修复再生（精选八篇）
修复再生 篇1
最近, 国际重要学术期刊Glia在线发表了中科院上海生命科学研究院健康所张雁云研究组博士生肖意传、徐经纬等研究人员关于脂代谢的调节影响神经再生修复和神经机体免疫功能的新发现。
脂代谢调节的紊乱会导致多种疾病的发生, 但是其对神经再生修复和神经免疫功能的影响目前还尚不清楚。内固醇受体辅激活因子 (SRC-3) 是机体脂代谢调节中重要转录因子, 研究人员发现, SRC-3基因敲除小鼠较野生型小鼠瘦小, 且其脂代谢水平较高。利用SRC-3基因敲除小鼠构建实验性自身免疫性脑脊髓炎 (EAE) 模型, 发现基因敲除小鼠表现出对EAE诱导的耐受。其原因是SRC-3基因敲除促进了炎症条件下中枢神经系统 (CNS) 中小胶质细胞处于一种非经典的激活状态, 这些非经典激活的小胶质细胞通过上调抗炎性细胞因子IL-10的表达来对抗EAE诱导引起的CNS炎症, 并促进了CNS少突胶质细胞诱导的髓鞘再生。进一步分析相关的机制, 发现这种非经典激活的小胶质细胞是由于SRC-3基因敲除诱导了炎症条件下CNS中PPAR-b的升高引起的, 也调节了神经干细胞的活化、增殖和分化。
在此研究中, 首次揭示了CNS小胶质细胞的非经典激活形式及抗炎症效应及其相关分子机制, 也发现了调节影响神经干细胞活化、增殖分化及再生修复病理损伤的重要代谢分子信号途径, 为神经干细胞再生修复损伤提供了新的思路。
修复再生 篇2
1.细胞与细胞之间的作用 细胞在生长过程中，如果细胞相互接触，则生长停止，这种现象称为生长的接触抑制。细胞间的缝隙连接(可能还有桥粒)也许参与了接触抑制的调控。肿瘤细胞丧失了接触抑制特性。
2.细胞外基质对细胞增殖的作用实验证明，正常细胞只有粘着于适当的基质才能生长，脱离了基质则很快停止于g1或g0期。基质各种成分对不同细胞的增殖有不同的作用，如层粘连蛋白可促进上皮细胞增殖，抑制纤维母细胞的增殖，而纤维粘连蛋白的作用则正好相反。组织中层粘连蛋白与纤维粘连蛋白的相对比值可能对维持上皮细胞与间质细胞之间的平衡有一定的作用。
神经轴突损伤后再生修复的治疗展望 篇3
1 手术治疗
手术的目的在于使受压的脊髓解除压迫,根据X线片、CT、MRI的影像,判定手术的方式,可以选择前路或者后路手术,颈椎可以选择颈前路椎管减压颈间盘摘除,钛笼植骨钛板内固定术,或者颈后路开门椎管扩大成形术。胸腰椎前路手术解剖复杂,手术风险高,故尽量选择后路的椎管减压,间盘摘除椎间植骨钉棒系统内固定术。术后的并发症较多,颈椎手术24～48 h内主要是呼吸困难和窒息,多是术后血肿所致。术后治疗重点是脊髓神经损伤的修复。最理想的治疗是让患者生活可以自理。
2 药物治疗
2.1 大剂量的甲强龙
大剂量的甲强龙可以稳定细胞膜,阻止类脂化合物的过氧化反应,减轻神经细胞的变性,减少钙蓄积,降低水肿,增加血运,预防神经纤维变性,还可改善脊髓的微血管灌注,增加血流。最佳时机是伤后8 h内应用,同时心电监护,还应防止应激性溃疡引起的消化道出血的并发症。
2.2 单唾液酸四己糖神经节苷酯(monosialotetrahexosylganglioside,GM-1)
GM-1可稳定细胞膜,激活ATP酶,使细胞在缺氧的情况下提高细胞生存率,可尽早应用。
3 细胞移植
3.1 雪旺细胞(schwann cell,SCs)
SCs是周围神经主要成分,移植后可促进轴突的髓鞘化和轴突再生[1]。Takeda等[2]发现雪旺细胞可合成神经生长因子(NGF)、脑源性神经生长因子(BDNF)。Feng等[3]将NGF和BDNF转染后的SCs联合植入神经损伤处,结果发现皮质脊髓的轴突生长,理论上可促进神经损伤的修复。
3.2 神经干细胞(nerve stem cells,NSCs)
修复神经损伤的理论依据:(1)可分泌多种神经生长因子,改善轴突生长的微环境;(2)产生多种细胞基质提供支架功能;(3)对缺失的神经元和胶质细胞有补充作用;(4)是脱髓鞘的神经髓鞘化。保持神经的完整性。其增值能力在在周围环境改变时被激活。很多生长因子对其有支持作用,如表皮细胞生长因子(EGF)、白细胞介素(LIF)等。Gray等[4]认为神经干细胞是治疗脊髓中枢损伤的理想替代物质。Johansson等[5]在神经损伤处移植神经干细胞,发现神经干细胞又向神经元转化的趋势。
3.3 骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)
骨髓中含量最为丰富,BMSCs在骨髓中含量极少,并随年龄的增加而细胞数量逐渐减少,体外特定的诱导条件下可分化为骨、软骨、神经、脂肪、肌肉及肝等多种功能细胞,它可以通过细胞替代弥补中枢神经疾病或损伤引起的神经功能缺损,同时能分泌多种白细胞介素和干细胞因子。因此,BMSCs的应用为中枢神经系统损伤修复提供了新的治疗方法。骨髓间充质干细胞取材方便,移植安全,没有排斥反应。骨髓间充值干细胞的分化受到微环境,细胞的诱导,细胞因子的影响。骨髓间充值干细胞可转化为神经元并分泌细胞生长因子,有利于轴突的生长,促进神经损伤的再生。改善患者的运动感觉功能,提高生活质量。对损伤神经的修复作用,有学者在实验中将体外培养的BM-SCs转染绿色荧光蛋白,移植入体内神经缺损处,最终BM-SCs分化为具有神经膜细胞功能和性质的细胞,并可以诱导细胞再生,从而达到修复受损神经的作用。
