疫苗质量

关键词：

疫苗质量（精选十篇）

疫苗质量 篇1

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的以偶蹄动物为主要感染对象的急性热性、高度传染性疫病, 世界动物卫生组织 (OIE) 将其列为必须通报疫病, 我国农业部将其列为一类动物疫病[1]。

1.1 口蹄疫的流行情况慨况

口蹄疫的流行在不同地区表现为不同的季节性。它的流行方式主要有扩散式和跳跃式。扩散式是由一点或一块逐渐向周围蔓延扩散;跳跃式是由一点到远距离的地方出现新疫点。气温比较低时口蹄疫常出现这种远距离传播。该病具有多型性、宿主广泛性、传染力强、周期性流行性等特点, 一旦发生呈流行或大流行。口蹄疫传播途径较多, 速度快, 潜伏期一般在1~7 d, 平均为2~4 d, 该病一般呈良性经过, 经一周左右即可自愈, 若蹄部有病变则可延至2~3周或更久;死亡率为1%~2%, 该病型叫良性口蹄疫, 有些病畜在愈合过程中病情突然恶化, 全身衰弱, 反刍停止, 站立不稳等症状, 往往因心脏麻痹而突然死亡, 这种病型叫恶性口蹄疫, 死亡率高达25%~50%[1]。目前我国为了控制口蹄疫的疫情, 采取了综合防治的措施, 一旦发现疫情应立即实行封锁、隔离、检疫、消毒等措施, 将疫情控制在可控范围内。在未发现疫情地区应及时注射口蹄疫疫苗, 防止疫情的出现。

1.2 口蹄疫病毒的属性及特征

口蹄疫病毒为微RNA病毒科、口蹄疫病毒属的成员。该病毒具有多型性和变异性, 目前已发现O型、A型、C型、南非3型、和亚洲1型共7个血清型, 每一个型又分为若干亚型。各血清型之间不能产生交叉免疫, 感染某型病毒后康复的动物或免疫某型病毒疫苗后的动物, 仍可感染其他型的病毒[2]。口蹄疫病毒 (FMDV) 的非结构蛋白基因在第153处aaa氨基酸处属于保守序列, 基因敲出aaa氨基酸导致细胞无法正常生长, 使牛机体发生疫病[3]。

2 疫苗

2.1 动物疫苗的作用

疫苗是将病原微生物及其代谢产物, 经过人工减毒、灭活或利用基因工程等方法制成的用于预防传染病的免疫制剂。其作用是接种动物机体后, 刺激机体产生特异性的抗体, 当体内的抗体滴度达到一定数值后, 就可以抵抗特定病原微生物的侵袭, 感染起到预防某种疾病的作用。

2.1 动物疫苗的种类

动物疫苗从大范围来讲, 可以分为细菌性疫苗和病毒性的疫苗。细菌性的疫苗是由细菌、霉形体、螺旋体制成的主要包括弱毒苗和灭活苗。细菌性疫苗一般采用继代后合格的菌种接种于适宜培养基进行大量的繁殖、收集培养物、活苗的分装及冻干或灭活苗的灭活及配苗、检验。病毒疫苗是由病毒制成的, 包括活病毒性疫苗, 死病毒性疫苗两类[4]。病毒性疫苗一般是采用毒种的鉴定、选择和制定病毒培养材料、病毒增殖、收毒, 活苗的分装及冻干;死苗的灭活及配制、疫苗的检验。

3 疫苗生产

3.1 抗原含量检测

口蹄疫病毒的7种血清型不具有相同的抗原性, 不论哪种血清型都会引起疫情的暴发, 病毒在不断流行与暴发过程中特异性发生了改变, 出现了优势毒株, 因此防治变得更加困难, 世界各地广泛流行传播, 不仅对国家和当地的畜牧业生产造成了严重的损害, 而且对国际及地区间的产品贸易往来带来了不小的影响, 世界范围内因口蹄疫的影响已造成了百亿美元的经济损失, 因此对疫苗抗原性的检测是非常必要的。其中主要的检测方法有ELISA方法和酶联免疫电转移印记法 (EITB) [5]。

随着口蹄疫病毒在世界的传播, 国内外对该病毒疫苗的研究也越发的重视, 从传统疫苗的研究到新型疫苗的研究, 国内外进展的突破不容小视。弱毒疫苗虽然用量少, 成本低, 但是此种疫苗对易感动物存在一定的危险性, 运输及保存也受到很大程度的限制;灭活疫苗是迄今为止世界用的最为广范的疫苗比较的安全可靠, 但是它的免疫性较差, 成本高, 容易使动物产生应激;基因工程亚单位疫苗由于只含有病原体的一部分, 动物接种后不会因为病原体而发病, 提高了疫苗的安全性, 目前在国内已经逐渐推广使用;合成肽疫苗, 减少了动物的过敏反应, 诱导免疫应答和中和抗体的水平提高, 可以保持较长的免疫持续期;活载体疫苗是近年来科学家们研究的重点, 通常采用非致病微生物作载体构建重组体来制备多价联苗, 由于口蹄疫病毒感染具有持续性, 因此对该种疫苗的研究引起了较多的关注;核酸疫苗在免疫的长效性和稳定性上具有一定的优势。迄今为止口蹄疫病情的扩散各地区大多采用灭活疫苗进行接种, 但是灭活疫苗有自身的缺点, 并不能很好的加强免疫效果, 为了可以增强免疫持续期并且可以成本生产, 其他类型疫苗的研发变得尤为的重要。正因为我们要克服各种原因对疫苗的影响, 我们要加紧找到突破点, 找到合适的口蹄疫疫苗进行免疫是我们目前刻不容缓的问题所在。

3.2 抗原性特点

FDMV由四种结构蛋白VP1、VP2、VP3、VP4形成五聚体单位, 构成病毒的空衣壳, 成二十面体。完整病毒粒子是空衣壳包裹一个分子的RNA组成, 分子量为6.9×i0Ku。四个结构蛋白构成的五聚体用组氨酸聚合成病毒衣 (75S) , 组氨酸残基的电离常数约为7.0, 所以口蹄疫病毒对酸敏感, p H值低于7.0环境能使病毒结构蛋白遭受破坏, 导致RNA暴露外环境而失去活性。氧化剂如部分醛类和过氧化物、卤族化合物、酸碱类物质都能使病毒结构蛋白破坏或RNA降解而病毒灭活。FMDV粒子的表面抗原位点包括线性和构象位点, 线性位点主要与表位的一级结构———氨基酸序列有关, 构象位点主要与病毒结构有关。研究表明, FMDV的病毒结构蛋白均参与抗原位点的构成, 而且线性位点少, 易变;构象位点多, 保守。FMD抗原位点多位于空衣壳蛋白的环结构上[6] (如VPI的G-H环) 。口蹄疫疫苗抗原灭活时, 必须考虑结构蛋白空衣壳 (75S) 的破坏程度, 特别是VP1的G-H环 (134~160位残基, 重要的抗原中和位点) 。由于上述四种结构蛋白都参与抗原位点的构成, 并在不同血清型中表现出不同位点。所以灭活抗原应尽可能不破坏病毒的结构蛋白或者是把破坏降到最低程度, 而且保证病毒RNA彻底破坏达到灭活目的, 以防病毒可能具有感染能力。

3.3 病毒的灭活

对于口蹄疫病毒的灭活最早使用的FMDV抗原灭活剂是被认为“经典”灭活剂的甲醛[7]。灭活机理是通过病毒蛋白的交联 (cross-1inking) 作用是使FMDV失去活性, 而不能作用于病毒的RNA。灭活过程不符合一级动力学原理 (first order kinetics) , 所以甲醛的灭活效果不确定。20世纪80年代后, 采用氮丙啶类 (Aziridine) 为灭活剂如。乙酰乙烯亚胺 (acetylethy-lenimine, AEI) , 其灭活曲线为线性, 由于主要作用于核酸, 所以对抗原的破坏小, 但毒性较大[8], 而且用PEG浓缩的FMD病毒液灭活时也出现灭活动态曲线拖尾现象。Bahnemanm (1975年)[9]采用二乙烯亚胺 (Binary ethy1eneim ine, BED替代了AEI作为灭活剂, 能达到一级灭活动力学标准, 因为毒性小, 使抗原灭活更安全。所以从1980年至今, 口蹄疫病毒一直采用BEI灭活[10]。2006年0IE推荐3mmol/LBEI两次灭活法, 以26℃灭活24h之后加入第二剂量的BEI继续灭活24 h。其中灭活罐更换一次, 有利于病毒的完全混合, 保证灭活彻底[11]。目前我国规程规定的灭活方法对于146S有一定的损失, 而且灭活安全评价方法与国际上也有区别。因此, 我国FMD疫苗生产病毒的灭活方法应该与国际上通用方法进行比较研究, 找出不足和应该改进之处, 并建立适合我国生产工艺的灭活方法。目前我国FMD疫苗的生产方式已处在产业升级阶段, 如细胞培养方式正在由传统的转瓶方式转为悬浮培养, 而且抗原的下游纯化浓缩工艺也在不断改进, 抗原含量评价方法的趋势是由原来的L50或TCID50方法转变为146S含量检测法, 该方法能准确地测出灭活前后的抗原含量。病毒灭活更安全彻底, 评价方法上符合统计学规律[12], 将成为FMD疫苗抗原灭活不断追求的目标。这些方面的改进能使我国口蹄疫疫苗的安全性和效力得到全面提高, 在FMDV防控中发挥更重要的作用。

