安检仪技术服务方案

关键词： 进站 经历 原理 安检

方案具有明确的格式和内容规范，要求其具有很强的实践性和可操作性，避免抽象和假大空的内容，那么具体如何制定方案呢？下面是小编为大家整理的《安检仪技术服务方案》相关资料，欢迎阅读！

第一篇：安检仪技术服务方案

安检仪工作原理

火车站进口安检仪工作原理

坐车过程中，相信无论是乘坐汽车或是火车回家的都有这样的经历：每次进站时，都被要求放包通过安检仪检查。虽然很多人都经历过，但很少有人对安检仪的工作原理了解得非常清楚。灵敏的“鼻子”是如何嗅到危险物品的?人或者物品经过安检仪时会不会受辐射?安检原理是X射线检查。

在进站口的每个入口处，都有一台神秘的家伙，这便是X光安检仪器，所有乘车旅客都被要求将大包小包放下，并通过安检仪进行检查。

火车站使用的安检仪器跟机场、汽车站的安检仪器相似，乘客进站后将行李箱、行李包或者一些大件的编织袋等行李放到安检仪上，通过传送带传送，接受X光检查，没有问题，乘客再将行李带走。一旦出现疑似危险物品的时候，负责安检的人员则会要求乘客将行李打开进行检查，一般乘客在十几秒内就可以完成安检。

说起安检仪工作的原理，安检仪是借助于输送带将被检查行李送入X射线检查通道而完成检查的电子设备。行李进入X射线检查通道，将阻挡包裹检测传感器，检测信号被送往系统控制部分，产生X射线触发信号，触发X射线的射线源发射X射线束。X射线束穿过输送带上的被检物品，X射线被被检物品吸收，最后轰击安装在通道内的半导体探测器。探测器把X射线转变为信号，这些很弱的信号被放大，并送到信号处理机箱做进一步处理，这些信号处理后就通过显示屏显示出来。“无论包有几层，X射线都能穿透，一层层地将包内的物品显示出来。”

依靠不同颜色辨认危险物品

X光安检仪并非摆设，而是实实在在地担起了铁路安全守护的工作。一些旅客因对危险物品不清楚，携带过来上车的人不少。所以经常能在东面安检仪附近的桌子下面一个筐子里，装满了花花绿绿的瓶瓶罐罐。筐子里既有发胶、空气清新剂，也有指甲油等，有时甚至有刀具。

这些都是通过安检仪检查出来的。

在这些检测出来的危险品中，化学危险品占80%，很多人认为只有一些管制刀具是禁止携带上车的危险品，殊不知化学危险品的杀伤力更大。“这些瓶装的发胶、空气清新剂等都是些压缩气体和液化气体，受热后，当瓶内压力升高至大于容器耐压限度时，就会导致爆炸。”

那安检仪是怎样将这些危险物品检查出来的呢?

经过X光检测后，行李内的物品会在显示器中显示出大致的形状，并显示成黄色、绿色、黑色等。一般黄色的物品是有机物，比如塑料、食品等，是安全的，而绿色、黑色的物品需要注意，如果绿色或黑色物体比较多，或呈匕首、刀子形状，则会要求乘客打开行李检查。易燃、易爆、毒害性、腐蚀性、放射性、传染病病原体、枪支、弹药、管制刀具等物品严禁进站上车，一经发现将没收。菜刀、餐刀、水果刀、工艺品刀、剪刀、钢(铁)锉、斧子、锤子等利器和钝器也不得随身携带，应一律放入行李中托运。

绝不会对人体有任何的损伤

虽然安检仪能够将危险物品检测出来，使市民的旅途更加安全，但很多人也有一个疑问：这个能透视乘客随身物品的大机器，是否就像医院里的X光机? 医院的放射科都会有防辐射的警告标志，那么铁路安检仪是否也会放射对人身体有害的射线? 地铁、车站、机场的安检设备及安检门绝对不会对人体有任何损伤，因为X光射线只在机器内部产生，而且是垂直照射，绝对不会透过机器的外壁照射到机器外围，除非在开启机器时有人钻入机器内。而且安检仪的进出口都有防辐射的铅帘挡着，射线也不会放射出来，所以乘客经过安检仪时不会受到任何辐射，在机器旁工作的安检人员也不会受到辐射。