3.4 胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESCs)
胚胎干细胞是一种高度未分化细胞,它能分化出成体动物的所有组织和器官。胚胎干细胞可形成轴突的髓鞘,与宿主的神经组织建立突触联系。胚胎干细胞移植技术对治疗中枢神经损伤疾病有较好效果,其机制主要包括:(1)移植到体内的部分干细胞,可定向分化为巨噬细胞,起到清道夫的作用;(2)是在受创组织所处的环境改善后,局部血流量增加,并且局部血管系统可得以修复;(3)就是把移植的干细胞定向分化为神经胶质细胞;(4)是神经细胞的再生,包括受损神经的存活和再生以及移植的干细胞定向分化为神经细胞。Ogawa等[6]实验时将培养的原代胚胎干细胞在体外分化后,移植到神经损伤处,结果表明在神经损伤处形成突触样结构,并分化为少突胶质细胞,并形成髓鞘结构,改善受损神经的功能。
3.5 嗅神经鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)
由嗅上皮细胞和嗅球组成,特点是终身分裂再生,表达轴突生长相关分子。OECs具有雪旺细胞和星形胶质细胞的特点,诱导轴突向损伤处生长,形成突触连接和髓鞘包裹,减少瘢痕形成,改善局部微环境,有利于神经轴突的再修复。Kim等[7]临床实验表明移植后2～8周后,患者的运动感觉均有明显改善。
3.6 基因修饰的纤维原细胞(genetically engineered fibroblast cells,GEFCs)
植入后可分泌多种神经营养因子,如BDNF及NT3等,可为轴突提供良好的生长环境。李洪钧等[8]将细胞联合植入损伤部位,发现有神经胶质纤维酸性蛋白表达。Zhao等[9]实验结果表明神经功能明显改善。
4 细胞移植后要解决的因素
4.1 损伤部位的桥接
Richardson等[10]和Cheng等[11]的实验结果发现神经移植后,有轴突再生,并长入宿主灰质。新的突触与肌肉形成的连接是主要目标[12]。
4.2 中和轴突生长抑制因子
这些因子包括硫酸软骨素蛋白多糖、髓磷脂相关性糖蛋白、髓鞘内的Nogo蛋白等。Moon等[13]用软骨素梅ABC可减弱硫酸软骨素蛋白多糖的抑制作用。
4.3 去除胶质瘢痕
胶质瘢痕对神经轴突生长有阻碍作用[14],Roitbak等[15]已在实验中发现。
4.4 免疫反应
免疫反应过强不利于神经的修复[16],Kim等[7]证实TNF调节细胞内Ca2+浓度,减轻金属离子神经毒性作用,减少氧自由基产生。Byrnes等[17]将激光放射与损伤处,可抑制免疫反应,增加再生轴突的数量。
综上所述,神经损伤修复的策略有减少细胞的变性,细胞移植,补充神经生长因子,减少抑制性因子,减少瘢痕和空洞,提供轴突生长的基质。总而言之,细胞移植是神经损伤的重要手段,在动物实验中取得较好的效果,为临床应用提供了基础。
摘要：脊髓损伤的病因有脊髓休克、脊髓挫裂伤、脊髓受压。损伤的治疗主要是手术解除脊髓的压迫,利用内固定恢复脊柱的序列和稳定性,维持椎体的正常形态和椎间隙的高度。而手术对于神经细胞的损伤没有治疗作用。目前细胞移植是治疗脊髓神经损伤的重要手段,移植的细胞可以分化为神经元和神经胶质细胞,并分泌大量的神经生长因子,促进损伤后神经轴突的再生,对脊髓损伤和外周神经损伤治疗的研究有极大的推动作用。
修复再生 篇4
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取笔者所在医院2013年2月-2014年5月收治的68例患者实施牙种植引导骨再生术进行治疗, 并按照所用口腔修复膜的不同将患者分为治疗组和对照组, 每组各34例, 治疗组中男18例, 女16例;患者年龄25~50岁, 平均 (39.58±1.17) 岁;4例为前牙, 22例为磨牙, 8例为前磨牙;对照组中男19例, 女15例;患者年龄25~51岁, 平均 (42.06±1.21) 岁;3例为前牙, 25例为磨牙, 6例为前磨牙。两组实施牙种植引导骨再生术进行治疗患者的基本资料进行对比, 差异无统计学意义 (P>0.05) , 具可比性。
1.2 方法
本次研究选取的68例实施牙种植引导骨再生术进行治疗的患者入院后均采用瑞士ITI非埋植型两段式种植体和由美国欧司海斯公司生产的Bio-Oss小牛骨粉实施牙种植术进行治疗, 操作者依据常规手术方法将种植体置入患者缺损区域里, 依据患者需要植入骨材料, 用生理盐水对骨粉进行浸湿之后将其放置在种植体侧骨缺损区域, 对患者牙缺失创面大小和形态进行观察并选取修复膜。在此基础上, 对照组患者利用肽膜进行引导骨再生治疗, 而治疗组患者采用由瑞士盖氏制药有限公司的天然双层胶原膜Bio-Gide进行引导骨再生, 在放置好的边缘处覆盖2~3 mm, 之后用间断缝合方法关闭创口。术后, 采用常规抗生素对患者进行治疗, 避免其出现感染现象。
