甲砜霉素

甲砜霉素（精选四篇）

甲砜霉素篇1

目前, 对于蜂胶中氯霉素的检测报道很多[4,5], 而对多种氯霉素类药物的同时测定, 国内外尚未见报道。本试验采用HPLC-MS/MS法建立了蜂胶中氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素残留的定性定量检测方法。为缩短测定周期和消除基质干扰, 对萃取和洗脱条件进行了优化。本试验方法灵敏准确, 简便快速, 重现性好, 能够满足蜂胶进出口检测的要求。

1 试验部分

1.1 材料与试剂

氯霉素标准品 (CAP) 、甲砜霉素标准品 (TAP) 、氟甲砜霉素标准品 (FF) 纯度均≧99.9%, Dr Ehrenstorfer Gmb H;乙酸乙酯、正己烷、无水硫酸钠、醋酸铅和乙醇均为分析纯;水为超纯水;甲醇为色谱纯;25%氨水 (1m L氨水加入到3m L纯净水中混匀) ;碱化乙酸乙酯:乙酸乙酯/25%氨水=97/3 (体积比) 。

1.2 仪器与设备

液相色谱-质谱仪:Waters超高效液相色谱-四极杆串联质谱仪 (ACQUITYTMUPLC/TQ Detector) ;涡旋振荡器;离心机:4 000r/min;旋转蒸发器;Oasis HLB固相萃取小柱:500mg;10m L容量瓶;微孔滤膜:0.45μm;Millipore纯水机。

1.3 试验方法

1.3.1 标准工作液的配制

分别准确称取0.010 0g氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素标准品, 置于100m L容量瓶中, 用甲醇定容, 混匀, 配制成标准储备溶液, 1~4℃冰箱保存。根据所需用流动相配制成一系列适当浓度的混合标准工作溶液。

1.3.2 样品处理

称取2g蜂胶粉末 (精确到0.01g) 置于50m L具塞离心管中, 加入5m L乙醇, 超声处理20min, 使蜂胶彻底溶解。加入10m L水于涡旋混合器上2 000r/min涡旋3min, 加10m L4%醋酸铅溶液, 2 000r/min涡旋振荡2min, 静置10min, 然后3000r/min离心5min, 过滤, 提取液置于50m L离心管中。样品残渣中再加入10m L4%醋酸铅溶液, 2 000 r/min涡旋振荡2min, 静置10min, 3 000 r/min离心5min, 过滤, 提取液合并至50m L离心管中。合并提取溶液中加入20m L碱化乙酸乙酯, 涡旋1min, 2 500r/min离心3min, 取上层乙酸乙酯溶液到20m L玻璃试管中并在50℃以下水浴减压浓缩至近干。依次用4m L正己烷和4m L水将残渣转移至10m L具塞玻璃离心管中, 并于2 000r/min涡旋振荡1 min, 然后2 000r/min离心3min。上层正己烷溶液弃去, 再加4m L正己烷, 重复上述操作。水层转移至Oasis HLB固相萃取小柱, 再用10m L水分次洗涤离心管, 洗涤液过HLB小柱, 弃去流出液, 用6m L甲醇洗脱, 收集全部洗脱液, 加水定容至10m L, 混匀, 通过0.45μm滤膜 (5.7) , 供HPLC-MS/MS测定。

1.3.3 色谱测定条件

色谱柱:Eclipace XDB-C18, 5μm, 150mm×4.6mm (i.d.) 流动相梯度洗脱程序见表1。流速:800μL/min;进样量:8μL;色谱柱温度:20℃。

1.3.4 质谱测定条件

离子源:电喷雾离子源;扫描方式:负离子扫描;检测方式:多级离子反应监测 (MRM) ;电喷雾电压 (IS) :-4 250V;雾化气压力 (GS1) :55Psi;气帘气压力 (CUR) ;离子源温度 (TEM) :550℃;去簇电压 (DP) :-70V;定性离子对、定量离子对、碰撞气能量 (CE) 及碰撞室出口电压 (CXP) 见表2。