安检机只有经过适当培训的人才才能安装和使用安检机。在任何时候都必须严格遵守辐射安全规则，避免辐射伤害。只有经过适当培训的人员才能安装和使用安检机。只有技术人员在维修时才能拆除盖板或者防护部件。不要在户外使用X射线安全检查设备。安检机必须在规定的工作电压下工作。设备使用之前必须检查使用的电压。安检机必须有良好的接地。安装现场使用的设备插座必须有接地端子。如有电压波动超过规定的地区，建议使用交流稳压器。不要把任何不属于X射线安全检查设备的电子部件接到X射线安全检查设备的电源分配器上。任何不恰当的修改可能会损坏X射线安全检查设备。禁止用户对设备进行不恰当的改动。安检机只能用于检查物品，严禁用于检查人体或动物。超过6个月没有使用的设备请不要开机，必须由专业人员对射线发生器进行重新启动。禁止坐或站在传送带上。不要接触输送带的边缘和滚筒。当设备运行时，身体的任何部分都不要进入检查通道。确保行李在检测通道内或出口端没有被堆叠，如果行李阻塞了检查通道，在清理之前应首先关机。设备不能在有损坏的铅门帘的情况下运行。防止各种液体流入设备，如发生这种情况，请立即关机。

安检机广泛适用于机场、火车站、汽车站、政府机关大楼、大使馆、会议中心、会展中心、酒店、商场、大型活动、邮局、学校、物流行业、工业检测等场所。 同时安检机旁配有金属安检门，安探金属安检门门体上下带有防水脚套，具有防水、防火、防腐等特点。六个相互重叠的金属探测区域，采用当前数字脉冲技术，交互式发射和接收，准确判定金属物品的位置。

主机箱面板自带LED灯光显示模块，可直观看到人们携带藏匿违禁物品相应的位置。

全自动线圈缠绕及主机的贴片生产能更精确的达到探测效果，具有连续工作特点。

灵敏程序可以任意调节，为满足客户所探测不同的违禁物品，可根据实际使用情况预先设定金属物品的可能部位及体积、重量、大小进行适当的灵敏度调节，排除皮带扣、钥匙、首饰、硬币等物品的误报，最高灵敏度可探测到一枚回形针大小的金属。

复合式电路设计，信号频率可自由调节，采用先进散射型红外扫描，迅速捕捉感应信号，且并网安装多台探测门共同工作互不干扰。

安探金属安检门具有强大的DSP信号处理数字过滤系统，采用当今世界最先进的磁电兼容技术形成极佳的抗电磁干扰能力和较强的耐触摸和碰撞能力。

内置自我诊断程序，开机自检，出错自动提示并能够自动测量和显示周围环境的干扰情况。自动统计通过人数与报警次数，精确率100%。

密码保护，只允许专管人员操作，，防止非授权人改变参数，无需维护、无需定期校准。预留RS-485通讯接口可与多台计算机联网，监控、统计使用情况，并可根据用户要求配置遥控装置。

