肠道病毒（精选九篇）
肠道病毒 篇1
人肠道致病病毒是许多非细菌感染消化道疾病的病因, 能引起呼吸道感染、结膜炎、肝炎和其他严重的感染, 如脑膜炎、脑炎和瘫痪等。大多数的肠道致病病毒感染源被认为来自废水、污水引起的水体污染。在污水处理工艺中, 氧化曝气、活性炭吸附、过滤、絮凝沉淀和氯气消毒后只能消除50%~90%的病毒。未能消除的病毒就会随污水释放到环境水体中, 污染环境水域、饮水和食品。
现阶段对水体进行检测主要是通过细菌指标, 但病毒与细菌并非直接相关, 检测细菌并不能直接获得病毒的存在情况。因此, 需要一种能够准确、快速、高效的检测方法对水体病毒进行监测。本文综述了常见的肠道病病毒的致病性、流行病学特点及其在水体中的传播途径。
1 主要人肠道致病病毒的结构特性、致病性和流行病学特性
由于肠道致病病毒的多元化致使产生了一系列的临床表现和流行病学特性。从公共健康的角度来看, 其中最重要的是诺瓦克氏病毒、腺病毒、轮状病毒及肠病毒等。
1.1 诺瓦克氏病毒
诺瓦克氏病毒是嵌杯病毒科[1]的成员。诺瓦克氏病毒含有单股正链RNA基因组, 分为三个开放阅读框 (ORF) 约7.7 kb。ORF1基因编码共200 k Da的6个非结构蛋白, ORF2编码一个60 k Da的衣壳蛋白VP1, ORF3编码次要结构蛋白VP2。病毒颗粒的外表面主要蛋白VP1形成的衣壳, 并出现表面上呈现二十面体对称形状。
诺瓦克氏病毒是一种急性病毒性胃肠炎的主要病因, 影响全球所有年龄结构的人群。诺如病毒肠胃炎的爆发可以是季节性的或偶发性的, 多发地点是在家庭、学校、敬老院、医院、饭店等半封闭环境。
1.2 腺病毒
腺病毒是一种无被膜病毒, 直径约90 nm, 34~48 kb的线性双链DNA病毒。病毒外层包有二十面体衣壳[2]。根据腺病毒的血凝性、DNA序列的同源性、组织嗜性、纤维蛋白的特点和其他生物学特性, 人类腺病毒被分为6个种, 定义为A至F。6种病毒组成51个血清型, 腺病毒衣壳包含至少9种蛋白质, 六邻体、五邻体和纤维蛋白构成主要衣壳蛋白[2]。五邻体和细长纤维蛋白在病毒衣壳顶端构成一个复杂结构。
腺病毒对呼吸道或消化道病毒感染可能会引起大范围的病毒传播。这可能会导致多种疾病, 如咽炎、结膜炎、肺炎、出血性膀胱炎、肠炎、肝炎或脑炎, 这些疾病对于儿童和免疫力低下患者可能是致命的。每年在全球的腺病毒感染爆发的过程中, 最常见的呼吸道感染相关的血清型是B亚型 (AD3, AD7和AD21) , C种 (AD1, AD2, AD5和AD6) 和E种 (AD4) [3]。
1.3 轮状病毒
轮状病毒是一种无被膜病毒, 直径大约70 nm, 属于呼肠孤病毒科的二十面体病毒[4]。轮状病毒颗粒由一个三层的蛋白质衣壳包裹, 内附11段双链RNA基因[7]。该基因编码病毒蛋白 (VP1, VP2, VP3, VP4, VP6和VP7基因) 构成病毒衣壳和5个非结构蛋白 (NSP1~NSP5) 。
轮状病毒感染患者小肠中上部绒毛上皮细胞的成熟肠细胞。在轮状病毒的复制周期, 病毒颗粒附着在三个层次的细胞粒子上, 随后通过浆膜或体膜进入细胞质渗透。病毒吸附肠黏膜细胞是由蛋白VP4所介导的。病毒的侵染性是由VP4裂解裂解产生的VP8和VP5所产生的。
轮状病毒已被确认为5岁以下儿童严重腹泻的主要原因。在发展中国家, 对医院收治患者调查显示, 140万例患者和约80万人死亡中, 约25%是由于腹泻引起。A组轮状病毒是发达国家和发展中国家的急性肠胃炎的常见致病病毒。目前, 还没有可用的轮状病毒感染具体的治疗方法, 部分国家已经发放了轮状病毒疫苗的许可证。
1.4 肠病毒
人肠病毒 (enteroviruses) 是属于细小RNA病毒科的无被膜病毒, 包含7.5 kb的单股正链RNA基因, 外部包有二十面体衣壳[5]。该基因编码4组结构蛋白, VP1~VP4和7组非结构蛋白, 这些蛋白影响病毒的复制和成熟。衣壳蛋白VP1, VP2, 和VP3位于衣壳表面, 决定抗原表位免疫反应[5]。在进化的基础分析多个基因区域, 人肠病毒可分为四个种 (人肠病毒A~D) 。这些病毒包括31种血清型的埃可病毒, 23种血清型的柯萨奇病毒, 6种血清型的乙型柯萨奇病毒, 3种血清型的脊髓灰质炎病毒和多种血清型的肠病毒[6]。
大多数肠病毒感染在通常情况下无明显症状或只有轻微的疾病, 如发热性疾病或轻微的上呼吸道感染。然而, 肠病毒也可广泛地引起各种临床疾病, 包括急性出血性结膜炎、无菌性脑膜炎、皮疹、急性或弛缓性麻痹、心肌炎和新生儿败血症等疾病。肠病毒是人类病毒性心肌炎的最常见病原, 通常与扩张型心肌病 (DCM) 相关联。每年全球每10万人中就有5~8人患有这种病症。大多数感染肠病毒的细胞病变后会导致特定组织细胞的破坏。同时, 一些疾病的表现形式可以是宿主的免疫反应的结果[6]。
脊髓灰质炎病毒是最典型的肠病毒之一。由三种不同血清型的脊髓灰质炎病毒组成。脊髓灰质炎病毒也可能会导致无菌性脑膜炎或非特异性小病。脊髓灰质炎病毒的感染通常途径是通过口中摄入病毒[7]导致肠道系统感染。所有三种血清型脊髓灰质炎病毒的受体为CD155, 是免疫球蛋白家族的成员中的一种糖蛋白。作为病毒血症的传播途径, 树突状细胞和巨噬细胞的感染可以帮助病毒跨越血脑屏障或沿神经通路感染脑细胞[7]。
2 水体中肠道致病病毒污染
2.1 污水中的病毒
城市污水来源于住宅、商业和工业活动区域, 是人类排泄物和生活废水的混合物, 其中包含固体悬浮物、杂质及多种化学物质。原污水是一种致病病毒的主要载体, 尤其是肠道致病病毒。目前的城市污水处理的条件和工序, 目标主要是从水中去除污染物、化学物质和生物物质, 以减少对人体的不利影响和可能性对生态系统造成的危害。
