关键词： 病毒
乙型肝炎病毒核心抗原（精选九篇）
乙型肝炎病毒核心抗原 篇1
1 材料与方法
1.1对象与分组
(1) 2011年1月至2013年12月我院临床诊断明确为HCV感染者218例, 设为HCV感染组:其中男137例, 女81例;年龄17~81岁, 平均43岁;部分患者使用干扰素进行过抗病毒治疗。 (2) 同期在我院体检的健康者100例, 均排除HCV感染, 设对照组:其中男62例, 女38例;年龄21~77岁, 平均41岁。 (3) 同期在我院门诊就诊的HCV感染高危者315例, HCV-Ab阴性但丙氨酸氨基转移酶 (ALT) >70U/L, 设为HCV高危组:其中男191例, 女124例;年龄18~80岁, 平均45岁。HCV感染者与健康体检者均检测HCV-c Ag、HCV-Ab、HCV-RNA三项, HCV感染高危者检测HCV-cA g。
1.2标本采集及检测
所有受试者空腹采静脉血5ml, 注入真空采血管, 1小时内使用高速冷冻离机分离血清, 并保存至两个已标记的2ml离心管。HCV-c Ag、HCV-Ab检测采用ELISA法, 使用安图iwo-960洗板机和安图P H O MO酶标仪。H C V-c A g检测试剂由湖南康润药业有限公司提供。HCV-Ab检测试剂由北京万泰生物药业股份有限公司提供。HCV-RNA采用实时荧光定量PCR法, 使用美国ABI 7300实时荧光定量PCR扩增仪及其分析系统进行定量分析。试剂和校准品由中山大学达安基因股份有限公司提供。具体操作严格按照仪器和试剂说明书进行。HCV-RNA:≥1.0×103U/m l为阳性, <1.0×1 03U/m l为阴性。
2 结果 (表1)
三项指标均阳性占27.1%;两项指标阳性占48.2% (105/21 8) , 其中均有H CV-Ab阳性;一项指标阳性占3.7% (8/218) 。HCV感染组HCV-Ab检出阳性210例 (96.3%) , HCV-c Ag检出阳性131例 (60.1%) , HC V-RN A检出阳性103例 (47.2%) 。HCV高危组中检出HCV-CAg阳性2例 (0.6%) 。对照组3项检测结果均为阴性。
3 讨论
丙肝起病隐匿, 八成患者早期无症状或仅有乏力的感觉, 不易引起临床医师和患者重视。HCV引起的肝炎80%发展为慢性肝炎, 其中约25%发展为肝硬化、肝癌, 对人类健康危害极大。HCV是多变异病毒, 在同型各株间, 甚至同一患者不同时期分离的克隆株之间亦有差异, 基因序列的差异, 导致编码产物抗原型的不同[2]。由于丙肝病毒的高度变异性, 目前还没有预防丙肝的疫苗, 但在其治疗上, 通过干扰尤其是聚乙二醇干扰素和利巴韦林联合治疗, 大部分患者可以达到治愈目的。
目前对于HCV感染的临床诊断仍以ELISA法检测HCV-Ab为主, 采用的第三代检测抗-HCV抗体试剂中增加了HCV基因组NS5区表达的蛋白作为抗原, 进一步提高了试剂的敏感性[3]。但由于厂家之间使用HCV基因重组抗原质量及各抗原片段包被比例不同, 各厂家试剂间的灵敏度和特异性存在一定差异, 从而导致抗-HCV抗体检测结果不一致[4]。由于HCV感染后到抗体的形成需要1~15个月, 存在窗口期 (平均70天) , 所以HCV-Ab阴性并不能排除携带HCV病毒并具有传染性的可能, 而且尚有1%~3%的患者HCV-Ab可持续阴性, 容易造成漏检[5]。
H CV-R NA定量检测灵敏度高, 人在感染H C V后1~2周, 血清中即可检测到, 可反映病毒的复制情况与传染性, 用于抗病毒治疗的选择和疗效监测, 是诊断HCV的“金标准”。HCV-DNA检测具有早期、敏感和特异等优点, 但HCV-RNA检测影响因素较多, RNA容易降解, 易出现假阴性, 抽血后必须尽快分离低温冷冻保存, 所有器材必须高压灭菌, 不适合临床样本常规筛查。
H C V-c A g E LI S A检测试剂作为H C V-A b的补充试验, 对处于HCV感染血清转化期的个体检测有很大价值, HCV-c Ag检测可将HCV检测的窗口期缩短至15天[6]。它也是HCV感染者体内出现的早期感染标志, 几乎与HCV-RNA同时出现, 在临床上可用于HCV感染血清转化前的早期急性丙肝诊断、HCV-Ab阳性者的病毒感染情况分析、HCV感染者治疗前后分析及疗效观察等。
本文中HCV感染组HCV-Ab的阳性检出率显著高于HCV-RNA与HCV-c Ag, 其原因是部分患者使用了干扰素 (IFN) 抗病毒治疗, 干扰和抑制了HCV-RNA的复制, 受感染的肝细胞释放到外周血循环病毒载体量减少, 而抗病毒治疗不影响HCV-Ab的存在。
HCV感染者中根据HCV-RNA、HCV-Ab、HCV-c Ag结果的不同, 总共有六种结果模式, 不同的结果模式表示不同的临床意义: (1) HCV-RNA阴性, HCV-Ab、HCV-c Ag阳性, 表示丙肝病毒感染早期, 而丙肝抗原没有被抗体完全结合, 抗原抗体同时阳性, HCV-RNA<1×1 03U/m l或R N A样本降解, 有传染性; (2) H C V-RNA、HCV-c Ag阴性, HCV-Ab阳性, 表示丙肝病毒感染后病毒已清除 (自愈或治愈) ; (3) 3项指标均阳性, 表示慢性丙肝病毒感染, 有传染性; (4) HCV-RNA、HCV-Ab阴性, HCV-c Ag阳性, 表示早期丙肝病毒感染, HCV-R N A<1×1 03U/m l或R N A样本降解, 有传染性; (5) HCV-RNA、HCV-Ab阳性, HCV-c Ag阴性, 表示丙肝病毒感染至少70天以后, 慢性丙肝病毒感染, 有传染性; (6) HCV-RNA阳性, HCV-Ab、HCV-c Ag阴性, 表示血液中HCV抗原滴度未达到试剂检测灵敏度, 但H C V-R N A阳性表示有病毒感染, 有传染性。