4 质量控制

4.1 生产质量检测

口蹄疫灭活疫苗生产过程中必须在GMP标准级的厂房内, 要在QA系统的框架内, 按照规定的制苗规程来进行, 必须达到可以防止任何来自生产工厂的病毒逃逸的生物安全级别[13]。口蹄疫疫苗配制成分中有很多生物源性的材料, 只有控制住其中是否有海绵状脑病病毒, 才能确保疫苗的可使用性;口蹄疫灭活疫苗用的种毒株的质量, 直接影响了终产品的质量, 因此, 对种毒株的质量控制是至关重要的;不同的生产厂家人为因素的不同, 也会对口蹄疫灭活疫苗的质量有所影响, 严格的控制人为因素对疫苗的质量影响, 应该规范化人为的流程;口蹄疫病毒不耐酸碱, 不耐热, 所以对PH值和温度的控制是关键;口蹄疫病毒还对微生物产生的蛋白质分解酶敏感在生产过程中应该加以重视。

4.2 运输过程中的质量控制

口蹄疫由于是灭活疫苗因此在运输过程中应该严格的实行质量监控。不仅生产厂家本身要对其生产疫苗从理化特性、无菌性、安全性、免疫效力等方面进行自检, 而且官方兽药监管检验机构也要不定期的随机抽检厂家生产的口蹄疫疫苗, 重点对成品疫苗进行无菌检验、安全性检验和效力检验, 以评价疫苗的质量, 督促生产厂家保证好成品口蹄疫质量监督, 同时在运输过程要经冷藏处理, 放置时间不能过长, 影响疫苗的效果[14]。

4.3 储存及使用质量检测

疫苗应一直保存在适宜的温度条件下, 口蹄疫疫苗应由政府权威机构认可和可控的商业机构经销, 为了保证疫苗质量, 确保达到预期的免疫效果, 使用者应该按照生产厂家推荐的使用方法使用疫苗, 通常幼畜免疫两次, 每次1头份, 1~3个月间隔, 然后根据流行情况每6个月或1年进行常规免疫.

目前国际惯用检测方法繁多, 测技术不断快捷和简化, 更加便于相关工作者的操作。凝胶排阻高效液相色谱法 (SE-HPLC) , 该凝胶孔径大小为45μm, 主要检测疫苗抗原表面抑制剂的活性来评价疫苗的活性[15]。

5 研究展望

伪狂犬病活疫苗质量标准 篇2

本品系用伪狂犬病弱毒株接种鸡胚成纤维细胞培养 ,收获细胞培养物 ,加适当稳定剂 ,经冷冻真空干燥制成 ,用于预防猪、牛及绵羊伪狂犬病。

【物理性状】本品为微黄色海绵状疏松团块。加P B S液后迅速 溶解呈均匀的混悬液。

【无菌检验】按9 2版兽用生物制品规程附录2页进行 ,应无菌 生长。

【支原体检验】按9 2版兽用生物制品规程附录4页进行 ,应无 支原体生长。

【外源病毒检验】按9 2版兽用生物制品规程附录6页第2.2进 行 ,应符合规定。

【病毒含量测定】每批疫苗任抽样1瓶 ,按瓶签注明头份稀释测毒价 ,每头份不低于5000个T C I D _(50)(半数细胞感染量)。

【安全检验】每批疫苗任抽样1瓶 ,按瓶签注明头份稀释 ,肌肉接种6～ 18月龄无伪狂犬病毒中和抗体的绵羊2头,每头5m l(含10头剂),观察14天 ,应无临床反应。

【效力检验】每批疫苗任抽样1瓶 ,按瓶签注明头份稀释成每毫升含1/50头剂 ,肌肉接种6～ 18月龄绵羊4头,每头1m l , 14天 1

后连同条件相同的无伪狂犬病毒中和抗体对照羊3头 ,每头肌肉注射强毒1m l(含1000L D_(50))观察14天 ,免疫羊应4/4保护 ,对照羊至少2/3发病死亡 ,为合格。

【剩余水分测定】按9 2版曾用生物制品规程附录12页进行 , 应符合规定。

【真空度测定】按9 2版兽用生物制品规程附录13页进行 ,应符 合规定。

【作用与用途】用于预防猪、牛和绵羊伪狂犬病。注苗后第6天产生免疫力 ,免疫期为1年。

【作法与用量】按瓶签注明的头剂 ,用PB S稀释 ,每一头剂为 1m l ,肌肉注射。

猪 :妊娠母猪及成年猪注2头剂。3月龄以上仔猪及架子猪注1头剂。乳猪每一次注1/2头剂 ,断乳后再注1头剂。

牛1岁以上牛3头剂

5～ 12月龄牛2头剂

2～ 4月龄犊牛第1次1头剂 ,断乳后再注2头剂。

绵羊4月龄以上者1头剂。

【注意事项】

1.本疫苗用于疫区及受到疫病威胁的地区。在疫区点内 ,除已发 2

病的家畜外 ,对无临床表现的家畜亦可进行紧急预防注射。

2.妊娠母猪于分娩前3～ 4周注苗为宜。其所生仔猪的母原抗体可持续3～ 4周 ,此后的乳猪或断乳猪仍需注射疫苗;未用本疫苗免疫的母猪 ,其所生仔猪 ,可在生后1周内注苗 ,并在断乳后再注苗1次。

3.稀释后的疫苗须当日用完。

【贮藏】在-20℃以下保存 ,有效期为18个月;在2～为9个月;在10～ 30℃阴暗处 ,应不超过1个月。’

有一种疫苗叫联合疫苗 篇3

联合疫苗是将几种疫苗合并起来制作成一种疫苗，宝宝接种一种疫苗就可以同时预防好几类疾病。

为什么要采用联合疫苗？

使用联合疫苗最大的好处就是可以减少接种次数，增加接种便利性，可以更好地保证人群中疫苗的接种率，达到真正控制疾病的目的。

如果不采用联合免疫，很难让宝宝完成必要的疫苗接种。现代疫苗为了保证接种的安全性，大多数都采用灭活疫苗，灭活疫苗要反复接种3～4次才能达到有效免疫的效果。为了让宝宝的免疫系统有足够的时间产生抗体，保证疫苗接种的效果，同一种疫苗每两次接种之间至少间隔4周以上。这样算来，如果宝宝在2岁以内只完成国家规定的必须要接种的疫苗，如乙肝、卡介苗、脊髓灰质炎、百白破、麻腮风、甲肝等疫苗，就导接种18-20剂次。更何况还有b型流感嗜血杆菌疫苗、肺炎疫苗、流感疫苗、水痘疫苗等重要的疫苗要接种。而接种联合疫苗，就能大大减少接种次数，保证宝宝能按时完成免疫接种。

Q：提问联合疫苗

A：它安全吗？

很安全。联合疫苗并不是简单地将几种疫苗混合在一起，而是需要像研制单一疫苗一样，在上市之前均经过大量的临床前动物试验和人体的临床试验验证安全有效之后方可使用。

Q：它有效吗？

A：与单一疫苗效果相同。每一种联合疫苗在推广应用前都必须经过严格的临床试验，保证它预防疾病的免疫效果必须达到与单一疫苗同样的效果。

Q：它会加重不良反应吗？

A：不会。联合疫苗不会增加接种不良反应的概率，也不会增加不良反应的强度。而且因为接种次数减少，出现不良反应的可能性也就减少了。此外，由于宝宝去医院的次数减少了，交叉感染的风险也能相应降低。

立夏之后，气温逐渐升高，街头的冷饮、冰激凌、凉茶纷纷亮相，这些都是孩子们的心头大爱，但是，即使孩子再喜欢，也不能由着他的性子让他随意吃。初夏时节天气多变，早晚温差较大，人体还在不断适应调整中，处在外热内寒的状态，饮食不宜太过寒凉，避免损伤阳气，特别是孩子，他们的肠胃还很稚嫩，大量的冷饮刺激容易导致各种消化酶减少，胃肠道的蠕动发生紊乱，出现胃痛、食欲不振、大便失调等情况，还可能引发腹泻等疾病。

当然了，将孩子与冷饮完全隔绝也不太可能。那究竟怎么掌握这个度呢？一般来说，6个月以内的宝宝应绝对禁食冷饮，两三岁的孩子每天最多吃一个迷你型的冰激凌，3岁以上的儿童每天也不应超过1支普通冰激凌。

此外，还需特别注意，不要让孩子在空腹、饭后或剧烈运动后立即食用冷饮，避免引发消化系统疾病。

虫牙凶猛要防患于未然

宝宝那么爱吃糖，真担心长虫牙！估计每个妈妈心里都有这样的担忧。怎样预防龋齿呢？不妨这样做：

口腔卫生注意口腔卫生是预防龋病最关键的环节，从小培养宝宝良好的口腔卫生习惯至关重要，如饭后漱口、睡前刷牙等。

饮食结构对食物进行粗细搭配，让宝宝适当多吃富含纤维的蔬菜、水果等，对预防龋齿有帮助。特别要控制甜食和碳酸饮料等的摄入量。

窝沟封闭窝沟封闭是在磨牙咬合面的点隙裂沟上涂布一层黏结性树脂，保护牙釉质不受细菌及代谢产物侵蚀，可使龋齿发生率降低90%以上。

氟保护漆氟保护漆是一种含氟的涂料，涂在牙齿表面后会形成一层保护膜，对牙釉质表面起到保护作用，就像给牙齿穿上一层保护衣。定期检查最好每3～6个月带宝宝进行一次口腔检查。