传统的城市污水处理系统包括物理化学处理法, 如静置沉淀、活性污泥法、过滤池等常规方法。这些物理过程能够除去污水中约90%~99%的病毒。目前对水中生物消毒的方法经常是使用氯气、臭氧与紫外线照射相结合。虽然这些方法能够除去大量的病毒, 但消毒效率有所不同, 它们还会成为污水排放后的二次污染物。
2.2 污水中的肠道致病病毒对水体的污染
未经充分处理的污水排放后直接影响地表水的质量, 以这些水作为的饮用水水源, 很可能导致饮用者受到病毒侵染。一项研究表明, 22%左右的河水和约6%的处理后水样能够检测出人类腺病毒。在另一项研究中, 约29%的河水样品和19%处理后的饮用水水样, 能够检测出肠病毒。肠病毒是最有可能污染地下水的病原体, 它们体积很小, 能通过污水管道裂缝等渠道渗透到土壤中, 在地下移动长达67 m的距离, 最终达到的含水层。在美国的一项研究中, 72%的生活区地下水中人类肠道致病病毒检测呈阳性。
美国环境保护署 (EPA) 在对每月粪便指标进行检测后, 提出公共环境的地下水是易受粪便污染的。地下水已成为一个传染病传播的源头, 在美国约80%的水源性疾病疫情归因于饮用受污染的井水。另一个重要的感染途径是通过娱乐场所的水域。人类肠道病毒经常通过处理后的废水排放到沿海水域, 这样就增加了在沿海水域中游泳者和潜水员的患病风险。
2.3 污水排放中的肠道致病病毒持续存在的后果
对于污水处理系统来说, 如果处理不完善, 会对公众健康造成严重影响。利用传统的细胞培养方法测定经过处理的废水中的病毒含量, 范围从1.0×10-3~1.0×102L-1。特别是人类肠道致病病毒可以长期稳定地存在于环境中, 特别是固体沉积物中。在污水污泥沉淀中能够存在17个月以上。肠道致病病毒的传染性剂非常低, 通常为几十数百个病毒颗粒。由于肠道致病病毒在环境水体中的持久性, 通过污染食品、饮用水和娱乐场所水域往往会导致疾病爆发。
3 带有肠道致病病毒的污水导致的食品污染风险
食品收获前的污染可能来自于灌溉农产品的废水、污水污泥或粪便肥料。许多研究都将肠道致病病毒所引发的急性胃肠炎和A型肝炎归因于吃的蔬菜或者沙拉等食品。收获后的食品在收集和运输过程中也能够受到多方面的污染, 如被污染的收割设备、运输集装箱、污染的容器、清洗和冲洗水或其他运输和储存过程中的交叉污染。卫生设施较差的地方也会发生烹调和加工后的二次肠道致病病毒感染。
由于海洋环境被污染, 包括牡蛎、贻贝、蛤、文蛤和甲壳类动物, 如螃蟹、虾等水产品被认为是肠道致病病毒感染和传播的途径之一。正链RNA病毒, 如诺沃克病毒、甲型肝炎病毒和肠病毒存在于这些水产品的消化系统腺体和鳃中。经常食用生鲜贝类或只经过轻微煮熟的水产品, 会大大增加感染肠道致病病毒的几率。研究证明, 经常食用处理不彻底或未经处理的污水排放水域出产的水产品的消费者中, 出现由诺瓦克氏病毒引发的胃肠炎以及肝炎病例较多。收获地点接近生活污水排放地点的水产品检测显示, 致病肠病毒经常呈阳性。
4 肠道致病病毒检测的发展方向
现行的安全标准, 利用环境中的常见的细菌作为检验指标。如大肠菌或肠球菌, 这些评价标准仅仅是代表病原细菌或原生生物, 但这个检验指标并不能直接反映肠道致病病毒含量。目前, 对于肠道致病病毒的检测, 需要专门的实验室和技术进行组织培养、电子显微镜和免疫检验等作为主要检测手段。在一些国家对于废水排放处理不当和监测不足, 经常会造成病毒引起的胃肠炎爆发。
目前, 利用分子生物学手段能够更快速、准确、高效地进行肠道致病病毒检测。其中以聚合酶链式反应 (PCR) 为主的检测方法是相对迅速和便捷的。在传统PCR的基础上, 近年来即时定量PCR的出现大大提高了PCR的灵敏性, 并能够准确地检测样本的血清型。在消除PCR检测的干扰因素的研究方面, 多数研究都集中在包括利用凝胶过滤、免疫学、蛋白等电点聚集等方法, 这些方法都是建立在利用牛肉浸提物电荷莫吸附吸附及溶解洗脱方法的基础上。
通过利用即是定量PCR等前沿分子生物学方法开展对肠道致病病毒的研究和检测, 能够有效提高水体中病毒检出效率, 对提高人类社会健康水平起到关键的作用。
参考文献
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再生水利用中肠道病毒的健康风险 篇2
介绍了国内外对再生水利用中肠道病毒健康风险的评价方法和案例.评价结果表明,再生水经深度处理且投氯量≥10 mg/L、使肠道病毒去除率在5-lg以上时,用于高尔夫球场、食用庄稼灌溉和地下水回灌,可使肠道病毒的.感染风险降低至可接受水平(10-4),但用于接触性娱乐用水(如游泳等)还需提高再生水处理深度和加强消毒效果.
作 者：何星海 马世豪 李安定 He Xing-hai Ma Shi-hao LI An-ding 作者单位：北京市环境保护科学研究院,北京,100037 刊 名：中国给水排水 ISTIC PKU英文刊名：CHINA WATER & WASTEWATER 年，卷(期)： 21(3) 分类号：X703.1 关键词：再生水 肠道病毒 健康风险 存活时间
与肠道病毒71型的对话 篇3
手足口病可防、可控、可治，并不可怕。近日，笔者来到微生物世界，走进肠道病毒家族，就手足口病有关问题，“采访”了EV71——
问：你是哪种类型的病毒?
EV71：我是肠道病毒大家族中的一员。在肠道病毒大家族中，除我之外，还有甲型肝炎病毒、脊髓灰质炎病毒、口蹄疫病毒、柯萨奇病毒、埃可病毒等。我是1970年被发现的，并被命名为肠道病毒71型，英文缩写EV71。不同的肠道病毒能使人引起不同的疾病。我和柯萨奇A16型可使人罹患手足口病，但我的毒力比老柯强。
问：你是在什么季节侵袭人体?
EV71：一年四季，我都可以兴风作浪，但高峰是5～7月。
问：哪些人容易被你感染?