2 结果与讨论

2.1 质谱条件的选择及优化

根据氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素三个目标物的结构特征, 将1μg/m L的氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素的混合标准溶液选择ESI负离子电离模式, 进行一级质谱母离子全扫描。测定氯霉素、甲砜霉素、和氟甲砜霉素的分子离子分别为m/z 321.0, 354.0和355.8, 然后以测出的分子离子作为母离子, 进行子离子扫描, 结果见图1。在这种质谱条件下, 氯霉素主要产生m/z 257.0, 121.0, 175.9和152.0等子离子;甲砜霉素主要产生m/z290.0和184.8等子离子;氟甲砜霉素主要产生m/z335.7和184.9等子离子。各目标物选用离子丰度最强的碎片离子作为定量离子, 丰度次强的碎片离子作为定性离子。为了得到最佳质谱条件, 对锥孔电压和碰撞能量进行配比优化, 从而使选定的母离子和子离子组成的特征离子的丰度和比例达到最佳, 结果见表2。

2.2 色谱条件的优化

氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素属于弱极性化合物, 为目标物的色谱峰得到较好的分离效果, 本试验对Symmety C18色谱柱和Eclipace XDB-C18色谱柱进行比较。结果表明:以水-甲醇为流动相, 采用梯度洗脱的方式, 流速为800μL/min, 在8min内, 氯霉素、甲砜霉素与氟甲砜霉素均得到了较好的分离。所得色谱图见图2。

2.3 线性范围和灵敏度

氯霉素、甲砜霉素与氟甲砜霉素为内标, 配制0.1~50ng/m L的混合标准溶液。以标准品与内标物峰面积比值Y为纵坐标, 工作溶液的质量浓度ρ (μg/L) 为横坐标制作标准曲线。结果表明, 3种目标物的线性关系良好, 相关系数R2均大于0.997, 符合要求。以信噪比 (S/N) 为5, 确定为方法的检出限, 所得数据见表3。

2.4 回收率与精密度

将0.1、2、10μg/kg 3个不同水平的标准工作液添加到在空白样品中。每个添加水平进行3次实验, 每次实验平行测定3次, 进行加标回收率实验。结果表明:氯霉素的回收率为67.3%~119.3%, 变异系数为2.85%~12.59%;甲砜霉素的回收率为90%~121%, 变异系数为1.34%~12.97%;氟甲砜霉素的回收率为76.27%~119%, 变异系数为0.82%~13.2%, 符合国内外有关标准和法规的要求。

3 结论

通过实验建立了应用HPLC-MS/MS同时测定蜂胶中氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素残留的方法。该方法具有操作简便、灵敏度高、测试周期短等优点, 同时检出限比目前国际上氯霉素类药物的残留检出限0.1μg/kg低1个数量级。该方法适合于对蜂胶中氯霉素类药物的残留确证, 为我国蜂胶的食用及出口提供了技术支持。

参考文献

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[4]张晓燕, 张睿等.高效液相色谱-串联质谱法测定蜂胶中的氯霉素[J].色谱, 2012, (3) :314-317.

甲砜霉素肠溶片说明书篇2

【英文名称】ThiamphenicolEnteric-coatedTablets

【拼音全码】JiaZuoMeiSuChangRongPian(BiDi)

【主要成份】甲砜霉素。

【性状】甲砜霉素肠溶片(彼迪)为肠溶片，除去包衣后显白色。

【适应症/功能主治】用于敏感菌如流感嗜血杆菌、大肠埃希菌、沙门菌属等所致的呼吸道、尿路、肠道、尿路、肠道等感染。

【规格型号】0.25g*12s

【用法用量】口服，成人一日1.5～3g，分3～4次，儿童按体重一日25～50mg/Kg，分4次服。

【不良反应】1.可发生腹痛，腹泻、恶心、呕吐等消化道反应，其发生率在10%以下。2.偶见皮疹等过敏反应。3.早产儿及新生儿中尚未发现有“灰婴综合征”者。仅有个例报道有出现短暂性皮肤和面色苍白。4.甲砜霉素肠溶片(彼迪)亦可引起造血系统的毒性反应，主要表现为可逆性红细胞生成抑制，白细胞减低和血小板减低;发生再生障碍性贫血者罕见。

【禁忌】对甲砜霉素肠溶片(彼迪)过敏者禁用。

【注意事项】1、患者在治疗过程中应定期检查周围血象，疗程较长者尚需检查网织细胞计数，以及时发现血液系统不良反应。 2、肾功能不全者甲砜霉素排出减少，体内可有蓄积倾向，应减量应用。 3、老年患者用药应根据肾功能调整用药。

