关键词： 猪瘟
细胞疫苗（精选九篇）
细胞疫苗 篇1
1 对象与方法
选择2006年1月出生, 并在2008年12月31号以前, 在我站完成吸附无细胞百白破4剂次接种的适龄儿童共206例, 男117例, 女89例。方法按中华人民共和国卫生部《预防接种工作规范》执行[2]。疫苗一律选择武汉生物制品研究所生产的不同批次吸附无细胞百白破联合疫苗, 并由铜陵市CDC统一采购。注射器为安徽省天康医疗用品有限公司生产的专供预防接种使用的1 ml、55 mm×20 mm的一次性灭菌注射器。接种前固定一名接种医生对小儿进行健康体检, 严格掌握适应证, 对处于疾病恢复期的儿童一律推迟到症状消失, 停药10 d以上再接种。基础免疫:3月龄接种第1剂次、4月龄接种第2剂次、5月龄接种第3剂次, 接种部位在右、左上臂外侧三角肌肌内注射, 交替进行, 每剂次间隔≥28 d。加强免疫:18~24月龄第4剂次在左上臂外侧三角肌内注射为多, 注射后嘱家长密切观察全身和局部反应, 并保持电话联系。
2 结果
2.1 反应与接种剂次的关系
见表1。
*有3例出现重度反应, 且此3例出现重度反应没有接种第4剂次;**有8例出现重度反应
2.2 反应与接种月份的关系
见表2。
2.3 反应与接种部位的关系
基础免疫因小孩小、主动活动能力不足, 均采用右左交替注射。随着儿童的增大, 活动增多, 为了不影响小儿右手活动, 习惯将疫苗接种到左上臂。未发现明显的局部反应, 但有2例小儿在前一月接种B型流感嗜血杆菌疫苗 (HIB) , 此次, 在同部位接种无细胞百白破, 局部均出现严重反应, 疼痛明显, 可能与HIB疫苗含有破伤风类毒素成分有关。随着疫苗品种的增多, 成分变得复杂。因此, 不管接种何种疫苗, 对于同一个小孩均应遵守左右交替接种, 如须同时接种两种以上国家免疫规划疫苗, 最好选择两个部位, 臀部和上臂外侧肌内注射, 以降低局部反应机会。
2.4 反应与其他疫苗的关系
接种无细胞百白破引起的反应者, 下次接种其他疫苗, 未见严重的局部和全身反应, 所以, 要明确地告知家长对无细胞百白破反应强烈者不再接种百白破, 但可以继续接种其他疫苗。
3 讨论
预防接种不良反应分为一般反应和异常反应, 一般反应是指在预防接种后发生的, 由疫苗本身所固有的特性引起的, 对机体只会造成一过性生理功能障碍的反应, 主要为发热, 分为轻度 (37.1~37.5℃) 、中度 (37.6~38.5℃) 和重度 (≥38.6℃) 。注射局部红肿浸润, 根据纵横平均直径分为弱反应 (≤2.5 cm) 、中反应 (2.6~5.0 cm) 和强反应 (>5.0 cm) 。同时可能伴有全身不适、恶寒、倦怠、食欲不振等, 个别受种者可发生恶心、呕吐、腹泻等胃肠道症状[3]。由表1可以看出, 随着接种剂次的增多, 反应的发生率增加, 严重反应的例数也增多。这与林文璇、李容汉的报道相一致[4]。对反应发生的机制尚未见报道, 可能与个体体质有关。由表2可以看出吸附无细胞百白破引起的反应一年四季均有发生, 但7、8月份发生率最高, 这可能与7、8月份接种人数多, 夏天气候变化大, 炎热, 出汗, 进食少, 小孩抵抗力差以及每天给小孩洗澡揉擦有关。因此, 建议百白破1.5~2岁加强, 尽量选择在冬、春、秋季进行, 接种前做好准备工作, 如接种前晚或前几小时给小孩洗热水澡, 接种后2~3 d避免局部接触生水和揉擦, 减少不良反应发生。对轻、中度者, 体温38.5℃以下, 可以嘱家长密切观察, 多给小孩喝白开水, 适当休息, 注意保暖, 防止继发其他疾病, 1~2 d可以自然好转。重者体温可达38.5℃以上甚至达40℃, 发生热性惊厥, 需送医院观察治疗。轻、中度局部反应一般不需任何处理, 局部重反应者可采用热敷, 并给予小量镇痛退热药, 一般每天2~3次, 连续1~2 d即可。所以, 每位接种人员在日常工作中, 切勿掉以轻心, 要把每一个接种环节做细、做精、做好。同时, 要告知儿童家长可能出现的反应及处理方法, 以免给儿童家长造成不必要的恐慌, 而拒绝接受其他免疫规划疫苗的接种, 降低接种率。
参考文献
[1]李雪清, 李博文, 荣晓琴, 等.接种吸附无细胞百白破疫苗的体会.[J].中日友好医院学报, 2008, 22 (5) :318-320.
[2]中华人民共和国卫生部.预防接种工作规范[S].2005.
[3]王陇德.预防接种实践与管理[M].北京:人民卫生出版社, 2006:114-115.