一般来说，6个月以内的婴儿下肢的胫骨（膝关节以下的长骨）朝外侧弯曲是正常生理现象，主要是因为在妈妈肚子里时，为了适应狭小的空间，宝宝都是蜷缩着蹲在子宫内的，所以宝宝的小腿从膝关节起会向内弯曲，膝关节会轻微变形，宝宝出生后，小腿自然就有点弯曲了。随着宝宝慢慢学步，双下肢开始负重，腿部的肌肉得到加强，双腿开始逐渐而缓慢地向垂直发展，最终大腿和小腿会成为一条直线，长成正常的形状。太阳镜，颜色越深越能保护眼睛？

太阳镜防不防紫外线、能否保护眼睛，与颜色深浅无关，而与镜片的生产材料有关，如果太阳镜在生产时加入了防紫外线的材料，一般都有U V（紫外线）的标志。镜片的颜色选择则应以周围环境的颜色不失真、物体的边缘清晰、能有效识别不同颜色信号灯为原则，以灰色、绿色为好。安全的婴儿床，都应该这样

小宝宝一天大概有一半的时间会在床上度过，选个安全舒适的婴儿床很重要，宝宝睡得好，才能长得好。安全的婴儿床该考虑因素。圆润光滑婴儿床所有可能与宝宝接触的各个部位都应圆润光滑，以免因棱角突出划伤宝宝，或钩住宝宝衣物。

疫苗质量控制新策略:一致性措施 篇4

对于疫苗特性的描述要比药物更困难, 因为它们包含的抗原分子结构复杂, 生产过程繁琐, 抗原在生产过程和/或在终产品中与某些成分相互作用, 比如保护剂和佐剂, 因此更广泛的采用体内方法来进行疫苗的质量控制, 强调以终产品的动物检验来预测其在靶动物中的效力。对于一些近期研发的疫苗 (多聚糖结合疫苗, 比如嗜血杆菌、肺炎球菌和脑膜炎球菌疫苗) , 通过在线检验可更好地在生产中运用一致性措施来简化批签发规程。这尤其与采用体外检验相关, 同时保持了证实其与临床批次等效的能力。这推出了一个在疫苗质量控制领域的新策略“一致性措施”, 现在已延伸至上市使用的常规疫苗。本文对一致性措施的概念、核心要素、实施的质量标准等相关问题进行简述。

1 一致性措施的定义和使用原因

一致性原为一个用于确保不间断地签发安全有效产品的旧概念, 但现在已成为疫苗常规批签发的一个新策略。一致性措施是指采用构成产品特点的一系列参数 (比如抗原含量、抗原完整性等) 来替代现行的批签发检验。产品特点应在注册时被确定并达到管理机构满意的程度, 由管理机构和疫苗厂达到一致, 并采用严格的质量体系在生产中进行监控。产品特点确保每一批次或签发的批次和与临床上确定安全有效的批次相似。因为在终产品采用动物分析来预测疫苗在靶动物体内效果的能力有限, 可用一些更给力的检验来替代, 测定与已证实安全有效批次的等同性。一致性措施充分利用已在生物分析和其它分析方法上取得的进展, 同时会减少使用动物的数量。

在疫苗生产中采用质量体系 (GMP、QA等) 和相应的分析工具, 在确定疫苗批与批之间关键特点的一致性上取得了很大进展。一致性措施应包含于批签发检验领域。对此策略的支持与动物模型的特点及其不足之处有关。动物模型在预测疫苗在人类以及靶动物 (兽用疫苗) 的安全性和效力等相关特点上存在不足。现在已有几个正在使用的动物模型在预测其临床效力方面的价值从未被正确地验证。使用实验动物会引起伦理方面的关注, 成本高、花费时间长, 需要熟练的人员以及复杂的实验设施, 而且一些目前使用的包括使用国际参照品的动物模型并没有达到生物分析模型的基本标准。

现在认为将一致性措施延伸至常规疫苗将会: (1) 引入一个更严格的体系来管理生产疫苗批次的质量; (2) 最终导致实验动物用量的显著减少。采用此措施的目的是鉴定产品安全有效的关键参数, 并在生产过程中对这些参数进行监测, 这减少了对疫苗终产品进行广泛批检验的需求。一致性建立的要素是来源于采用合适的分析工具在产品研发 (包括临床检验) 和常规生产中得到的信息, 以及对所获数据的持续评价 (趋势分析) 。

2 实施一致性措施应考虑的质量要素

为了建立用于批签发的一致性措施, 限制或去除体内检验并保证其实施, 应对如下要素进行评价。

2.1 临床评价

所有商品化签发批次产品的特点应该与在遵守现行良好临床规范 (c GCP) 条件下证实安全有效的临床批次一致, 此策略可用于新研发的产品。对于一些临床数据并不是根据c GCP确定的老产品, 应当提供历史数据和上市后的监测信息, 并且对此要进行专门设计。

2.2 生产评价

应根据已批准的注册文件, 并在遵守GMP的条件下, 证实疫苗是以一致的方式生产的, 这涉及到所有的生产步骤、正确过程的验证、环境监测、人员资质和QA监督, 还包括内审和管理当局组织的检查。

2.3 检验评价

仅有科学意义大、不多余的用于测定产品安全性和有效性相关特点的检验, 以及证实生产过程一致性的检验, 应在制定产品特点中使用。这些检验必需被正确验证, 并在QA系统中实施。应该知道虽然批签发规程应包含于产品特点中, 对同样参数的严格限制可用于确定并监测一致性。批签发规程主要是依靠在检验中临床批次特点的一致性, 一致性限制以趋势数据为基础。

对于一些包含常规成分和/或特定类型佐剂更加复杂的疫苗, 也可以采用很少数量的动物进行有限的免疫原性研究, 作为终产品检验的一部分。当生产改变时, 至少在一个有限的时间段内重新证实其一致性, 进行体内验证或重新评价。

2.4 应用评价

在一致性措施中最明显的应用是产品的常规批签发。可在某些条件下此策略也可被用于稳定性检验。比如在稳定性研究中来确定产品特点的一致性。对于特定的批次, 这也可以通过体内检验来对产品稳定性的特点进行再评价。应该明确如果此策略成为当前实践, 对某些特定产品应重新考虑此系统。

3 一致性措施中的质量标准

质量体系运行包括对生产过程的详细验证与维护, 保证生产的疫苗批次在临床上安全有效, 检验仅是其中的一个部分。现在认为疫苗质量不是单纯靠检验来保证的, 而是建立在严格实施质量保证体系之上。一致性措施强化了这个理念并将其延伸至疫苗生命周期内的其它活动, 比如在下发许可之前通过不止一个批次产品的临床试验来确定疫苗使用的田间记录, 并在下发许可之后启动药物使用监测程序。整理完整和正确的操作程序以及建立评价生产过程改变效果的体系非常重要。

虽然批签发规程是确立生产一致性的有用工具, 其它的对中间体和终产品检验的在线特点和参数也有助于评价一致性。疫苗厂应该确立程序并设定控制措施来随时控制各种有意义参数的运行。批签发规程不应与质量控制限制相混淆。批签发规程是在产品研发过程中确定的, 不如某些质量控制限制保守, 虽然两者都是依靠疫苗生产者和管理者积累的经验。有时两种参数是在下发方许可时临时确定的, 仅当有足够数量的批次 (依照批与批的结果) 生产之后才可以完全确定。在质量控制限制和批签发规程之间缓冲区的同样参数, 可以使厂家从控制限制研究变异, 无需浪费多个批次就可以改正变异产生的原因。另外存在的质量控制限制以及规程可使疫苗厂家随时提高一致性, 而无需对规程进行正式变更, 避免进行额外的临床或动物试验。

在一致性措施中最易被误解的是效力检验中物理标准的作用。因为一致性措施趋向于建立临床批次与即将生产批次的联系, 经常假定需要一个稳定的临床批次可用作标准或对照。事实上在一致性措施中评价的是下发许可后生产的每个批次和已证实安全有效的一个或更多批次在效力或活性上的相似性。为了这个目的生产者和管理当局有时需要采用已知效力标准的疫苗进行计算, 并限制性地接受。此疫苗批次也许或也许不是临床批次, 但是将新参照品调整至原有参照的标准后当需要时可被替换。这与当前使用的国际标准相似。但应该知道由一种疫苗得到的结果也许与不同种类疫苗得到的结果没有可比性, 如果效力检验测定的内容并不是在靶群体中效力的替代, 因此对每类产品都需要采用同源的标准疫苗。应成立一个多国组织维护并且分发这些参考疫苗。