1.3 疗效判定标准
依据我国卫生部关于疾病的治疗修复效果评定标准对本次研究选取的68例实施牙种植引导骨再生术进行治疗患者的临床治疗效果进行评定。其中, 成功:患者实施临床治疗后, 其种植体具有良好的稳定性, 且在缺损区域里长出新骨, 同自体骨相结合;失败:患者实施临床治疗后, 没有达到成功标准。临床种植修复成功率=成功患者例数/总选取患者例数×100%[4]。
1.4 观察指标
观察两组患者治疗1周后骨厚度和植骨厚度, 通过游标尺对患者实施手术治疗1周后的骨厚度和植骨厚度进行测量[5]。
1.5 统计学处理
采用SPSS 17.0软件对所得数据进行统计分析, 计数资料以率 (%) 表示, 比较采用X2检验。计量资料以 (±s) 表示, 采用t检验, P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组患者种植修复效果对比
治疗组患者实施临床治疗后, 其种植修复成功率显著高于对照组, 差异有统计学意义 (P<0.05) 。具体见表1。
例 (%)
2.2 两组患者不良反应发生率对比
治疗组患者出现不良反应发生率显著低于对照组, 差异有统计学意义 (P<0.05) 。见表2。
例 (%)
2.3 对比两组患者治疗1周后骨厚度和植骨厚度
治疗组患者实施临床治疗1周后, 其骨厚度为 (2.605±0.531) mm, 植骨厚度为 (2.388±0.457) mm;对照组患者实施临床治疗1周后, 其骨厚度为 (2.315±0.321) mm, 植骨厚度为 (2.127±0.384) mm。对比两组患者治疗1周后骨厚度和植骨厚度, 治疗组患者治疗1周后骨厚度和植骨厚度均显著高于对照组, 差异均有统计学意义 (P<0.05) 。
3 讨论
引导骨再生 (GBR) 技术指的是利用屏障膜的特性, 阻止源自于周围软组织中的成纤维细胞, 确保骨面外成骨细胞有充分的时间进行增殖, 从而实现阻止再生与定向修复的治疗目的[6,7]。在为牙缺损患者行引导骨再生技术治疗时, 其中屏障膜是极为关键的一点, 需具备相应的硬度以确保骨再生有充分的空间环境, 且具有良好的稳定性及固位[8,9]。国内已有研究显示, 屏障膜材料具备的性能对GBR技术的成败有直接影响, 屏障膜对于引导骨再生过程有重要作用[10,11,12]。
Bio-Gide是一种可吸收的、无细胞毒性的双层胶原膜, 属于生物膜, 具有良好的血凝块稳定功能及细胞隔离功能, 其在一定时间内出现降解现象, 该种降解物质对患者产生的影响较小[13,14]。有效促使缺损区植骨细胞的生长, 与此同时, 还可促使新生成骨组织贴合到生物膜上, 促进植骨生长, 加强自体骨和新生骨的结合, 且不会导致宿主发生免疫排除反应, 故而可作为GBR技术中的口腔屏障膜应用, 且可显著提高临床治疗效果和患者对治疗的满意度[15,16]。本次研究在为68例牙缺失患者实施牙种植引导骨再生术进行治疗时, 对照组采用肽膜展开引导骨再生治疗, 而治疗组采用瑞士盖氏制药有限公司的天然双层胶原膜Bio-Gide展开引导骨再生治疗, 研究结果显示, 治疗组患者种植修复成功率94.12%、不良反应发生率5.88%、治疗1周后骨厚度为 (2.605±0.531) mm、植骨厚度为 (2.388±0.457) mm, 对照组患者种植修复成功率73.53%、不良反应发生率29.41%、治疗1周后骨厚度 (2.315±0.321) mm, 植骨厚度 (2.127±0.384) mm。以上数据说明, 治疗组患者种植修复成功率、出现不良反应发生率和治疗1周后骨厚度、植骨厚度与对照组比较差异均有统计学意义 (P<0.05) , 该研究结果同李铁军[12]的研究结果基本一致。
综上所述, 在采用牙种植引导骨再生术对患者进行治疗过程中采用瑞士盖氏制药有限公司的天然双层胶原膜Bio-Gide临床效果显著, 其可显著提高种植手术成功率, 改善患者生活质量。
摘要：目的:对口腔修复膜在牙种植中引导骨再生的临床效果进行研究分析。方法:从笔者所在医院实施牙种植引导骨再生术进行治疗患者中选取68例, 根据患者所用修复膜将其分为对照组 (采用钛膜进行引导骨再生) 和治疗组 (采用由瑞士盖氏制药有限公司的天然双层胶原膜BioGide进行引导骨再生) , 每组各34例, 对比两组患者种植修复效果、不良反应发生情况和治疗1周后骨厚度、植骨厚度。结果:治疗组患者种植修复成功率94.12%、不良反应发生率5.88%、治疗1周后骨厚度为 (2.605±0.531) mm、植骨厚度为 (2.388±0.457) mm, 对照组患者种植修复成功率73.53%、不良反应发生率29.41%、治疗1周后骨厚度 (2.315±0.321) mm, 植骨厚度 (2.127±0.384) mm, 两组种植修复成功率、不良反应发生率、治疗1周后股厚度及植骨厚度比较差异均有统计学意义 (P<0.05) 。结论:在牙种植引导骨再生术中采用瑞士盖氏制药有限公司的天然双层胶原膜BioGide临床效果显著, 值得推广。