细胞疫苗 篇2
物质的考虑
审评五部 生物制品室 高恩明
摘要：本文对《疫苗生产用细胞基质研究审评一般原则》中细胞传代及其残留物要求的有关问题进行了重点阐述
目前，我国疫苗生产使用的传代细胞主要有两种，一种是非洲绿猴肾细胞的传代细胞系（Vero细胞）。另一种是中华仓鼠卵巢细胞的传代细胞系（CHO细胞），虽然《疫苗生产用细胞基质研究审评一般原则》不涉及CHO细胞的有关问题，但鉴于CHO细胞本身存在的问题及残留物质的重要性，本文对有关问题进行讨论。
CHO细胞主要作为表达载体，目前国内用于重组疫苗的表达，二十世纪九十年代上市的产品有重组乙型肝炎疫苗，现在仍有一些科研单位或企业正在研发某些重组疫苗，试图采用CHO细胞表达。
理论上，传代细胞的DNA和蛋白存在致肿瘤的可能性。目前国内的研究资料显示，CHO细胞致肿瘤试验阳性，逆转录酶试验阳性。为此，《中国药典》三部（2005版）对CHO细胞表达的重组乙型肝炎疫苗提出新的要求，要求CHO细胞残余DNA含量≤10pg/剂量，CHO细胞残余蛋白占总蛋白含量的0.05％以下，并要求在生产工艺中增加病毒灭活工艺。在药品审评中，对于未上市的新疫苗的评价，除进行技术审评之外，还需要进行效益/风险比的分析与评价。虽然CHO细胞只作为表达载体，表达的目的蛋白尚需纯化，CHO细胞的残留物质很少，但是，仍存在潜在的风险，因此不推荐新的预防用疫苗采用CHO细胞表达，更不能推荐用于婴幼儿。
近几年，我国采用Vero细胞生产灭活疫苗逐渐增多，疫苗的种类包括人用狂犬病纯化疫苗、出血热纯化疫苗、甲型肝炎灭活疫苗、乙型脑炎纯化疫苗。Vero细胞是传代细胞系，理论上具有致肿瘤的可能性，已有资料报导，Vero细胞在170代以上致肿瘤试验阳性；WHO推荐134～150代，认为在该代次内未发现致肿瘤性。因此，建议我国疫苗生产些企业尽可能采用150代作为使用限定代次。
Vero细胞残余DNA、残余蛋白（包括促生长蛋白）可能对人体有潜在的致肿瘤性及其他危害，建议疫苗生产研究单位研究特异性检测Vero细胞蛋白的方法，为今后制定相关质量控制标准奠定基础。此外，目前阶段应尽量降低疫苗总蛋白含量，间接控制细胞残留蛋白。关于Vero细胞残余DNA危害，除了与残余DNA含量的多少有关外，还与残余DNA片断的大小有关，残余DNA含量越高、片断越大，其潜在的致肿瘤性越大。因此，建议疫苗生产研究单位强化纯化工艺，尽量降低残余DNA含量；此外，研究并建立检测Vero细胞残余DNA片断大小的方法，为今后制定相关质量控制标准奠定基础。
在上述采用Vero细胞生产的纯化疫苗中，乙型脑炎纯化疫苗比较特殊，因为它是国家一类疫苗，即实施计划免疫的疫苗，用于婴幼儿的免疫接种。因此，对乙型脑炎纯化疫苗的质量要求应相对严格，用于计划免疫婴幼儿使用的疫苗，采用Vero细胞生产是否合适，对于Vero细胞DNA残余量、残余蛋白含量如何要求有待讨论。目前可初步要求DNA残余量≤10pg//剂量（参照CHO细胞产品的要求），要求生产企业建立Vero细胞残余蛋白含量的检测方法并拟定质量标准。
细胞疫苗 篇3
吸附无细胞百白破系由无细胞百日咳疫苗原液、白喉类毒素原液及破伤风类毒素原液加氢氧化铝佐剂制成。为类白色或淡黄色混悬液，放置后佐剂下沉，摇动后即成均匀悬液。含适量硫柳汞防腐剂。
有效成分：百日咳杆菌有效组分，白喉类毒素及破伤风类毒素。
輔佐：氢氧化铝佐剂，硫柳汞防腐剂。
通过我院2014年1月到6月所接种人次的观察具体情况如下：
1 对象与方法
1.1 观察对象
年龄3个月～18个月无禁忌的健康儿童的基础免疫接种。
1.2 方法
接种年龄、部位、方法及疫苗的冷链均严格按照疫苗操作规程要求和免疫程序进行接种，并告其监护人吸附无细胞百白破疫苗的适用对象、作用、方法、适应证及禁忌证以及不良反应及其处理等注意事项由监护人签字。
1.3 观察内容及方法
接种前了解接种对象的健康状况，有无高热惊厥史、有无过敏史等，接种后嘱家长应注意观察，如出现不适及时和我们联系，随时以家访或电话随访等方式进行观察，并签告知通意书，并详细登记接种不良反应监测调查表及时上报，观察内容包括：局部反应：红、肿、痛等症状；全身反应：发热、寒战、头痛、疲倦、皮疹、恶心、呕吐，全身不适症状；变态反应、过敏性荨麻疹，过敏性休克、紫癜等。
1.4 护理
一旦发生接种不良反应，采取相应的处理措施：心理护理，告知家长一般不良反应的相关知识，及时反馈情况，多询问，多安慰，以消除家长紧张情况，积极配合，精心护理；局部反应，采取局部热；全身反应采取对症处理发热给予物理降温，多饮水，必要时注射退烧剂，并密切观察其病情变化；变态反应，进行相应的抗休克、抗紫癜处理。
2 结果
在接种所有对象中，接种第一针为95例，第二针为82例，第三针82例及加强针82例。
3 讨论
细胞疫苗 篇4