【儿童用药】尚不明确。

【老年患者用药】尚不明确。

【孕妇及哺乳期妇女用药】妊娠期，尤其妊娠后期妇女应尽量避免应用，哺乳期妇女用药时应暂停哺乳。

【药物相互作用】1.抗癫痫药(乙内酰脲类)。由于甲砜霉素肠溶片(彼迪)可抑制肝细胞微粒体酶的活性，导致此类药物的代谢降低，或甲砜霉素肠溶片(彼迪)替代该类药物的血清蛋白结合部位，均可使药物的作用增强或毒性增加，故当与甲砜霉素肠溶片(彼迪)同用时或在其后应用须调整此类药物的剂量。2.甲砜霉素肠溶片(彼迪)与降血糖药(如甲苯磺丁脲)同用时，由于蛋白结合部位被替代，可增强其降糖作用，因此需调整该类药物剂量。格列吡嗪和格列苯脲的非离子结合特点受影响较其他口服降糖药为小，但两者合用时仍须谨慎。3.长期口服含雌激素的避孕药者同时服用甲砜霉素肠溶片(彼迪)时，可使避孕的可靠性降低，以及经期外出血增加。4.由于甲砜霉素肠溶片(彼迪)可具有维生素B6拮抗剂的作用或使后者经肾排泄量增加，可导致贫血或周围神经炎。因此甲砜霉素肠溶片(彼迪)与维生素B6同用时后者的剂量应适当加。5.甲砜霉素肠溶片(彼迪)可拮抗维生素Bl2的造血作用，因此两者不宜同用。6.与某些骨髓抑制药合用时，可增强骨髓抑制作用，抗肿瘤药物、秋水仙碱、羟基保泰松、保泰松和青霉胺等均属此类药物。

【药物过量】尚不明确。

【药理毒理】甲砜霉素肠溶片(彼迪)口服后吸收迅速而完全，正常人口服400mg后2小时血药浓度达峰值，为4mg/L。剂量增加时，血药浓度也相应增高。连续用药在体内无蓄积现象。甲砜霉素吸收后在体内广泛分布，以肾、脾、肝、肺等中的含量较多，比同剂量的氯霉素约高3～4倍。血半衰期约1.5小时，肾功能正常者24小时内自尿中排出给药量的70%～90%，部分自胆汁中排泄，胆汁中浓度可为血药浓度的几十倍。甲砜霉素在体内不代谢，故肝功能异常时血药浓度不受影响。

【药代动力学】尚不明确。

【贮藏】密封。

【包装】12片/盒。

【有效期】24月

【批准文号】国药准字H3858

【生产企业】广东彼迪药业有限公司

甲砜霉素篇3

国内外文献报道[3~6], 欲测定某种药物体外抗菌活性, 通常是在在特定环境下其抑制某种微生物出现明显增长的最低药物浓度即最小抑菌浓度。药物最小抑菌浓度测定方法主要有常量肉汤稀释法, 微量肉汤稀释法, 琼脂稀释法。作者以微量肉汤稀释法为基础, 首次采用氯化三苯基四氮唑 (TTC) 比色法, 以血清型O78大肠杆菌为试验菌株, 测定了甲砜霉素、氟甲砜霉素原料药溶液和相应浓度的包合物溶液的最小抑菌浓度。TTC比色法测定药物最小抑菌浓度 (MIC) 的原理[7~9]:无色的TTC和活细菌内的脱氢酶反应, 生成红色而不溶于水的三苯甲臢 (TPF) , TPF比较稳定, 不会被空气中的氧自动氧化, 如果没有活的细菌或活细菌的量很少, 则氯化三苯基四氮唑 (TTC) 不会被还原, 溶液呈无色, 因此, 氯化三苯基四氮唑 (TTC) 可作为细菌是否存活的显色剂。

1 仪器与材料

1.1 仪器

VX-100漩涡混合仪 (美国Labnet, 附件含有酶标板的振荡板、离心管振荡板) ;SWCJ2FD型超净工作台 (苏州净化设备有限公司) ;LRH250S恒温恒湿培养箱 (广东省医疗厂) ;全自动YXQLS50SⅡ立式电热压力蒸汽灭菌器 (上海博迅公司医疗厂) ;FA1604电子天平 (上海精密仪器仪表有限公司) ;移液器 (20~200μL, 芬兰) ;移液器 (100~1000μL, 芬兰) ;移液器 (1000~5000μL, 芬兰) 。

1.2 材料

1.2.1 药物

甲砜霉素-羟丙基-β-环糊精包合物 (江苏省动物药品工程研发中心自制, 含量为19.69%) ;氟甲砜霉素-羟丙基-β-环糊精包合物 (江苏省动物药品工程研发中心自制, 含量为6.90%) 、甲砜霉素 (江苏省倍康药业有限公司提供, 含量99.2%) ;氟甲砜霉素江苏省倍康药业有限公司提供, 含量99.7%) , 2, 3, 5-氯化三苯四氮唑 (简称TTC) 。