符合国际安全标准，对人体内的心脏起博器、孕妇、磁性软盘、录像带、磁带、胶卷记录资料等无负作用。

第二篇：安检仪使用管理办法

青州市汽车站安检仪使用管理办法

为加强安检仪器的使用和管理，加大危险品的查堵力度，确保车站安全平稳有序，规范安检仪的使用和管理，结合本站工作实际，特制定安检仪使用管理办法。

一、使用管理

1.安检仪的管理隶属客运科;责任人李金堂，分两班运行，带班科长安道洪、赵后猛、王益华、王强为当班责任人。

2.安检仪操作人员必须持证上岗，未经培训及未取得上岗证的人员不得擅自操作安检仪，当班安检员为第一责任人，对当班“三品”堵查负全部责任。

3.安检仪主要用于旅客携带行包、货物的安全检查;安检门主要用于旅客及随身携带物品的安全检查。

二、操作规程

1.安检仪的使用应严格按照设备说明书的要求进行操作，操作人员必须掌握仪器的操作性能及作业程序，严格按照规程操作，以减少设备的坏损，延长设备使用寿命。

2.操作人员须具有高度的工作责任心，规范作业，严格操作，充分利用安检仪的“三品”查堵功能，杜绝危险物品进站上车。

3.安检仪运行时，操作人员须集中精力，时刻观察安检仪运行状态，防止意外事故发生。

4.在操作安检仪时，应严格遵守操作规程，严禁违规操作和安检仪超载运行。

三、维护保养

1.定期对安检仪进行维护、保养，杜绝安检仪带故障强行工作，不得随意拆卸或安装安检仪零部件。

2. 操作人员必须爱惜仪器，轻开轻关，严防损坏。 3.注意防潮、防火、防盗，下班前应切断电源。

4.安检仪出现故障时，要及时上报告，以便组织人员维修，保证仪器设备的完好，并做好书面记录。

5.保持设备区域的卫生，每班工作人员应每日对安检仪进行擦拭及区域内打扫卫生，以保持设备和区域的整洁，安检仪周围严禁堆放杂物。

四、安检仪操作注意事项

1、X射线检查系统在任何情况下，均能保护操作人员及被检物品(含感光材料、药品、食品等)的安全。

2、禁止解除任一安全联锁开关;禁止去除任何外罩板。

3、禁止人体的任何部位(或其它活体)进入通道。

4、设备在使用过程中，必须有人看守。

5、尽量将被检物品放在传送带的中间部位。

6、若检测通道出现被检物品堵塞现象，必须关闭系统后，才能清理被堵塞的物品。

7、防止任何液体流入设备内部，万一发生类似情况，必须尽快停机清理。

8、操作设备前必须先阅读操作手册。

9、未经授权禁止打开设备进行检修。

10、每天上班前先开机预热10分钟，以保证设备的精确度。

11、防止尖锐物体划伤传送带表面。

12、严禁仪器受到各种严重碰撞。

五、考核

值班站长对安检仪的使用情况进行定期和不定期的检查和抽查，对于使用管理较好的班组或个人，将给予适当奖励;对于违规操作，甚至造成安检仪损坏的行为和因主体责任未落实，责任心不强，造成“三品”通过该通道进站上车的，视造成的后果对责任人进行处罚。

第三篇：高端安检解决方案和安检服务供应商

北京民航保安器材公司，民航局下属企业，最初主要服务对象为民航安检系统，并为各大机场提供安检解决方案以及设备。从公司成立至今可以说是始终伴随着中国安检行业发展壮大，并和安检行业与时俱进。并把高端安检设备引进中国比如意大利CEIA系列的安检门、手持金属探测器、液体探测仪、鞋底探测、金属探测门，CEIA一直把用户安全作为产品研发中最核心关注的部分。所有的CEIA产品的电磁发射安全性和抗干扰性都满足或者高于本土以及国际标准，同时遵循全球各个地区的电器安全标准，CEIA进口安检门利用高级生产资料、先进的组件和广泛的自动化生产，为客户创造具有突破性的价值，同时也造就了优质、可靠和稳定的CEIA产品。英国艾吉斯(Aigis)公司防爆抗暴产品。中国航天科工集团毫米波设备、金吾锦卫防爆罐等设备以及其他公司进口X光安检机。

公司安检方案设计政府机关、机场、企业电子厂、海关、车站等行业，并在行业中树立起口碑，在机场方面各省会机场、直辖市机场中都是公司所提供的安检设备。政府机关中，人民大会堂、毛主席纪念堂、国家博物馆、国家大剧院等国家重要活动场所的使用的安检设备为公司提供。

我公司有二十多人的技术支持团队常年驻扎在各个机场，随时协助配合解决机场安检的变化需求以及相应的技术支持;在民航地区管理局所在地都部署有我公司的服务团并提供24小时响应服务;全面的推进客户满意工程，彰显企业服务形象，创建国内最具有美誉度的安检行业品牌。

面对严峻的安防形势的挑战，我们不但要一如既往地发扬高效服务、务实求真的精神，服务国内外客户，更要始终如一地坚持优质高效、不断创新的理念达成卓越的理想。我们愿意与同行业伙伴密切合作、共同发展，共创双赢!

第四篇：流式细胞仪分析技术及应用(课件)

流式细胞仪分析技术及应用-------温医细胞生物学技术

流式细胞仪分析技术及应用

第一节 概述

第二节 数据的显示与分析

第三节 流式细胞仪技术要求

一、工作原理

一、参数

一、免疫检测样品制备

二、散射光的测定

二、数据显示方式

二、免疫分析中常用的荧光染料与标记染色

三、荧光测量

三、设门分析技术

三、免疫胶乳颗粒的应用

四、细胞分选原理

四、流式细胞技术的质量控制

第四节 流式细胞仪技术的要求

第五节、流式细胞仪的科研应用

第六节

流式细胞术在临床检测中的主要应用  流式细胞术(flow cytometry, FCM)亦称荧光激活细胞分选器(fluorescence-activated cell sorting, FACS):是一种集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、电子计算机以及细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的新型高科技仪器。/是对于处在快速直线流动状态中的细胞或生物颗粒进行多参数、快速的定量分析和分选的技术。/广泛应用于基础研究和临床实践各个方面，包括细胞生物学、肿瘤学、血液学、免疫学、药理学、遗传学及临床检验学等。

 流式细胞术发展史

1930年Caspersson和Thorell开始致力于细胞计数的研究

1934年Moldaven最早设想细胞检测自动化，用光电仪记录流过一根毛细管的细胞 1940年Coons提出结合荧光素的抗体去标记细胞内的特定蛋白 1949年Wallace Coulter申请了在悬液中计数粒子的方法的专利 1950年Caspersson用显微UV-VIS检测细胞

1953年Croslannd-Taylor应用分层鞘流原理，成功设计红细胞光学自动计数器 1969年Van Dilla及其同事在Los Alamos, NM发明第一台荧光检测细胞计 1972年Herzenberg研制出细胞分选器