近年来, 我国不少地方猪瘟疫情呈现上升的趋势。猪群猪瘟带毒或隐性感染十分普遍, 猪瘟流行呈现典型猪瘟和非典型猪瘟共存、混合感染或继发感染频繁出现的特点, 母猪繁殖障碍和新生仔猪先天性感染等疫病严重威胁我国的养猪生产安全。根据中监所的相关实验数据显示, 我国猪瘟疫苗免疫抗体合格率仅60%, 易感猪群占饲养量的40%, 使得猪瘟在我国大部分地区仍然呈散发或流行。造成这些的原因之一是我国现有的疫苗还存在一些局限。
目前我国生产的猪瘟疫苗主要有三种:猪瘟兔化弱毒脾淋苗;猪瘟兔化弱毒组织苗;猪瘟细胞苗 (牛睾丸原代细胞疫苗、猪瘟传代细胞苗) 。
1 猪瘟兔化弱毒脾淋苗
一般是指用接种猪瘟兔化弱毒家兔的脾和淋巴结生产的疫苗。
2 猪瘟兔化弱毒组织苗
一般是指用接种猪瘟兔化弱毒的乳兔组织生产的疫苗。
3 猪瘟细胞苗
分为牛睾丸原代细胞疫苗和猪瘟传代细胞苗。
3.1 猪瘟牛睾丸原代细胞疫苗
利用牛睾丸原代细胞制造的疫苗, 它的优点是可以大批量生产, 生产过程容易监控, 价格便宜, 但缺点是效价不稳定。由于每次制造疫苗的细胞来源于不同的牛, 批间差异大;另外我国牛感染牛病毒性腹泻病毒 (BVDV) 比例较高, 利用牛睾丸细胞生产疫苗很容易受到BVDV的污染。BVDV与猪瘟 (CSFV) 同属于黄病毒科瘟病毒属, 由于竞争抑制的原因, 猪瘟病毒在细胞中的增殖会明显受到影响, 这就导致猪瘟牛睾丸原代细胞疫苗病毒滴度太低;同时由于培养细胞用的牛血清往往含有BVDV的抗体, 用这种苗免疫不但干扰猪瘟疫苗抗体的产生, 造成免疫失败, 还容易让猪感染上BVDV, 引起母猪繁殖障碍, 病毒可通过胎盘传给仔猪甚至引起仔猪发病。
3.2 猪瘟传代细胞苗
是目前先进的猪瘟疫苗。它采用国际认证的同源传代ST细胞培养, 批间差异极小, 稳定性好, 病毒培养液中病毒含量高, 可以大批量生产, 生产过程容易监控, 而且避免了BVDV病毒污染的威胁。因而, 相对于前述几种猪瘟疫苗来说是一种新型优质、高效、安全的疫苗。该苗所用的猪睾丸传代细胞系 (ST细胞系) 与猪同源, 适合猪瘟病毒增殖, 由此类 (系) 细胞制造的疫苗病毒滴度比牛睾丸原代细胞疫苗的病毒滴度提高了20倍以上, ST细胞系还可以通过建立细胞库进一步控制细胞质量, 确保用无外源病原的细胞生产疫苗, 有效解决了疫苗中BVDV外源病原污染的问题, 从根本上解决了猪瘟疫苗生产中存在的问题, 大大提高了疫苗质量, 为在我国完全控制和净化猪瘟提供了技术保障。
细胞疫苗 篇5
关键词：PRRSV,病毒,分离,疫苗,细胞病变,比较研究
猪繁殖-呼吸综合症 (Porcine reproductive and respiratory syndrome PRRS) 是由猪繁殖-呼吸综合症病毒 (PRRSV) 引起的一种新的、具有高度传染性的病毒病[1]。该病毒于1991年首次在荷兰分离到, 我国于1996年由郭宝清等[2]分离到该病毒。PRRSV属于动脉炎病毒科动脉炎病毒属[3], 根据基因型的不同, 现将PRRSV划分为美洲型和欧洲型[4], 而两型之间或同型之间不同的分离株存在着很大的抗原差异和毒力差异, 因此给生产实践中病毒的检测和疾病预防带来了极大困难。笔者从临床样本中分离到1株PRRS病毒, 命名为J株, 并对该病毒的特性作了初步的研究, 并将其细胞病变和细胞半数感染量 (TCID50) 与另外两株弱毒疫苗株作了比较和分析, 现将结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 试剂
HDMEM (购自北京赛墨飞世尔生物化学制品有限公司, 生产批号:NTG0111) 、胎牛血清 (购自北京海克隆生物化学制品有限公司, 生产批号:NSF0050) , 滤膜提取核酸试剂盒 (购自香港基因公司, 生产批号:VTK-0608-001) , 猪繁殖与呼吸障碍综合症 (PRRSV) PCR试剂盒 (购自香港基因公司, 生产批号:VTK-0112-002) 。
1.2 样品处理
样本为病死猪的内脏组织, 采集少量的各脏器组织于研钵中, 剪碎并加入少量HDMEM细胞培养液进行研磨, 5000rpm离心5min, 取上清, 一部分用于核酸的提取, 其余加入双抗处理后[5]-20℃保存备用。
1.3 样品的PCR检测
1.3.1 核酸提取
按照试剂盒的操作要求, 采用滤膜提取核酸的方法提取样本的RNA, 然后加入60μL的DEPC水进行溶解, -20℃保存备用。
1.3.2 RT-PCR检测
按照RT-PCR试剂盒的要求进行PRRSV的检测, 并记录检测结果。
1.4 病毒分离
将Marc-145细胞传代培养, 18h后待细胞贴壁80%左右, 将-20℃保存的样本用0.2μm微孔滤器过滤后接种于Marc-145细胞, 吸附1h后, 去掉上清液, 加入含2%胎牛血清的HD-MEM维持液培养。每日观察细胞, 收获培养7d后出现细胞病变的细胞液, 并按照1.3步骤作进一步的鉴定, 确定是否分离到病毒;如无病变, 则于7d后收获, 继续盲传2代, 仍无病变者废弃。
