关键词: 艾滋病
艾滋病的实验室检测(精选8篇)
篇1:艾滋病的实验室检测
艾滋病检测实验室保密制度
1、需要保密的文件,要标明保密字样。
2、HIV抗体检测实验室检测资料要有专人负责,妥善保
存各种实验记录、感染者档案、实验室工作人员健康
监护档案、HIV职业暴露医学随访结果及结论等资料
3、原始记录、结果报告等资料按照有关规定要求和时限
妥善保管,不得遗失。不得擅自修改和销毁;严格遵
守保密制度,未经所属卫生行政部门许可,不得向无
关人员或单位提供任何情况。
4、艾滋病检测项目结果与个人信息关联资料的传递必
须确保安全,如果使用网络传送,文件必须加密。
5、各类保密资料必须经有关负责人批准后方可查阅,一
般不得借阅。
违反保密制度造成后果的,承担相关责任。织金县中医院检验科
篇2:艾滋病的实验室检测
附:艾滋病检测实验室基本标准
二、艾滋病检测确证实验室
(一)人员条件。至少由5名医技人员组成,其中专职人员至少2名,具有副高级卫生技术职称人员至少1名。负责确证试验的技术人员需具有3年以上从事艾滋病病毒抗体检测工作经验、接受过省级以上艾滋病检测技术培训,并获得培训证书。
(二)建筑条件。需有独立的血清学检测实验室,分为清洁区、半污染区和污染区,符合二级生物安全实验室(BSL-2)要求。根据需要可设置核酸检测、免疫学检测等建筑区域。
(三)仪器设备条件。配备血清学检测和二级生物安全实验室(BSL-2)所需仪器设备,至少包括酶标读数仪、洗板机、普通冰箱、低温冰箱、水浴箱(或温箱)、离心机、旋转震荡器、摇床、加样器(仪)、专用计算机和必要的摄像器材、消毒和污物处理设备、实验室恒温设备、安全防护用品和生物安全柜。具有建立血清库和数据库的设备条件。
三、艾滋病检测筛查实验室
(一)艾滋病筛查中心实验室及艾滋病筛查实验室。
1、人员条件:至少由3名医技人员组成,其中具有中级卫生技术职称人员至少1名。负责筛查试验的技术人员需具有2年以上从事病毒性疾病血清学检测工作经验,接受过省级以上艾滋病检测技术培训,并获得培训证书。
2、建筑条件:实验室或检测区域应分为清洁区、半污染区和污染区,应符合二级生物安全实验室(BSL-2)要求。
3、仪器设备条件:配备艾滋病病毒抗体筛查试验所需设备,至少包括酶标读数仪、洗板机、普通冰箱、水浴箱(或温箱)、离心机、加样器(仪)、消毒与污物处理设备、实验室恒温设备、安全防护用品和生物安全柜。
(二)艾滋病检测点。
1、人员条件:至少由2名经过艾滋病检测技术培训并获得培训证书的专业人员组成。
2、建筑条件:需有艾滋病检测区域或专用实验台,能开展简便、快速检测。
篇3:艾滋病病毒抗体的实验室检测方法
1 筛查试验方法
筛查试验主要包括酶联免疫吸附试验 (ELISA) 、免疫斑点试验、免疫层析试验和凝集试验等方法, 后3种方法是为提供自愿咨询检测 (VCT) 的需求使用的简单而快速的试验方法。
1.1 ELISA试验
这种方法是使用最早, 也是最常用的HIV抗体筛查方法。目前, 试剂已经发展到第四代。
第一代试剂于1985年开始在美国使用, 主要用于献血员的筛查。试剂使用的抗原是完全病毒的裂解产物, 采用间接ELISA试验检测抗体。由于抗原常常含有细胞培养的蛋白成分而出现较多假阳性反应, 使特异度降低;而提高特异度的措施是稀释标本, 反而又使敏感度下降。同时, 抗原制备和纯化较困难, 危险性较大。
1990年, 第二代ELISA试剂使用重组或合成多肽抗原, 仍采用间接ELISA试验检测抗体, 能同时检测HIV-l和HIV-2。由于选择、使用了重要的抗原决定簇, 特异度和敏感度都有所提高, 抗原制备更加安全、容易, 重复性也较好。但是, 由于重组抗原有时含有载体的组分, 出现假阳性反应;多肽抗原缺乏合适的立体构象, 可能使敏感度下降。
1992年, 美国研制出第三代试剂, 与第一代和第二代试剂的检测方法不同, 采用双抗原夹心法检测抗体。这种试剂可以检出针对HIV抗原的所有抗体亚型, 不需要过度稀释标本保证特异度, 相对第二代试剂敏感度有所提高, 但还存在漏检现象。
