独立表达(精选四篇)
独立表达 篇1
Ⅱ型胰岛素样生长因子m RNA结合蛋白3(insulin-like growth factorⅡm RNA binding protein 3IMP3)以高度亲和力与Ⅱ型胰岛素样生长因子m R-NA结合,通过调节Ⅱ型胰岛素样生长因子m RNA的运输、翻译及稳定性来参与细胞极性、运动和增殖活性的调节[4]。近几年的研究结果表明,在胰腺癌、肺癌、肝癌、结肠癌、肾癌、子宫内膜癌、膀胱癌、骨肉瘤、甲状腺瘤等多种肿瘤中,IMP3表达普遍升高,而且可以作为多种肿瘤诊断和预后判断的分子标志物[5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16]。然而IMP3在食管鳞癌中的表达情况未见报道。本研究首次利用免疫组织化学和real time PCR对食管鳞癌中IMP3的表达水平及其临床意义进行了研究。
1 资料与方法
1.1 资料
回顾性收集了1990年~2001年在中国医学科学院肿瘤医院接受手术治疗的原发食管鳞癌病例120例,均未行术前放、化疗,所有石蜡标本的HE染色切片均经病理医生阅片确诊,同时标记癌组织以及远癌正常食管黏膜,组织芯片由上海芯超生物科技有限公司制作。除去免疫组织化学过程中脱片的点,可分析病例为100例。具体病例资料及5年随访资料,见表1。另外,回顾性收集了2006年在同一医院接受手术治疗的原发食管鳞癌病例33例,术前未行放、化疗。肿瘤组织和远癌正常食管黏膜术后液氮中速冻,-80℃冰箱保存,其中20例同时收集了福尔马林固定的石蜡包埋组织,用于免疫组织化学检测。
1.2 免疫组织化学
IMP3抗体购自美国Abnova公司,PV9000及DAB显色液购自北京中杉金桥生物技术有限公司。切片经二甲苯脱蜡,梯度酒精水化,95℃、15 min抗原修复,3%的双氧水消除内源性过氧化酶活性,一抗(1︰100稀释)4℃孵育过夜,PV9000室温孵育,DAB显色,苏木素复染。PBS代替一抗为阴性对照。结果由中国医学科学院肿瘤医院2位病理医生读片。依据细胞着色强度和着色细胞数量判定阳性强度。“-”为阳性细胞数<5%;“+”为5%~25%肿瘤细胞弱染色;“++”为25%~50%肿瘤细胞中度染色;“+++”为>50%肿瘤细胞强染色。“-”判定为阴性,“+”、“++”或“+++”都判定为阳性。
1.3 Real time PCR
Trizol(美国Invitrogen公司)提取冷冻组织中的总RNA。甲醛变性电泳鉴定总RNA的质量。RevertAidTM第1链c DNA合成试剂盒(加拿大Fermentas公司)进行总RNA的反转。PCR引物由上海生工公司合成。IMP3上游引物:5'-GATGCAA-GACTTTCAACTGACTGG-3',下游引物:5'-AGCT-TAGTGAGGCTCATGACAGTG-3'。β-actin上游引物:5'-GGCGGCACCACCATGTACCCT-3',下游引物:5'-AGGGGCCGGACTCGTCATACT-3'。SYBRPremix Ex TaqTM试剂盒(日本Ta KaRa公司)和美国ABI7300 PCR仪进行real time PCR扩增,60℃退火31 s,共反应40个循环。结果判定采用相对定量方法:2-ΔΔCT法。ΔΔCT=CT(TIGF2BP3-Tβ-actin)-CT(NIGF2BP3-Nβ-actin)。
1.4 统计学方法
采用SPSS 13.0软件进行分析。各组间IMP3表达阳性率的比较采用四格表χ2检验。不同IMP3表达组之间的生存分析采用Kaplan-Meier分析、Log-rank检验和Cox多因素回归分析。以P<0.05为差异有显著性。
2 结果
2.1 IMP3蛋白在食管鳞癌组织中的表达升高