1.5 两株疫苗毒的细胞培养
将国外某PRRSV疫苗毒A株和国内某PRRSV疫苗毒B株用HDMEM细胞培养液稀释10倍, 取1ml离心取上清按照1.4的方法接种于Marc-145细胞, 每天观察细胞病变, 收获培养7d的细胞培养液, 并按照1.3步骤作进一步的鉴定, 确定是否分离到病毒。
1.6 临床分离株J株、弱毒疫苗株A和B株TCID50的测定
将Marc-145细胞传代至96孔细胞培养板, 用含10%胎牛血清的HD-MEM培养液培养至细胞长成单层。吸取细胞培养液, 将待测毒株作10倍梯度稀释 (10-2~10-8) , 接种Marc-145细胞单层, 每个稀释度设6个复孔, 每孔100μL, 试验同时设不加病毒的细胞对照孔。37℃吸附1h后, 加入维持液, 37℃, 5%CO2培养7d, 每天观察并记录细胞病变。按照Reed-Muench法计算各自TCID50[6]。
2 结果
2.1 病毒分离及RT-PCR鉴定结果
临床样本通过研磨、取上清液处理后, 接种Marc-145细胞能够引起明显的细胞病变, 其细胞上清液经RT-PCR检测为PRRSV阳性。
2.2 J病毒株在Marc-145细胞上引起细胞病变的观察
PRRSV阳性样本接种到Marc-145细胞上能产生了明显的细胞病变 (见图1-6) , 主要表现为:细胞聚缩、折光率增强、细胞破溃脱落, 细胞液变得浑浊, 其F3代培养到第7天的时候细胞基本脱落, 其细胞培养物经RT-PCR检测为PRRSV阳性。
2.3 A和B弱毒疫苗株在Marc-145细胞上引起细胞病变的观察
2株疫苗株在Marc-145细胞上也产生了明显的细胞病变 (见图7-10) , 各自的细胞培养物经RT-PCR检测也为PRRSV阳性, 但是这三种病毒出现的细胞病变的时间和病变的特征并不相同, 见附表。
2.4 J分离株、A和B弱毒疫苗株TCID50的测定
将J分离株、A和B弱毒疫苗株分别进行梯度稀释, 将每个稀释度接种6孔Marc-145细胞, 每天观察并记录细胞病变的结果, 按Reed-Muench法计算得到其毒价分别为J分离株8.0TCID50/0.1ml、A弱毒株3.4 TCID50/0.1ml以及B弱毒株4.5TCID50/0.1ml。
3 讨论
近几年研究表明, 猪繁殖-呼吸综合症病毒是导致猪“高热病”主要病因之一, 并一度引发大面积猪场的感染, 其感染率和死亡率都相当高, 因此PRRSV应当引起足够的重视[7]。本研究通过细胞分离的方法, 成功从猪临床内脏样本中分离到PRRSV, 并且细胞病变观察和RT-PCR鉴定也进一步证明在Marc-145细胞上分离到了PRRS病毒。
本研究同时也对A弱毒疫苗株和B弱毒疫苗株进行Marc-145细胞的再培养, 并能够观察到明显的细胞病变, 其细胞培养物经RT-PCR检测为PRRSV阳性, 通过比较三种PRRSV在Marc-145细胞上引起的细胞病变, 我们发现J病毒株引起的细胞病变较为缓慢, 病变特征随感染时间的延长而逐渐变的明显, 而且收获的细胞液非常浑浊, 进行传代前必须离心去除杂质, 而A和B弱毒疫苗株出现病变时间较短, 说明疫苗毒能够比野毒更快的适应细胞;野毒产生的细胞病变明显区别于疫苗毒, 其TCID50也远远高于疫苗毒的TCID50, 说明野毒的感染特性与疫苗毒有较大的区别, 其对细胞的感染进程变的缓慢, 但是病毒毒力明显增强。我国临床应用的PRRSV活疫苗大都是由野毒进行细胞的有限传代进行病毒致弱的, 但是其生物学特性的改变, 同样伴随着其基因结构的变异和核苷酸的突变, 从而有可能导致其免疫原性的改变, 所以其产生的抗体是否能阻断野毒的感染就需要实验室进一步的证实。
同样的道理, 弱毒疫苗株在使用过程中也有潜在毒力增强的危险, 从而在使用过程中会造成人为的散毒, 因此应当在生产过程中尽量使用灭活疫苗;3株病毒的TCID50分别为J分离株8.0TCID50/0.1ml、A弱毒株3.4TCID50/0.1ml以及B弱毒株4.5TCID500.1ml, 两株疫苗株的TCID50明显低于J株, 因此应当在疫苗生产过程中时刻监控疫苗的毒力和病毒含量, 保证疫苗中病毒含量不低于最低免疫剂量, 防止疫苗中病毒量达不到免疫要求, 从而导致免疫失败。
本研究对PRRS临床分离病毒进行了初步的探索, 比较了其与弱毒疫苗株的病毒特性和生物学差异, 但是PRRSV是一种易突变病毒, 其病毒毒力的增强与减弱到底与细胞传代及野外感染有多大关系, 今后其弱毒疫苗的使用会不会导致病毒毒力的返强, 从而造成PRRS的散毒还需要进一步的研究与探索。
参考文献
[1]Rossow K D.Porcine reproductive and respiratory syndrome[J].Vet Pathol, 1998, 35 (1) :1-20.