EV71：婴幼儿和儿童容易被我感染，尤其是3岁及3岁以下婴幼儿更容易被我感染而发生手足口病。由于成人的免疫功能强，即使被感染，一般也不会发病，也无任何症状，但感染后会传染给儿童。
问：你是怎样传播手足口病的?
EV71：人是我的唯一宿主。被我感染的病人和隐性感染者都是手足口病的传染源。我主要经粪一口途径和(或)呼吸道飞沫传播。正常人通过密切接触病人的粪便、疱疹液和呼吸道分泌物(如病人打喷嚏的飞沫)及被我污染的手、毛巾、手绢、牙杯、玩具、奶具、餐具以及床上用品、内衣等而被感染。
问：你造成的手足口病主要有哪些症状?
EV71：我进入人体后，潜伏2～7天，然后使人发病。患儿多以发热起病，体温在38℃～39℃，热程2～7天。发热1～2天后在手掌、手指和脚掌、脚趾间皮肤上出现如米粒样小疱疹。有时在肘部、下肢、臀部也可出现小疱疹。疱疹周围有红晕，疱疹大多不痒，也不会结痂。口腔黏膜和咽部也可出现疱疹，疱疹破溃后形成溃疡，引起口炎和咽峡炎。患儿可以伴有流涕、咳嗽、头痛、恶心、呕吐等症状。绝大多数患儿症状轻，7-10天可自行痊愈，不会留下后遗症，皮肤上也不会留下疤痕。极少数重症患儿可以引起无菌性脑膜炎、脑炎、肺炎、肺水肿、心肌炎，甚至死亡。
问：你的个性有什么特点?
EV71：我不怕冷但怕热。我在4℃时可以存活1年，在20℃时可长期存活。我在50℃时就可被灭活，60℃～85℃时，1分钟就会死亡。我也怕消毒剂和紫外线，各种氧化剂(高锰酸钾、漂白粉等)、甲醛、碘酒都能使我灭活，但我不怕75％酒精和5％来苏。
问：人类怎样才能预防你的感染呢?
EV71：人类还没有研制出有效的疫苗来防范我，对我造成的手足口病还没有特效疗法，只能对症治疗，一般情况下，7-10天就可治愈。我作孽造成的手足口病绝大多数症状轻，重症病例只是极少数，死亡率只有10万分之一或几万分之一，人类大可不必对我产生恐慌。只要做好有效防控，我就无机可趁。这里有15字防控原则：洗净手、喝开水、吃熟食、勤通风、晒衣被。
问：家里有孩子被你感染了要特别注意什么?
EV71：轻症患儿不必住院，宜居家治疗、休息，不要让患儿接触其他儿童，以免传染：患儿的唾液、痰液等分泌物要用卫生纸包好丢到垃圾箱，孩子的粪便要收集好、消毒后丢人厕所，不要随意丢弃，同时要消毒便盆；患儿的衣服、玩具、餐具及枕头被褥等要保持卫生，患儿的日常用具要消毒；居室要勤开窗通风。
问：如何对日常用品进行消毒?
EV71：我的个性你已经知道，可针对我的个性做好消毒。如果家里有患儿，可用以下方法消毒：奶嘴、奶瓶、餐具、毛巾等物品可用50℃以上热水浸泡30分钟或煮沸3分钟；污染的玩具、桌椅和衣物等使用“84”消毒液或漂白粉按使用说明每天清洗；患儿的痰、唾液和粪便、擦拭纸等，最好用消毒剂处理后再丢进厕所。
重症肠道病毒感染的临床治疗 篇4
关键词：重症肠道病毒感染,临床特种,治疗,机械通气
肠道病毒是在流行病学以及生物学特性的方面相似的RNA病毒,大部分有6~9个基因,并且呈20面立体的对称结构球形病毒,同时每个病毒有几个到几十个血清型,对普通的理化因素有着较强的抵抗力,并且耐低温以及低酸,而不会被胃酸以及胆汁灭活,不过对高锰酸钾、漂白粉以及过氧化氢液等比较敏感,对热、干燥以及紫外线同样比较敏感[1],在自然界的生存力比较强,在污水以及粪便中可以生存数月,能够感染多种动物,不过人体是唯一传染源。世界各地都有流行,可是散发、局部流行甚至大规模流行,并且在温带地区的夏秋季较为常见,儿童是最为主要的感染对象以及播散媒介,尤其是新生儿期往往因为母亲、医护人员或者交叉感染导致发病。
1 资料与方法
1.1 一般资料:
选取我院2012年12月至2013年12月收治的12例重症肠道病毒感染患者,其中男9例,女3例,年龄6个月~5岁,平均2岁。经省疾病控制中心的病原学检测为重症肠道病毒感染,所有患者均出现脑膜炎、脑炎、肺水肿、脑脊髓炎以及循环障碍等方面的症状。
1.2 临床表现:
所有患者均出现手、足、咽峡部以及肛周疱疹,其中皮疹的持续时间为5~11 d,起病到出现重症合并症的时间是1~8 d[2]。8例患者早期出现脑炎以及脑膜脑炎神经系统的受累症状,表现主要为:嗜睡以及昏迷5例,四肢抽动3例,此外还伴有颈项强直、肢体抖动以及肌力下降等。5例发展成为肺水肿以及呼吸循环衰竭,主要表现为进行性的呼吸困难以及吸气三凹征,此外还伴有咯白色或者粉红色的泡沫痰、心率增快、肺部湿音、血压增高或者下降、四肢末端的湿冷以及毛细血管的充盈时间延长等症状[3]。此外2例患者为表现出神经系统的症状,1例患者起病后发展成为呼吸循环衰竭,另有1例患者是合并支气管哮喘而导致的通气功能障碍,具体情况见表1。
1.3 治疗方法
1.3.1机械通气治疗。
第一,机械通气治疗的适应证方如下:患者的呼吸节律改变,包括呼吸暂停、抽泣样呼吸、双吸气以及叹气样呼吸;患者安静时同体温无关的那些呼吸及频率上升,>60次/分[4];患者短期内的肺部出现了湿哕音;患者的X线胸片肺部出现渗出性的改变;患者的面色苍白、发绀或者苍灰;患者的四肢末梢湿冷、苍白或者发绀,同时毛细血管的充盈时间延长>3 s[5]。第二,机械通气的开始以及持续时间。在机械通气的开始时间方面,入院2 h内给予机械通气2例,2~6 h 3例,6~12 h 3例,12~24 h 3例,24~48 h 1例。机械通气的持续时间方面,≤72 h 3例,72~96 h 2例,96~120 h 4例,120~144 h2例,>144 h 1例[6]。第三,机械通气的参数方面,使用DRAGGAR呼吸机,设定模式为IPPV,参数则设定在PIP 20~26 cm H2O,PEEP4~16 cm H2O,Fi O230%~90%,f 20~32次/分,I∶E1=1.4∶1.9[7]。
1.3.2药物治疗。