HCV高危者检出HCV-c Ag阳性2例, 表明仅检测HC V-Ab存在漏诊的风险, 尤其是对手术前丙肝病毒筛查的病例。它涉及术中感染责任和用血安全等问题, HCV-c Ag检测在一定程度上降低了这些风险。
H C V-c A g、H C V-A b、H C V-R N A三项联合检测已成为HCV感染的主要指标, 可提高HCV感染“窗口期”的检出率, 有助于实现丙肝的早期防治。对3项指标的出现与消退规律及其与临床病理演变关系进行追踪观察分析, 可为HCV感染情况评估、治疗方案选择和预后判断等提供直接依据。
摘要：目的 探讨丙型肝炎病毒核心抗原 (HCV-cAg) 、丙型肝炎病毒抗体 (HCV-Ab) 、丙型肝炎病毒RNA (HCV-RNA) 检测对丙型肝炎 (丙肝) 的诊断价值。方法 对218例HCV感染者、100例健康体检者进行HCV-cAg、HCV-Ab、HCV-RNA检测, 对3 1 5例丙氨酸氨基转移酶增高但HCV-Ab检测阴性的高危者进行HCV-cAg检测。HCV-RNA检测采用实时荧光定量PCR法, HCV-CAg和HCV-Ab检测采用ELISA法。结果 HCV感染组HCV-Ab检出阳性210例 (96.3%) , HCV-cAg检出阳性131例 (60.1%) , HCV-RNA检出阳性103例 (47.2%) 。HCV高危组中检出HCV-CAg阳性2例 (0.6%) 。对照组3项检测结果均为阴性。结论 HCV-cAg、HCV-Ab、HCV-RNA三项联合检测已成为HCV感染的主要指标, 可提高HCV感染“窗口期”的检出率。
关键词：丙型肝炎病毒,丙肝病毒核心抗原,丙肝病毒抗体,丙肝病毒RNA
参考文献
[1]中华医学会肝病学分会, 中华医学会传染病与寄生虫病学分会.丙型肝炎防治指南[J].中华肝脏病杂志, 2004, 12 (4) :194.
[2]许方, 李晓兰, 祝琳.丙肝病毒核心抗原检测对于丙型肝炎诊断的价值[J].中国实验诊断学, 2010, 14 (5) :713.
[3]谢立, 吴晓东.丙型肝炎病毒检测方法的研究进展及其临床意义[J].世界华人消化杂志, 2005, 13 (1) :884.
[4]高艳, 陈志强, 麦永平, 等.3组国产ELISA抗-HCV初复检试剂的检测效果评价[J].国际检验医学杂志, 2010, 31 (7) :743.
[5]温涛, 程四国, 刘玉振, 等.丙型肝炎病毒RNA与血清标志物的检测[J].细胞与分子免疫学杂志, 2003, 19 (4) :375.
乙型肝炎病毒核心抗原 篇2
1.目的
规范乙型肝炎病毒核心抗体检测试验，确保检测结果准确性和重复性。可用于临床辅助诊断是否感染乙型肝炎病毒。2.原理
应用ELISA法原理检测人血清或血浆中的乙型肝炎病毒前S1抗原，用乙型肝炎病毒表面抗体（抗-HBs）包被微孔，配以辣根过氧化物酶标记的乙型肝炎病毒前S1（PreS1）多克隆抗体，加入TMB显色液后显色，用来检测血清中的乙型肝炎病毒前S1抗原。3.标本：采集见采样手册。
3.1标本要求：用无抗凝剂管抽取静脉血2～3ml，1小时内送检，2小时内离心(2500～3000r/m)10分钟分离出血清。
3.2标本储存：一般标本应在2小时内完成检验，室温放置下不超过8小时，不能立即检测的标本应离心后4～8℃保存不超过48小时。超过48小时的标本应分离出血清于2～8℃的待检样本冰箱保存，一周内检测完毕。已完成检测的标本储存在废弃样本冰箱保存1周，以备复查。3.3 拒收的标本包括
标本量过少；放置时间过久；申请单与标本上信息不一致；检验项目与标本类型不符；输液时在同侧血管抽血；标本溶血或严重脂血；标本污染；空的试管等。4.试剂
4.1试剂名称：乙型肝炎病毒前S1抗原检测试剂盒（酶联免疫法）。4.2 生产厂家：上海复星长征医学科学有限公司。4.3 试剂组成：
包被板(96T)；酶结合物1瓶；TMB显色剂A、B各1瓶；浓缩洗涤液1瓶(1：20稀释)；终止液1瓶；阴性对照；阳性对照；子母袋；板贴。
4.4 试剂储存条件及有效期：储存温度为2～8℃，有效期为12个月，稳定期开封后的使用期限为7天（剩余包被条装入密封袋中保存）。4.5性能参数
4.5.1灵敏度：用灵敏度企业参照品（L1、L2、L3）进行检测，结果应为阳性。4.5.2 精密性：用精密性企业参考品进行检测，CV（%）<15%（n=0）。4.5.3其它因素的影响：
4.5.3.1 常见的干扰因素如溶血（血红素含量不高于500mg/L）、高血脂（甘油三酯含量不高于5.6mmol/L）、黄疸（胆红素含量不高于340ug/L）、类风湿因子和ALT升高均不会造成假阳性。
4.5.3.2 检测血清与三种常见的抗凝剂抗凝血浆标本，结果无差异。4.5.3.3 本试剂与HAV-IgM、HEV、HCV和HIV抗体阳性样品均无交叉反应。5.仪器设备: Anthos 2010酶标分析仪。6.操作步骤