[2]刘文兴, 蔡雪晖, 郭宝清.猪生殖-呼吸道综合症病毒 (PRRSV) 分离鉴定及其与欧、美PRRSV抗原的比较[J].中国畜禽传染病, 1998, 20 (4) :193-195.
[3]陆承平.兽医微生物学[M].第3版, 北京:中国农业出版社, 2004, 554-555.
[4]Meng X J, Paul P S, Halbue P G, et al.Phyogenetic analyses of the putative M (ORF6) and N (ORF7) genes of porcine re-productive and respi ratory syndrome virus (PRRSV) :impli cation for the genotypes of two geneotypes of PRRSV in the USA and Europe[J].Arch Virol, 1995, 140 (4) :745-755.
[5]连宏军, 闫丽辉, 刘培欣, 等.13株新城疫病毒强毒株的分离鉴定及部分生物学特性[J].动物医学进展, 2006, 27 (6) :64-69.
[6]杨汉春.动物免疫学[M].第2版, 北京:中国农业大学出版社, 2003, 113-340.
细胞疫苗 篇6
目前, 国家免疫规划的疫苗, 由原来的“5苗防7病”已经扩大到“15苗防17病”。儿童接种的针次也随之增多, 为提高家长对预防接种工作的重视和配合, 降低接种反应, 做好常见副反应的护理, 是摆在我们接种人员面前的一大难题。而在所有规划疫苗中, 副反应发生率最高是百白破。
1 临床资料
选择2007年1月1日—2007年8月31日出生, 在我院完成吸附无细胞百白破4剂次接种的儿童共326例, 男172例, 女154例。并通过询问监护人禁忌证和身体状况, 在详细填写了询问知情同意书签字后的情况下, 共接种1 158剂次, 其中基础疫苗922剂次, 加强免疫236剂次。
2 结果
本组共接种1 158剂次, 其中第1剂次出现副反应3次, 第2剂次发现副反应7次, 第3剂次出现副反应9次, 第4剂次出现副反应17次。
3 接种吸附无细胞百白破后常见的不良反应
是指在预防接种后发生的, 由疫苗本身所固有的特性引起, 对机体只会造成一过性生理功能障碍的反应, 可分为局部反应和全身反应两大类。
3.1 局部分应
局部红、肿、热、痛, 有时伴有硬结。红肿纵横平均直径为弱反应 (≤2.5 cm) 、中反应 (2.6 cm～5.0 cm) 、强反应 (≥5 cm) 。
3.2 全身反应
发热:分轻度 (37.1 ℃～37.5 ℃) 、中度 (37.6 ℃～38.5 ℃) 、重度 (≥38.6 ℃) , 一般在接种当天或次日开始, 2 d或3 d自行消退。部分受种者除体温上升外, 可伴有头痛、眩晕、恶寒、乏力和食欲不振。
4 护理
接种前要询问上次接种吸附无细胞百白破后有无不适及接种后副反应的观察, 嘱咐家长接种后在留观室观察30 min后无特殊状况再离开, 如出现不适及时联系。嘱家长3 d内尽量不要给孩子淋浴, 因为3 d内针眼还没有完全愈合, 防止不洁净的水进入针眼引起感染。
年龄越大接种反应越多, 所以我们接种百白破时尽量在儿童18月龄以后进行。但由于夏天出汗, 接种部位容易发痒, 18月龄以后的儿童无意识的抓挠易引起炎性反应, 若处理不及时极易引起硬结、溃烂, 所以尽可能避免在夏季接种。
如局部有红肿、硬结出现时, 要保持局部清洁, 白天及夜间睡觉要穿长袖衣服, 以避免小儿因瘙痒而抓挠。睡觉时注意不要挤压。较轻的局部反应一般不需要处理。稍重的可用干净的毛巾热敷, 每天2次或3次, 每次10 min～15 min[1]。或用新鲜土豆洗干净后, 用消毒后的刀片切成薄片外敷, 每日最少3次以上。效果不好可改用硫酸镁加甘油混合后外敷。
出现全身反应需要加强观察, 一般不需要任何处理, 必要时适当休息。如发热在38.5 ℃以下, 多饮水, 以促进体内代谢物的排泄和降低体温, 注意保暖, 以防止继发其他疾病。如体温在38.5 ℃以上, 要给予物理降温, 必要时注射退热剂。如极个别出现高热、抽搐等, 应立即送医院治疗, 并停止以后吸附无细胞百白破的接种。
5 讨论
值得一提的是, 目前我们使用的吸附无细胞百白破较以往的全细胞百白破更加安全有效, 即使有反应, 大多也是轻微的。在使用过程中要严格按照《预防接种工作规范》进行, 尽量选择不同部位进行接种, 但在5个月之内, 不要在卡介苗接种过的部位进行, 以降低局部反应几率。所有疫苗均由山西省太原市迎泽区疾控中心领取。再通过对儿童预防接种前、后进行的护理干预, 我们极大地提高了接种吸附无细胞百白破的安全性, 从而把反应减少到最低限度。