4 一致性措施中存在的潜在缺陷和不足

因为现代疫苗是复杂的制品, 采用非动物替代在试验室预测疫苗在田间的效力有时并不完美。而单独的纯化抗原或可分离的抗原成分在生化或免疫学特性上的一致性相对容易建立, 将抗原混合并添加赋形剂后, 会妨碍采用体外检验来评价终产品中抗原的质量。这种局限性导致认为至少在一些疫苗的批签发中使用完全相关的动物效力检验是正确。在一致性措施中通过采用在整个生产过程中从原材料到最后配比每个步骤获得的所有相关信息, 可以减弱体外检验的潜在缺陷或动物检验的有限性对确定产品特点的影响。虽然在某些条件下并不能否定动物检验的价值, 但有时在预测靶动物上的安全或效力的能力有限。如果一种动物检验的预测能力有限, 那么一致性措施更喜欢选择一种替代, 因为此策略中的任何检验, 包括用于终产品效力检验优化的动物试验, 仅仅是科学制定的确保疫苗将在靶动物有效系列分析的一部分。

当决定接受由检验中得到的一些组成产品特点的结果时, 应非常谨慎。这些检验必需相关并可体现产品的质量和数量。常规批签发通常服从一致性措施, 有时使用一些开发完全的以动物为基础的效力检验会提供一些显著的优点。例如在某些情况下, 一个有很好预测能力的效力替代检验可被用于注册, 或用于在已注册的产品中来检查疫苗组分或生产过程的重要改变。

5 支持与国际协调

对一致性措施延伸性的接受需要对现行国际标准体系进行全面了解。在国际协调中最基础的第一步是对此策略正确性的认可, 一旦此策略被国际签署, 出版解释操作细则的指导将是至关重要的。多年以来由世界卫生组织 (WHO) 生物制品标准化专家委员会采用的建议被用作全球人用疫苗国际管理条例的基础。由于技术发展水平不同, 在全球范围进行协调非常困难。因为欧洲药典在这方面的工作超前一些, 建议其通过正式和非正式的接触来激励WHO明晰地签署一致性措施, 强化并提倡将3Rs作为检验发展的指导原则。

有时在发展中和那些经济新兴国家的疫苗厂和管理机构反对采用体外替代, 因为误认为动物检验要比体外检验更便宜而且容易操作, 经常对与繁殖、畜舍以及动物处理条件要达现行标准的相关成本估计不足。同时不能否认用于购买体外替代检验比如ELISA试剂和设备的成本有时也难以接受。

现在都认为由国际药品注册会议和国际兽用药品注册会议制备的文件, 对全球协调程序和概念起着重要的作用。可是它们在制定疫苗质量控制政策中的影响在一些不发达的国家被削弱, 因为多数发展中国家认为这些机构是为了满足正式成员国的利益, 而正式成员国多是发达国家。现行的由WHO和欧洲药典确定的对某些管理产品提供国际单位或活性确定参考品的实践, 在采取一致性措施之后可能会被取消。可是仍然存在保证某些试剂到位的需求 (比如参考血清和单抗) 。

6 建议

疫苗质量 篇5

长生生物连续跌停，问题出在哪里

-07-20 16:56 来源：光明网-时评频道

作者：盘和林 中国财政科学研究院应用经济学博士后

日前，国家药品监督管理局网站披露，长春长生冻干人用狂犬病疫苗生产存在记录造假等严重违反《药品生产质量管理规范》的行为。长生生物科技股份有限公司的造假行为，给2万多股东带来了实实在在的损失：7月16日，长生生物跌幅达9.98%,成交额仅为上一交易日的三十分之一，7月17日、18日、19日再连续三天跌停，从目前形势来看，未来仍有可能连续下跌。

狂犬病疫苗人命关天，长生生物科技股份有限公司生产的狂犬病疫苗涉及造假，使得长生生物日跌幅达9.98%,且连续三天跌停。问题是，连续跌停的股票，也让部分投资者的利益受到损害。

实际上，长生生物股票大跌的问题，主要出在内部管理上。长生生物作价55亿元，借壳黄海机械上市，公司实际控制人为高俊芳、张澈馈⒄庞芽三人，分别持有长生生物18.18%、17.88%、8.24%的股权，三人是一致行动人。高俊芳、张友奎为夫妻关系，高俊芳、张澈牢母子关系。其中，高俊芳任长生生物科技股份有限公司董事长、总经理、财务总监。董事长和总经理为同一人，在上市公司中并不少见，然而在长生生物高俊芳一人兼任三职，这就使得公司的内部监督功能几近于零。

在利益面前，公司董事会成员的道德自律显得乏力，因此外部监管必须补位。然而，我国对上市公司造假的处罚力度并不够大。根据《证券法》第一百九十三条规定，对上市公司的顶格罚款不过60万元，对责任人员的顶格罚款不过30万元。这种力度的处罚不咸不淡，不足以震慑造假者并保护投资者。

可见，上市公司财务造假屡禁不止，主要原因是违法成本太低，造成了激励约束的不相容。实施违法违规行为于其可能带来的收益成本之间，存在巨大反差。因此，要有效遏制上市公司财务造假等行为，必须加大对违法违规行为的处罚力度，增加违法违规的`成本。

另外，要逐步完善和细化证券市场监管的法律，使之形成连贯、可操作性的法律体系。最为关键的是应尽快建立完善民事赔偿制度，这样，广大投资者就可以通过行使民事诉讼等方式保护自己的利益，并参与市场监督，对造假者形成一种威胁，缓解证监会的监管压力。

从美国对造假上市等民事赔偿案件的实践操作来看，民事赔偿是公司应尽的责任。以安然公司为例，投资者通过集体诉讼向安然公司提出损失的索赔，据全球最大咨询公司Tillinghast-Towers Perrin的调查，安然股东通过集体诉讼达成的和解金额，高达71.4亿美元。

最后，还应加强证券市场监管中的自律管理，要让证券业协会、证券交易所和证券公司等自律监管主体进一步发挥实际功能，规范证券公司化运作意识，充分发挥自律作用。

对财务欺诈、虚假陈述等违法行为，始终应保持高压态势，坚决从严执法，治理市场乱象，从而营造出良好的市场环境。大股东、管理层们，只有让公司发展得越来越好才是王道，而不是天天想着资本运作、减持套现，损害广大投资者的利益。(盘和林)

疫苗生产记录造假，致歉就能了事?

作者：李瑞

专家认为，对查实的问题企业，除了追究法律责任，还要严格落实行业禁入制度。

近日，国家药品监督管理局通报长春长生生物科技有限责任公司(下称“长春长生”)违规生产狂犬疫苗，存在记录造假等行为。狂犬病的死亡率几乎为100%,此次疫苗生产记录造假事件引发社会广泛关注。

7月17日，长春长生发布声明，表示已按要求停止狂犬疫苗的生产，并“深表歉意”.对此，很多人表示，这么大的事不能仅仅“致歉”了事，应该“治罪”.那么，长春长生是否应该“治罪”?对此，记者采访了相关专家学者。

生产记录造假的疫苗是假药吗?

记者了解到，药品管理法第101条明确规定疫苗属于药品：药品，是指用于预防、治疗、诊断人的疾病，有目的地调节人的生理机能并规定有适应症或者功能主治、用法和用量的物质，包括中药材、中药饮片、中成药、化学原料药及其制剂、抗生素、生化药品、放射性药品、血清、疫苗、血液制品和诊断药品等。中国政法大学教授、中国法学会刑法学研究会副会长阮齐林指出，国家药品监督管理局以长春长生生产的狂犬疫苗违反《药品生产质量管理规范》对其进行行政处罚，也印证了我国将狂犬疫苗认定为药品。

那么，生产记录造假的疫苗是否就是假药呢?药品管理法第48条规定，药品所含成分与国家药品标准规定的成分不符的、以非药品冒充药品或者以他种药品冒充此种药品的为假药。阮齐林表示，假药所指“成分不符”是指成分种类不符，而不是成分含量不达标。

记者了解到，生产记录是产品的基本标签和档案，不仅记载着企业的生产过程，而且也记录着产品的原材料、配制、成分、性能以及生产日期、销售去向等产品基本信息。“生产记录造假的具体情况如何，关乎涉案狂犬疫苗是不是假药的认定。”中国人民大学教授、中国消费者协会副会长刘俊海说，长春长生涉案疫苗生产记录造假的具体情况还有待进一步调查。

“如果涉案狂犬疫苗在有效成分的种类上造假，那就应当认定为假药。”阮齐林表示，如果涉嫌更改有效期或生产批号、降低有效成分的含量，则应依药品管理法第49条认定为劣药。

没引起不良反应就能免除法律责任?

虽然针对生产记录造假，国家药品监督管理局已对长春长生进行了行政处罚，但该企业声称的该公司所有狂犬疫苗“没有发生过因产品质量问题引起不良反应事件”,也不能排除该企业有构成刑事犯罪的可能性。

刘俊海介绍，生产、销售假药足以严重危害人体健康，构成生产、销售假药罪，该罪在犯罪形态上属危险犯。最高人民法院、最高人民检察院《关于办理生产、销售伪劣商品刑事案件具体应用法律若干问题的解释》(下称《解释》)第3条规定，经省级以上药品监督管理部门设置或者确定的药品检验机构鉴定，生产、销售的假药具有下列情形之一的，应认定为刑法第141条规定的“足以严重危害人体健康”:含有超标准的有毒有害物质的;不含所标明的有效成分，可能贻误诊治的;所标明的适应症或者功能主治超出规定范围，可能造成贻误诊治的;缺乏所标明的急救必需的有效成分的。

“一旦涉案疫苗不含生产记录所标明的有效成分，那么潜在接种者将面临生命危险。”阮齐林表示。

记者了解到，长春长生的涉案狂犬疫苗并未上市销售，其生产记录如果只是成分含量造假或者更改有效期，那么该狂犬疫苗按有关规定属于“劣药”.