修复再生 篇5
2012年4月-2014年4月收治牙齿缺失行种植引导骨再生患者200例(共计200颗牙)，将其随机分为对照组(100例)和观察组(100例)。对照组男62例，女38例；年龄22～54岁，平均(39.5±2.3)岁；牙齿缺损部位：前牙51颗，磨牙38颗，前磨牙11颗。观察组男70例，女30例；年龄23～55岁，平均(41.0±2.6)岁；牙齿缺损部位：前牙55颗，磨牙37颗，前磨牙8颗。排除全身感染和重要器官功能障碍患者，两组患者在性别、年龄等资料上差异无统计学意义(P>0.05)。
治疗方法：首先对所有患者进行X线全景拍照和CT扫描，获得牙槽骨床的断层图像、牙槽骨高度、厚度等资料，评估患者的软组织、硬组织缺损情况。对照组使用不可吸收膜材料进行种植修复，观察组使用可吸收膜材料进行种植修复。具体方法：患者麻醉后，使用牙种植系统在牙槽顶部和唇侧切口，要求切口远离牙齿缺损部位，距离边缘3～5 mm。翻开组织瓣，切口延伸到无牙颌骨远中部位。在牙槽顶部远中末端垂直切口，翻瓣后使用圆钻清除牙槽上的附着软组织，并且使用小球钻在骨皮质上钻孔，促使骨髓成骨细胞进入该区域。然后进行常规的种植体植入操作，根据牙齿缺损的形态和大小，观察组在种植区使用海奥修复膜来引导骨再生，对照组则使用肽膜引导骨再生，要求覆盖种植体边缘2.5 mm，然后对创口进行间断缝合。手术完成后使用抗生素预防感染，术后2周拆线，术后半年再次切开对牙龈进行二期手术，置入牙龈成型基台。
观察项目和指标：(1)观察两组患者的种植修复成功情况，术后种植体周围骨质吸收不明显，缺损部位有新骨生成，而且新生骨和种植骨良好结合即为成功，相反为失败。(2)对比两组患者种植修复后的植骨高度和成骨厚度，其中植骨高度=植骨后牙槽骨厚度-植骨前牙槽骨厚度，成骨厚度=二期手术种植体牙槽骨厚度-植骨前牙槽骨厚度。(3)观察两组患者的并发症发生情况，常见并发症如感染、膜暴露、面部肿胀等。
统计学方法：采用SPSS 18.0软件进行统计学分析，计数资料采用χ2检验；计量资料使用表示，采用t检验；P<0.05说明具有统计学意义。
结果
两组种植修复成功情况比较：观察组的种植修复成功率(95.0%)明显高于对照组(80.0%)，差异具有统计学意义(P<0.05)，见表1。
两组植骨高度和成骨厚度比较：观察组种植修复后植骨高度和成骨厚度明显大于对照组，差异具有统计学意义(P<0.05)，见表2。
两组并发症发生情况比较：观察组并发症发生率(9.0%)明显低于对照组(19.0%)，差异具有统计学意义(P<0.05)，见表3。
讨论
牙种植引导骨再生：伴随着医学技术的发展，牙齿种植的应用越来越成熟。但由于不同患者的骨量存在不足之处，所以在种植过程中会出现很多问题，引导骨再生技术则弥补了传统种植技术的缺陷[1]。引导骨组织再生技术指的是依据组织细胞迁移速度不相同的特点，在骨缺损和软组织之间置入屏障膜，从而创设出有利于骨组织生长的有利环境[2]。所以，膜材料的性能决定了引导骨再生技术的成败，具有重要的作用。
不同口腔修复膜：在李二红等人研究中表明，以肽膜作为引导骨再生的材料，由于肽膜不能够吸收，患者的血液无法进入植骨区的相关组织，因此植骨对血液和营养的吸收被阻挡，影响到患者的恢复[3]。海奥修复膜属于可吸收膜，能够发生降解，而且其产物对患者影响小，能够促使新生骨附着在膜上，实现新生骨和植骨的结合[4]。本次研究显示，采用海奥修复膜对患者进行种植引导骨再生，100颗牙中修复成功95颗，成功率95.0%，高于肽膜组的80.0%。患者植骨高度(2.51±0.38)mm，成骨厚度(2.65±0.52)mm，大于肽膜组的(2.04±0.26)mm、(2.23±0.35)mm。另外在并发症上，感染、膜暴露、面部肿胀发生率9.0%，低于肽膜组的19.0%。
摘要：目的:探讨在牙齿缺失行种植引导骨再生患者中应用不同口腔修复膜材料的临床效果。方法:2012年4月-2014年4月收治牙齿缺失行种植引导骨再生患者200例(共计200颗牙),将其随机分为对照组和观察组。对照组使用不可吸收膜材料(肽膜)进行种植修复,观察组使用可吸收膜材料(海奥修复膜)进行种植修复。观察两组患者的牙齿修复效果,以及并发症发生情况。结果:观察组的种植修复成功率(95.0%)明显高于对照组(80.0%),患者种植修复后植骨高度和成骨厚度明显大于对照组,并发症发生率(9.0%)明显低于对照组(19.0%),具有统计学意义(P<0.05)。结论:在牙齿缺失行种植引导骨再生患者中应用可吸收修复膜进行治疗,能够提高修复成功率,降低并发症的发生,值得临床推广。
关键词：牙齿缺失,种植引导骨再生,口腔修复膜材料,临床效果
参考文献
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[2]王杏松.口腔修复膜材料在牙种植中引导骨再生中的应用分析[J].中国医药指南,2014,4(11):172-173.