参考文献
细胞疫苗 篇7
1 资料与方法
1.1 临床资料
2008年7~12月于我院进行DC疫苗治疗的患者17例, 男15例, 女2例;年龄40~70岁, 平均50岁。GPS评分均在70分以上, 其中, 肾癌10例, 前列腺癌2例, 肺癌、肠癌共5例。
1.2 治疗方法
培养DC疫苗的组织可来源于外周血, 本组患者采集自外周血50~60 ml, 在符合GMP的实验室进行单核细胞的培养、分离、诱导抗原负载、配置和皮下免疫等过程, 7~14 d后回输给患者。DC疫苗的回输方法为皮下注射和静脉输注, 皮下注射在抽血后第7、9、11、13 d分4次注射, 分别在锁骨上、腹股沟、腋窝淋巴丰富处注射, 4次为1个疗程, 每次选择2处进行注射。DC治疗1个疗程约需20 d, 包括外周血单个核细胞采集, 4次皮下DC注射, 2次静脉CIK输注, 12次细胞因子输注及相关的临床观察和检测程序。
2 结果
在17例患者中, 除1例因并发症死亡外, 其他都顺利完成了疗程。有3例在治疗过程中出现低热和寒战, 经过物理降温和抗过敏治疗均恢复正常。17例患者克服了治疗前的紧张情绪, 表现为食欲增加、睡眠改善、精神状态好转等。患者能积极配合治疗, 对治疗过程中出现的不良反应能够正确对待, 使细胞免疫治疗取得了满意疗效。
3 护理
3.1 皮下注射及回输过程中的护理
采取标本进行DC疫苗培养时需严格执行无菌操作。DC疫苗为生物制剂, 解冻后的存放时间不能超过30 min, 如配成滴注液, 则点滴时间不超过30 min。为避免标本凝固, 可先以肝素原液充分润滑注射器后再采取标本。
3.2 DC的不良反应及处理
DC疫苗的常见不良反应为发热、寒战、流感样症状, 注射部位红肿、酸痛、瘙痒不适等。发热常发生于静脉点滴期间或24 h内, 因此在输注后24~48 h内应观察体温, 每日4次。患者回输DC疫苗时, 应注意在每个疗程交替注射的肢体, 每个注射的皮丘间隔3~5 cm, 注射后使用无菌纱布覆盖注射部位, 至药液吸收皮丘消失, 以防患者抓挠皮丘处。
3.3 心理护理
健康教育在DC疫苗治疗中显得尤为重要。对于大多数患者来说, 都存在复杂的心理障碍, 尤其经历了术后复发及放、化疗的患者。在进行DC疫苗治疗前, 护士应对患者进行针对性健康教育和心理指导, 让患者充分了解治疗的原理、效果、治疗过程中可能出现的不良反应及治疗期间注意事项等, 消除患者的疑虑, 以便患者能更好地进行自我护理。对本院收治的17例患者采用自理模式进行护理, 使患者增强了对身体康复的信心。
4 讨论
树突状细胞疫苗在肿瘤治疗中具有显著特点: (1) 传统治疗手段如放疗、化疗, 在治疗肿瘤的过程中对正常组织细胞损伤大, 毒副作用强。树突状细胞疫苗针对肿瘤细胞表达的肿瘤相关抗原或肿瘤特异性抗原发生特异性反应有效激活免疫系统, 杀伤肿瘤细胞, 对正常组织却几乎没有损伤。 (2) 树突状细胞免疫疫苗诱导的免疫记忆功能可产生持久的抗肿瘤反应, 防止肿瘤复发。DC疫苗的应用过程中, 注射部位及注射点皮肤准备对DC疫苗疗效非常重要, DC疫苗一定要在淋巴引流丰富区域, 皮下注射。
笔者认为细胞免疫治疗前充分的心理护理及正确的注射方法和部位, 对提高疗效、减少治疗过程中并发症有重要意义。加强治疗过程中的观察和护理, 患者就可以顺利完成治疗, 提高机体免疫功能, 提高生存质量和生存率。
参考文献
[1]贺兰湘, 张桂梅, 冯作化.负载不同形式肝癌抗原的树突状细胞抑瘤功能的比较[J].细胞与分子免疫学杂志, 2005, 21 (1) :100-117.
[2]谢绍建, 闫庆辉, 单保恩, 等.传染自体胃癌细胞总RNA的树突状细胞诱导个体免疫化治疗的体外实验[J].细胞与分子学杂志, 2006, 22 (1) :92-95.
[3]LanzavecchiaA, Sallusto F.Regulation of T cell immunity by dendritic cells[J].Cell, 2001, 106 (3) :63-266.
[4]Scanlan MJ, Jager D.Challenges to the development of antigen specific breast cancer vaccines[J].Breast Cancer Res, 2001, 3 (2) :95-98.
[5]高斌, 陈红松, 李若冰, 等.慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞亚群相对数量特点的分析[J].免疫学杂志, 2005, 16 (5) :85.