1.2.2 试验菌株

备注: (1) “-”表示无细菌或生长受抑制, 培养液清亮; (2) “+”表示有细菌生长, 培养液呈红色。

鸡大肠杆菌O78, 由扬州大学动物科技学院提供, 由江苏畜牧兽医职业技术学院动物药学系微生物实验室活化培养。

1.2.3 肉汤培养基

称取蛋白胨10g、牛肉浸出粉3.0g、氯化钠5g, 将其混合后, 加蒸馏水适量微温溶解, 再加水至1000mL, 调节pH为弱碱性, 煮沸, 滤清, 调节pH值使灭菌后为pH7.0±0.2, 分装, 灭菌[2]。

1.2.4 4%TTC溶液

准确称取TTC2g, 溶于少量灭菌水中, 定容到50mL。置于冰箱中冷藏保存。临用时用肉汤稀释稀释至需要的浓度[7]。

1.2.5 甲砜霉素/氟甲砜霉素及其包合物原液的配制

分别精密称取甲砜霉素/氟甲砜霉素及其包合物适量, 按无菌操作溶于适宜的溶剂中, 并稀释适当体积, 使其含量均为1000μg/mL。待用。

2 实验方法

2.1 试验菌种悬液的制备

将大肠杆菌培养液接种肉汤培养基置37℃培养6h~8h, 增菌后的对数生长期菌液, 用生理盐水稀释至0.5麦氏比浊标准, 约含大肠杆菌1×108CFU/mL, 然后再用肉汤培养基稀释100倍后使用, 约含大肠杆菌1×106CFU/mL。

2.2 TTC肉汤显色液

按无菌操作, 量取4%TTC0.5mL, 用肉汤稀释至100mL, 此时, TTC浓度为0.02%。

2.3 甲砜霉素/氟甲砜霉素及其包合物使用液的配制

分别精密量取甲砜霉素-羟丙基-β-环糊精、甲砜霉素原料、氟甲砜霉素-羟丙基-β-环糊精包合物、氟甲砜霉素原料药抗菌药物原液1mL, 分别用肉汤液稀释至5mL。其使用液浓度为200μg/mL。

2.4 甲砜霉素/氟甲砜霉素及其包合物抗菌活性测定

取1张无菌96孔板, 采用二倍稀释法测定。在每组1~12号孔, 加入肉汤液各0.2mL。然后在第A1、B1加入0.2mL甲砜霉素-羟丙基-β-环糊精抗菌药物使用液, 第C1、D1加入0.2mL甲砜霉素原料药抗菌药物使用液, 第E1、F1浓度加入0.2mL氟甲砜霉素-羟丙基-β-环糊精包合物抗菌药物使用液, 第G1、H1加入0.2mL氟甲砜霉素原料药抗菌药物, 然后吸取0.2mL至第2孔, 混匀后再吸取0.2mL至第3孔, 如此连续倍比稀释至第10孔, 并从第10孔中吸取0.2mL弃去, 混匀, 此时每组1~10号的药物浓度依次为100、50、25、12.5、6.25、3.13、1.56、0.78、0.39、0.20μg/mL。然后后在每组1~10号孔内加入上述制备好的被测菌种悬液、TTC肉汤液各0.1mL, 此时每组1~10号的药物浓度依次为50、25、12.5、6.25、3.13、1.56、0.78、0.39、0.20、0.10μg/mL。最后, 在第11号孔加试验菌种悬液、TTC细菌显色液各0.1mL, 作无药生长对照, 第12号孔加细菌显色液各0.2mL作无菌对照。涡旋振荡混匀, 于37℃培养12h~18h观察结果。以未生长菌 (即未显红色) 的最低药物浓度作为MIC。

3 结果与讨论

3.1 甲砜霉素/氟甲砜霉素及其包合物抗菌活性

抗菌试验结果, 如图1和表1所示。

结果表明, 当甲砜霉素-羟丙基-β-环糊精包合物、甲砜霉素原料药当其药液的浓度大于12.5μg/mL时, 96孔板上A、B、C、D组的相应试验孔均无细菌生长, 其最低抑菌药物浓度 (MIC) 相同, MIC值12.5μg/mL;当氟甲砜霉素-羟丙基-β-环糊精包合物、氟甲砜霉素原料药当其药液的浓度大于1.56μg/mL时, 96孔板上E、F、G、H组的相应试验孔均无细菌生长, 其最低抑菌药物浓度 (MIC) 相同, MIC值1.56μg/mL。这说明甲砜霉素/氟甲砜霉素被包合后抗菌活性未受影响。