[3]李二红.不同修复膜材料对牙种植中引导骨再生的效果对比分析[J].中国当代医药,2014,22(16):53-55.
修复再生 篇6
1 资料与方法
1.1 一般资料
本研究选择2013年5月-2014年3月笔者所在医院收治的98例牙种植的患者, 年龄20~68岁, 平均 (41.3±5.6) 岁。按照随机数字表法均分为两组, 观察组49例患者中, 男25例, 女24例, 年龄22~67岁, 平均 (42.1±4.8) 岁, 磨牙20颗, 前磨牙13颗, 前牙16颗;对照组49例患者中, 男23例, 女26例, 年龄20~68岁, 平均 (40.2±5.3) 岁, 磨牙22颗, 前磨牙11颗, 前牙16颗。排除患有严重心肺肾病、感染及精神方面疾病的患者。两组患者年龄、性别及缺损状态等基本情况比较, 差异均无统计学意义 (P>0.05) , 具有可比性。
1.2 方法
两组患者均按照常规手术方法将种植体植入, 且均采用SLA表面根形柱状种植体 (瑞士士卓曼公司) 和Bio-Oss小牛骨粉 (美国欧司海斯公司) 。将小牛骨粉用生理盐水浸湿后安置在缺损区域, 根据患者的牙骨缺损创面的形状和大小, 对照组采用合适的钛膜引导骨再生, 观察组采用海奥口腔修复膜引导骨再生。两组均在放置好的边缘处覆盖2.0~3.0 mm。
1.3 观察指标
观察两组修复成功率、成骨效果及不良反应。成骨效果以引导骨组织再生的成骨量来表示, 具体体现为最终修复前的牙槽嵴厚度与术前牙槽嵴厚度之差[4]。
1.4 疗效评定标准
疗效评定采用我国原卫生部制定的治疗修复效果评定标准, 修复成功为种植体稳定性良好, 缺损区域有新生骨形成, 并与自体骨结合[3]。
1.5 统计学处理
采用SPSS 19.0软件对所得数据进行统计分析, 计量资料用均数±标准差 (±s) 表示, 比较采用t检验;计数资料以率 (%) 表示, 比较采用X2检验。P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组临床疗效比较
观察组患者中, 修复成功46例, 有效率为93.9%;对照组修复成功40例, 有效率为81.6%。观察组修复成功率高于对照组, 差异有统计学意义 (P<0.05) 。
2.2 两组成骨效果比较
本研究中, 观察组患者经过5个月愈合期后, 其成骨厚度分别均显著高于对照组, 差异均有统计学意义 (P<0.05) , 详见表1。
2.3 两组不良反应情况
观察组不良反应率为2.0%, 对照组不良反应发生率为8.2%, 观察组患者不良反应发生率明显低于对照组患者, 差异有统计学意义 (P<0.05) , 详见表2。
*与对照组相比, P<0.05
3 讨论
引导骨再生技术是指在牙骨槽缺损的地方植入骨材料覆盖上一层高分子的生物膜作为保护屏障, 从而促进骨缺损部位的修复和再生[5]。以往临床上采用钛膜作为修复膜, 因为它空间比较稳定, 理论上成骨效果良好[6]。不过钛网需要第二次手术, 容易产生并发症, 因此成骨效果受到影响, 造成患者接受度较差。海奥口腔修复膜作为可被吸收的双层胶原膜, 其主要特点是降解时间长, 代谢的产物没有细胞毒性, 既能维持空间的稳定性, 又能使血液血浆进入植骨区域, 从而促进植骨生长, 提高修复率[7]。
在本次研究中, 观察组修复成功率高于对照组, 差异有统计学意义 (P<0.05) ;观察组治疗5个月后的骨厚度和植骨厚度均厚于对照组, 差异均有统计学意义 (P<0.05) ;观察组治疗后不良反应率为2.0%, 低于对照组的8.2%, 差异有统计学意义 (P<0.05) 。本研究结果显示, 无论成功率、成骨情况, 还是不良反应, 采用海奥口腔修复膜均优于一般的钛膜, 可见海奥口腔修复膜的优势所在。当然, 海奥口腔修复膜存在机械强度差、维持空间的能力不足的缺点, 临床上采用双层膜覆盖技术来弥补这个缺点[8]。
综上所述, 采用海奥口腔修复膜行牙种植引导骨再生的临床应用效果良好, 修复成功率较高, 有效促进骨和植骨的发育成长, 临床上值得大力推广应用。
参考文献
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修复再生 篇7
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2005年5月至2013年3月在本诊所行牙种植再生的患者151例, 所有入选患者皆无严重的心、肝、肾及全身感染疾病。所有患者皆有1颗牙缺失需要行种植修复。所有患者中男86例, 女65例, 年龄19~73岁, 平均 (37.25±13.14) 岁;所有患者随机分为实验组75例, 对照组76例;均经伦理委员会批准, 且患者知情同意。实验组中, 男46例, 女29例, 年龄19~70岁, 平均 (36.89±12.31) 岁, 包括21颗前牙, 19前磨牙, 35颗磨牙;对照组中, 男46例, 女30例, 年龄20~73岁, 平均 (38.12±11.29) 岁, 其中前牙区17颗, 前磨牙22颗, 磨牙37颗。两组患者年龄、性别、牙缺损位置等一般资料比较, 差异无统计学意义 (P>0.05) , 具有可比性。