细胞疫苗 篇8
关键词：百白破疫苗,接种,不良反应,预防
吸附无细胞百白破联合疫苗是由百日咳疫苗原液、白喉类毒素原液及破伤风类毒素原液加氢氧化铝佐剂制成, 用于预防百日咳、白喉、破伤风[1]。接种儿童的年龄段为3个月~6周岁。预防接种后的不良反应, 主要与疫苗中的百日咳成分有关。疫苗本身对机体来讲是一种异体异物蛋白质, 具有生物学活性, 可导致机体发生接种反应[2]。接种反应出现的症状和强度, 与儿童的身体状况和疫苗的冷链管理等因素有关, 并且和接种前的准备, 接种时的规范操作, 接种后的正确宣教有密切关系。
1 一般资料
2 0 1 3年1~1 0月我院预防接种门诊接种百白破疫苗共6 3 3 0人次, 基础免疫4 7 5 4人次, 加强免疫1 5 7 6人次。进行回顾性的分析总结。
2 方法
接种前准备充足, 接种时规范操作, 接种后正确宣教。接种后不良反应通过电话随访和儿童家长及监护人及时报告。所有疫苗均由天津市疾病控制中心逐级发放。严格按照免疫程序及疫苗操作规程进行接种。
3 结果
接种6 3 3 0人次中共发生接种不良反应1 0例, 基础免疫1人, 加强免疫9人。以注射部位局部红肿、低热为主, 未出现严重不良反应。通过正确的接种方法, 使我院接种门诊百白破接种不良反应发生率控制在1.6‰, 每位儿童都能有效地接种疫苗, 起到预防疾病的作用。
4 讨论
本文百白破不良反应发生率低于有关报道。如何降低不良反应发生率, 探讨预防措施如下。
4.1 接种人员应加强岗前培训, 掌握百白破疫苗的接种方法和技术要求。如掌握不好, 药液易注入皮下组织, 难以吸收。
4.2 加强冷链管理, 由专人负责, 密切监测并记录冰箱温度变化, 确保疫苗质量。疫苗储存环境为2~8℃冰箱中。使用时疫苗安瓿不能直接接触冰排, 以防冻结。疫苗接种室定期定时进行空气消毒, 室温保持在2 2℃上下, 避免儿童接种过程中受凉。接种门诊应备有肾上腺素、苯海拉明等急救药物, 有发生严重过敏反应时急救用。
4.3 疫苗接种前应细心向家长询问儿童近期的身体健康状况, 既往病史, 有无药物过敏史及接种反应史。患有中枢神经系统疾病 (如脑病, 癫痫) 者及过敏体质的人不能接种。发热、急性疾病、慢性疾病急性发作期应暂缓接种。接种前后尽量避免儿童过分活动, 以防受凉或汗液刺激引起副反应。
4.4 接种前仔细核对疫苗名称, 批号, 有效期及安瓿是否有裂纹, 疫苗开启后应立即使用。使用时应摇振不少于3 0 s, 用注射器反复抽吸并沿安瓿内壁旋转冲刷, 以达到充分混合的效果, 这是降低硬结发生的有效措施[3]。如出现摇不散的凝块, 异物, 疫苗安瓿有裂纹或标签不清者均不得使用。
4.5 接种时严格无菌技术操作, 选择正确的接种部位及方法:臀部或上臂外侧三角肌垂直进针, 深部肌内注射。用7 5%酒精消毒, 棉签由内到外旋转式消毒, 待酒精干后左手绷紧皮肤, 右手持注射器, 与皮肤呈7 0°~9 0°角, 快速刺入针头长度的三分之二, 固定针管, 回抽无血, 注入疫苗后快速拔出针头。
4.6 接种后留观3 0 m i n, 告知家长接种百白破疫苗后可能出现的不良反应, 如:注射部位局部可出现红肿、疼痛、发痒, 全身性反应可有低热, 哭闹等。告知家长一般不需特殊处理, 可自行缓解。告知家长接种疫苗2 4 h后如接种部位出现局部硬结, 应用4 0℃温毛巾热敷, 2次/d, 1 5~2 0 m in/次, 或者用新鲜的土豆片敷注射部位1 5~3 0 m in, 3次/d, 1~2个月即可自行吸收, 注射第2针时应换另侧部位。个别发热儿童可有恶心、呕吐等消化道症状, 经对症处理后均可缓解。接种疫苗后, 给儿童多饮水, 加快新陈代谢, 减少低热情况的发生。如出现高热不退、惊厥等异常情况者, 应及时就医, 以免影响病情。
参考文献
[1]谢亚利, 李汉华, 李贺兰, 等.百白破疫苗接种不良反应原因分析及预防对策[J].中国自然医学杂志, 2009 (6) :446-448.
[2]郑惠玉.儿童接种百白破疫苗后的不良反应原因及预防护理[B].求医问药, 2011, 9 (11) :455.