6.1 取出试剂盒及待测样品，将所有试剂及样品恢复至室温（18-25℃）。将恒温箱调至反应温度。
6.2 编号与加样：第1孔加阳性对照50μl，第2孔加阴性对照50μl，第3孔加低值质控50μl和第4孔加高值质控50μl，第5孔开始分别按序将样本50μl加入对应微孔。（注：用双波长检测，可不设空白对照孔；）
6.3 每孔加酶标结合物各50μl,振荡30s，使孔内液体混匀，用板贴封盖反应板,置 37℃温育 60 分钟。
6.4洗涤:小心揭掉封板膜，用洗板机洗涤6次,扣干。
6.5 显色:每孔加入TMB显色剂A、B各50μl,轻轻振荡混匀,置 37℃避光显色 10～15分钟。
6.6 加终止液:每孔加终止液 50μl，轻轻振荡混匀。
6.7 测定：用酶标仪双波长450nm/（620nm～630nm）测定各孔OD值。7.结果的分析与判断
7.1 CUT OFF值=阴性对照孔OD值×2.5。（阴性对照孔OD值低于0.05者按0.05计算；高于0.05，按实际值计算。）
7.2 待测样品OD值＜CUT OFF值时，判为阴性。7.3 待测样品OD值≥CUT OFF值时，判为阳性。8.质量控制：
8.1 质控物来源: 上海复星长征医学科学有限公司。8.2 贮存条件和稳定期：2～8℃贮存，效期12个月。8.3 室内质量控制和外部质量评价程序：见程序性文件。9.生物参考区间：阴性。10.可报告区间：阴性～阳性。11.报告时间：
11.1平诊：门诊报告发放时限是当日下午6：00统一发放报告。病区报告发放时限是当日下午6：00由护士发放到各科室。11.2急诊：一般不报告急诊。12.注意事项
12.1 勿使用过期试剂，不同品名、不同批号的试剂不可混用，从冰箱中取出使用前必须回复至室温。
12.2取出当天所需微孔条后，其余微孔条用封口膜封存，以避免受潮。12.2加样至孔底，勿加在孔壁上，勿产生气泡；加试剂前应使液体混匀。如果滴加，滴加前应弃去1—2滴。垂直滴加。勿滴在孔壁上。12.3温育时间一定要够。
12.4洗板要充分；防溢出，防污染。
12.5拍板时应注意微孔掉落及多余液体洒溅。13．操作中可能的风险与安全措施（见第一节）14.临床意义
14.1反映HBV感染与复制状况的标准。PreS1-Ag出现较早并与HBeAg，HBV-DNA显著相关，可作为急性乙型肝炎早期感染的标志，也是反应HBV复制的指标 14.2 预后及药物疗效的判断。急性乙型肝炎患者PreS1一Ag阴转越早，预后越好，是病毒清除的最早迹象；如果PreS1一Ag持续阳性，提示将发展至慢性肝炎，且在机体免疫反应参与下，可出现肝细胞损害，其中一部分可演变为肝硬化和肝癌。
14.3早期诊断病毒感染。PreS1-Ag出现在急性乙型肝炎最早期，在转氨酶升高之前即可查出，提示可作为早期诊断乙型肝炎病毒感染。在体检和献血员中加查PreS1一Ag，对早诊断和尽早切断传染源有十分重要作用。因此前S1抗原联合乙肝五项检测，可提高乙肝病毒检出率、减少漏诊率。15.当检测系统（仪器）不能工作时，所采取的补救措施：
15.1一般使用anthos2010酶标仪，如出现故障可以用MK3酶标仪进行代替检测。15.2如仪器都出现故障，可以比对阴阳对照，肉眼判读；无法准确判读者，应留样待系统正常后复查。16.参考文献
乙型肝炎病毒核心抗原 篇3
doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2012.09.242
传统乙肝血清标志物是目前我国用于乙肝检测与筛查的普及指标，但其在检测病毒复制等方面尚有不足。文章分析前S1抗原(PreS1)和乙型肝炎病毒(HBV)血清标志物之间的关系，探讨乙型肝炎病毒前S1蛋白在临床上的应用价值。关于PreS1、抗PreS1与HBV免疫标志物的相关性。采用ELISA对306例HBsAg阳性标本进行PreS1、抗PreS1与HBV血清标志物相关性的研究证实，前S1抗原(Pre-S1Ag)检测是对乙肝“两对半”，尤其是e抗原和HBV-DNA测定的重要补充和加强。前S1蛋白与HBV-DNA的一致性较好，在反映乙型肝炎病毒复制情况方面比很敏感，可作为临床上乙型肝炎病毒感染的诊断的一项理想的检测指标。
资料与方法
标本：临床收集HBsAg阳性标本306份。
试剂：HBV血清标志物检测试剂由上海科华生物技术有限公司生产(批号201105022)，前S试剂由上海复星长征医学科学有限公司生产(批号2011062111)。
方法：严格按试剂盒说明书进行操作。
结果
HBeAg阳性共146例，其中前S1阳性127例，阳性率为87.0%；HBeAg阴性共160例，其中前S1阳性72例，阳性率为45%；HBeAg阴性血清160例，前S大多数存在于抗HBe阳性血清中，阳性率为40.6%。见表1。
前S1阳性127例，HBeAg(-)其中前S1阳性72例，阳性率为45%，HBeAg阴性血清160例前S大多数存在于抗HBe阳性血清中，阳性率为40.6%。见表2。
讨论
乙肝病毒前S抗原是乙肝表面抗原的组成成分。有研究报道，PreS1蛋白作为HBV的外壳蛋白成分，在HBV感染宿主的过程中起着关键作用。一方面，PreS1蛋白21～47段可与肝细胞膜上的相应受体直接结合；另一方面，PreS1蛋白21～47段可与宿主细胞膜上的IL-6含有的识别位点结合，均可介导HBV侵入宿主细胞。HBV PreS1抗原检测是对HBV标志有益的必要的补充，对乙型肝炎病况的判别有重要参考意义。