1975年Kohler等提出单克隆抗体技术，为细胞研究提供大量的特异免疫试剂

目前国内主要流式细胞仪厂家：Beckton Dickinson(BD)公司;BACKMAN COULTER公司

 流式细胞术的特点：最大的特点是能在保持细胞及细胞器或微粒的结构及功能不被破坏的状态下，通过荧光探针的协助，从分子水平上获取多种信号对细胞进行定量分析或纯化分选。 细胞不被破坏，测量快速、大量、准确、灵敏、定量

主要特点 ：1.单个细胞水平分析;2.多参数分析(同时多种荧光素标记)水平分析;3.灵敏度高;4.可分析大量细胞;5.速度快： 5000-10000个细胞/秒;6.统计学意义：提供细胞群体的均值和分布情况;7.分选感兴趣的细胞：血细胞、骨髓、组织培养细胞等。

第一节 概述

流式细胞仪是测量染色细胞标记物荧光强度的细胞分析仪，是在单个细胞分析和分选基础上发展起来的对细胞的物理或化学性质(如大小、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等)进行快速测量并可分类收集的高技术。 分为三大类：(1)类为台式机(临床型)：仪器的光路调节系统固定，自动化程度高，操作简便，易学易掌握。(2)类为大型机(科研型)特点：分辨率高，可快速将所感兴趣的细胞分选出来，并可以将单个细胞或指定个数的细胞分选到特定的培养孔或培养板上，同时可选配多种波长和类型的激光器，适于更广泛更灵活的科学研究应用。(3)类为新型流式细胞仪：15 个参数同时分析。高速分选速度达到50,000 个/秒，并可进行遥控分选，能够满足多种科学研究的要求。 流式细胞仪常检测的细胞特性 细胞组成

细胞功能

一、工作原理 大小

细胞表面/胞浆/核--特异性抗原

①采用激光作为激发光源，保证其具有更好的单色性与激发 粒度

细胞活性

效率;②利用荧光染料与单克隆抗体技术结合的标记技术， DNA, RNA含量

胞内细胞因子

保证检测的灵敏度和特异性;③用计算机系统对流动的单细 蛋白质含量

激素结合位点

胞悬液中单个细胞的多个参数信号进行数据处理分析，保证 钙离子, PH值, 膜电位 酶活性

了检测速度与统计分析精确性。 概括为三个系统结构：(1) 液流系统：由样本和鞘液组成。鞘液(PBS或生理盐水)：主要作用是包裹样本流的周围，样品流在鞘液的环包下形成流体力学聚焦，包裹的细胞排列成单行，以每秒5000个-10000个细胞，每秒10米速度流动室喷出，保证每个细胞通过激光照射区的时间相等，从而得到准确的细胞荧光信息。鞘液在整个系统运行中流速是不变的。改变样本的进样速率开关，可提高采样分析的速度。

(2) 光学系统：大多采用氩离子气体激光器。每个细胞所携带荧光物质被激发出的荧光信号强弱，与被照射

1 流式细胞仪分析技术及应用-------温医细胞生物学技术

的时间和激发光的强度有关，因此细胞必须达到足够的光照强度。激光光束在达到流动室前，先经过透镜形成光斑，这种椭圆形光斑激光能量分布属正态分布，为保证样品中细胞受到的光照强度一致。激光光束与细胞液流呈90°角方向照射，细胞产生散射光和荧光。

主要光学原件是滤光片，主要分成3 类：

1、长通滤片：(LP) ：LP500滤片允许500μm 以上光通过，而500μm 以下光吸收或返回。

2、短通滤片(SP) ：与长通滤片相反，如SP500 滤片允许500μm 以下光通过，500μm 以上光吸收或返回。

3、带通滤片(BP) ：带通滤片可允许相当窄的一波长范围内光通过，一般滤片上有两个数，一个为允许通过波长的中心值，另一为允许通过光的波段范围。如BP500 表示其允许通过波长范围为75μm-525μm。

(3) 数据处理系统

流式细胞仪与显微镜的区别

区别

流式细胞仪

显微镜

光源

激光

自然光、灯光 对象

细胞、生物粒子

细胞、组织等 承载工具 鞘液及流动室

载玻片 检测信号 光学信号

形态及染色 放大方式 PMT、放大电路 目镜×物镜、光学放大 统计

计算机，>5000 人工，200 结果

多参数，综合分析 简单，单参数

二、散射光的测定

散射光信号不依赖任何样品的制备技术(如染色)，因此称为细胞的物理参数。(波长与激光相同。)主要分为: ①前向散射光(0°散射)FSC：激光束照射细胞时，光以相对轴较小角度(0.5°～10°)向前方散射的讯号用于检测细胞等粒子的表面属性，信号强弱与细胞体积大小成正比。