3.2 菌接种量、体外培养时间及TTC浓度的对最小抑菌浓度的影响

3.2.1 菌接种量

文献报道[9], 接种菌液的浓度与药物的最小抑菌浓度 (MIC) 有关, 在温度、培养时间相同时, 药物MIC值随着接种量的增大而升高, 为使试验条件保持一致, 将所有菌株接种浓度确定为2.5×105cfu·mL-1。

3.2.2 体外培养时间

文献报道[10]体外培养时间-MIC曲线显示药物的MIC在温度、接种量相同时, 随着培养时间的延长而趋于稳定, 为了得到稳定的MIC, 培养时间确定为16h。

3.2.3 TTC浓度

据文献报道[11], 显色剂TTC的最终浓度过低影响显色反应, 失去指示作用, 浓度过高有抑菌作用, 最佳浓度为0.005%TTC。另有文献报道[12], 显色剂TTC浓度过高对革兰氏阳性细菌有明显抑制作用, 对革兰氏阴性细菌无明显抑制作用。因此, 作者把TTC的最终浓度定为0.005%, 并选择革兰氏阴性细菌大肠杆菌作为试验菌株。

3.3 TTC比色法的应用价值

T T C比色法既可用于药物残留的检测, 还可用药物体外抗菌活性的测定。如果将细菌还原产物三苯甲臢 (TPF) 溶于适当溶剂, 用酶标仪测定其吸光度, 则可对血浆等样品中微量药物进行定量分析。

4 结语

该研究结果表明:甲砜霉素、氟甲砜霉素用羟丙基-β-环糊精包合物后, 在试验条件下, 其体外抗菌能力未受影响。TTC比色法简便、快捷, 用于药物残留的检测, 还可用药物体外抗菌活性的测定, 甚至生物样品的定量分析。由于大肠杆菌对氟甲砜霉素的敏感度要比甲砜霉素强, 因此, 在治疗鸡大肠杆菌疾病时, 最好应使用动物、畜禽专用抗生素氟甲砜霉素, 以减少治疗用量, 降低药物的残留。

摘要：目的:考察甲砜霉素、氟甲砜霉素被包合后, 其体外抗菌活性的变化情况。方法:分别配制一系列不同浓度的甲砜霉素、氟甲砜霉素原料药溶液和相应浓度的包合物溶液, 在以O78大肠杆菌为试验菌株的情况下, 氯化三苯基四氮唑 (TTC) 作为细菌是否存活的显色剂, 测定其最小抑菌浓度。结果:在体外试验条件, 甲砜霉素、氟甲砜霉素包合物的最小抑菌浓度与其原料药是相同, 体外抗菌活性未受影响。结论:该方法简便、快速、准确, 可用于甲砜霉素/氟甲砜霉素-羟丙基-β-环糊精包合物抗菌活性的测定。

关键词：TTC法,甲砜霉素,氟甲砜霉素,包合物,抗菌活性

参考文献

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甲砜霉素篇4

甲砜霉素、氟苯尼考作为广谱抗菌药临床应用较多, 但二者在动物性食品中残留易导致致病菌株产生耐药性[1]。可潜在危害人类的免疫机能, 抑制血细胞和血小板的生成, 易诱发粒细胞缺乏症、再生障碍性贫血等疾病[2]。

试验采用高效液相色谱 (HPLC) 建立测定甲砜霉素、氟苯尼考的药物残留检测方法, 操作便捷, 快速, 灵敏度高, 可同时测定牛奶中的甲砜霉素和氟苯尼考的药物残留。

1 材料

1.1 主要仪器

高效液相色谱仪 (型号为996) , Waters公司生产;漩涡混合器 (型号为Ms1 Minshaker) , IKA公司生产;离心机 (型号为HIMAC CF 16 RX) , HITACHI公司生产;电子天平 (型号为PB602-N) , 梅特勒-托利多仪器公司生产;去离子水发生器 (型号为Milli-Q) , 北京德泉兴业商贸公司提供。

1.2 主要试剂

甲砜霉素标准品 (纯度为99.7%) 、氟苯尼考标准品 (纯度为99.3%) , 均由中国兽医药品监察所提供;所用乙腈、乙酸乙酯为色谱纯试剂, Fisher scientific公司提供;Oasis®HLB 6 cc (500 mg) 固相萃取小柱, Waters公司生产。