阮齐林告诉记者，刑法上的生产、销售劣药罪属于实害犯，要求已经对人体健康造成严重危害才能构成犯罪。“生产、销售劣药，对人体健康未造成严重危害的，不构成生产、销售劣药罪，但如其销售金额在5万元以上，根据刑法第149条的规定，应构成生产、销售伪劣产品罪。”阮齐林表示，虽然长春长生没有销售行为，但是根据《解释》第2条，伪劣产品尚未销售，货值金额达到刑法规定的销售金额3倍以上的，以生产、销售伪劣产品罪(未遂)定罪处罚。也就是说，这种情况下只要涉案狂犬疫苗货值达到15万元，即可认定长春长生构成生产伪劣产品罪。

如果长春长生涉案狂犬疫苗的生产记录造假不涉及药品管理法第48、49条所列项目的造假，而是其他一般生产记录造假，阮齐林表示，这种情况下长春长生将不构成犯罪，但是生产记录造假违反《药品生产质量管理规范》，行政责任是免不了的。

如何规范药企诚信生产?

据了解，长春长生已不是第一次被点名通报了。11月3日，原国家食药监总局在样品抽样检验中检出长春长生生产的批号为05014-01的百白破疫苗效价指标不符合标准规定。

“药企为何会屡教不改?关键在于药企的违法成本太低，罚了款、换个药名又继续经营。”刘俊海说，要达到处理一个教育一片的效果，就必须抓住典型，依法从严处理。一旦长春长生构成刑事犯罪，除了要承担相应的刑事责任，还要严格落实行业禁入制度。

浅谈疫苗生产中的质量风险控制 篇6

疫苗是健康人群用于预防和控制传染性疾病的产品, 其生产水平和质量安全与公众的健康密切相关。我国共有疫苗生产企业40多家, 年产疫苗达10亿人份, 是世界上最大的疫苗生产国之一, 为人类预防多种传染性疾病起到了积极作用。由于疫苗的生产采用生物活性原材料, 生产工艺复杂、生产周期长且对生产环境要求高, 在储存运输过程中的温湿度变化易对制品产生不良影响, 因此属于高风险药品, 需要疫苗生产企业进行严格的生产过程控制与质量管理。应用质量风险管理的机制对疫苗的生产过程进行评估, 识别疫苗生产中存在的主要风险, 有利于企业制定有效的控制与管理措施, 从而降低疫苗生产的质量风险, 提高疫苗的质量与安全水平, 切实保障人民群众的用药安全。

1 质量风险管理的意义

质量风险管理是对药品整个生命周期进行质量风险评估、控制、沟通、审核的系统过程。FDA早在2002年就发布了“21世纪c GMP———一种基于风险的方法”, 首次正式提出了在制药行业中运用风险管理的方法。在ICH Q9发布不久, 欧盟就将风险管理加入到了其GMP的法规中 (附录20) 。我国新修订的GMP也明确了制药企业应引入质量风险管理的机制, 要求企业根据科学知识及经验对药品整个生命周期的质量风险进行评估、控制、沟通与审核, 以保证产品的质量。

质量风险管理强调的是前瞻性的预防行为以及对问题根本原因的调查和持续改进, 从而保证决策的恰当性与有效性, 避免盲目性, 获得“控制损失, 创造价值”的双重效果。

引入质量风险管理的理念与方法对于疫苗生产企业来说具有重要意义。一方面, 疫苗生产工艺的特殊性决定了其产品质量会受到诸多因素的影响, 只有充分预见并分析各种质量风险, 企业才能够制定并不断完善其生产质量控制体系, 从而保证疫苗的质量。另一方面, 疫苗接种的对象大多为健康人群, 并且以婴幼儿居多, 一旦出现较大的质量或安全问题将带来极为严重的后果与影响, 因此基于风险管理理念的“事前防范”尤为重要, 越早越多地识别风险, 越有利于全面有效地控制风险, 避免质量事故的发生, 保障疫苗的疗效与安全。

2 疫苗生产中的质量风险分析

疫苗的质量风险来源于生产人员、生产用设施设备、生产用物料、生产操作过程以及生产环境几个方面, 疫苗生产企业只有从“人、机、料、法、环”几个方面对疫苗的生产进行充分分析, 才能够全面识别影响疫苗质量与安全的各种风险因素, 从而加以有效的控制管理。

2.1 疫苗生产人员的风险分析

疫苗属于无菌制品, 在疫苗的生产中, 操作人员是造成产品微粒和微生物污染的最大风险。正常情况下, 人体会随时散发出大量的微粒, 这些微粒的表面又附着了一定量的微生物。在生产过程中, 进入无菌生产区的各类物料、工器具以及设备等均可以通过不同形式的灭菌或消毒, 但对于进入无菌区的人员却无法进行彻底而有效的处理。因此, 人员的控制对于疫苗生产尤为重要。人员导致风险的程度取决于人员对无菌原材料、产品、工器具、设备、与产品接触的表面等暴露环境的干扰。人员的防护措施包括洁净服的式样及穿着舒适性、人员的健康与卫生状况、人员的岗位操作技能与操作规范、人员所接受的培训以及人员的工作态度是保证疫苗质量的基本前提。

2.2 疫苗生产设施设备的风险分析

疫苗生产用设施设备通常包括配料罐、过滤系统、灭菌柜、洗烘灌联动线、轧盖机、灯检机以及水系统与空调系统等。设施与设备是疫苗生产的必需硬件, 生产设备的合理设计、正确选型、安装与使用是疫苗质量得以实现的基本保障;设备的验证确认、预防性维护、维修以及标识管理等直接影响设备的状态与使用, 也是影响疫苗质量的主要风险点。在生产过程中, 凡是直接接触药液的容器具及设备表面都有可能带入微粒和微生物, 因此设备的清洁与消毒方式对于防止污染和交叉污染至关重要。在疫苗生产用设备中, 配液灌的材质、过滤系统的选择、滤器 (滤膜和滤芯) 的处理、滤芯与药液的相容性及其完整性、洗烘灌设备的稳定运行、隧道烘箱高效过滤器的完整性等都有可能导致产品受到微生物或异物的污染。灭菌柜作为无菌药品生产最重要的设备之一, 其灭菌控制程序、物品装载方式、热分布与热穿透情况、腔室压差控制等对最终灭菌的效果有直接影响, 因此也是影响产品质量的主要因素。

2.3 疫苗生产用物料的风险分析

疫苗生产的起始材料均为生物活性物质, 如生产用菌种、毒种和细胞株。疫苗生产用菌毒种及细胞的管理, 对于保持其生物学特征、保证疫苗产品的质量及生物安全至关重要。在种子库的制备、登记、检定、保存、领用及销毁等一系列过程中会存在诸多的风险。如果登记信息不明确, 将导致生产用菌毒种及细胞株的使用不可追溯。不同属、不同级别的种子应分开保存, 保存设备及房间应有严格的管理, 标识应清晰明确, 否则容易引起种子的混淆与误领, 引发严重的质量与生物安全问题。

除了生物活性原材料外, 各类原料、辅料、包装材料以及佐剂、防腐剂甚至抗生素等对最终产品的质量都具有重要影响。如果疫苗生产用原料出现质量问题, 将影响所制备细胞和病毒接种的质量, 间接影响疫苗的主要质量指标。如果辅料及内包装材料出现质量问题, 将直接影响疫苗产品的质量。此外, 外包装材料等不与产品直接接触的物料对疫苗成品的安全及稳定性等也具有重要的影响。从物料供应商的风险角度分析, 疫苗生产企业对于物料供应商的控制和管理从某种程度上决定了购进物料的质量。如果企业选择的供应商不具备相关合法资质或不能满足疫苗生产使用的要求, 将无法保证所提供物料的质量, 疫苗产品的质量也就得不到保证。

2.4 疫苗生产工艺过程的风险分析

由于疫苗的生产过程是生物学过程, 最终产品不能进行灭菌处理, 需要实行全过程无菌控制。疫苗生产企业对于有毒生产区及无毒生产区的区分情况、人流及物流的设计方式、人员更衣程序、物品及生产环境的清洁与消毒程序、生产用溶液及器具灭菌方式、分装及冻干等工艺过程的控制等都是疫苗生产过程中污染的风险来源。除了污染风险外, 对于疫苗生产过程中的交叉污染、混淆及差错的风险控制也尤为重要。在疫苗生产的全过程中, 物料及毒种的领用、投料、配制、分装、冻干、包装、清场等均存在交叉污染、混淆及差错等风险。

另外, 当疫苗的生产工艺稳定后, 任何与疫苗生产相关的变更均存在直接影响最终产品质量的风险。虽然疫苗在研发过程中已对生产工艺及质量控制等进行了充分的研究, 但当产品正式获得批准后, 出于改进工艺、扩大生产规模、提高产品稳定性以及法规符合性要求等方面的考虑, 疫苗生产企业仍然有必要进行疫苗生产相关的变更。如果企业对于变更的研究不充分, 没有进行变更前后全面而深入的风险评估, 对变更可能给产品质量带来的影响缺乏充分的认识和了解, 就很有可能对疫苗生产及质量控制造成不良影响, 进而影响疫苗产品的安全性与有效性。