第四代试剂是新发展起来的HIV抗原、抗体联合检测试剂, 可同时检测HIVP24抗原和HIV-1和HIV-2抗体。同时, 试剂的敏感度提高了, 缩短了窗口期, 减少急性感染者窗口期漏检, 降低了血源筛查的残余危险度。与第三代试剂相比, 第四代试剂可提前1~2周作出诊断。目前国内主要使用第三代试剂, 少数使用第二代试剂。
1.2 免疫斑点试验
免疫斑点试验通过使用硝酸纤维素膜为截体, 将HIV抗原滴在膜上成点状, 即为固相抗原。如果待测血清标本中存在HIV抗体, 即可与HIV抗原发生免疫反应, 形成的抗原抗体复合物可以与酶标记的抗人免疫球蛋白结合, 阳性结果在膜上抗原部位显示出肉眼可见的有色斑点。该方法具有反应时间短 (10min内) , 抗原用量少的优点。
1.3 免疫层析试验
该方法是在硝酸纤维素膜的加样区包被用特殊材料标记的 (通常用金或硒标记) 的HIV抗原, 在检测区和对照区包被重组或多肽HIV抗原。如果被检测标本中含有HIV抗体, 则样品中的抗体首先与标记的抗原结合, 发生抗原抗体反应形成复合物, 该复合物由于层析作用向前移动, 与包被在检测区的抗原结合, 形成标记HIV抗原-HIV抗体-重组多肽HIV抗原抗体复合物而显色。免疫层析试验大部分为一步法, 操作简便, 结果容易判定。
结果判断:检测区和对照区各出现一条红线, 被认为是HIV抗体阳性;只在对照区出现一条红线, 被认为是HIV抗体阴性;没有条带出现, 则认为试验无效。
少数免疫层析试剂在固相载体的不同部分包被不同的抗原来检测HIV-l M群和O群以及HIV-2抗体。该方法可以用血清、血浆或尿液检测, 检测时间为5min, 阳性结果一般在2min左右出现, 弱阳性结果5min左右出现;该方法适合基层医院快速筛查, 对不同基因型的区别有助于流行病学调查。
1.4 凝集试验
凝集试验将明胶颗粒、乳胶颗粒或自身红细胞等作为固相载体, 通过被HIV抗原致敏的固相载体与抗体发生免疫反应, 根据固相载体在孔中的凝集情况, 来检测标本中的HIV-1/2抗体。凝集试验操作时不需要仪器设备, 操作人员不需要很强的实验操作能力和结果解释能力。但是, 由于每次操作需要U板、样品、致敏和末致敏颗粒, 需设立阳性对照, 需要按要求稀释, 孵育时间长达2h等原因, 目前尚不能再基层医疗单位得到广泛应用。
另外, 唾液、尿液等生物材料也可以用于HIV抗体的检测。如艾滋病唾液检测卡, 在硝酸纤维素膜上包被人工合成的HIVgp41gp36蛋白抗原, 可同时检测含在唾液中的HIV-1/2抗体, 原理为酶免疫间接法。主要检测HIV IgA和IgG, 敏感度和特异度与ELISA相似, 避免了静脉穿刺;但样品预处理时间长, 且售价较高。尿液HIV-1抗体检测试剂在1996年由美国FDA首次批准, 主要用于静脉注射毒品人群和其他高危险人群的大规模流行病学调查。如我国赵立庆等[1]研究表明, CalypteTM尿液试剂盒的真阳性率为100%, 真阴性率为99.1%;与确认试验结果比较, 阳性符合率为100%, 可以作为快速筛查的方法。
2 确认试验方法
确认试验包括免疫印迹试验 (WB) 、线性免疫试验和免疫荧光试验等方法, 其中WB为最常用的方法 (金标准) 。
2.1 免疫印迹试验 (WB)
该方法通过对HIV不同抗原组分的分离以及浓缩和纯化, 能够检测针对不同抗原成分的抗体, 所以其敏感度一般不低于筛查试验, 特异度也很高。就HIV的病原诊断而言, 是目前使用最多的HIV抗体确认试验方法。但是, 尽管病毒经过浓缩和纯化, 但条膜上仍然可能含有病毒赖以生存的宿主细胞成分, 可出现非特异性反应, 大多出现在中分子量区域。因而, 这种方法的缺点是在某些情况下, 产生大量的不确定结果。
2.2 线性免疫试验 (LIA)
该方法将HIV不同型别和亚型的特异性抗原 (重组蛋白和合成肽) 以及质量控制带包被在一条尼龙膜条上, 用于检测样本中的HIV-1和/或HIV-2抗体。在检测抗体的同时, 还可以区分是HIV-1感染还是HIV-2感染。LIA可以减少WB出现的大量不确定结果。
2.3 免疫荧光试验