免疫组织化学检测了100例食管鳞癌及癌旁正常食管黏膜中IMP3的表达。17.0%(17/100)的食管鳞癌组织中IMP3表达阳性,只有2.0%(2/100)的正常食管黏膜呈阳性表达,两者差异具有显著性(P<0.001)。IMP3的表达主要定位于细胞浆(见图1)。
2.2 IMP3高表达是食管鳞癌患者独立的预后因素
IMP3的表达与食管鳞癌患者的年龄、性别、分化程度、发生部位、T分期、淋巴结转移以及TNM分期无明显相关性。有食管癌家族史的患者中IMP3的表达阳性率为30.4%(7/23),高于没有食管癌家族史组的12.9%(10/77),但差别不具有显著性(P=0.051),见表1。Kaplan-Meier分析表明,IMP3高表达组患者的术后生存率(5年生存率23.5%)比低表达组(5年生存率45.7%)差,差异具有显著性(P=0.032),见图2。单因素分析表明,IMP3表达、TNM分期、T分期及淋巴结转移与患者的预后相关;但多因素Cox回归分析显示,IMP3高表达(P=0.015)和TNM分期(P=0.001)是食管鳞癌独立的预后因素。IMP3高表达的相对危险度为2.183(95%可信区间为1.164~4.082),见表2。
2.3 IMP3的mRNA在食管鳞癌组织中表达升高
Real time PCR检测了33例食管鳞癌及其癌旁正常黏膜冰冷冻组织中IMP3 m RNA的水平。2-ΔΔCT法计算癌/癌旁比值。癌/癌旁比值的中位值为1.59(0.04~24.42)。以中位值为Cutoff值,51.5%(17/33)的组织中IMP3 m RNA的水平发生上调,见图3。IMP3 m RNA的表达水平与肿瘤的浸润深度、淋巴结转移、TNM分期以及分化程度无相关性。对其中20例患者的石蜡包埋组织进行了免疫组织化学染色,检测了IMP3蛋白表达水平,25.0%(5/20)的肿瘤组织呈阳性表达。但是其m RNA的水平和蛋白水平之间没有相关性。
3 讨论
本研究中,IMP3在食管癌组织中表达明显高于癌旁正常组织,而且其高表达与食管癌患者预后差显著相关,是食管癌独立的预后因素之一。本研究中IMP3的m RNA水平明显上调,说明在食管癌中IMP3在转录水平就发生了上调,这与卵巢癌的研究一致[7]。但本研究中IMP3的蛋白与m RNA之间无相关性,推测IMP3 m RNA翻译至蛋白的过程可能存在调节机制,但还需要深入研究证实。
独立表达 篇2
昨天下午,北京大学招生办公室公布了今年该校自主招生和“校长实名推荐”两个面试的全部考题,一共30道。在这些考题中,涉及时事和热点的占10道左右。参与命题的北大教授称,这样的命题体现了北大对学生心系天下的要求。北大的考题涉及3月11日发生的日本9级大地震,国家博物馆前竖立孔子像,房产税征收,公务员考录等内容。昨天,记者采访到几位参与命题和面试的北大教授。教授表示,考题中大量涉及时事热点,体现了北大对学生心系天下的要求,北大认为,他们的学生就应该关注热点,有社会责任意识。对于参加了这两场面试的考生,教授的整体评价是:表达较好,但欠缺独立的思想。据了解,参加自主招生和“校长实名推荐”面试的学生,大多在中学阶段担任职务,组织过校内外活动,表达沟通能力都不错,许多人表示想读经济、金融、管理等专业。面试考官认为考生答题时“一方面……另一方面……”的句式较多,缺乏鲜明的.观点和独立的判断。 中国大学网实习记者张航)
与时事相关的部分考题
1.近期房产税、车船税、“馒头税”等均引发社会热议,请谈谈你对纳税与公民权利关系的理解。
2.国家最近规定,中央和省级机构录用公务员,一般情况下都须具有两年以上基层工作经历,不再招收应届毕业生,你对此有何评论。
3.近来续写《红楼梦》又成为社会热点话题。你认为后人可以续写、仿写、改写经典名著吗?
4.今年是辛亥革命100周年,海峡两岸将共同举行隆重庆典。你认为大陆和台湾看待辛亥革命的角度和意义会有什么不同?
5.日本政府最近称,由于中国的GDP已经超过日本,所以要大幅削减对华援助,你如何看待此事?