②侧向散射光(90°散射)SSC：激光束照射细胞时，光以90°角散射的讯号，用于检测细胞内精细结构和颗粒属性，即细胞膜、胞质、核膜结构性质。

目前采用FSC(表示细胞大小)SSC(表示细胞内颗粒的复杂程度)这两个参数组合，检测FSC与SSC信号通过计算机处理，可得到FSC-SSC图，可区分裂解红细胞处理后外周血白细胞中淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞三个细胞群体，或在未进行裂解红细胞处理的全血样品中找出血小板和红细胞等细胞群体。

三、荧光信号(FL)测量

当激光光束与细胞正交时，一般产生两种荧光信号：

①一种是细胞自发荧光：细胞自身在激光照射下，发出微弱荧光信号;

②另一种是经过特异荧光素标记细胞后，受激发照射得到的荧光信号，由于 90o 方向的散射光信号较弱，容易分离出荧光信号，因此此方向上放置必要的光学元件(滤光片、双色分光镜等)，可以获取荧光信号。

通过收集两种以上不同波长的荧光信号FL1 、FL2进行检测和定量分析，就能了解所研究细胞参数的存在与定量，反映生物颗粒表面和内部的各种情况。

常配置的激光器波长为488nm。

633nm激光管常用染料有APC、APC-Cy

荧光信号的宽度(如FL2-W)常用来区分双联体细胞，由于DNA 样本极易聚集，当两个G1 期细胞粘连在一起时，其测量到的DNA 荧光信号(FL2-A)与G2M 期细胞相等，这样得到的测量数据G2M 期细胞比率会增高，影响测量准确性。通过设”门”(gate)方法，将双联体细胞排除。其原理是双联体细胞所得到的荧光宽度信号(FL2-W)要比单个G2M 细胞大，因此设”门”后才能得到真正的DNA 含量分布曲线和细胞周期。不过通过荧光强度的高度峰和面积峰也可做同样分析。

四、细胞分选原理(图示见上)

通过流式细胞仪进行细胞分选主要是在对具有某种特征的细胞需进一步培养和研究时进行的。快速精度分选纯度90%-99%，且细胞活性不受影响。

1、细胞分选时，液流在驱动力作用下断成高度均一的液滴。在喷嘴下几毫米处，液滴从液流断开。

2、从颗粒被检测到液滴断开的时间由Accudrop技术直接计算。

3、符合分选条件的颗粒一旦被检测到，包含该颗粒的液滴断开时，液滴被充电。断开后的液滴仍然带电，带电的液

2 流式细胞仪分析技术及应用-------温医细胞生物学技术

滴通过被充电的偏转板。受到静电吸引或排斥，带电液滴将向左或右偏转。未带电的液滴不偏转而流入废液槽。 检测指标：阳性百分率、绝对计数、平均荧光强度

(二)FCM 分选指标

分选速度：单位时间内分选的细胞数量。与悬液中细胞的含量成正比。一般要求分选速度至少达5 000个/秒左右，以保证被分选细胞的生物学活性不受影响。

分选纯度：被分选出的细胞所占的百分比，分选纯度与仪器的精密度直接相关，与实验设计的选择密切相关，可达到99%。

分选收获率：实际收获的分选细胞与设定通过测量点的分选细胞之间的比率。与纯度成反比。

分选得率：从一群体细胞悬液中分辨出目的细胞的总量，再经分选后得到目的细胞的实际得率。与分选速度成反比。 第二节 数据的显示与分析

常用数据显示方式：单参数直方图 、双参数散点图 、二维等高图 、假三维等高图 、三参数散点图、设门分析技术

目前FCM 数据存贮的方式：采用列表排队方式。目前FCM 所采用的都是多参数指标，荧光参数标记物如是4 个，采用list mode 方式可大量地节约内存和磁盘容量。当一个细胞被测4 个参数，那么获取10000 个细胞，所占容量为4×10000 个(字或双字)。同时当只检测1 个参数时(如DNA)，可灵活的关闭其它3 个参数，节省3/4 的空间数据的显示通常有一维直方图、二维点图、等高线图、密度图等几种。

一、 参数

FSC：反映颗粒的大小。SSC：反映颗粒的内部结构复杂程度。FL：反映颗粒被染上的荧光数量多少。

二、数据显示方式

(一)单参数直方图---------由一维参数(散射光或荧光)与颗粒计数(COUNT)构成，反映同样散射光或荧光强度的颗粒数量的多少。横坐标表示荧光信号或散射光信号相对强度(FSC、SSC、FL