HBeAg是HBV核心内部成分，是临床上判断病毒在宿主体内复制并具有传染性的重要血清学指标，其出现常提示HBV复制活跃和传染性强。但目前HBeAg阴性的乙型肝炎患者逐年增多，其中一部分患者仍存在病毒复制，如何识别这些HBeAg阴性的患者有无病毒复制，PreS1抗原作为一种新的血清学指标，体现出其独特的优势。
临床306例HBsAg阳性病例，以两对半指标的不同组合模式，分析与PreS1间的关系，证明PreS1与HBeAg具有一致性。146例HBeAg阳性率为88.1%，说明前S1在HBV感染的早期就可检出。因此，前S1阳性是有助于乙型肝炎的诊断并可作为HBV复制的指标。多数研究报道急性HBV感染时抗PreS1是最早出现的免疫反应，本组数据研究与多数报道一致在急性肝炎早期多数患者血清中就出现了抗PreS1，因此，它的前S1和HBeAg指标一样，也是乙肝感染的早期指标，且与阴转时间呈正相关。这样，前S1抗原可作为病毒清除与病毒转阴的指标。前S1抗原阳性的乙肝患者传播乙型肝炎病毒比前S1抗原阴性和无症状HBsAg携带者的危险性更大，因而说明前S1抗原可反映乙型肝炎病毒复制的传染性的指标，如果前S1抗原持续阳性，指示HBV向慢性转变，比较急性乙型肝炎，慢性乙型肝炎和HBsAg阳性的患者血清中前S1蛋白，前S1抗原状阴转愈早，HBV患者的疗程愈短，预后也愈好，说明前S1抗原及其抗体的检测是急性乙型肝炎的临床论断，疗效观察和判断数据预后的良好指标。
参考文献
1 吕军,董黎,高远.乙型肝炎病毒前S1蛋白的檢测与临床应用价值［J］.实用诊断与治疗杂志,2007,21(10):767-768.
2 卜国平,开远胜.乙型肝炎病毒前S1抗原的实验室检测及其在临床上的应用［J］.实用肝脏病杂志,2007,10(4):250-251.
乙型肝炎病毒核心抗原 篇4
1 材料与方法
1.1 检测对象
标本来自2008年4月至12月本院门诊及病房患者。丙肝抗体阳性组90例, HCV-Ab阴性ALT高于200U/L者263例及肝炎门诊就诊HCV-Ab阴性ALT高于70者128例, 共计391例。分离血清并置于-70℃保存, 确保标本仅冻融一次。
1.2 检测方法
1.2.1 HCV-CAg检测采用湖南景达制药有限公司提供的HCV-cAg酶联免疫检测试剂盒, 具体操作严格按照试剂盒说明书进行。
1.2.2 HCV-Ab检测采用北京科卫临床诊断试剂有限公司提供的HCV-Ab诊断试剂盒, 具体操作严格按照试剂盒说明书进行。
1.2.3 HCV-RNA定量检测采用深圳匹基生物工程有限公司提供的HCV核酸扩增 (PCR) 荧光定量检测试剂盒, 利用美国AB公司7500实时PCR分析系统进行定量分析。
2 结果
感染组HCV-cAg阳性率为37.78%, 高危人群组HCV-cAg阳性率为0.51% (见表1) 。高危人群组2例HCV-cAg阳性, 对其做HCV-RNA检测, 1例为阴性, 1例为阳性, 结果为2.3×105拷贝/ml。
3 讨论
丙型肝炎是由丙型肝炎病毒感染引起的一种重要的世界性传染病, 丙型肝炎病毒主要是通过输血及血液制品获得, HCV是多变异的病毒, 疫苗的研究在短期内难有突破性进展。丙型肝炎的预后不良, 目前尚无理想的特效药物和治疗措施。因此早期诊断是防止丙型肝炎病毒传播的有效手段。
目前, 对于HCV感染的临床诊断仍以ELISA法检测HCV抗体为主, 但抗体检测存在着一些不足之处。其一, 各厂家试剂间的灵敏度和特异性存在着一定差异, 从而导致结果不一致。其二, HCV-Ab产生有一个明显的窗口期, HCV感染后到抗体转阳的窗口期平均为70 d, 所以抗-HCV阴性并不能排除携带HCV并且具有传染性的可能。
此外, 常用的HCV检测方法还有PCR定性或定量检测, PCR检测HCV-RNA灵敏度高, 人在感染HCV1~2周血清中即可检测到HCV-RNA, HCV-RNA可以反映病毒的复制与传染性, 为病毒血症的标志, 是诊断HCV的“金标准”。但HCV-RNA检测影响因素也多, 在一些基层医院难以开展, 给技术的推广造成了一定的局限性。
近些年关于HCV核心抗原 (HCV-cAg) 的检测有越来越多的报道, HCV-cAg检测可以将HCV检测的窗口期缩短至15 d, 通过大量实验研究表明, HCV核心抗原诊断试剂较HCV抗体检测对HCV感染的阳性检测提前14~68 d, 平均35.2 d。这就降低了HCV经血传播的风险, 具有可行性和较广泛的应用基础。HCV核心抗原也是在HCV感染者体内出现的早期感染标志, 几乎与HCV RNA同时出现。据文献报道, HCV核心抗原阳性样品中HCV-RNA阳性率为85%以上, 两者之问密切相关。
本实验所检测的90例丙肝抗体阳性的标本中, 其中有34例HCV-cAg阳性, 阳性率为37.78%, 低于有关报道42.50%, 由此可见, HCV-cAg对丙型肝炎诊断有较大的价值。。