该方法以固定在玻片上的感染细胞内的HIV为抗原, 与待测血清反应后, 加入荧光素标记的抗人免疫球蛋白, 洗掉没有结合的荧光抗体, 在荧光显微镜下观察结果, 胞浆内出现特异性荧光而对照孔没有出现, 可判定为HIV抗体阳性。但该试验不宜在一般的实验室开展和应用。
HIV抗体检测工作应该按照《全国艾滋病检测技术规范》的要求, 在合格的实验室内进行, 要采取严格的质量保证、质量控制和质量评价措施, 注意实验室生物安全管理和防护, 注意职业暴露的预防, 严格遵守实验室标准操作程序, 防止样品间交叉污染, 切实保证样品检测质量。
我们坚信, 随着检验技术的快速发展, 将有更多的试剂和新方法用于HIV抗体检测, 使HIV感染者得以早期诊断。
参考文献
篇4:艾滋病的实验室检测及管理
【关键词】实验室;检测;管理
【中图分类号】R5 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484(2012)09-0337-01
艾滋病,又名“获得性免疫缺陷综合征”,从1981年美国诊断出全球首例患者至今的25年间,已有2500万人不治身亡,感染者达到3950万人,资料表明全球目前每8秒钟就新增1例感染者。这些感染者是如何通过实验室检测出来的?我们该怎样科学检测和管理呢?
1实验室检测
1.2免疫学检查 循环淋巴细胞显著下降,TH细胞减少,TH/TS小于0.1;T细胞功能下降,迟发型皮肤试验转阴,体外试验证明以非特异性有丝分裂原刺激时,T细胞反应降低,T细胞的细胞毒作用下降,产生白细胞介素2及a-干扰素下降。B细胞功能失调,多克隆性高球蛋白血症,对新抗原刺激不产生应有的抗体反应,自然杀伤细胞活性下降。
1.2HIV抗体检测目前,艾滋病病毒(HIV)的主要检测方法是做HIV抗体检测,它是诊断HIV感染者和艾滋病病人的主要指标。检测方法包括:1.酶联免疫吸附法(ELISA);2.明胶颗粒凝集试验(PA);3.免疫荧光检测法(IFA);4.免疫印迹检测法(Western Blot,简称WB法);5.放射免疫沉淀法(RIP)。其中前三项常用于筛选试验,后二者用于確证试验。HIV感染后数周或数日内常不能检出抗体,95%的受染者在5个月内可测出抗体。但也有感染后3-4年仍不能检出抗体者,此时有必要检测HIV病毒。
HIV抗体检测流程是:受检者先要到国家批准的有资质的艾滋病筛查实验室做筛查试验。需要说明的是,筛查实验室是不能发出HIV抗体阳性报告的。如筛查结果为阳性,需要用两种试剂复测,若复测两种试剂均为阴性,则报告“HIV抗体阴性”;若两种试剂均为阳性或一阴一阳,必须再将标本送到国家批准的艾滋病确证实验室做确证试验,如确证试验结果无法确证为阴性或阳性,则报告确证试验结果为“HIV抗体不确定”,一般要求在3个月的“窗口期”后复查,复查结果如果仍为不确定,必须再过3个月复查,最终结果仍为不确定或为阴性,则可排除受检者为艾滋病感染者。
2实验室管理
艾滋病检测实验室是艾滋病预防控制工作中的一个重要组成部分,其提供的检测数据是制定遏制艾滋病的传播流行措施的重要依据。至2006年底,全国共有初筛检测实验室6000多家,116家确证实验室。随着艾滋病检测面的不断扩大,艾滋病确证实验室无法完成更多的初筛检测任务,因而更多的初筛检测就由初筛检测实验室来承担。而对艾滋病初筛实验室进行规范化的管理是全面提高艾滋病初筛实验室的技术水平,提高检测质量,确保检测准确性的重要保证。
2.1加大对实验室硬件的投入,根据《全国艾滋病检测工作管理办法》对初筛实验室的建设条件和仪器设备进行资金的投入。保证实验室人员业务能力、设施环境等条件满足检测要求。
2.2健全和规范管理制度,根据《全国艾滋病检测工作管理办法》和《全国艾滋病检测技术规范》的要求,制定一系列管理制度,如样品的管理、职业暴露预防和处理制度、实验室安全措施、实验室工作制度等,并严格按制度执行。
2.3在初筛实验室引入先进的管理模式,实验室建立检测标准操作程序文件和实验室管理文档,建立检测数据库,制定废弃物管理及处理制度,使实验室的工作得到规范化的管理。
参考文献:
[1] 现代预防医学,[M]科学技术出版社,2011.