6.有人说,低收入人群的生活质量是衡量一个社会文明进步的标志,谈谈你的看法。
7.近日在国家博物馆北广场竖立了孔子雕像,引起各方关注。请谈谈你的看法。
8.近年来,影视剧中出现不少“穿帮”镜头,请从文化建设角度谈谈你的看法。
9.3月11日下午1时46分,日本近海发生8.8级地震并引发海啸,面对这一灾难,请谈谈你的感想。
10.有人认为:“水资源短缺是中国未来面临的一个比能源问题更巨大的挑战”。你同意吗?为什么? 中国大学网来源:北京晚报) 中国大学网
★ 面试要敢于提问
★ 面试提问
★ 招聘面试提问技巧
★ 面试后要求考官回电话
★ 通过面试提问展示风采
独立设计师的美学表达 篇3
对“独立”二字,我们总是心怀敬畏。它是标识,更是宣言。王小波在《沉默的大多数》一书中,多次提及作为知识分子的忧患,表达出保持独立意识的重要性,观点犀利,绝对是一副“良药苦口”的好文章。
那么,在设计领域,“独立”这个身份标识到底意味着什么?以服装设计领域为例,独立设计师强调“为自己工作”,打造的是独立设计师品牌,它“通常都蕴含着设计师在历史和社会变更中对合理而独立存在的文化和精神的思考,保持着统一的风格,有着标签化的设计,但不会迂腐到没有任何流行元素。另一个好处是它们有着适合各种人群的价格和风格,永远是限量版的,并具有一些理解并认同品牌的死忠。”我们将以上对独立设计师服装品牌的剖析运用于空间设计,虽然业态不同,空间设计领域也似乎要更难驾驭些,但相信设计师的独立精神是相通的。
作为专业媒体,我们为何关注空间设计内的独立设计师群体,因为他们的独特性一一爱他们的业主是死忠,不爱的可能一点也不愿意给机会,就像陈辉及连君曼论坛打出的“我们只做纯设计”,他们总是有选择性地挑选客户;虽然不像规模大的公司那样分项目小组高强度地运作,但是档期往往排到几年后;口碑先行之下,他们跟业主处得跟朋友一般,不乏“回头客”……他们走的是究竟是一条怎样的设计路?带着这样的疑问,本期专题我们将聚焦不同地域的独立空间设计师,与他们探讨独特的设计表达。
独立表达 篇4
1《铁路沿线》中的边缘化探索
将《铁路沿线》的诞生用偶然一次, 绝不为过, 自然也是杜海滨有一双善于发现纪录选题的眼睛, 一颗艺术人的敏感内心。在杜海滨为一部剧情片采景外出的路上, 火车路过宝鸡的铁路沿线。火车来来往往的路上, 杜海滨放下了脚步, 他看到这样的一群人们, 他们以卖废品或者偷盗为生, 最小的年纪年仅九岁。杜海滨手持着一部掌中宝, 便深入到了这一群人当中。
杜海滨说:“在任何一个城市的街道上, 都能看到这样一些人, 也曾经有过一种冲动, 想走上去与他们交谈聊天。”边缘化的群体, 长期以来由于受到人们的不包容甚至排斥, 常常都具有自卑, 很难沟通的特点。纪录片的本质之一, 就是把现实的人际交往与电影创作相结合起来的一个创作方法, 纪录片的人际交往往往是以真诚为标准的。杜海滨操着一口标准的陕西话, 未表来意, 只是单纯友好地从与他们进行生活的沟通, 慢慢打消了他们警惕防范的心里, 走进了他们的生活。
在初次见面聊天之后, 杜海滨曾将他身上的两百块钱给了他们。对凤翔, 一个身患重病, 却染满功利心思的流浪汉, 杜海滨拒绝了施舍。在当天拍摄结束后, 去医院给凤翔买了许多的药, 自此之后再也没有以金钱的形式施舍过任何一个被摄者。到今天, 与杜海滨谈及到纪录片被摄者要求收费的问题, 杜海滨表示这么多年, 从来没有再给过被摄者费用了。涉及了金钱, 在镜头前的他们, 将不再真实。独立纪录片影片本大多就是边缘化的群体和主题, 追求有极高的真实性。
20年的发展史, 让独立者不仅仅只是孤芳自赏, 越来越多的人关注到了独立纪录片的存在。而带给观众“真实”“震撼”之后, 却是撕碎这一个边缘化群体的伤口付出的代价, 观众看到的是一段时代下的悲情, 而对于他们, 却是鲜血淋漓的现实。社会的底层边缘, 弱势群体, 这些字眼敲在了他们的身上。他们的特殊身份和许多生活隐私是见不得光的, 而曝光, 将对他们未来的生活造成极其严重的影响。