所有患者根据诊疗的指南予以个体化治疗,具体如下:控制患者的补液量,维持患者血压稳定的前提下,保持体液轻度的负平衡;给予患者甲泼尼龙治疗;给予患者小剂量的甘油果糖、甘露醇,同时应用呋塞米;静脉使用丙种球蛋白,同时应用的过程中确保无过敏等方面的不良反应;使用韦林抗病毒;予以营养神经以及心肌等方面的治疗;对于血流动力学不够稳定、毛细血管的再充盈时间上升、休克患者要应用米力农以及多巴胺等药物,同时根据患者的病情予以生理盐水扩容;患者的血糖浓度>12.0 mmol/L时应用胰岛素,从而维持患者血糖在正常的范围内[8]。
2 结果
12例患者插管后30 min内均有白色的泡沫样物质从导管内溢出,同时复查X线胸片比上呼吸机前的肺部渗出要加重,经过呼吸机治疗3~7 d后病情好转,X线胸片显示患者的肺部症状减轻,同时肺部哕音消失并且咳嗽有力,并且自主呼吸规整有力而顺利撤机。7例患者气管插管时出现肺出血,因难治性的休克以及心律失常放弃治疗。1例患者因为喉麻痹而行呼吸机治疗。11例随访6个月后恢复正常,1例随访2个月后因为合并呼吸系统的感染而死亡。
3讨论
肠道病毒有多种类型,是人类的致病微生物当中较为常见的种类。肠道病毒多发于夏秋季节,我国文献曾经多次报道其爆发性流行,多为院内的获得性感染,而院外的获得性感染报道较少。新生儿的肠道病毒感染当中,最为常见的是柯萨奇病毒,是小RNA病毒科,能够在任何的年龄段发病,不过新生儿免疫力低下而不能抑制病毒复制,因此容易感染。在很多情况下,新生儿的肠道病毒感染体内分离病毒株,同一时间社区内的流行病毒株是相一致的,表明新生儿同医护人员或者亲属间出现交叉感染,进而导致肠道病毒爆发性的流行,严重地威胁着患儿生长发育。
重症肠道病毒感染往往以发热作为首发的症状,同时伴有心肌损伤、肝功异常、脑膜炎还有肺炎等多个器官受损的表现。新生儿则没有严重的神经系统症状,不过还是应当进行脑脊液的检查,并进行肠道病原学的检查,一方面可以排除化脓性的脑膜炎并鉴别诊断,另一方面也可以指导后续的治疗。重症肠道病毒感染可能导致心力衰竭以及休克等临床表现,甚至于短期内出现死亡。不过只要给予及时对症处理,患者肠道病毒感染预后较好。通常情况下,经过治疗后的脑脊液在5 d后逐渐恢复正常。肠道病毒感染预后的效果同疾病严重的程度还有病毒毒性相关,其中丙种球蛋白营养支持治疗的效果较好。一些患者临床的症状不够典型,在入院的时候未能引起足够的重视,导致患者的病情危重而诱发死亡。总而言之,对重症肠道病毒感染,要做到早期诊断以及早期治疗,院外获得性的感染症状较轻,因而疗效相对比较理想,不过要切断传播的途径而避免爆发性的流行。
参考文献
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三种方法提取肠道腺病毒核酸的比较 篇5
关键词：腺病毒,核酸提取,荧光定量PCR
人类腺病毒 (Adenovirus) 为双链DNA病毒, 大概35KB, 它能引起一系列疾病, 如急性呼吸道疾病、角膜结膜炎、肠胃炎[1]。它分为47个血清型和6个亚类 (A到F) , 近些年F亚类中的病毒型40和41被确认为肠道感染的病原体, 是仅次于轮状病毒的引起小儿肠胃炎的主要病毒, 肠道腺病毒的感染在全球范围内发生, 4%~17%的小儿腹泻是由它引起的。AD-40和AD-41主要感染2岁以下的孩子且在全年发生。临床症状为水样腹泻伴有呕吐、低烧、轻度脱水[2,3]。AD-40是1岁左右的婴儿的感染源, AD-41则是一些大龄的幼儿的感染源[4]。
临床上快速准确地检测病原体对疾病的诊断起到关键的作用, 研究表明金标法和荧光定量PCR方法都可用于检测肠道病毒, 通常是2种或多种病毒一起检测, 为方便操作, 往往提取病毒的RNA, 进而反转录成c DNA, 进行荧光定量PCR检测的灵敏度较金标法更高些[5]。因此, 提取到质量较高的病毒核酸为进一步进行实时荧光定量PCR反应监测病毒打下了良好的基础。笔者采取RNAiso法、二氧化硅法、商品化吸附膜式柱提取试剂盒法三种不同的方法提取腹泻小儿粪便中的腺病毒RNA, 反转录后进行实时荧光定量PCR, 通过分析Ct值以及提取的时间和成本来综合评价3种提取方法, 选择对后续荧光定量PCR最有利的方法, 为以后的腹泻病毒快速准确检测奠定基础。
1 材料与方法
1.1 试验材料
实验室保存的腺病毒阳性样本。选取3个样本, 每个样本设置3个重复。
1.2 试验试剂
TaKaRaMin BEST Universal RNA Extraction Kit、二氧化硅、Tris-Hcl、EDTA、Trizol。
1.3 试验主要仪器设备
Nanodrop 2000c, Step One Real-Time PCR system。
1.4 试验方法
1.4.1 病毒核酸提取
1.4.1.1 RNAiso法
按照TaKaRa试剂盒说明书进行。
1.4.1.2 SiO2法
吸取10%的粪便样本100μL加入到1.5 PV管中, 继续加入1 000μL的裂解缓冲液和40μL的分离硅溶液, 涡流振荡10s, 室温下静置10min后, 离心30s, 弃上清液。第一次洗涤:加入1 000μL洗涤缓冲液, 充分振荡洗涤两次;第二次洗涤:加入1 000μL70%的乙醇, 充分振荡洗涤两次;第三次洗涤:加入1 000μL丙酮, 充分振荡洗涤两次。在56±2℃加热器上干燥10min (彻底干燥) , 将彻底干燥后的沉淀溶解于50μL的DEPCd H2O水中, 用移液枪吹打溶解, 在56±2℃加热器上温育10min, 最大转速离心5min, 将上清液 (约45μL) 转移到新的1.5 PV管中, 在管壁上标记样本名称、编号、提取时间, -80℃下保存备用。
1.4.1. 3 吸附膜式柱提取试剂盒法提取法
参照TaKaRa Mini BEST Universal RNA Extraction Kit使用说明书进行;实验步骤中的3、4、5、6提取DNA以及步骤12中DNaseⅠ消化的步骤省略不做。
1.4.2 核酸浓度纯度检验
取核酸样品2μL, 利用Nanodrop 2000c微量分光光度计检测其浓度及A260/A280、A260/A230的比值。