细胞疫苗 篇9
1 材料与方法
1.1 接种对象与疫苗
受试者为3足月龄无百白破疫苗接种史、无百日咳白喉破伤风疾病史、无百白破疫苗接种禁忌症的健康婴幼儿。观察疫苗为长春长生生物科技股份有限公司生产的吸附无细胞百白破联合疫苗, 批号为20051001, 有效期至2007年10月12日。 对照疫苗为武汉生物制品研究所生产的吸附无细胞百白破联合疫苗, 批号为20050521-1, 有效期至2007年5月18日。
1.2 方法
本试验采用随机、双盲、同类疫苗平行对照设计。观察对象525人以3∶2的比例随机分别接受观察疫苗 (315人) 和对照疫苗免疫接种 (210人) 。符合入选条件的观察对象, 按计划免疫程序每人注射3针, 每针间隔1个月, 注射部位分别在两臀部肌肉, 交替注射0.5 ml/次。
1.3 免疫原性测定方法
1.3.1 血清标本采集:
疫苗接种前和全程接种后1个月各抽取静脉血2.5ml, 分离血清, -20℃以下低温保存。
1.3.2 抗百日咳毒素抗体 (PT) 和抗丝状血凝素抗体 (FHA) 测定:
采用抗PT-ELISA和抗FHA-ELISA方法检测进行;抗白喉 (D) 、抗破伤风 (T) 抗体测定:采用ELISA方法分别检测抗白喉抗体和抗破伤风抗体。
1.3.3 抗体阳转标准:
免疫前为阴性, 免疫后抗体滴度T≥0.1IU/ml、D≥0.1IU/ml、PT≥20 Eu/ml以及FHA≥20 Eu/ml为阳转;若免疫前为阳性, 则免疫后抗体滴度4倍增长为阳转。
1.4 统计处理
试验数据经核对后用SPSS11.0软件进行统计分析。采用Pearson卡方检验或Fisher检验观察疫苗和对照疫苗的4个指标抗体阳转率;观察疫苗免疫前后抗体水平GMT分析, 采用u检验进行组间比较。
2 结果
2.1 受试者分配、脱落及剔除情况
在试验前共有525人签署知情同意书, 最终入选符合受试者条件501人, 其中观察疫苗308人, 对照疫苗193人。最终对入选的501人全部进行了免疫接种, 采集免疫前、免后疫系列血清标本并进行血清学检验。
2.2 两家疫苗免疫后抗体阳转率比较
抗破伤风抗体观察疫苗阳转率为100.00%, 对照疫苗为99.48% (fisher检验、P=0.3852) ;抗白喉抗体观察疫苗阳转率为98.05%, 对照疫苗为97.93% (χ2=0.0006, P=0.9796) ;抗百日咳毒素抗体观察疫苗阳转率为87.99%, 对照疫苗为92.23% (χ2=2.2942, P=0.1299) ;抗丝状血凝素抗体观察疫苗阳转率为93.18%, 对照疫苗为93.78% (χ2=0.0695, P=0.7920) 。两家疫苗4种抗体阳转率的差别均无统计学意义, 见表1。
2.3 观察疫苗免疫前后抗体GMT比较
观察疫苗抗破伤风抗体GMT水平免前为1.102 3、免后为4.398 5, 免前与免后的差别有统计学意义 (U=-52.372 6, P=0.000 0) , 免后高于免前, 免后抗体水平是保护水平的33倍;抗白喉抗体GMT水平免前为0.016 0、免后为0.882 5, 免前与免后的差别有统计学意义 (U=-37.710 1, P=0.000 0) , 免后高于免前, 免后抗体水平是保护水平的8.8倍;抗百日咳毒素抗体GMT水平免前为5.000 0、免后为36.000 0, 免前与免后的差别有统计学意义 (U=-44.389 5, P=0.000 0) , 免后高于免前。免后抗体水平是保护水平的1.8倍;抗丝状血凝素抗体GMT水平免前为8.000 0、免后为43.500 0, 免前与免后的差别有统计学意义 (U=-41.047 7, P=0.000 0) , 免后高于免前, 免后抗体水平是保护水平的2.2倍。
3 讨论
本次长春长生吸附无细胞百日咳、白喉、破伤风联合疫苗现场试验结果表明:观察疫苗免疫后, 破伤风抗毒素水平达0.1IU/ml (国际标准) 以上的为100.00%、白喉抗毒素水平达0.1IU/ml (国际标准) 以上的为98.05%, 分别高于《预防接种工作规范》[3]免疫成功率≥85%和≥80%的标准;而百日咳抗体阳转所使用的标准 (≥20 Eu/ml) , 远高于欧洲目前的标准 (≥5 Eu/ml) , 百日咳抗体的阳转率在本次试验中为抗百日咳毒素抗体阳转率为87.99%, 抗丝状血凝素抗体阳转率为93.18%。观察疫苗各种抗体GMT水平免前与免后的差异有统计学意义。
试验结果表明:长春长生吸附无细胞百白破联合疫苗与武汉生物制品研究所生产的无细胞百白破联合疫苗相比, 免疫后抗破伤风抗体、抗白喉抗体、抗百日咳毒素抗体以及抗丝状血凝素抗体阳转率差异均无统计学意义。与侯启明、孙海燕等[4,5]研究结果相符合。
从4种抗体的阳转率、抗体GMT水平来看, 长春长生吸附无细胞百日咳、白喉、破伤风联合疫苗在受试人群中具有良好的免疫原性。
参考文献
[1]国家食品药品监督管理局.药物临床试验质量管理规范[S].2003年8月6日.
[2]国食药监注[2004]575号.疫苗临床试验技术指导原则[S].
[3]卫生部卫疾控发[2005]373号.预防接种工作规范[S].
[4]侯启明, 马霄, 张庶民, 等.三组分的无细胞百白破联合疫苗安全性和免疫原性研究[J].中国计划免疫, 2003, 9 (5) :253.