在伦理传播的方面, 边缘化的表达一直是独立者们的诟病。杜海滨在《铁路沿线》里的素材很多, 但成片就只是那几个人的故事。故事的最后, 是杜海滨半年后再次回去到宝鸡的铁路沿线, 去看望他们。他们有的有了新家庭, 有的找了工作, 有的没了音讯, 但片中每一个人物都走上了自己的人生道路。在其后杜海滨的每一部片子都是如此, 拍完的是故事, 在最后, 都会交代这些悲情之后的温暖。而在最后的传播途径上, 反而会淡化互联网这一个平台, 让纪录片在塑造真实的同时, 也保护真实。
2 融入美学的边缘化表达
在美学角度, 独立纪录片往往以“悲剧”文明, 而他又不是传统戏剧上对悲剧的定义, 崇高美以及优美的毁灭, 仅仅只是去展示一群人或一个人是有多么的悲情罢了。不仅如此, 独立纪录片的导演, 大多不是导演影视专业出身, 他们可能来自各行各业, 由于摄像机的普遍, 摄影技术的平民化。更多人走入了这个行业, 让影像无论是从拍摄者还是被摄者主题都走入了草根化, 但同时也让美学与纪录片的平衡打破。
《铁路沿线》是一部自述式访谈加采访相结合的方式, 片中有1/4的章节是导演自己在讲述铁路沿线的这个故事, 自己拍摄的这个过程。不是单一的用故事讲故事, 而是用语言去处理故事。在一个短期拍摄的纪录片里, 往往不能很好地表现这一个真相的前因后果, 甚者容易造成观众的误解, 看到垃圾场便会联想到这个地方的居住环境的恶劣, 听到一些极端的声音便容易理解这是在讽刺些什么。用一种看似主观实际但又最客观的方式讲故事最好不过, 由于独立纪录片往往只是由一人或是几个人的小团队拍摄而成, 其主观性往往有个人化的倾向。真实之内又有真实, 导演本身用镜头语言讲不清的故事在融合自述式访谈, 反而完整了该影片的叙事结构。
美学, 作为一种主观意识形态的产物, 往往是在无数的理论实践中生成的, 不是纸上谈兵, 空口白话而已。《铁路沿线》里面, 尽管只是手持的掌中宝拍摄, 画质和机位是本身的局限, 可这样并没有困住导演本身对镜头的追求。在采访“火狐狸”时, 他讲到一半哽咽了, 火车轰隆隆的开过沿线, 杜海滨并没有将镜头对准即将摇摇欲坠的眼泪, 而是一个摇镜头, 半边的天空, 行驶而过的火车, 一个长长的镜头。无言的一个空镜头, 更有了冲击力, 同时也是杜海滨对流浪汉的尊重。生活的无奈将他们压得很累了, 也就不需要把脆弱再给别人看了。
在对这些边缘化人物的刻画, 杜海滨一直都是以这样的一种态度, 客观真实, 包括对自己在纪录片里的呈现。他也做错过, 给过他们钱, 有过不好的心态, 真实里的真实都纪录在他的摄像机里。将美学与独立的影像相结合, 不仅仅是追求更是尊重。
3 独立导演对影像的追求
在杜海滨新作《少年小赵》成都展映时, 有一个新兴纪录片导演对杜海滨提出了质疑。认为他在《少年小赵》的画面追求上太低, 现在的技术水平可以追求更高的画面。然而杜海滨却说:“我只想在纪录片上找到一个平衡点。”无论是在画面的追求以及对整个纪录片的追求, 杜海滨一直都在寻求这样一个平衡点。
低成本, 小制作的独立纪录片一直都处在被议论成粗糙, 拙劣的风口浪尖。导演们想去表达, 却又有心无力, 许多都处在失落的低潮里。得不到资金的支持, 得不到社会的认可。在制作纪录片这一个平衡秤上, 始终朝着一方在倾斜。也就是因为许多的导演从一开始就过于的追求目的, 忽视了表达, 再去想如何得到一个好的选题, 却总是忽视身边的一切。
杜海滨不是一个纯粹的独立纪录片导演, 但自从拍摄《窦豆》以来, 快接近20年的时间, 他从未间断的拍摄纪录片。他总是会接许多的剧情片的活, 也会接下广告的拍摄等, 他会从事各行各业的导演拍摄工作。而独立纪录片, 只是他灵魂深处的东西。每拍摄一部纪录片的时候, 杜海滨总是在干着其他的工作, 用着其他工作所获取的资金再投入到这个纪录片的拍摄。很多时候, 拍摄一个纪录片, 就是无盈利的事情。这本身就是独立的事情, 是自己的追求。其艺术价值本身上, 就是极高的。
但独立制作人过度的沉溺于个人话语的创作, 也是独立纪录片的一大问题, 纪录片的很大一个问题在于选材, 题材是一个纪录片成功的关键。而独立制作, 总会让一些问题过于的单一, 为了边缘而边缘、为了先锋而先锋, 题材狭窄, 视野不够开阔。虽目的是注意关怀, 却总是因为过度的边缘化而失去本质。作为一个独立的导演, 思想不应该就是单一独立的, 一个话题总是在头脑风暴后才会更加的深入。
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