1、FL2)四个参数的任何一个值。其单位是信道，横坐标可以是线性的，也可以是对数的，纵坐标一般是细胞数。

(二)双参数直方图---------双参数直方图：纵轴和横轴分别代表被测量细胞的两个测量参数，根据这两个参数就可以确定细胞在图上的表达位置。双参数信号通常采用对数信号，最常用的是点密图，在图中，每个点代表一个细胞，点图利用颗粒密度反映同样散射光或荧光强度的颗粒数量的多少。常用的表达方法有二维点图,等高线图,二维密度图。 在二维图中，任选FSC、SSC、FL

1、FL2 中二个参数作为X 轴、Y轴，在二维图上每个点代表一个细胞，可以区分细胞性质不同的群体;X 坐标为该细胞一参数的相对含量，而Y 坐标为该细胞另一参数的含量。 在双参数图形中可以将各细胞亚群区分开，同时可获得细胞相关的重要信息。

(三)二维等高图---------由类似地图上的等高线组成，其本质也是双参数直方图。等高图上每一条连续曲线上具有相同的细胞相对或绝对数，即“等高”。曲线层次越高(越里面的线) 所代表的细胞数愈多。等高线越密集则表示细胞数变化率越大。

(四)三参数直方图---------在三维图中，任选FSC、SSC、FL

1、FL2 中二个参数作为X 轴、Y轴，Z轴为细胞数，构成三维图。

(五)流式细胞仪的多参数分析--------- 多参数分析：当细胞标记了多色荧光，被激发光激发后，得到的荧光信号和散射光信号可根据需要进行组合分析。

三、设门分析技术

Gate设置：指在某一张选定参数的直方图上，根据该图的细胞群分布选定其中想要分析的特定细胞群，并要求该样本所有其他参数组合的直方图只体现这群细胞的分布情况。

FCM的分辨率：分辨率是衡量FCM测量精度的指标，通常用变异系数CV表示。一般要求CV<8，最好CV<3。 第四节 流式细胞仪技术的要求

一、免疫检测样品制备

细胞样品制备要求：

1、单细胞悬液;

2、细胞最适密度0.5×106-1.5×106个/ml;

3、荧光染色后尽量洗净细胞外多余染料，减少荧光本底;

4、双染色时尽量选择发射光谱不接近的荧光色素，产生易区别的两种荧光颜色;

5、如果细胞分选后继续培养，细胞样品制备和上机应该无菌操作。 外周血淋巴细胞样品的制备：分离单个核细胞

培养细胞的样品制备：蛋白酶消化-----机械吹打-----使贴壁细胞脱落-----洗涤-----尼龙网过滤 新鲜实体组织单细胞悬液的三种制备：

单细胞悬液的保存：

3 流式细胞仪分析技术及应用-------温医细胞生物学技术

机械法(金属网引起细胞破碎)

深低温保存法(一年) 酶处理法(选择最适宜消化酶)

乙醇或甲醇保存法(2周) 化学试剂处理法(导致细胞成活率降低)

甲醛或多聚甲醛保存法(2月) 表面活性剂处理法 注意事项：

1、新鲜组织标本应及时进行处理保存;

2、根据实验目的选择最隹的固定方法;

3、酶学法要注意条件的选择和影响因素，要注意酶的溶剂，消化时间、pH 值、浓度等方面对酶消化法的影响。

4、需注意不同组织，选择相应的方法;如富于细胞的组织——淋巴肉瘤、视神经母细胞瘤、脑瘤、未分化瘤、髓样癌以及一些软组织肉瘤等，不一定采用酶学法或化学法;往往用单纯的机械法就可以获得大量高质量的单分散细胞;

5、在使用酶学方法时，要重视酶的选用，如含有大量结缔组织的肿瘤——食管癌、乳腺癌、皮肤癌等，选用胶原酶较好。

二、常用的荧光染料与标记染色 适用条件: ①有较高的量子产额和消光系数;②荧光强度与光量子产额之间的关系由下式表示：F=Q(I-eεCL) F 表示荧光强度，Q 表示光量子产额，I 表示激发光强度，￡表示消化系数，C 表示染液浓度，L 表示溶液厚度。③对488nm的激发光波长有较强的吸收;④发射光波长与激发光波长间有较大的波长差;⑤易与标记单抗结合而不影响抗体的特异性 荧光素发射荧光的基本原理：荧光素受到一定波度(激发波长)的激光激发后，其原子核外的电子由于吸收了激光的能量，由原本运动处于基础态轨道跃迁到激发态轨道上运动，然后当电子由激发态重新回到基础态时，释放出能量并发射出一定波长(发射波长)的荧光。

1、要选择正确的激光器：不同荧光素用不同的激发光波长的激发光来激发：

FITC 和PE 等的激发波长均为488nm，用产生可见光的氩离子激光器;APC 和PC5 等的激发波长在红光范围，需使用发射630nm 波长红光的氦-氖激光器。