391例转氨酶升高但丙肝抗体阴性的标本中, 其中2例为HCV-cAg阳性, 阳性率为0.51%, 经RT-RNA确证1例为阴性, 1例为阳性。有文献报道高危人群的阳性率为0.55%。表明仅用HCV-Ab检测的确存在漏诊的风险, 尤其是对手术前丙肝病毒筛查的病例, 它涉及到术中感染责任和用血安全等问题, 丙肝核心抗原检测在一定程度上降低了这些风险。笔者认定, HCV-Ab、HCV-cAg的共同检测既可以防止窗口期漏检又可以排除一些其他疾病的干扰, 在一定程度上降低丙型肝炎诊断假阳性率, 可以提高丙型肝炎检测的准确性, 有助于丙型肝炎的筛查以及临床上的病情判断。
1例HCV-cAg阳性, 但HCV-RNA阴性的标本, 说明了核心抗原与HCV-RNA的检测并不是100%完全相关的, 原因可能为该患者为丙肝早期, RNA<103个拷贝或者由于污染、保存条件不完善等原因引起的RNA样本有降解, 另一个原因可能由于现有的核心抗原检测试剂盒还不够完善, 导致假阳性的存在。
乙型肝炎病毒核心抗原 篇5
1 资料与方法
选择我院2007年3月至2008年3月的门诊乙型肝炎患者274例, 均符合2005年中华医学会肝病学分会与感染病学分会联合制订的中国慢性乙型肝炎防治指南的诊治标准[1], 其中男153例, 女121例, 年龄18~45岁, 平均 (26±16) 岁。采集清晨空腹静脉血标本, 常规冰冻备用。
1.1 主要试剂和仪器
荧光定量PCR仪 (罗氏) , 全自动酶标仪 (日本) 。HBV-DNA试剂、pre-S1Ag试剂及HBV-LP试剂均为上海生物技术公司产品, ALT试剂为美国Beckman公司产品, HBs Ag试剂为武汉生物技术有限公司产品。
1.2 检测方法
HBV-LP、HBs Ag、pre-S1Ag的检测采用ELISA法, HBV-DNA采用荧光定量-聚合酶链反应技术检测, ALT采用速率法检测。所有试剂均在有效期内使用, 严格按照试剂说明书操作。以HBV-DNA阳性 (>103copies·ml-1) 为病毒复制的标志, 以ALT>40 U·L-1为肝功能损害。
1.3 统计学处理
所有数据采用SPSS 18.0软件进行处理, 样本率的比较采用χ2检验, P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 乙肝患者Pre-S1Ag、HBV-LP与HBV-DNA的检测结果
274例乙肝患者Pre-S1Ag、HBV-LP及HBV-DNA阳性率比较差异无统计学意义 (P>0.05) , 见表1。
2.2 乙肝患者Pre-S1Ag阳性、HBV-LP阳性与HBV-DNA阳性率的关系
Pre-S1Ag+HBV-LP阳性组中HBV-DNA阳性的比例显著高于Pre-S1Ag阳性组 (χ2=9.03, P<0.01) 和HBV-LP阳性组 (χ2=9.22, P<0.01) , 见表2。
与单纯Pre-S1Ag阳性和HBV-LP阳性组比较, a P<0.01注:括号内为百分率
2.3 Pre-S1Ag、HBV-LP阳性乙肝患者ALT的检测结果
Pre-S1Ag+HBV-LP阳性组中ALT异常例数的比例显著高于Pre-S1Ag阳性组 (χ2=6.26, P<0.05) 和HBV-LP阳性组 (χ2=6.01, P<0.05) , 见表3。
3 讨论
对乙型病毒性肝炎诊断和治疗疗效的评价, 一直是以HBV-DNA的检测结果作为评价的最高标准[2]。同时也发现PCR测定方法要求高, 质量控制严格, 成本高, 不易推广, 且易出现假阳性, 仅靠检测HBV-DNA也存在一定的局限性。HBV-LP作为乙型病毒性肝炎病毒包膜的组成部分, 不仅有肝细胞毒性和致癌性, 还有促进病毒的复制、增强HBV-DNA复制的作用[3,4]。由于表达HBV-LP的管状颗粒的数目远大于完整病毒颗粒, 所以HBV-LP在血清中的消退晚于HBV-DNA的消退, HBV-LP的表达是病毒复制的指标之一, 其检测也相对简单、快速。只有在完整的HBV颗粒表面才表达HBV基因编码的Pre-S1Ag蛋白, 而且其具有很高的特异性, 并具有高度的免疫原性[5]。乙肝病毒Pre-S1Ag还具有介导HBV病毒进入肝细胞的作用, 所以可作为HBV传染性的指标[6]。Pre-S1Ag是由其线性表位的显露来被检测, 加上Pre-S1Ag的表位在形成空间构象时, 部分关键氨基酸序列少量的暴露在外, 由此造成Pre-S1Ag检出率偏低, 而HBV-LP是立体构象表位被检测[7], 故联合检测可能会提高准确性。
与单纯Pre S1Ag阳性和HBV-LP阳性组比较, a P<0.05注:括号内为百分率
本研究结果表明, 在乙肝患者中, 其血清PreS1Ag、HBV-LP的阳性率与HBV-DNA阳性率的比较差异无统计学意义, 表明血清Pre-S1Ag、HBV-LP阳性率与HBV-DNA阳性率有较高的一致性, 我们发现HBV-DNA含量越高, HBV-LP含量也越高, 这与国内学者的研究[8,9]一致。Pre-S1Ag、HBV-LP均能较好地反映出乙肝病毒复制状态, 但与HBV-DNA的检测结果仍有差距。在Pre-S1Ag与HBV-LP双阳性时, HBV-DNA的阳性率显著高于Pre-S1Ag阳性组及HBV-LP阳性组, 表明Pre-S1Ag和HBV-LP的联合检测更接近HBV-DNA的检测结果, 联合检测更有助于了解HBV在体内感染及复制的情况, 并作为反映病毒复制情况的有效指标。我们发现Pre-S1Ag与HBV-LP双阳性组ALT的水平显著高于Pre-S1Ag阳性组及HBV-LP阳性组, 表明Pre-S1Ag、HBV-LP双阳性时较Pre-S1Ag阳性或HBV-LP阳性更能反映肝脏损伤状态, 联合检测Pre-S1Ag和HBV-LP对于评价乙肝患者的肝功能损伤具有较好的临床意义。本研究结果显示, 联合检测Pre-S1Ag和HBV-LP时操作简单且费用低, Pre-S1Ag和HBV-LP双阳性时较单独检测时更接近HBV-DNA的检测结果, 更能反映出肝功能的损害程度。