1.2 实验材料和仪器
种植体 (美国3I公司) ;Bio-Oss骨粉 (美国欧司海斯公司) ;实验组采用烟台正海生物技术有限公司生产的海奥®口腔修复膜 (国食药监械 (准) 字2011第3460301) ;对照组采用西安中邦生物材料有限公司生产的钛膜;10分度游标卡尺购自德国USTOMED公司) 。
1.3 方法
实验组和对照组患者均依照常规手术的步骤, 将种植体和生理盐水浸湿后的Bio-Oss骨粉放在种植体侧的骨缺损区。观察组:根据不同患者牙骨缺损创面的形状、大小等, 剪取合适大小的海奥口腔修复膜, 放置在植骨区域, 引导缺损骨的再生。对照组:根据不同患者牙骨缺损创面的形状、大小等, 剪取合适大小钛膜放置在植骨区域。两组均在放置好的边缘处覆盖2.0~3.0 mm, 最后间断缝合, 关闭创口。
1.4 观察指标
观察两组患者的修复成功例数 (临床上种植体稳定性良好, 缺损区域出现新生骨, 已经与自体骨结合为成功) 及修复成功率;观察两组患者1周骨厚度、植骨厚度 (采用10分度游标卡尺进行测量) , 并比较两组的不良反应。
1.5 统计学处理
应用SPSS13.0统计软件, 对计量资料采用均数±标准差, 采用t检验, 对计数资料采用χ2检验, 检验水准α=0.05。
2 结果
2.1 两组患者修复效果比较
实验组修复成功率为94.66%;对照组成功率为85.53%。两组比较差异非常显著 (P<0.05) 。见表1。
2.2 两组患者1周骨厚度、植骨厚度的比较
两组患者1周骨厚度、植骨厚度的比较, 实验组患者明显高于对照组, 差异有统计学意义 (P<0.05) 。见表2。
2.3 不良反应比较
实验组患者中面部肿胀1例, 伤口开裂1例, 不良反应发生率为2.67%;对照组出现面部肿胀3例, 伤口开裂4例, 实验组患者不良反应发生率 (2.67%) 与对照组 (9.21%) 比较, 差异有统计学意义 (P<0.05) 。
3 讨论
引导骨组织再生 (Guided Bone Regeneration, GBR) 技术是根据各类组织细胞迁移速度不同的特点, 将屏障膜置于软组织和骨缺损之间建立生物屏障, 从而制造出适合骨组织生长的有利环境。因此, 屏障膜材料的性能是决定GBR技术成功的关键因素, 屏障膜在引导骨再生中过程中起着重要的作用[4,5]。
海奥口腔修复膜是一种降解的时间较长、无细胞毒性、可吸收的双层胶原膜, 具有良好的细胞隔离功能和血凝块稳定功能, 临床上主要用来修复口腔黏膜及软组织缺损, 近年来应用范围扩大, 越来越多的用于修复缺损的口腔黏膜[6]。海奥口腔修复膜使新生骨组织贴合到生物膜上, 促进植骨的生长, 无诱发宿主免疫排斥反应的细胞成分, 因此其作为口腔屏蔽膜应用于GBR技术中[7,8]。
本研究结果显示, 实验组修复成功率为94.66%;对照组成功率为85.53%。两组比较, 观察组种植修复成功率明显高于对照组, 差异有统计学意义 (P<0.05) 。两组患者1周骨厚度、植骨厚度的比较, 实验组患者明显高于对照组, 差异有统计学意义 (P<0.05) 。实验组患者不良反应发生率为2.67%;实验组患者不良反应发生率 (2.67%) 与对照组 (9.21%) 比较, 差异有统计学意义 (P<0.05) 。说明海奥口腔修复膜应用于牙种植引导骨再生术中, 疗效显著。
综上所述, 海奥口腔修复膜行牙种植引导骨再生在临床上应用效果较好, 膜引导组织再生术在即刻种植中运用的研究已经取得了较大的成功, 并具有很好的运用前景, 值得临床进一步推广应用。
参考文献
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[3]孟维艳, 周延民, 储顺礼, 等.种植体周不同骨量缺损修复的组织学研[J].现代口腔医学杂志, 2009, 23 (2) :124-127.
[4]杨治洁, 张摇磊, 刘堃援, 等.生物胶原膜与钛膜在引导骨组织再生技术中的应用比较[J].安徽医药, 2011, 15 (6) :713-714.
[5]李铁军.口腔修复膜材料在牙种植中引导骨再生的效应[J].河北医学, 2012, 18 (9) :1223-1226.
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[7]郭伟军.不同材料矫正器在口腔牙齿矫正中的应用研究[J].当代医学, 2012, 18 (12) :46.