1.4.3 反转录
按照试剂盒说明书进行反转录。
1.4.4 实时荧光定量PCR检测
引物和探针, 同时设定阳性对照和阴性对照。阳性对照, 前期实验室检测确定为阳性的样本;阴性对照为配制PCR体系所用的去离子水。使用美国ABI公司Step One Real-Time PCR system扩增仪, 每管反应总体积为25μL, 5μL的样品c DNA, 20μLPCR扩增预混液, 共45个循环。Ct值≤37且有对数增长曲线的为扩增阳性。
2 结果与分析
2.1 核酸的均一性
纯的DNA样品OD260/OD280应为1.8~2.0, OD260/OD230应大于2.0, OD260/OD280小于1.6时, 表明样品中存在蛋白质或酚污染;OD260/OD230小于2.0时, 表明溶液中有残存的盐和小分子。
从核酸浓度看RNAiso法提取的腺病毒核酸浓度相对较高, 且重复性较好, Mini BEST试剂盒提取的病毒核酸浓度低, 二氧化硅法提取核酸主要的不足是重复性不好。
三种提取方法获得的腺病毒核酸的A260/A280平均值分别为1.55、1.67、1.78。Mini BEST试剂盒提取的病毒核酸质量较好, 从数值看还是有少量蛋白质污染。
2.2 Ct值
研究表明, 每个模板的Ct值与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关系, 起始拷贝数越多, Ct值越小。图2分别为采取三种不同方法提取三个腺病毒核酸, 每个样品三个重复, 之后进行荧光定量PCR反应得到的Ct值;通过比较三种方法提取的核酸进行荧光定量PCR所获得的Ct值, 结果显示采用Mini BEST试剂盒提取的核酸经过荧光定量PCR得到的Ct值最小, 表明目的基因拷贝数最多, 腺病毒含量最多。Si O2法提取的腺病毒核酸获得的Ct值稍高于试剂盒法。RNAiso法提取得到的核酸进行荧光定量PCR所得Ct值最大, 表明目的基因含量最少。
3 讨论
近年来, 实时荧光定量PCR技术由于具有较好的敏感性、特异性和可重复性, 能实现多重反应, 具有自动化程度高、无污染性、实时性和准确性的优势, 在分子诊断领域发展最快, 应用最成熟也最常被采用。肠道病毒中具有代表性的腺病毒、轮状病毒等引发腹泻的病毒是我们在临床诊断过程中比较常见的, 在本研究中, 三种方法的提取时间类似, 费用Mini BEST试剂盒相对高些, 二氧化硅价格较低, RNAiso试剂成本居中。通过对三种方法提取腺病毒核酸的结果分析, 虽然使用RNAiso法提取的核酸总浓度很高, 但是从后续实时荧光定量PRC扩增的结果看, 这种方法灵敏度较低, 提取的目的核酸较少;二氧化硅吸附法提取的核酸浓度不太稳定, 重复性不好, 荧光定量PCR所得Ct值较RNAiso法低, 说明该法提取的目的核酸浓度比RNAiso高;使用Mini BEST试剂盒提取的核酸总浓度虽然低, 但是经过荧光定量PCR扩增获得的Ct值最低, 说明目的病毒核酸浓度最高, 提取效率最高, 因此使用该法提取腺病毒核酸效果最好, 能更好地进行病毒的鉴定及定量。
参考文献
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肠道病毒 篇6
关键词：轮状病毒肠炎,肠道外损害,治疗
轮状病毒 (RV) 是引起婴幼儿腹泻的重要病原, 是秋冬季小儿常见病。近年来, 发现RV感染不仅引起肠道内感染, 而且合并肠道外损害的病例逐渐增多[1]。我科自2006年9月至2008年9月收治287例轮状病毒肠炎患儿, 发现合并多系统损害152例, 现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
287例住院患儿均符合小儿轮状病毒肠炎的诊断[2], 男169例, 女118例;152例合并肠道外损害, 男82例, 女70例, ~6个月21例 (13.81%) , 6个月~1岁56例 (36.84%) , 1~2岁67例 (44.08%) , 2~4岁8例 (5.26%) 。发病季节, 秋冬季123例, 春夏季29例。152例中, 107例发热, 最高体温40℃, 伴或不伴有呕吐, 有不同程度的稀水便, 24h均超过5次, 重者达16次。其中轻~中度脱水116例, 重度脱水14例, 酸中毒21例。
1.2 治疗方法
所有患儿入院后均行大便常规、大便细菌培养, 采用ELISA法检测大便轮状病毒抗原, 查电解质、血糖、心肌酶谱、肝肾功能, 心肌酶谱改变的患儿进一步做心肌肌钙蛋白, 做心电图、脑电图等检查, 部分患儿行头颅CT、脑脊液检查, 有呼吸系统相关表现进一步做痰培养、拍胸部X线检查。入院后均给予口服或静脉补液以纠正脱水及电解质紊乱, 利巴韦林抗病毒, 口服八面体蒙脱石散或消旋卡多曲颗粒、微生态制剂等综合治疗。对心脑肝肾等器官损害的患儿加强抗病毒, 保肝保肾营养心肌治疗。惊厥者予止惊镇静, 有颅内压增高者给予甘露醇降低颅压, 并给予营养脑细胞改善代谢的药物。
2 结果
2.1 实验室检测结果
287例患儿轮状病毒抗体检测均阳性, 便常规脂肪滴 (+~+++) , 白细胞1~3个/HP, 均未见红细胞, 大便志贺菌属、沙门菌属及致病性大肠杆菌属培养均阴性。血生化中离子钙低于正常4例, 钠离子或高或低者有22例, 钾离子低于正常9例, 二氧化碳结合率轻度下降14例, 重度下降4例。
本组287例轮状病毒肠炎患儿, 发生肠道外损害152例, 发生率为52.96%, 其中1个系统损害者61例 (40.13%) , 2个系统损害者84例 (55.26%) , 3个系统损害者27例 (17.76%) , 本组151例治愈, 死亡1例, 系重度脱水合并心肺脑多器官损害。
2.2 肠道外损害