参考文献
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乙型肝炎病毒核心抗原 篇6
1.1 资料来源
2007年城关镇卫生院为参考新农合村民免费健康体检，男女共计1101人。
1.2 方法
用乙型肝炎病毒HBsAg（全血/血清）试纸条筛查[1]，全部静脉采血；对阳性者又用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测乙型肝炎五项，仅做定性。
2 结果
2.1 城关镇14个行政自然村1101名村民，乙型肝炎病毒HBsAg和乙型肝炎五项都阳性55人，阳性率5.00%，见表1。
从表1可以看出，个别行政村阳性率偏高，根据此结果，对这几个村入村作了调查分析，结果如下：A村是旅游比较发达，流动人口较多，可能使其传染率增加。其余几个村是村与村之间紧密相连，且这几个地区自然经济条件差，村医执业水平相对其他地区差，还有这几个村都有家族遗传病史，和遗传因素有关。
2.2 1101名村民HBsAg全血试纸条和乙型肝炎五项检测结果
见表2。
从表2可以看到, 小三阳的患者所占比率最高。
2.3 阳性结果年龄结构
统计结果发现，发病率最高年龄组为41～60岁人群，依次为21～40岁、61～70岁、1～20岁，见表3。
3 讨论
城关镇地区乙型肝炎病毒感染的阳性率为5.14%，比文献报道HBsAg的携带率为10.17%相比偏低[2]。可能与人们生活习惯，思想意识提高有关，但也于知道自己是乙型肝炎的患者就不来榆中县城关镇卫生院体检怕人们知道这一心理因素的有关。从表1统计结果可以看出，自然村1、4、5、6、9平均阳性率7.41%，明显高于其他村，其原因可能是： (1) 这几个村外出务工人员多，由于健康意识淡薄，传染了乙型肝炎。 (2) 还可能与家庭易感有关。 (3) 从表2中看出，小三阳患者最多，其次就是病毒携带者。从表3年龄分布来看，注射乙型肝炎疫苗可能是预防乙型肝炎发病的最有效办法。
总之，乙型肝炎病毒主要通过血液、母婴、性传染，也可通过唾液、尿液、精液、汗液和乳液等分泌物传染，也就是密切接触者最易感，所以应该从家庭中避免并切断传播途径，最有效的就是全程接种乙型肝炎疫苗；使其产生抗体从而有效地防止传播。乙型肝炎的主要传染源是乙型肝炎患者和携带者，肝炎的潜伏期为60～160d，平均90d，所以防治乙型肝炎，除了有效接种乙型肝炎疫苗外，还要加大健康教育力度，提高人们防病意识，了解防病知识，提高从业人员执业水平和执业道德，改善乡村级医疗条件，从而更有效预防乙型肝炎。加大宣传力度把这种健康教育纳入当地的教育规划，是人人都懂得有病及时治疗无病要加大预防的基本知识，这会让我们远离乙型肝炎。
摘要：为了解城关镇乙型肝炎病毒感染的发病率, 作者收集汇总了2007年城关镇村民免费健康体检的新农合资料, 现报道如下。
关键词：城关镇村民,乙型肝炎病毒,发病率,ELISA:筛查
参考文献
[1]中华医学会肝病分会, 中华医学会感染病学分会.慢性乙型肝炎防治指南[J].中华流行病学杂志, 2006, 27 (1) :79-88.
乙型肝炎病毒核心抗原 篇7
1 材料和方法
1.1 调查对象
共10个年龄组人群 (5~、10~、15~……≥50岁) , 每个年龄组男女比例均衡, 城乡人群比例均衡。
1.2 方法
1.2.1 抽样方法
按城区与农村分为2层, 按照分层随机抽样原则, 每层随机抽取4个居委会或村, 按上述年龄组随机抽取调查对象。
1.2.2 标本采集
每名调查对象采集静脉血≥2ml, 2℃~8℃保存24h内自动沉降或离心分离血清后, 置-20℃冷冻保存待检, 填写采样记录单, 共采集有效血清4 671份。
1.2.3 检测方法
用ELISA法检测HBsAg, 试剂由英科新创 (厦门) 科技有限公司提供, 操作和结果判定均严格按试剂说明书进行, 可疑者重复检验仍阳性者定为阳性。
1.2.4 统计分析
用SPSS 11.5软件包统计分析。
2 结果
2.1 HBsAg感染情况
共调查4 671人, 其中男性2 480人, 女性2 191人, HBsAg阳性率为17.77% (830/4 671) , 其中男性21.29% (528/2 480) , 女性13.78% (302/2 191) , 两者差异非常显著 (x2=436.138, P<0.001) 。
2.2 不同年龄组HBsAg阳性率
HBsAg阳性率在5~、10~、15~及20岁以上4个年龄组中有随年龄增大而上升的趋势, 5~、10~岁组最低, 20岁以上年龄组最高 (x2=104.130, P<0.001, df=3) 。 (表1)
2.3 城乡人群监测情况
HBsAg阳性率农村高于县城区, 差异显著 (x2=44.943, P<0.001) 。 (表2)
注:各年龄组之间的比较, 用趋势x2, 同时把20岁以上组合并, 因为阳性率差不多, 故比较了4个组。
3 讨论