2.5 疫苗生产环境的风险分析

生产洁净环境是个动态的概念, 它是环境控制的各项措施综合作用的结果。对于疫苗而言, 生产环境对产品的主要风险来源于生产环境中的微粒和微生物可能对产品产生的污染, 以及进入生产环境中的物品、人员、设备等可能对产品造成的交叉污染。控制生产洁净环境的目的就是为疫苗生产和质量控制提供适宜的环境, 包括适当的压差、洁净度、气流流向和温湿度等。对于疫苗生产环境的控制依赖于空调净化系统以及对洁净环境的定期消毒与监测。空调净化系统的控制风险主要体现在洁净室的压差与压差梯度、气流组织、送风速度、自净时间、换气次数、温湿度及悬浮粒子等。因此, 空调净化系统的设计方式与循环方式、空气源 (新风比例) 、温度控制系统 (冷冻水与热水) 、压力控制系统 (初、中、高效过滤器) 以及空调净化系统的定期维护保养等都是影响生产环境洁净度的风险点。此外, 对于生产环境的清洁与消毒方式及频率决定了洁净环境的微生物 (沉降菌与浮游菌) 水平, 也是影响生产环境的风险因素。

3 疫苗生产中的质量风险控制措施

3.1 加强疫苗生产人员管理

由于从事疫苗生产的人员是影响疫苗质量的最大风险之一, 因此疫苗生产企业必须对从事生产的相关人员进行严格的控制与管理。这些管理制度应当涵盖人员的专业知识、卫生、健康、岗位要求、生物安全以及无菌操作等各个方面。更为重要的是, 疫苗生产企业应当建立健全培训管理制度与考核机制, 使生产相关人员具有良好的质量意识, 能够规范生产操作, 以最大限度地降低人员对疫苗生产造成污染的风险。

3.2 完善生产设施设备管理

设施与设备是疫苗生产及质量得以实现的基本保障, 因此疫苗生产企业对于生产设施设备的管理直接决定了其生产稳定程度与产品质量水平。缺乏对生产设备充分的性能确认以及定期全面的维护保养是目前疫苗生产企业在设备管理方面普遍存在的问题。生产设备的设计和安装应有利于避免污染和交叉污染, 并且便于操作、清洁、维修和保养, 这点在设备的设计与安装确认阶段就应予以考虑。设备的运行与性能确认应确保设备在生产工艺规定的参数范围内能够稳定运行, 降低由于设备故障对生产过程与质量控制的影响。此外, 为了满足新版GMP的要求, 也为了产品质量的持续稳定, 设施设备的升级改造也是疫苗生产企业应当适当考虑的问题。

3.3 加强生产用物料及供应商管理

疫苗生产用菌毒种、细胞以及各类原材料是疫苗质量得以实现的最重要保障。对于菌毒种及细胞株的管理, 疫苗生产企业应当建立完善的管理制度, 按照国家相关规定详细记录菌毒种及细胞株的学名、株名、历史、来源、特性、用途、批号、传代、冻干日期和数量等。在种子保管过程中, 传代、冻干及分发领用记录等也应清晰并可追溯。不同属、不同级别的种子应分开保存, 保存设备及房间应有严格的管理, 避免出现遗失或引发生物安全问题。对于其他原材料, 企业应当根据产品的特点及生产工艺建立更为严格的内控标准, 并建立每一种物料及其供应商的质量档案, 基于风险的原则开展供应商审计, 加强对物料供应商的源头控制管理, 定期对物料的质量情况进行回顾分析, 以更为全面地保证最终产品的质量。

3.4 确保疫苗生产工艺持续稳定

为了有效控制疫苗生产中的污染、交叉污染、混淆及差错等风险, 疫苗生产企业应当对疫苗生产的全过程进行充分设计与验证。疫苗的生产验证包括产品的生产工艺验证、培养基模拟灌装试验、产品的灭菌有效性验证、溶液的除菌过滤性能验证、设备及器具的清洗与灭菌验证、关键生产设施设备的确认、生产环境的验证以及人员的更衣确认等涉及生产工艺过程的各个方面。完善的生产验证可以促进生产工艺的持续改进, 也有利于提高企业对于生产过程的控制能力。此外, 当疫苗生产企业需要进行生产相关变更时, 应对变更进行全面深入的风险评估与研究, 充分分析变更可能给产品质量带来的影响, 进行变更前后的对比研究, 从而降低各种风险, 真正实现质量的持续改进。

3.5 加强疫苗生产环境的控制监督

为了确保无菌药品的质量安全, 新版GMP在无菌药品附录中采用了WHO和欧盟通用的A、B、C、D分级标准, 对无菌药品生产的洁净度级别提出了具体要求;增加了在线监测的要求, 特别对生产环境中的悬浮微粒的静态、动态监测, 对生产环境中的微生物和表面微生物的监测也做出了详细的规定。疫苗生产企业应当按照新版GMP要求实施必要的改造及生产环境控制监督, 保证疫苗生产所需的环境, 从而保证产品的质量。

4 结语

综上所述, 质量风险管理是一种以科学为基础, 并且切合实际的决策过程。疫苗生产中的质量风险来源于生产人员、设施设备、生产用物料、生产工艺过程以及生产环境的诸多方面。基于质量风险分析, 加强疫苗生产人员、设施设备以及生产用物料的管理, 确保疫苗生产工艺持续稳定, 同时加强对疫苗生产环境的监督控制, 有利于切实保证疫苗的质量与安全。

参考文献

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[4]李国晏, 徐斌, 崔萱林, 等.高压蒸汽灭菌柜性能验证方法的研究[J].微生物学免疫学进展, 2002, 30 (2)

[5]赵鸿剑, 梁毅.基于质量风险管理的药品原辅料供应商现场审计[J].机电信息, 2012 (20)

疫苗质量 篇7

1 疫苗采购

1.1 国家强制免疫兽用生物制品由省政府采购办公室和省兽医行政管理部门依法进行招标采购。只有经过农业部批准、通过兽药GMP验收的生物制品生产企业, 才能生产取得批准文号的强制免疫兽用生物制品。对符合国家要求的生产厂家进行考察, 查看相关有效证件, 即农业部GMP认证, 农业部颁发的兽药生产许可证及产品的批准文号, 是招标工作必备的程序。

1.2 由于生产条件与管理水平的不同, 不同企业生产出的同一品种疫苗是有差异的。考查强制免疫兽用生物制品生产厂家是否有完善的质量检测手段和质量保证体系、售后服务水平、疫苗的包装、运输条件、生产厂家的社会信誉度等综合实力是必要的。

1.3 企业追求利润, 不可能低于成本为社会作贡献。采购疫苗合理定价是保证质量的前提。

1.4 对购入的强制免疫兽用生物制品进行免疫抗体跟踪监测, 同时观察注射疫苗后动物副反应的轻重程度, 以此为依据对购入的疫苗免疫质量进行评估, 为疫苗购入提供科学依据。此项工作具有重要意义。

1.5 生物制品具有有效期。使用时疫苗的有效期长效果就好, 反之, 由于贮存运输等多种因素影响免疫效果, 临近失效期的疫苗免疫效果是无法得到保证的。为避免浪费资金同时保证免疫效果, 在招标采购前制定科学合理的免疫疫苗需求计划, 在保证免疫需求的前提下, 确保疫苗适时调入, 确保调入疫苗有较长的有效期也是保证免疫质量的重要环节。

2 疫苗储存与运输

2.1 确保疫苗的贮存与运输温度符合技术要求, 是保证疫苗质量不可忽视的环节。随着国家对动物疫病防控力度的加强, 强制免疫疫苗品种和数量都在增加, 就全国而言, 目前各级防疫部门用于疫苗贮存的冷链设施不能100%符合技术要求, 尤其是疫苗运输过程更难做到即使是疫苗生产厂家在小批量发货中也存在运输温度达不到技术要求的情况。因此运输环节对疫苗免疫效果的大影响应引起足够的重视。

2.2 强制免疫的猪瘟疫苗和新禽二联苗是冻干苗, 要求在-15℃条件下贮存, 按要求冻干苗在23℃条件下运输1次, 必须在10d内用完。夏季很少有冷冻条件运输, 疫苗从厂家到村防疫员的发放过程经历多个环节, 如不加以注意就可能造成多次冻融现象, 多次冻融对抗原的破坏性是人所共知的。所以加强运输环节的保管措施, 对保证疫苗质量十分重要。

2.3 油佐剂灭活疫苗要求的贮存温度是2～8℃, 大多数单位具有相应的冷链设施。但也有一些单位大量疫苗贮存没有足够的冷链设施, 有的用地窖贮藏, 有的冰箱贮存但常发生停电现象, 有的为了省电, 春秋就放在室温下保存, 经实验证明, 这种贮存方式无法保证2～8℃的条件要求, 在一定程度上降低了疫苗的质量, 长期在这种条件下贮存疫苗能够加速疫苗变质。用这种疫苗对动物免疫接种, 其抗体要比正常低1～2个效价。因此, 疫苗也应重视的保存方式。

2.4 为了加强强制免疫兽用生物制品的保存和运输条件, 保证免疫质量, 各级政府投入适当资金, 建立和完善省、市、县 (区) 、乡、村的冷链设施是必要的。舍不得投入冷链建设资金, 造成疫苗保管不当, 一旦引发疫情, 就会给当地经济造成无法估量的损失。