修复再生 篇8
1 材料与方法
1.1 材料
硫代甜菜碱10(SB-10),硫代甜菜碱16(SB-16),Triton X-200(均购自Sigma aldrich公司),过氧乙酸(Adamas-Beta),α-MEM(Gibco)、南美血清(Gibco),一抗:层粘连蛋白(LN)抗体(Rabbit anti-Laminin Sigma aldrich L9393;1∶800),纤维粘连蛋白(FN)抗体(Rabbit anti-Fibronectin Abcam ab23751;1∶500),神经丝蛋白-200(NF-200)抗体(Rabbit anti-neurofilament 200 Sigma aldrich N4142;1∶2000),anti-Rat CD3 PE(e Bioscience17-0030;1∶100),anti-Mou CD4 APC(invitrogen MR5105;1∶200),anti-Rat CD8a FITC(e Bioscience11-0084;1∶50),Alex flour 488 anti-rabbit(Jackson711-545-152;1:1000),Alex flour 594 anti-rabbit(Jackson 111-585-003;1∶1500),Real Envision二抗检测试剂盒(上海基因公司);摇床(江苏金坛),离心机(上海飞鸽),光学显微镜(Nikon-eclipse80i,日本),透射电镜(FEI TECNAI SPIRIT G2香港),扫描电镜(FEI QUANTA 200,香港),冰冻切片机(Leica M750),解剖显微镜(Leica),超薄切片机(Leica)。
1.2 实验动物及分组
本研究所涉及新西兰成年兔及SD大鼠均由中山大学实验动物中心提供[(使用许可证编号:SYXK(粤)2012-0083)],并由中山大学附属第三医院伦理委员会批准。健康新西兰成年兔3只,雌雄不限,体质量3~3.5 kg,用于获取制备脱细胞支架的原材料;健康成年SD大鼠30只,雌雄不限,体量250~280 g,利用完全随机分组法将动物分为实验组和对照组,每组15只。手术过程于中山大学附属第三医院神经外科颅底实验室完成。
1.3 方法
1.3.1 兔源性脱细胞神经支架的制备方案和检测方法
分离兔两侧胫神经,手术显微镜下剥离表面的脂肪组织和血管,游离神经组织。按照下列步骤制备神经支架:(1)去离子水中浸泡6 h,期间换液3次;(2)将神经浸入125 mmol/L SB-10中,室温震荡12 h(90 r/min),去离子水漂洗3 h(0.5 h换液1次);(3)0.14%Triton X 200和0.16 mmol/L SB-16混合溶液中室温振荡24 h,去离子水漂洗3 h(0.5 h换液1次);(4)重复1~3步骤;(5)经上述处理过的神经于体积分数0.1%的过氧乙酸消毒6 h,无菌蒸馏水充分漂洗后,置于无菌PBS中4℃冰箱内保存备用。
1.3.2 支架形态学检测
HE染色检测脱细胞效果;LN(1∶800)、FN(1∶500)免疫组化染色证实支架的成分和结构;甲苯胺蓝染色及透射电镜检测髓鞘去除程度;扫描支架观察支架内部结构;NF-200免疫染色显示轴突去除情况。
1.3.3 外周血淋巴细胞亚群分析
术前及术后1、4、12周,两组大鼠通过尾静脉分别收集外周血500μL于抗凝管中。按照以下步骤进行流式检测:(1)新鲜抗凝血,按1∶10的比例向抗凝管中加入红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,1100 r/min离心4 min后弃上清。继以Buffer溶液重悬。(2)按合适浓度加入抗体(CD3-PE;1∶50、CD4-APC;1∶200、CD8-FITC;1∶50),避光孵育30 min。(3)每样品管加入1.5~2 m L Buffer溶液,1100 r/min离心4 min后弃去上清。(4)每样品管加入300μL Buffer溶液重悬,上机检测(BD FACS Calibur流式细胞仪)。
1.3.4 造模方法
大鼠麻醉后(戊巴比妥钠;腹腔注射),暴露右侧坐骨神经,造成10 mm长的神经缺损。(1)实验组:在解剖显微镜下(25倍视野),利用8-0尼龙线将支架与宿主的神经外膜缝合。(2)对照组:相同解剖位置切取10 mm长的坐骨神经后,将其翻转后再吻合于原处,术后青霉素肌肉注射于手术切口周围,预防感染。所有动物均在标准条件下饲养。
1.4 术后神经再生评价
术后1、2、4、12周对各组动物进行坐骨神经功能指数(Sciatic nerve function index,SFI)评价:设计长约1 m暗箱通道,铺以记录纸张,予大鼠双侧后脚涂墨水,驱赶其穿过通道,行走后,记录纸上留有足印。每次取5~6对足印进行以下测量:足印长度(PLF)、足距宽度(TSF)、中间足趾宽度(ITF);SFI=-38.3PLF+109.5 TSF+13.3 ITF-8.8。SFI为0代表功能正常,-100代表功能完全丧失。12周后将移植物取出后行以下处理:40 g/L多聚甲醛溶液固定、脱水、包埋、切片(5μm),NF-200(1∶2000)免疫组化观察轴突生长情况;2.5 m L/L戊二醛前固定,10 m L/L锇酸后固定,下行脱水后环氧树脂包埋、聚合、半薄切片行甲苯胺蓝染或经醋酸铀-柠檬酸铅双染后行透射电镜检测,Imagine-pro plus 6.0软件分析再髓鞘化神经纤维的数量,髓鞘的厚度,轴突的直径大小。
1.5 统计学处理
采用SPSS 19.0统计学软件进行数据分析,计量资料以(±s)表示,比较行重复测量资料的方差分析,以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 手术伤口观察