长泰县人群HBsAg阳性率为17.77%, 明显高于我国一般人群中HBsAg阳性率 (9.09%) [1], 亦高于1992年全国肝炎流行病学调查结果 (9.75%) [2], 略高于福建省 (17.09%) 。低年龄组HBsAg阳性率较高年龄组低, 与李凌奋、王伟明[3,4]等研究结果一致。这主要与加大乙肝防治知识的健康教育和乙肝疫苗的广泛接种有关。长泰县从80年代末开始开展乙肝疫苗预防接种, 1996年将乙肝疫苗纳入计划免疫管理, 2003年将乙肝疫苗纳入儿童计划免疫。通过广泛宣传, 主动要求预防接种人数逐年增多, 人群的免疫水平也得到提高。提示我们今后仍需加强对乙肝防治知识的宣传力度, 发挥健康促进作用, 落实好新生儿及时接种乙肝疫苗的免疫工作。
农村人群HBsAg阳性率高于城区, 这与城区乙肝疫苗接种率高于农村有关, 也可能与个人卫生知识, 卫生习惯等因素有关。HBsAg阳性率男性高于女性, 造成性别差异的原因可能与男性社会交往频繁、活动范围广泛、感染机会较多及个人卫生习惯和免疫功能 (女性由于类固醇激素对T淋巴细胞的作用面有抗HBsAg的能力) 等因素有关。提示我们今后仍需加强对病毒性肝炎携带者的管理和治疗, 对密切接触者采取预防接种疫苗, 及时做好餐饮具消毒等有效措施。
4 建议
加强病毒性肝炎携带者的管理, 以防感染链扩大;对高年龄组人群及高危人群加强监测, 加强健康教育力度, 发挥健康促进作用;鼓励预防接种, 以提高这部分人群对病毒的免疫力;全面提高免疫规划人群乙肝疫苗全程合格接种率和首针及时接种率, 进一步降低儿童HBsAg携带率。
参考文献
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乙型肝炎病毒核心抗原 篇8
关键词：大学生,乙型肝炎病毒表面抗原,预防,治疗
乙型肝炎是严重危及我国居民生命健康的一种疾病, 人体一旦感染了乙肝病毒, 人体就会受到严重的伤害。目前, 临床上还没有研制出一种特效的根治乙型肝炎的药物以及治疗方法, 很多乙肝患者将成为终身携带病毒者[1]。若患者的身体抵抗力较低以及发生其他疾病时, 那么将很有可能会发展成为急慢性肝炎、肝硬化、肝腹水甚至是肝癌。对此, 及时地发现并有针对性地采取治疗与控制对此, 能够在很大程度上减少疾病的发展速度, 提高健康水平。本文主要对笔者所在高校的11400名在校大学生的体检资料进行回顾性分析性, 对HBsAg阳性率进行分析, 现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般对象
选取2008—2011年笔者所在大学生11400名, 年龄18～23岁, 平均 (21.1±1.2) 岁;入校时进行血清标准检测, 按照1995年中华医学会感染性疾病研究中心所制定的《病毒性肝炎防治方案》中的相关标准, 对确诊的HBsAg阳性患者采用综合治疗的方法, 对其余大学生进行乙肝疫苗的预防接种。
1.2 方法
1.2.1 检测方法
本研究主要采用上海荣盛生物技术有限公司所生产的乙肝表面抗原全面快速测定试纸条进行胶体金法加以测定, 本组全部操作与结果判断均严格地按照使用说明书上的方法实施。
1.2.2 治疗方法
1.2.2.1 饮食治疗
尽量多饮食富含维生素、高蛋白质以及适当的碳水化合物, 减少脂肪性食物的摄取, 严格禁烟忌酒以及控制饮食的量。
1.2.2.2 心理在治疗
向检测出HBsAg阳性学生集中宣讲关于乙肝病毒性肝炎方面的知识, 通过发放乙肝知识宣传册以及以各自形式举办专题讲座介绍乙肝的相关知识及其危害。
1.2.2.3 西医治疗方法
0.4mg利巴韦林, 采用肌肉注射的方式, 1次/d, 服用1个月;干扰素250U肌注, 1次/d, 服用1个月;50mg灭滴灵, 口服, 2次/d, 服用3个月;复合维生素B, 1次/d, 服用3个月;15mg肝太乐, 1次/d, 服用1个月;0.1gVc, 1次/d, 服用3个月;定期对患者的肝功能以及乙肝各项指标进行检测[2]。
1.3 预防对策
1.3.1 健康宣教
对乙肝病毒的传播路径进行宣传, 对HBsAg呈现阳性但是肝功能正常要求自我隔离, 不能参加鲜血活动, 应该注意切断其传播途径, 注意加强水源保护以及用水安全、食品卫生。重中之重, 就是注意加强血液及体液两种传播路径, 因此需要对乙肝患者采用一次性注射器进行治疗, 一人一针一管, 对于带有乙肝患者而言, 均需要进行消毒处理。
1.3.2 接种疫苗
对HBsAg检测显隐性的大学生进行乙肝疫苗预防接种, 于第1、3、5个月进行上臂三角肌皮下注射为1.0ml。
2 结果
2.1 本组大学生血清HBsAg检测结果
11400名研究者中, 有535名为HBsAg阳性患者, HBsAg阳性检测率为4.69% (535/11400) , 剩余10865名在校大学生血清HBsAg检测为阴性, 占95.31% (见表1) 。
2.2 HBsAg阳性患者治疗后检测结果
将535例HBsAg阳性患者按照1.2.2.3节中的治疗方法进行治疗, 治疗1年后, 得出如下表2所示的结果。经过上述方法的治疗, 具有一定的效果, HBsAg转阴率有增大的趋势 (见表2) 。
3 讨论