2.5 我们认为省级防疫部门是全省疫苗的供应中心, 应具有恒温库房容积为400m3, 能储备灭活疫苗2000万m L以上, 低温冷库容积为100m3, 能储备低温保存的疫苗400万只份以上。市、县级动物疫病预防控制中心是辖区内强制免疫疫苗发放和贮存的主要部门。市级动物疫病预防控制中心, 应具有不低于50m3的冷藏库, 或具有每台可存放10万m L灭活疫苗的冷藏柜30台以上, 确保市本级具备贮存300万m L以上灭活疫苗的能力;县级动物疫病预防控制中心应具有不低于40m3的冷藏库, 或具有每台可存放10万m L灭活疫苗的冷藏柜20台以上, 确保县本级具备贮存200万m L以上灭活疫苗的能力。同时市、县 (区) 动物疫病预防控制中心还应具有贮存疫苗容积不低于8m3的冷库或冰柜, 确保每个单位具备贮存猪瘟冻干活疫苗50万头份以上的能力。各市县 (区) 可按照本辖区内畜禽的饲养总量和实际情况在与上级主管部门沟通后进行调整, 保证强制免疫用疫苗贮存条件符合技术要求。

2.6 各区域防疫监督所是疫苗发放的必经环节, 乡镇动物卫生监督所区域所应结合本辖区每季度实际疫苗使用数量, 配备冷藏柜及冰箱。并确保冷藏柜的容积应满足10万m L以上灭活疫苗的储藏要求, 冰柜的容积应满足1万头份冻干活疫苗的贮藏要求。

2.7 村级防疫员应每人配备一个保温箱, 同时应具备用来暂存疫苗的专用冰箱。

2.8 为保证疫苗在运输过程中的质量和安全, 各疫苗生产厂家在运送疫苗时必须用疫苗保温车, 防止夏季疫苗温度过高和冬季疫苗冻结, 疫苗的外包装必须有保温箱, 在高热季节应在疫苗箱内放置冰块, 保证在24h内将疫苗送到指定地点, 防止造成疫苗失效影响免疫效果。

2.9 建立健全强制免疫兽用生物制品的贮存制度, 是保证兽用生物制品质量的重要措施。

疫苗库有专人管理, 冷温库、疫苗冷藏柜要防潮、避光、清洁。对冷温库、冷藏柜定时观测温度变化, 并做详实记录。出现异常及时采取相应措施。确保贮藏条件达到技术标准。

3 疫苗供应

3.1 强制免疫兽用生物制品实行政府采购, 逐级供应, 逐级监督制度。建立健全疫苗出入库制度、储存运输制度、破损报废制度、留样观察制度、统计报表制度和审计制度, 管理中实施监督与制约机制, 严禁倒卖、浪费和销售强制免疫兽用生物制品, 确保正常供应秩序。

3.2 各级动物防疫部门在强制免疫兽用生物制品的购入、供应、保存等环节要有专人负责, 各种规章制度及管理人员公示上墙。入库疫苗要认真核实数量、生产厂家, 物理性状、真空度、规格、生产日期及有效期等, 发现问题及时处理。

3.3 定期盘点库存, 对过期、破损的疫苗要定期整理上报, 经审核批准后方可报废进行无害处理。加强管理, 避免库存疫苗积压, 降低免疫效果的现象发生。

疫苗质量 篇8

一、标准修订参数和实施时间。在现有口蹄疫

疫苗质量标准的基础上, 提高效力检验标准, 增加内毒素和总蛋白检测参数。

(一) 自2013年9月1日起, 新生产的口蹄疫

灭活疫苗及合成肽疫苗效力检验标准由每头份3PD50提高到6PD50;新生产的口蹄疫灭活疫苗内毒素每头份疫苗不超过50EU。

(二) 口蹄疫灭活疫苗总蛋白检测参数分两个

阶段实施, 自2014年1月1日起, 对总蛋白含量实施不定期抽样检测, 并公开检测结果;2015年1月1日起, 总蛋白含量每ML疫苗不高于500ug。

(三) 新的检测参数实施前生产的产品, 可在产品有效期内流通使用, 并按原质量标准进行监督检验。

二、请中国兽医药品监察所组织拟订效力检

验、内毒素和总蛋白检测标准, 修订口蹄疫灭活疫苗及合成肽疫苗质量标准, 尽快报我部发布执行。同时, 要加强口蹄疫疫苗新质量标准执行中的监督与指导, 及时收集和反馈相关问题和意见。

三、各口蹄疫疫苗生产企业要结合自身实际,

尽快组织企业生产和质量检验人员, 认真学习、准确理解新增检测参数, 掌握检验技术, 确保口蹄疫疫苗质量标准提升工作顺利实施。

疫苗质量 篇9

食品安全是指对食品按其预期用途进行制作、食用时不会使消费者健康受到损害的一种保证。食品安全可追溯到食品加工业的上游, 可谓抓安全性必然从源头抓起, 源头有很多种, 其中畜牧养殖业就是食品源头的重要一环, 例如加强动物疫病的防疫, 杜绝有害的饲料添加剂等, 由此疫苗行业也值得更多的关注。

本研究对山东某种鸡场送检的某国外疫苗公司生产的CVI988/Rispens株MD疫苗进行毒力测定和ALV是否污染的检测, 通过评估该类疫苗的质量水平, 探究该种鸡场发生疑似MD的可能因素, 以此为例探讨了MD疫苗质量对鸡群及至对鸡源食品安全生产的影响。

1 材料和方法

1.1 材料

山东某种鸡场送检的不同时间生产的两个批次的CVI988/Rispens株MD疫苗编号为F11、F21、F22, 批号依次为C006311、C006111、C006311, 规格均为2000羽, 运输过程中保存于液氮。

1.2 主要仪器和试剂

蛋白酶K购自华美生物工程公司;PCR Kit、DNA Marker DL2000、r Taq E (5U/μl) 、d NTPs、p MD18-T均购自Ta Ka Ra公司;感受态细胞TransT1购自北京全式金公司;胶回收试剂盒购自美国OMEGA公司;DMEM培养基和新生牛血清购自GIBCO公司;胰酶购自德国MERCK公;SPF鸡胚来自济南赛斯家禽科技有限公司;ELISA检测ALV p27抗原试剂盒来自IDEXX, 编号为09254-AJ944 (抗原) 。其他常规试剂均为国产分析纯。

1.3 MD疫苗的毒力测定

所有疫苗融化后取100ul疫苗液, 按照有限稀释法进行测定。每天观察并记录蚀斑的数量, 直到蚀斑数量稳定不变, 共观察7d。用Reedmuench方法计算疫苗的毒力。

1.4 MD疫苗中ALV p27抗原的ELISA检测

将剩余疫苗置于-80℃冰箱和室温反复冻融3次, 以裂解MDV。从裂解后的MD疫苗原液中取150ul, 2000rpm, 2min离心后取上清用ELISA试剂盒检测上清中的p27抗原, 所有样品各设3个重复 (大于S/P临界值0.2的样品为阳性) 。

1.5 MD疫苗细胞培养后ALV p27抗原的ELISA检测

将处理的疫苗上清接种CEF, 2h后, 将细胞生长液换为细胞生长维持液, 培养9d后检测细胞上清中的ALV p27抗原。同时设置未接种样品的CEF为对照。所有样品各设三个重复。

1.6 MD疫苗细胞培养后ALV的PCR检测

将接毒培养9d后的CEF收集到1.5ml的离心管中, 2000rpm, 2min离心, 弃上清, 沉淀用组织抽提液重悬, 加入10ul蛋白酶K, 55℃消化8h, 用苯酚氯仿法提取细胞DNA, 用针对ALV-J的gp85基因 (924 bp) [6]引物 (简写为ALV-J-gp85) 和针对A-J囊膜蛋白基因 (env) (2400bp, 含LTR序列) 引物 (简写为ALV-ALL) 做PCR检测 (见表1) 。反应体系为25l。ALV-J-gp85反应程序:94℃预变性8min, 94℃变性45sec、60℃退火45sec、72℃延伸1min (30个循环) , 72℃总延伸10min, 4℃保存。env基因反应程序为:95℃预变性5min、95℃变性1min、57℃退火1min、72℃延伸2min30sec (30个循环) , 72℃总延伸10min, 4℃保存。PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳进行检测, 将阳性产物回收、连接、转化的克隆产物验证成功后送上海铂尚生物工程公司测序。用DNAstar软件对基因进行分析。

2 结果

2.1 MD疫苗的毒力测定结果

疫苗F11、F21、F22的毒力分别为800PFU/羽份、1300 PFU/羽份、1480PFU/羽份, 均低于国家兽医药典规定的2000PFU/羽份, F11低于OIE规定的不低于1000 PFU/羽份的要求。