2 方法

2.1 样品处理

称取牛奶试料 (5.00±0.05) g, 置于50 m L离心管中, 加入乙酸乙酯15 m L, 涡旋混匀, 中速振荡5 min, 5 000 r/min离心5 min。取上清液置于50 m L鸡心瓶中, 再用乙酸乙酯15 m L重复提取残渣1次, 合并2次提取液, 45℃旋转减压蒸发至近干。加水5 m L, 正己烷5 m L于鸡心瓶中充分溶解, 转至50 m L离心管中, 再加水5 m L, 正己烷5 m L于鸡心瓶中重复溶解后转至同一离心管中。中速振荡5 min, 8 000 r/min离心5 min取下层液, 备用。HLB固相萃取柱依次用乙腈、水各5 m L活化;取备用液过柱, 挤干。用乙腈5 m L洗脱, 洗脱液于45℃条件下用氮气吹干, 准确加入流动相1.0 m L溶解残留物, 过膜, 供高效液相色谱仪测定。同步进行空白添加试样。

2.2 HPLC条件

色谱柱为Waters Symmtry C18 (250×4.6 mm, 5μm) , 检测波长为225 nm, 柱温为30℃, 流速为1.0 m L/min, 流动相为乙腈与水的比例为25∶75, 进样量为20μL。

2.3 标准曲线的制备

精密量取适量的甲砜霉素、氟苯尼考标准工作液加入乙腈+水 (25∶75) 溶液, 制成20, 50, 125, 250, 500 ng/m L系列对照溶液, 供高效液相色谱仪测定。

3 结果与分析

3.1 试验图谱 (见图1~3)

3.2 方法的线性范围及灵敏度

本方法的标准曲线线性关系良好, 在0.02~0.5μg/m L的质量浓度范围内甲砜霉素质量浓度 (x) 与其峰面积 (y) 的标准曲线线性方程为y=40.46x+267.37, 相关系数 (r2) =0.999 6;氟苯尼考质量浓度 (X) 与其峰面积 (Y) 的标准曲线线性方程为Y=40.352X+200.66, r2=0.999 4。

3.3 方法的回收率和精密度

准确称取试料 (5.00±0.05) g, 置于50 m L离心管中, 添加不同浓度的标准工作液, 使得空白牛奶中甲砜霉素和氟苯尼考添加量分别为0.025, 0.050, 0.100μg/m L, 每个添加量设6个平行, 经2.1的方法提取和净化后, 供高效液相色谱仪测定, 以外标定量法计算添加回收率, 见表1。

3.4 实际样品测定

将本方法用于北京城区4个奶站的10份牛奶样品的甲砜霉素、氟苯尼考残留量的测定, 根据化合物的保留时间与标准品比较鉴别样品, 所测定的样品均未检出甲砜霉素和氟苯尼考残留。

4 讨论

4.1 检测波长的确立

试验采用高效液相色谱仪 (型号为996) , 在225 nm波长处甲砜霉素保留时间为7.47 min, 氟苯尼考保留时间为18.8 min, 2个峰间隔时间较长, 色谱峰峰型较佳, 且均为基线分离峰。空白试料提取液在上述保留时间无干扰峰出现 (见图2) , 检测波长确定为225 nm。

4.2 固相萃取柱及样品溶解液洗脱液的选择

试验过程中, 先后选择了Sep-Pak Vac C18 (3 cc) , OasisHLB (6 cc) , SUPELCEAN LC-C18 (3 cc) 3种固相萃取柱, 通过色谱峰的分离及回收率的比较, 使用OasisHLB (6 cc) 固相萃取柱效果最好。

先后选择了甲醇和乙腈作为样品的溶解液及洗脱液, 试验结果表明, 二者差别不大, 考虑到与流动相的匹配, 最终选用了乙腈作为洗脱液, 乙腈+水为25∶75为样品的溶解液。

5 结论

试验建立了采用高效液相色谱法同时测定牛奶中甲砜霉素、氟苯尼考的检测方法, 前处理操作方法简便, 快速, 重复性好, 提高了检测效率, 也可减少动物性食品中的残留物质蓄积对人体造成的伤害。

参考文献

[1]罗昭军, 韦良云, 李军.高效液相色谱法检测牛奶中甲砜霉素残留的研究[J].广西农业科学, 2009, 40 (11) :1489-1493.