乙型肝炎是最常见的疾病之一, 目前没有很好的治疗药物, 在我国的人群中, 乙型肝炎表面抗原阳性率非常高, 据中华医学会肝病学会等报道, 我国的一般人群中乙型肝炎病毒表面抗原阳性率9.09%, 翟红[3]报道我国有 1.2 亿人乙型肝炎病毒表面抗原阳性, 大学生的乙型肝炎病毒表面抗原阳性率 4.38%;唐日晖等[4]报道深圳市企事业单位职工乙型肝炎病毒表面抗原阳性率高达 6.77%。
本研究主要对本组大学生血清HBsAg阳性检测率以及HBsAg阳性患者治疗后的检测结果进行了观察与分析, 结果显示:本组11400名在校大学生中, 经检测, 有535名学生血清HBsAg检测呈阳性, 阳性检测率为4.69%。2008—2011年HBsAg阳性检测率呈现出逐年下降的变化趋势, 即由5.28%下降至3.48%;2008—2011年男生HBsAg阳性检测率要略高于女生。经过西医方法的治疗, 取得了一定的效果, HBsAg转阴率呈现出逐年升高的变化趋势, 即由2009年的18.12%升高至2012年的21.13%, 且女生HBsAg转阴率增加速度要快于男生。
综上所述, 注重健康宣教, 从控制人群乙型肝炎发病的高度全面地开展乙型肝炎疫苗的接种工作, 对于适合乙肝疫苗接种的学生进行预防接种, 能够有效地降低乙肝的发病率。
参考文献
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乙型肝炎病毒核心抗原 篇9
1 材料与方法
1. 1 试验材料选取本院2012 年6 月~2014 年12 月190份血液筛查阴性标本, 同时采集190 份质控血液标本。
1. 2 方法将所选取的380 份血液标本进行严格检测, 应用双抗原夹心法检测HCV抗体。在检测时所应用试剂有吉比爱、Ortho丙肝病毒抗体酶联免疫诊断试剂, Chiron RIBA确认试剂。
1. 2. 1 抗原制备嵌合表位抗原经包涵体的形式表达, 采取离子交换层析措施进行纯化, 然后通过Sephadex G-50 柱凝胶完成过滤采集, 应用SDS-PAGE将抗原蛋白进行仔细鉴定。
1. 2. 2 双抗原夹心法应用50 mmol/L碳酸盐缓冲液对抗原予以稀释处理, 多肽抗原具体浓度为:结构处多肽151 g/ml, NS4 处多肽0.51 g/ml, NS5 处多肽0.251 g/ml, 所应用到的基因工程表达抗原具体浓度有c7 应用1 g/ml, C11 应用1 g/ml。每个孔内均加进100 μl, 在37℃状态中持续保存1 h, 然后放置到4℃冰箱内过夜, 应用30% 小牛血清PBST实施封闭处理, 在每个孔内加进200 μl, 37℃状态中保存1 h, 然后去除封闭液, 应用50 μl样品稀释液, 每个孔内加进5 μl, 37℃状态中保存30 min, 然后应用PBST进行5 次冲洗。选择最为适宜酶稀释度, 通过棋盘滴定方法在每个孔内加进50 工作浓度的酶标记抗原, 37℃条件下放置15 min, 经PBST冲洗5 次, 每孔加入50 μl底物缓冲液及50 μl显色剂, 在37℃状态中保存10 min, 使之能够完全显色。然后在每个孔内加进50 μl2 mol/L硫酸, 停止反应, 应用酶标仪于450 nm波长条件下实施吸光度效果检测, 若检测结果≥临界值者则表示阳性, 反之则表示阴性。
2 结果
应用双抗原夹心法检测标本, 显示126 份为阳性标本, 1份为阴性标本, 应用Chiron RIBA确认试剂检测显示其均呈现阳性, 双抗原夹心法检测敏感性为99.21%。见表1。
3 讨论
对患者HCV抗体进行检测是确定其是否发生感染的初步阶段, 主要有用作筛检工作的酶免疫检测 (EIA) 以及用作确证工作的重组免疫印迹试验 (RIBA) , 其中RIBA由于需要较高费用且并未建立严格试验标准, 目前在临床诊疗中并无较多应用[4]。由于EIA存在较为明显的便利性及稳定性、自动化功能强、价格较低等优点, 在临床中应用到血液筛查及检测工作较为广泛。目前EIA发展至第三代, 依然实施间接法予以检测, 因其方法学存在一定固有缺陷性, 极易导致结果出现假阳性及漏检情况[5]。目前在临床中将双抗原夹心ELISA法检测试剂作为发展方向具有较为明显应用价值, 夹心法可使得酶标记的特异性抗原将间接法检测时酶标记的抗体进行取代由此完成整个检测, 与间接ELISA法进行比较, 其对于样品检测存在双特异性选择特点, 可以将血清内出现的抗HCV的总抗体完成检测, 有效防止间接ELISA法所存在的检测弊端, 确保检测结果具有更高的敏感性与特异性, 而且因为HCV抗原所具有的分子量较小, 以酶进行HCV抗原的直接性标记, 往往使得空间位阻情况发生, 导致抗体与抗原无法轻易结合, 存在较为明显抑制作用, 因此HCV抗原的标记是建立抗HCV抗体的双抗原夹心ELISA检测方法的一个较为重要的难点[6]。
在本文研究中, 双抗原夹心法检测显示阳性为126 份, 阴性为1 份, 双抗原夹心法检测无需对血清产品予以稀释, 也不会因类风湿因子等不良因素而受到干扰, 存在较为理想的特异性, 而且能够对血清中各种抗体予以检测, 尤其免疫球蛋白M (Ig M) 类抗体可以明显减少自病毒感染至应用ELISA法检测到抗体间的“窗口期”。所以采取双抗原夹心ELISA法检测确保HCV感染诊断试剂存在较高特异性, 其检出率明显上升, 有效缩短检测时间, 具有较高临床推广应用价值。
参考文献
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