2、各种荧光素的发射波长也十分重要，据此可以确定其检测所需光电倍增管性质; 如FITC，被激光激发后发射绿光，检测时要使用第一光电倍增管(即PMT1);PE 则发射橙色光，需用第二光电倍增管(即PMT2);PC5 和PerCP 等，发射的是深红色光，这时需选择第三甚至第四光电倍增管(即PMT3 或PMT4),等等

常用的几类荧光染料

(二)免疫荧光标记

名称染料激发发射光溶解性对PH敏感特点荧光染料与细胞成分的四种结合方波长或荧光性式

结构亲和式

颜色

嵌入结合

共价键结合 异硫氰酸荧FITC488绿 易敏感易溶于水，与抗体结光素合不影响特异性52

5荧光标记抗体特异性结合 得州红Texas 568红 不易不敏感稳定，偶联后量子产免疫荧光标记方法

red额低615直标：干扰少,但需购买多种单抗

藻红蛋白PE488橙间标：步骤多,干扰多,不需标记多种575抗体

易不敏感具较多发光基团，消藻青蛋白PC488红组合标记

光系数和量子产额高

别藻青蛋白APC633红 670 能量传递复PEcy5488红易不敏感减少交叉，成本高 合染料670

三、免疫胶乳颗粒技术的应用-----液相芯片技术

是把微小的乳胶微球分别染成上百种不同的荧光色，把针对不同检测物的乳胶微球混合后再加入待标本，在悬液中与微粒进行特异性地结合，经激光照射后不同待测特产生不同颜色，并可进行定量分析。因检测速度极快，所以又有“液相芯片”之称 。

4 流式细胞仪分析技术及应用-------温医细胞生物学技术

四、流式细胞技术的质量控制

(一)单细胞悬液制备的质控

(二)免疫荧光染色的质控 适当的制备方式(不同标本来源外周血、骨髓、培养细胞等)

温度 试剂选择

pH 样品处理(蛋白质浓度、缓冲液、细胞条件、活性、自发荧光等)

染料浓度 实体组织来源标本用机械法

固定剂 温度25~37℃，pH7.0~7.2

(三)仪器操作的质控

光路与流路校正: 确保激光光路与样品流处于正交状态，减少变异(CV)。 PMT(光电倍增管)校准: 保证样品检测时仪器处于最佳灵敏度工作状态。 绝对计数校准: 保证计数的准确性。

(四)免疫检测的质控

同型对照：即免疫荧光标记中的阴性对照，选用相同源性的未标记单抗作为对照调整和设置电压，以保证特异性。 全程质量控制：与待测标本一起标记和检测，结果达靶值，提示本次实验结果可靠。 第五节、流式细胞仪的科研应用

1、细胞表型分析

2、胞内蛋白的检测

3、细胞周期和DNA倍体分析

4、流式标准小球定量

5、分选

6、细胞内钙离子测量

第六节、流式细胞术的临床应用

1、细胞周期和DNA含量分析

2、细胞凋亡的检测和分析

3、血小板及血小板活化的FCM 分析

4、造血干细胞(CD34+细胞)的检测

5、白血病和淋巴瘤免疫分型

6、网织红细胞分析

7、残余白血病检测

8、淋巴细胞亚群分析

9、肿瘤耐药基因分析

10、AIDS病检测中的应用

11、自身免疫病相关HLA抗原分析

12、移植免疫中的应用

1、DNA 含量分析检测原理：DNA 含量常和某种细胞周期相关蛋白同时检测，来分析细胞处于某一特定周期阶段。恶变肿瘤细胞一般多出现异倍体，有很多研究证明DNA 含量分析对人肿瘤的诊断预后有很高的价值。 荧光染料和细胞 DNA 分子特异性结合具有一定的量效关系： ① DNA 含量多少与荧光染料的结合成正比;

② 荧光强度与DNA 分子结合荧光素多少成正比;

③ 荧光脉冲与直方图的通道值成正比。因此，FCM-DNA 定量分析1 个细胞增殖群时，可将二倍体DNA 含量分布组方图分为三部分：

即G0/

1、S、G2M ;G0/1和G2M 细胞峰的DNA 分布均为正态分布，S 期可以认为是一个加宽的正态分布。 在癌组织DNA 直方图上，异倍体峰前总可以见到1 个或大或小的二倍体峰位的G0/1 细胞峰。另外，显微图象分析仪做异倍体检测时，都采用组织中淋巴细胞做对照。

在同一个肿瘤的不同区域、或原发肿瘤和继发、或转移灶、或随肿瘤病程发展、或经治疗的肿瘤灶，其DNA 倍性可能有所变化，这种倍体类型的差异，称为DNA 倍体异质性。 DNA分析的临床意义