2.2 MD疫苗原液ALV p27抗原检测结果

MD疫苗F11、F21、F22冻融后上清中p27抗原均为阳性, S/P值分别为0.417、0.43、0.256。

2.3 MD疫苗细胞培养上清中ALV p27抗原的ELISA检测结果

F11、F21、F22细胞上清ALV p27抗原均为阳性, S/P值分别为0.657、0.733、0.774。未接种样品的对照用CEF检测结果为阴性。

2.4 MD疫苗细胞培养后ALV的PCR扩增与测序结果

将得到的F11、F21、F22囊膜蛋白 (env) 基因序列 (PCR方法扩增2400bp片段, 包括LTR序列) 与参考株MAV-1 (A) 、RAV-1 (A) 、RSV-Schmidt Ruppin (B) 、RSVPr-C (C) 、D10652R SV-D (D) 、RAV-0 (E) 、SD0501 (E) 、HPRS-103 (J) 、ADOL-7501 (J) 序列进行同源性分析, 结果显示, 3瓶疫苗中扩增的ALV序列与参考毒株SD0501 (E) 、E-strain-1同源性均为98%以上 (表2) , 遗传进化树分析结果表明, 疫苗中污染的ALV与ALV-E参考株SD0501的亲缘关系最接近, 说明分离到的毒株属于ALV-E (附图) 。J亚型检测结果为阴性。

3 讨论

(1) 养殖生产中经常发生一些不明原因的免疫失败现象, 给企业造成重大的经济损失。除了免疫程序、母源抗体干扰、病毒持续感染等因素外, 疫苗质量下降、活疫苗遭受外源病毒污染的现象也屡见不鲜。由各种原因导致的MD疫苗保护效力不足, 会导致鸡群免疫失败, 不能控制和防止鸡群中MD的出现。Silva等利用PCR方法对商品MD疫苗进行检测时, 发现了ALV的污染[7]。受污染疫苗的使用会加重该疫病的传播, 放大并严重危害养禽业的健康发展。种鸡场出现MD的鸡只不一定是疫苗质量的问题, 与疫苗本身的免疫保护指数, 注射部位, 免疫程序等有一定关系。 (2) 本研究结果显示, 送检的3瓶MD疫苗的免疫剂量均低于国家兽医药典规定的2000PFU/羽份, 但有2个批次 (F21, F22) 满足OIE规定的不少于1000PFU/羽份的要求, 疫苗质量和生产状况等还需进一步的提高。检疫部门也应加大ALV的检测力度, 提高检出率, 确保在生产疫苗过程的细胞培养等阶段无ALV的感染, 在生产中完成有无ALV污染的检测。送检疫苗的种鸡场发生MD, 无论何种原因所致, 但显然, 不合格MD疫苗的应用是鸡群发生MD肿瘤病的原因之一。而发生肿瘤的鸡群往往存在抗生素药量超标及滥用问题, 影响禽蛋肉等鸡源食品质量, 危害人民群众的生活健康。 (3) 近年来食品安全事件频发, 如2012发生的过量药物喂养的抗生素鸡, 以及一直不断发生的、禽流感和猪蓝耳病等, 动物疫病一直在威胁着食品安全。随着人民生活水平的提高, 对农产品质量要求更高, 不仅要吃好, 而且要吃出健康。食品安全的问题一直是国家和公民所关注的头等大事。随着强制免疫品种的扩大, 规模化养殖程度的提高, 疫苗市场的规模还有很大的提升空间;随着民众对食品安全事件的关注度提高, 国家将继续加大对全国制售假兽药、违法添加违禁药物的力度。而这些都与生产源头的鸡苗质量与疫苗质量密切相关。

摘要：山东某种鸡场7个父母代鸡群应用2个批次马立克 (MD) CVI988/Rispens疫苗免疫后仍发生疑似MD病。本研究对其送检的3瓶MD苗 (2个批次, 编号为F11、F21、F22, 其中F21、F22为同一批次) 进行了毒力测定及禽白血病病毒 (ALV) 的检测。结果显示:MD疫苗F11、F21、F22的毒力检测结果分别为800PFU/羽份、1300PFU/羽份、1480PFU/羽份, 3瓶疫苗的毒力均低于国家兽医药典规定2000PFU/羽份的标准, F11低于OIE规定不少于1000PFU/羽份的标准;3瓶MD疫苗冻融后上清和细胞培养上清的p27抗原均为阳性;3瓶疫苗均检测出E亚型ALV (ALV-E) 的囊膜蛋白 (env) 基因 (PCR方法扩增2400bp片段, 包括LTR序列) , 与经典ALV-E株RAV-0 (E) 、SD0501 (E) 的同源性为98.9%99.4%。本研究发现, 送检的3瓶2个批次MD疫苗存在毒力不足和内源ALV污染的质量问题, 有可能是该种鸡群发生疑似MD病的原因之一。

关键词：马立克病 (MD) ,禽白血病病毒 (ALV) ,PCR,食品安全

参考文献

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[4]PayneLN.TheemergenceofsubgroupJavainleucosisvirus[J].Avian Pathology.1998, 27;S36-S45.

[5]李新华.禽白血病流行病学特点及防制措施[J].养禽与禽病防治, 1997, 20 (4) :11-12.

[6]代阳, 杨其峰, 王波等.不同地区海兰褐蛋鸡中J亚群-禽白血病病毒株株gp85基因的分子演化分析[J].畜牧兽医学报, 2010, 41 (5) :635-638.

动物疫苗和疫苗的免疫接种 篇10

1 疫苗种类

动物疫苗即以动物为接种对象的疫苗, 总体可分为传统疫苗和生物技术疫苗两大类。 传统疫苗目前应用最广泛, 包括活疫苗、灭活疫苗、代谢产物和亚单位疫苗; 生物技术疫苗包括基因工程重组亚单位疫苗、基因工程重组活载体疫苗、基因缺失疫苗、核酸疫苗、合成肽、抗独特型疫苗等, 该类疫苗目前使用有限。以下主要介绍传统疫苗中的活疫苗、灭活疫苗及多价疫苗。

1.1 活疫苗 (1) 弱毒疫苗, 是对微生物的自然强毒通过物理化学处理和生物的连续继代使其对原宿主动物丧失致病力或只引起轻微的亚临床反应, 但仍保存有良好免疫源性的毒株或从自然界筛选的自然弱毒株而制备的疫苗, 该种疫苗优点是免疫效果好、免疫期长, 对种母代动物接种可使子代获得被动免疫, 目前使用最多, 但在使用中应注意有出现异种微生物或同种强毒污染的危险, 经人工接种途径可能人为地传播该种疫病。 (2) 异源疫苗, 指用不同微生物菌 (毒) 株制备的疫苗, 接种后能使动物获得对疫苗中不含有的病原体产生抵抗力, 如兔纤维瘤病毒疫苗能使其抵抗兔黏液瘤病; 或用同一种中的某型微生物种毒制备的疫苗, 接种动物后能使其获得对异型病原体的抵抗力, 如牛、羊接种猪型布氏杆菌弱毒菌苗后, 能使牛、羊获得牛型和羊型布氏杆菌病的免疫力。

1.2 灭活疫苗又称死苗, 是利用物理或化学方法处理微生物, 使其丧失感染性或毒性而保持良好免疫源性而制成的疫苗, 是疫苗发展的方向, 接种后不能在动物体内繁殖, 故使用剂量大、免疫期较短, 需加入佐剂。优点在于研制周期短、使用安全、易保存、性能稳定; 缺点是免疫效果次于活疫苗, 注射次数多、副反应稍大、成本较高。 主要有油佐剂和氢氧化铝疫苗, 如猪瘟结晶紫疫苗、猪丹毒氢氧化铝疫苗、猪细小病毒疫苗。

1.3 多价疫苗指用同一种微生物中若干血清型菌 (毒) 株的增殖培养物制备的疫苗, 多价疫苗能使免疫动物获得完全的保护, 如猪多价副伤寒死菌苗等。

2 动物疫苗的免疫接种

2.1免疫途径免疫途径有滴鼻、点眼、刺种、注射、饮水和气雾等。应根据疫苗类型、疫病特点及免疫程序来选择接种途径。死苗、类毒素和亚单位苗不能经消化道, 应采取肌肉或皮下注射, 选择活动少的易于注射的部位, 如颈部皮下、禽胸部肌肉。禽类滴鼻和点眼免疫仅用于接种弱毒疫苗效果较好;饮水免疫最方便适用于大型鸡群, 不适合初次免疫;刺种适用于某些弱毒苗, 如鸡痘苗;灭活疫苗和弱毒疫苗可采用注射刺种和注射免疫, 效果确实;气雾免疫不仅可诱导产生循环抗体, 也可产生黏膜局部免疫力, 但会造成一定程度的应激反应, 易引起呼吸道感染。

2.2畜禽疫病的免疫程序各养殖场应根据当地实际情况制定免疫程序, 没有固定模式。应考虑本地区疫病流行情况, 以动物种类、年龄、饲养水平、母源抗体水平、疫苗的类型及性质、免疫途径、血清学抗体监测等各方面因素作为重要的参考依据, 选择制定最佳又切实可行的免疫程序。

3 影响动物疫苗免疫效果的因素

免疫应答是一种复杂的生物学过程, 受诸多因素影响, 要充分考虑并尽量避免各种因素的影响。最主要因素有: (1) 遗传; (2) 营养状况; (3) 环境因素; (4) 疫苗质量与运输条件、保存稀释方法、操作不当及剂量不足; (5) 接种途径与免疫程序; (6) 病原的血清型与变异; (7) 疫病对免疫的影响; (8) 母体抗原; (9) 病原微生物之间的干扰作用, 注意同时免疫两种或多种弱毒疫苗, 可能会产生干扰现象。