(1) 呼吸系统:共89例 (58.55%) , 其中上呼吸道感染40例, 支气管炎32例, 肺炎17例。表现为发热、流涕、咳嗽、咳痰、呼吸急促及呼吸困难, 肺部可闻及干湿啰音。呼吸系统表现可出现在腹泻前后或同时出现。 (2) 循环系统:共59例 (38.82%) , 表现为精神萎靡、乏力、烦躁、胸闷、憋气、心音低钝, 心电图表现:19例ST-T改变, 传导阻滞2例, 均为右束支传导阻滞, 窦性心动过速28例, 心肌酶谱CK-MB增高49例, 最高达792U/L, 肌钙蛋白阳性5例。其中19例诊断为病毒性心肌炎, 余诊断为心肌损害, CK-MB多在入院1周后左右恢复正常。 (3) 神经系统:共27例 (17.76%) , 主要表现为头痛、烦躁、呕吐、嗜睡、精神萎靡。其中良性惊厥3例, 占1.98%, 病毒性脑炎18例。脑电图示:24例轻~中度异常, 脑脊液检查外观均清亮, 压力略高5例, 细胞数 (10~50) ×109/L5例, 生化均正常。头颅CT、MRI未见异常。大部分随原发病治愈而症状消失, 1例病毒性脑炎4周后复查脑电图正常。 (4) 血液系统:共25例 (16.45%) , 其中面色苍白14例, (轻度贫血9例, 中度贫血5例) , 粒细胞减少9例, 血小板减少<100×109/L2例。 (5) 消化系统:肝脏损害12例 (7.89%) , 其中6例肝脏增大, 均无黄疸, ALT70~180U/L。 (6) 泌尿系统:11例 (7.24%) , 表现为轻度水肿7例, 镜下血尿5例, 尿蛋白 (+~++) 9例, 血压增高2例, 尿素氮轻度增高3例, 血清C3低于正常3例, 肌酐均正常, 未见肾功能衰竭。 (7) 其他:皮疹17例, 为充血性或者斑丘症。胃泡极度扩张3例, 经胃肠减压、禁食、补液后缓解。电解质紊乱28例, 低钠血症15例, 高钠血症7例, 低钙血症4例, 低钾血症9例。
3 讨论
RV属于呼肠孤病毒科, 双链RNA病毒, 是秋冬季婴幼儿腹泻的主要病原之一[3], A组RV是婴幼儿腹泻的主要致病原, 尤以10~12月份为高发期, 主要侵犯6~24个月婴幼儿[4]。RV有非常特异的细胞趋向性, 在体内仅感染小肠绒毛顶端的肠上皮细胞, 由于不同的机制破坏了小肠上皮细胞功能, 肠道的吸收功能下降, 随之水电解质丢失;同时消化酶双糖酶主要为乳糖酶下降, 乳糖堆积, 肠腔的渗透压梯度促进更多的液体进入肠腔。同时诱导被感染的肠上皮细胞大量合成病毒的内毒素—非结构蛋白NSP4, 导致细胞内钙离子积聚, 并激活临近基底细胞膜上钙依赖性氯离子通道, 使氯化物分泌增多, 随后NSP4引起小肠绒毛缺血性改变, 激活宿主的肠神经系统, 导致肠黏膜液体平衡紊乱, 从而导致水样腹泻、发热、呕吐等发生[5]。近年来轮状病毒不仅可引起肠道内感染, 而且在发病早期即可发生病毒血症并引起全身多器官损害, 其肠道外并发症表现多样化, 病毒血症是导致肠道外损害的重要机制[6]。RV不仅从粪便标本中, 而且从血清、脑脊液、肺、腹水、肝、肾、胰、小肠中均可被分离出[7]。采用PCR (RT-PCR) 技术, 在轮状病毒肠炎患儿的血中也检测到轮状病毒[8], 而且在轮状病毒患儿的血中检测出特异性抗体IgM、IgG[9], 以特异性抗体显著增加为主要特点, 并且抗体产生的水平与疾病的严重程度相关[10]。
本文轮状病毒肠炎并肠道外损害152例, 其中合并呼吸道损害89例, 发生率为58.55%, 占首位, 依次为循环系统、神经系统、血液系统、肝脏、肾脏, 与相关报道一致[9,11]。RV感染的肠道外表现, 几乎累及全身多个脏器与系统, 严重者可致中毒性休克和DIC。有关RV感染诱发的DIC、血栓性微血管病, 与人类的红细胞上富含RV受体有关。本组资料RV致血液系统损害占16.45%, 位居第四, 表明一旦发生病毒血症, 在某些免疫因子参与下, 血液系统可能也是常见受累的系统之一[7]。
RV肠炎患儿发生热性惊厥, 临床比较容易认识, 本文良性惊厥3 例, 均已排除热性惊厥、脑炎、脑膜炎、脑病、癫痫以及其它原因所致的脑损伤。有关良性惊厥, 大部分学者倾向于婴幼儿在急性胃肠炎、菌血症、或病毒血症的状态下, 惊厥阈降低而出现发作, 予镇静对症治疗后, 均未复发, 随访两年, 生长发育无近期和远期的不良影响[12,13,14,15]。
肠道病毒 篇7
1 材料与方法
1.1仪器与试剂
(1)仪器。生物安全柜、倒置显微镜、CO2恒温培养箱、污水处理设备、滤膜,振荡器。(2)试剂。Mg Cl2(2.5M)、盐酸(0.5N)、3%牛肉浸液、细胞培养液、维持液。
1.2方法
(1)污水的采集。结合当地人口和居住等情况选择两个长期监测点进行污水样品的采集,分别为哈尔滨市内的龙江环保集团和哈尔滨的双城市污水厂,每月各采集一次污水样品。2013-2014 年在边境县区和发生洪涝灾害的地区设置夏季监测点(黑河市爱辉区、佳木斯市同江市和抚远县、大庆市肇源县,牡丹江市绥芬河市和东宁县),在7-9 月每月各采集一次污水样品。采集污水处理厂污水入口处的污水(也就是未经污水厂处理的污水)。各地每间隔一个月采集一次污水样品,每次采集污水样品量为1L。用1L无菌塑料桶(或干净的饮用水瓶)收集污水,装满后拧紧盖子,谨防污水样品滴漏,外面用干净塑料袋包装2 层,防止周围环境污染。采集后放4℃冰箱保存,在48 小时内送达实验室,并保持低温冷藏运输。(2)污水样品的过滤与洗脱。实验前高压过滤装置及剪刀、镊子,取出污水样品,倒入50m L(或更大的)离心管中,于3 000rpm, 4℃离心30min。将上清液转移到烧杯中,然后加入2.5M的Mg Cl2(终浓度0.05M),用0.5N HCl调节p H值为3.5,用p H试纸检查溶液的p H值。在生物安全柜中将硝酸纤维素滤膜装入过滤器,取出滤器,连接压力泵,过滤污水。在生物安全柜中拆开过滤装置,取出滤膜放到无菌容器中,用无菌剪刀和无菌镊子将滤膜剪成碎片,放入50m L离心管中。将剪开的滤膜放在含有10 m L的3%牛肉浸出液的50 m L离心管中。用超声波搅拌器搅拌碎片或在漩涡振荡器上震荡2 分钟,将上清液转移到15m L的离心管中(第一次洗脱液),再向50m L的管子中加入10m L的3%牛肉浸出液,超声波搅拌或振荡器震荡2 分钟,再次吸出上清液到另一只15m L的离心管中(第二次洗脱液)。将两次的洗脱液于4℃,3 000rpm离心15min,然后用针式滤器(0.45μm)过滤。将过滤后的液体保存在4.5m L冻存管中。(3)病毒的分离与鉴定。取200μL抽提液接种到24 孔板或细胞培养管中的细胞上(RD、L20B、Hep-2)。在每种细胞的24 孔板上,将二次洗提液分别加5 孔、3 孔上样进行病毒分离。观察CPE的形成,收获并鉴定。