DNA分析诊断肿瘤：----DNA非整倍体细胞峰-----突出的四倍体细胞峰

DNA倍体分析：结合临床病理的形态学诊断，对一些恶性肿瘤进行早期诊断，跟踪随访和早期治疗，大大提高一些肿瘤的治愈率和生存率。尤其对一些细胞抽吸物、体液、组织液的脱落细胞的分析，意义尤为重要。 增殖状态分析：反映了肿瘤的生长速度和侵袭性 FCM在肿瘤早期诊断和鉴别诊断中的作用

DNA非整倍体的出现可能是癌前病变发生早期癌变的一个重要标志 在病理形态学不能做出诊断前可提供确切诊断信息 DNA非整倍体的交界瘤应按恶性对待

形态学表现良性的肿瘤出现非整倍体提示恶变可能 DNA指数可作为判断间叶组织肿瘤良恶性的辅助指标 细胞凋亡------(1)、早期细胞凋亡的流式细胞术检测：半胱氨酸蛋白酶3(caspases-3)

-------(2)晚期细胞凋亡的流式细胞术检测：DNA 含量分析法：目前检测凋亡细胞DNA 断裂的方法中，最常用、最简便的就是DNA 含量分析;DNA 直方图上显示在G0/1 峰前出现一个DNA 含量减少的亚二倍体或称亚G0/1 峰，又称凋亡细胞峰

第五篇：安检通口安检方案

近年来，随着各类社会矛盾日益突出，公安，交通机构，法院，检察院，博物馆等政府机构，以及军事机构，监狱，信访局，体育场馆，核电厂等重点安防机构，频频发生暴力犯罪事件和违法行为，造成了巨大的人身，财产安全损失，产生了重大的社会经济影响，因此安全防范的作用越来越重要。

安检的重要性：

高科技安检装备的应用是安全防范的必然趋势和有效途迳，面对经济全球化伴随而来的犯罪手段的高智能化，犯罪行为的跨区域化的特征，传统的凭经验和人工手段的落后安检方式已远不能适应时代发展的需要，因此，通道口安检工作必须要依靠先进的科技装备和手段来实现安全防范的目的，通过不断改进各种技术装备，借助各种高科技手段提高通道口检查站的整体斗力。

安检的发展需求：

随着社会面防控形势的发展和变化，对安检装备的完善和升级改造必须要有前瞻意识，与时俱进以适应新形势的工作需求。一是要在功能方面加以拓展和延伸，完善安检措施的严密性，二是要在应用方面提高实用性和便捷性，保证安检工作的高效率，三是要在性能方面保证可靠性和维护性，保持安检装备运作的良好工作状态。

主要安检技术应用：

1、 通道式X射线安全检查仪，传统行包安检手段，主要用于爆炸物与武器，管制刀具等危险违禁品检测。

2、 计算机断层扫描技术，能够自动识别易燃，易爆，易腐蚀性危险液体，以及用于制作液体爆炸物的主要液体组成成分。

3、 爆炸探测技术，能够自动检测行包和粉末状、胶状嫌疑物品是否存在爆炸物，并鉴别爆炸物种类。

4、 金属探测技术，传统人身安检手段，主要用于金属材料武器和管制刀具等危险违禁品检测。

为了提高安检通道口安检的快速与便捷，设置通道口建议安检方案如下：

1、 建议在距安检区1公里2公里和3公里处分别设置识别牌，便于群众及时掌握判断拥赌情况。

2、 主要包括安检、防爆处置和防恐设备三类，其中安检设备包括X光射线安检仪，安检门，手持金属探测仪，液体检测仪。防爆处置包括爆炸物探测器等。防恐设备包括液体探测仪，气体探测仪等。

必备的安检设备及器材

X射线行李检测仪：主要用于排爆现场排爆人员观察可疑物内部构造使用，来检查恐怖分子随意摆放可疑包裹进行检测，能清晰看清里面的物品，还可从颜色来分清物品是否违禁物品，起到高效快捷的作用。

安检门：用来探测进入人员随身是否藏有武器，刀具或其它金属物体，安检门可以根据安检级别设置灵敏度，在确保安全前提下，提高安检通过率。

手持金属探测：在进入人员通过安检门，通过安检门所设置安检级别值时，安检门报警后，安检员可以使用手持金属探测器对可疑人员进行二次(无接触)搜身安检，搜查进入人员穿戴衣物内是否藏有枪支，刀具或其它金属管制器具。

危险液体检查仪：能够在X光射线检测机里看到有液体状的包装时，可以叫通过人员将易燃易爆易腐蚀性危险液体进行检查，可以分清是否是危险物体，可以广泛应用于高级别安检需求场所。

安检人员培训

安检设备及器材使用人员需要对安检的作用，设备的操作，安检规范及设备报警后应急处理等进行系统培训。可邀请公安部有关部门专家授课，设备及器材由供应商负责进行技术培训。培训周期需要1-2天。