所有动物一般状况良好,手术侧肢体均有不同程度的趾甲萎缩,脚垫出现溃疡在实验组有2只,对照组有1只。术后12周,重新暴露手术区,移植物与周围组织均有轻度粘连,两组动物均未发现有移植物皱缩或崩解。
2.2 支架形态学检测
HE染色显示细胞核完全去除(图1A);甲苯胺蓝染色及透射电镜显示致密的髓鞘结构完全去除(图1B、D);超微结构有轻微的变形,基底膜保留较为完整(箭头所示);扫描电镜显示支架内部为多孔状立体通道结构(图1C);荧光免疫证实支架成分富含纤维粘连蛋白(图1E)及层粘连蛋白(图1F);与正常神经(图1G)相比,支架内部轴突神经丝蛋白(图1H)已经完全去除。
2.3 外周淋巴细胞亚群分析结果
淋巴细胞亚群分析结果显示,与术前相比,术后第1周,两组大鼠外周血内CD3+、CD4+淋巴细胞及CD4+/CD8+均有不同程度升高,差异均无统计学意义(P>0.05);术后第4周CD3+、CD4+淋巴细胞及CD4+/CD8+较之前有所下降;术后第12周,两组大鼠上述变量基本降至术前水平,比较差异均无统计学意义(P>0.05)。术后1、4、12周时间点,两组间大鼠外周血CD3、CD4+、CD8+淋巴细胞含量比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。见表1~4。
2.4 功能评价
12周恢复期内,两组大鼠均有不同程度的功能恢复。术后第1周,各组SFI值均在-98左右,2周后两组均有不同程度升高;4周及12周后,实验组SFI分别为(-90.6±2.8)、(-82.6±1.4),对照组分别为(-87.7±3.5)、(-77.8±1.5),两组4周及12周SFI值比较差异均无统计学意义(P>0.05)。见图2。
*与对照组比较,P>0.05
2.5 轴突及髓鞘再生评价
术后12周,重新暴露手术区,移植物与周围组织均有轻度粘连(图3A);实验组移植物内有NF-200阳性轴突通过(图3B),轴突呈现极性排列,与支架纵行丝状结构伴行,与远端神经内轴突形成联系,但离远端缝线1.5 cm处远处,轴突数量变少,直径变细(图3C)。甲苯胺蓝染色及TEM评价(图4):实验组移植物内再生轴突数量(图4C、D、E)每一个高倍镜视野(1000倍)下为(80±7)个,但与对照组(80±5)个(图4A、B、E)比较差异均无统计学意义(P>0.05);移植物内再生髓鞘厚度方面(图4F),实验组为(0.53±0.12)μm,与对照组(0.52±0.08)μm比较,差异无统计学意义(P>0.05)。
注:A为损伤近端,B为移植物,C为损伤远端
3 讨论
近年来,组织工程技术在神经修复领域的应用越来越广泛,脱细胞神经支架的研究也逐步走向临床阶段,虽然其促进神经修复的效果受到诸多学者的认可,但是来源匮乏直接影响其日后在临床上的应用。同种异体神经支架一般来源于截肢的肢体或者尸体,和自体移植相比有诸多优势,但是由于某些社会习俗和宗教因素的影响,原材料的获取受到很大限制,因此需要寻找一种更加方便、有效的神经替代物。
去细胞支架来源于天然外周神经组织,经过处理,去除大部分抗原成分比如细胞和髓鞘成分,而保留完整的细胞外基质结构(ECM),研究表明ECM能够为增殖的雪旺氏细胞(SC)提供黏附和导向支持,这对后续形成bunger带至关重要,同时也为轴突再生铺平道路;另一方面研究认为ECM富含很多蛋白,像胶原蛋白(CollagenⅠ及Ⅳ型),纤维粘连蛋白(Fibronectin,FN),层粘连蛋白(Laminin,LN)等。这些成分通过影响轴突的再生速度和方向来左右神经再生的效果。通过处理及后期检测,笔者制备的去细胞神经支架细胞及髓鞘成分完全去除,基底膜结构保存完整,富含LN、FN成分。
对异种移植物的应用最大的忧虑就是其生物安全性。理论上来说,利用萃取方法可以完全去除抗原成分,但实际上操作起来异常困难。有实验表明通过常见的萃取技术制备的去细胞支架依然可以检测到300 bp残余的DNA,但此残余量理论上不足以导致严重的排斥反应,有学者发现,实际DNA残余量远低于上述水平。另外有观点认为在哺乳动物各物种间,ECM氨基酸的组成顺序具有高度一致性,这也是异种ECM不会引发排斥反应的重要原因之一;ECM成分所诱导的宿主淋巴细胞反应通过Th1和Th2这两种途径,前者和促炎因子有关,介导组织免疫排斥;后者抑制炎症的产生,介导免疫耐受。有实验证明异种细胞外基质成分所涉及到的反应仅限于Th2途径。这些理论是异种脱细胞支架体内应用的强有力支持。在未给予免疫抑制剂的情况下,本实验中所有动物均没有发现全身性免疫排斥反应。虽然移植术后1周时,实验组动物外周血CD4/CD8比例有所提高,但考虑为手术切口局部炎症反应造成。动态分析在第4周和12周,该比例逐渐下降至术前水平。这些变化同时发生在对照组中,两组结果比较差异并无统计学意义(P>0.05),这证实兔源性异种神经支架移植到体内并未干扰大鼠机体的免疫系统。
目前外周神经支架有多种商业化产品,大部分为人工合成材料(PLGA,壳聚糖等)构成。因缺乏生物活性,修复效果欠佳;形状及尺寸较单一,很难保证个体化匹配[18],临床应用价值还有待提高。脱细胞神经支架可能能够解决上述顾虑,但该类支架临床应用较少,纵然近年来很多数据证实其临床应用的价值[19,20],但原材料的来源依然是个不容忽视的问题,因此异种脱细胞神经支架的价值就显得更为突出。在本实验中,笔者使用兔来源的神经支架修复大鼠坐骨神经缺损,取得较为理想的效果,这证实异种支架具有良好生物安全性及作用有效性。极有可能将来广泛应用到临床。虽然其他物种间未测试,但是本研究结果为异种脱细胞材料的临床应用提供实验参考。