2 结果
2013 年至2015 年7 月黑龙江省脊灰实验室共采集污水样品84 份,在所有污水样品中共分离出脊灰病毒疫苗株211 株和NPEV(非脊灰肠道病毒)274株,其中分离到脊灰疫苗高变异株17 株和VDPV(脊灰疫苗衍生株病毒)1 株。
通过对环境污水样品的检测,黑龙江省脊灰实验室分别在哈尔滨市,双城市,牡丹江东宁市、宁安县,黑河市爱辉区以及佳木斯同江市的污水样品中监测到了17 株脊灰疫苗高变异株,在双城市监测到VDPV(脊灰疫苗衍生株病毒)1 株。
在外环境污水样品中监测到脊灰疫苗高变异株与脊灰疫苗衍生株病毒,提示在黑龙江省部分地区有脊灰疫苗高变异株及脊灰疫苗衍生株病毒的存在,且不能排除病毒继续变异的可能。
黑龙江省脊灰实验室采用外环境中脊灰病毒分离的新技术方法,能够分离出环境污水中的脊灰病毒等肠道病毒,通过此方法的建立与应用,为黑龙江省维持无脊灰工作开辟了新的监测途径。
3 讨论
2000 年,包括中国在内的西太区实现了消灭脊灰的目标[2],为人类的健康做出积极的贡献。从1999 年至今,全球未再发现II型脊灰野病毒[3]。人类于20 世纪50 年代先后发明预防脊髓灰质炎的灭活疫苗(IPV)和减毒活疫苗(OPV)。由于OPV接种途径简单、价格低且能干扰环境中野病毒的存在,在消灭脊灰早期阶段,被WHO推荐用于儿童的常规和强化免疫。但近年来在一些无脊灰地区,由于使用OPV而导致的疫苗衍生病毒(VDPV)和脊灰疫苗相关病例(VAPP)的问题,开始引起人们的关注。2000-2011 年,全球有17个国家发现c VDPVs(脊灰疫苗衍生病毒循环)。在2005-2011 年期间,尼日利亚发生严重的c VDPVs疫情,人们对c VDPVs病毒的致病性、该疾病的临床严重程度以及针对c VDPVs的控制措施与WPV进行比较,结果显示Ⅱ型c VDPVs、Ⅰ型WPV(脊灰野病毒)与Ⅲ型WPV导致麻痹的临床严重程度没有明显差别[5]。所以,近年来在中国,VDPV也越来越得到重视,中国部分省份也发现过VDPV病例[4,5,6,7,8]。而且,因为脊灰病毒(包括VDPV)感染易感宿主后有近99%为隐性感染,并不表现出临床症状,且病毒可以在外环境中存在较长的时间,个别患者排毒时间可达4 个月以上[1],如果遇到合适的易感宿主,可能会导致脊灰病例(或VDPV病例)的出现,甚至发生脊灰(或VDPV)循环和暴发。另外,国外报道在已十余年无脊灰流行的国家,在外环境中分离到脊灰野病毒。黑龙江省脊灰实验室在84 份污水样品中共分离到14 株脊灰疫苗高变异株病毒。根据基因大约以每年1%的变异速率推断[9],该地区脊灰疫苗高变异株病毒已在环境中存在至少半年,但尚无证据表明该地区有脊灰疫苗高变异株循环[10]。从环境中监测到人肠道病毒,可以保证患者及早得到正确的治疗,并及时采取有效的防控措施,保护暴露人群的健康,防止疾病的流行传播,具有广泛的社会效益。因此,此检测技术也可推广应用到其他肠道病毒外环境的监测,为其他肠道传染病监测提供关键技术。开展外环境病原学监测是急性迟缓性麻痹(AFP)监测系统的重要补充,对维持黑龙江省无脊灰状态起到了积极的作用,为及时发现VDPV和脊灰野病毒的输入提供了预测预警。
参考文献
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肠道病毒 篇8
1 资料与方法
1.1 临床资料
标本来源于我院2010年6月15日-8月20日临床诊断或疑似为HFMD患者的咽拭子或肛拭子共计387份,类型以咽拭子为主。其中男231例,女156例,年龄2个月-6岁。
1.2.1 标本的采集和处理
用专用采样棉签采集临床诊断或疑似为手足口病病例的咽拭子、或肛拭子;迅速将棉签放入装有3～5ml保存液的采样管中,旋紧管盖并密封。
1.2.2 试剂和仪器
使用中山大学达安基因股份有限公司提供的试剂盒。仪器为SLAN荧光定量扩增仪。有获得资格证书的人员严格按照试剂说明书进行操作, 按试剂盒所列条件进行扩增,由电脑分析计算定量结果。
1.2.3 RNA模板提取
取液态样本100uL放置于1.5mL灭菌离心管,加入200uLTrizol试剂及100uL氯仿,用振荡器强力震荡20s后静止3min,然后12,000rpm离心2min;小心取出上层无色液体(注意不可触及中间絮状层),转移至新灭菌的1.5mL离心管,然后加入10uLRNA提取液A,再用震荡器混匀,8,000rpm离心1min后,小心弃去所有液体;加入溶液C(确认已加入无水乙醇)400uL,充分震荡均匀,8,000rpm离心1min,尽可能将液体去除干净;将装有沉淀的离心管摆在通风櫥中风干15min,然后加入30uLDEPC H2O,吸打混匀管中沉淀,得到白色的悬浊液,可直接用于检测,也可存于-70℃待用。
1.2.4 PCR程序
与PCR反应管中加入5ulRNA模板提取液,扩增体系总容量为25uL,用已知含量的标准阳性对照品制备标准曲线,同时设置阳性和阴性对照,置于自动荧光PCR仪上,40℃25min,一个循环;94℃3min,一个循环;93℃15s→55℃45s,40个循环。
1.3 结果的判定标准
如果检测样本无典型S型扩增曲线或Ct>35.1,则判样本为EV71阴性;如果检测样本呈典型S型扩增曲线Ct值≤35.1,则判样本为EV71阳性结果。
2 结果
阳性197例,感染率50.90%;男性感染率为51.95%;女性感染率为49.36%。
3 讨论
肠道病毒是常见感染人类的病毒,可导致多种疾病,临床表现多样,近几年由肠道病毒引起的暴发疫情时有发生。5-7份是手足口病高发期。HFMD的主要传染源是患者、隐性感染者和无症状带毒者,其血液、鼻咽分泌物和粪便中均存在病毒,可以通过呼吸道传播,也可以由手及污染物经口传播。HFMD普通症状不会致死,但EV71不仅引起HFMD,而且可引起严重的中枢神经系统并发症,如脑膜炎、脑炎、急性迟缓性瘫痪等,造成儿童死亡。因此,对EV71尽早作出实验室确诊是提高诊断和治疗并减少患者死亡的关键。肠道病毒最常用的监测方法是病毒分离培养。然而,分离培养一个周期获得阳性结果需要5～7d,获得阴性结果需要10d,此外,细胞培养有时不能分离某些病毒株[5,6]。RT-PCR可用于监测肠道病毒,它可以检测出细胞培养不能分离的病毒株,但通常需要1d的时间。随着分子生物学技术的发展,荧光定量PCR技术能快速而准确地检测临床标本中的EV71,且实行闭管式操作,能有效防止PCR产物的污染,提高检测结果的可靠性;从标本处理开始只需要3～4h即可完成,节约了检测时间。本研究建立的快速检测肠道病毒EV71的荧光定量RT-PCR方法,具有特异性强、敏感性高、效率高等优点,它操作简单,稳定性好,可以在3～4h内快速检测肠道病毒EV71,可用于临床对EV71作出早期诊断。
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肠道病毒 篇9
2014年8月-2015年10月收治轮状病毒性肠炎患儿30例, 将其作为观察组, 选择同期就诊的无轮状病毒感染患儿30例, 将其作为对照组。观察组男12例, 女18例, 年龄2个月~4岁, 平均 (2.12±1.24) 岁;对照组男13例, 女17例, 年龄2个月~3岁, 平均 (2.01±0.87) 岁。两组一般资料比较, 差异无统计学意义 (P>0.05) , 具有可比性。
方法:所有患儿于住院后第1天常规留置标本, 采用金标法对其进行检测, 并采用酶联免疫吸附法检测轮状病毒抗体。于患儿住院后第2天检测患儿的血常规、血气分析指标及其生化指标。对于心肌酶谱检测结果存在异常的患儿, 再进行详细检查;对于存在惊厥现象的患儿, 进行腰穿;对于存在呼吸道损伤的患儿, 进行胸片检查;对于存在哭闹或主诉疼痛的患儿, 进行腹部彩色超声检查。
观察指标:观察两组患儿出现肠道外损伤的情况。其中, 肠道外损伤主要包括心肌损伤、肝脏损伤、呼吸道损伤、肾脏损伤以及中枢神经损伤。
统计学方法:采取统计学软件SPSS 19.0对上述数据处理, 计数采取率 (%) , 组间率对比采取χ2检验, 对比以P<0.05为差异有统计学意义。
结果
观察组肠道外损伤率为83.3%, 对照组肠道外损伤率为46.7%, 观察组高于对照组, 组间比较, 差异有统计学意义 (P<0.05) , 见表1。
讨论
轮状病毒主要是通过粪便、人与人接触以及呼吸道感染等途径传播, 发病人群主要集中于6个月以下的婴幼儿, 发病季节以秋冬季节为主[3]。轮状病毒性肠炎的发病机制主要是因轮状病毒侵蚀患儿的小肠黏膜, 促使绒毛不断缩短, 破坏绒毛结构, 导致患儿肠道内的水电解质平衡遭到破坏, 从而降低了肠道对葡萄糖的吸收能力, 最终导致腹泻[4]。
临床研究表明[5], 对轮状病毒性肠炎患者检查后, 发现在患儿的血清、腹水以及肝脏等均可检出轮状病毒RNA, 且检出病毒不存在差异。本次研究结果显示, 观察组出现肠道外损伤25例, 对照组出现14例, 观察组肠道外损伤发生率高于对照组, 组间比较, 差异有统计学意义 (P<0.05) , 充分说明轮状病毒感染会引发肠道外损伤。
轮状病毒肠炎引发心肌损伤的机制主要是:轮状病毒通过胃肠道破损黏膜进入到患儿血液循环内, 侵犯心肌组织, 损伤患儿的免疫功能, 再加上患儿脱水后往往会出现循环血量不足, 导致患儿血压降低, 并造成冠脉血流不足, 从而引发缺氧、缺血症状, 进而会损伤患儿的心肌细胞。临床上主要表现为窦性心动过速。治疗上主要采用营养心肌药物进行治疗, 可以缓解患儿的症状。
轮状病毒肠炎引发呼吸道损伤可能是由于轮状病毒通过呼吸道传播, 导致患儿感染。临床上主要表现为呼吸道感染, 并于1~2 d内会出现消化道感染。
轮状病毒肠炎引发中枢神经损伤主要表现为热性惊厥、脑膜炎等症状, 其中, 惊厥较为常见, 但其持续时间往往较为短暂。
轮状病毒肠炎引发肝脏损伤主要是是由于轮状病毒中存在嗜肝组织特性, 具有较强的肝趋向性, 促使患儿体内的肝酶升高。治疗上主要采用抗病毒、护肝等方法, 预后效果良好。
本次研究中, 观察组出现肾脏损伤的患儿3例。患儿的肾损伤程度较轻, 且临床症状不明显, 分析其原因可能与患儿自身的肾脏功能不健全存在一定的关系。
此外, 其他研究报道轮状病毒性肠炎可能会导致患儿出现胰腺损伤、血液系统损伤等症状[6], 但在本次研究中, 30例轮状病毒性肠炎患儿均未出现该现象, 这可能与本次研究样本较小有关。
综上所述, 轮状病毒性肠炎肠道外损伤的临床表现相对较多, 针对患儿出现的肠道外损伤, 应采用积极对症处理, 从而保障患儿的健康。
摘要：目的:探讨轮状病毒性肠炎肠道外损害的临床表现。方法:30例轮状病毒性肠炎患儿作为观察组, 30例无轮状病毒感染患儿作为对照组。两组患儿均接受实验室检查, 分析两组患儿的肠道症状、肠道外损伤表现及检查结果。结果:观察组肠道外损伤率明显高于对照组 (P<0.05) 。结论:轮状病毒性肠炎肠道外损伤的临床表现相对较多, 针对患儿出现的肠道外损伤, 应采用积极对症处理, 从而保障患儿的健康。
关键词：肠炎,轮状病毒性感染,肠道外损害
参考文献
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