[2] 艾滋病的实验室检查,[J]中华检验医学杂志,2009.3.
篇5:艾滋病初筛检测实验操作规程
1.目的
保证艾滋病病毒抗体ELISA实验的准确性。2.适用范围
艾滋病病毒抗体ELISA实验。
3.具体要求 3.1样品采集
样品采集安试剂盒要求采集。采血时注意安全,用一次性注射器谨慎操作,防止发生刺伤和造成外界污染。血样如即时用可存于普通冰箱,如要长期保存,分离血清置于-20 及以下。同时做好记录。3.2样品运送
样品转送,除特殊需要外,必须是血清或血浆,置于带有盖帽的试管内,或将塑料试管用酒精灯封死,防止样品流出。试管上标明姓名、时间、编号,将试管放入专门带盖的容器内,容器的材料要易于消毒处理,在所放试管周围上下垫有软性物质,以免碰碎,容器外标有HIV检测专用字样和生物危害标志。路途较远或气候炎热时,容器应置于4 以下运送。这样同时附送检单。3.3样品登记和处理
3.3.1收到样品后,及时填写标本登记记录表,送样人、收样人签字,如已进行过初检,登记初检结果和实验方法及所用试剂情况。
3.3.2对从其他实验室送来的样品,检查并注明送检单与标本记录的符合、样品管破损、溢漏等情况。如有溢漏应立即将尚存的血样移出,并对管壁和盛器消毒。检查并记录样品的质量有无严重溶血、细菌污染、血脂过多以及黄疸等情况。
3.3.3对实验室自采的样品,最好将血液先放置1-2个小时,再用3000 离心15分钟,吸出上清液备用,如在几天内检测可放在2-8 冰箱中,如要贮存,置于-20冰箱。3.4实验准备
3.4.1将试剂从冰箱中取出,按试剂盒要求时间恢复室温。3.4.2检查并记录冰箱、温箱温度。
3.4.3按照试剂盒要求准备实验原始记录表,标明空白、阴性对照、阳性对照、外部质控血清以及检测样本的位置:登记日期和实验起止时间,记录环境条件及试剂盒厂家、批号、效期:整个实验过程中每一步操作都要在原始记录表上详细登记。3.4.4按照试剂盒的要求配置洗液及其他所需要的试剂。
3.5加样和稀释 根据样品数量将合适数量的酶标板条固定在板架上,为了不损坏洗扳机,每道上的酶标板条必须保持完整{不足部分可用废弃的微孔添充},检查加样器加样刻度是否与试剂盒要求的加样量相符,按照原始记录表表明的位置加入各种质控品和检测样品,注意:空白只加标本稀释液。加样量和稀释度严格按照试剂盒说明书规定的操作,一般先加样品稀释液后再加入样品。加样要准确,小心不要使吸头碰着酶标板空上是包被抗原。为保证加样的准确,最好使用多孔道加样器,使用时注意防止吸头间的交叉污染。
3.6温育 贴好封板膜,按照试剂盒要求的温度和时间进行温育,最好选择湿育方法。3.7洗板 开启洗板机前,先检查洗板机废液瓶是否已排空,开启后先用蒸馏水冲洗管道,再换上洗液瓶。按照试剂盒的要求,选择、修改洗扳方式、洗涤次数和浸泡时间,根据所用酶标板的条数确定洗板道数,根据酶标板的位置调节洗头的位置,然后开始洗板,洗板结束后用蒸馏水冲洗管道。
3.8加酶结合物对于二步法ELISA实验需加酶结合物,按试剂盒要求完成。3.9加底物洗好板后应立即加底物,需加自配的底物应现配现用。
3.10终止反应 在规定的时间内用试剂盒中的或根据要求自行配置的终止液终止反应。3.11酶标仪读物 按照试剂盒的要求选择滤光片,确定空白孔位置,选择合适达的打印报告格式,读数并打印结果。
3.12所用仪器在使用后及时填写使用记录。3.13结果判断计算
3.13.1根据试剂盒说明书要求的阴阳对照OD值范围判断实验的准确性,阴阳性对照OD值在范围之内,试验方可成立,超出范围,试验失败,整个实验重做。
3.13.2在指控图上标出外部指控血清的S/CO值,判断实验结果是否被接受。
3.13.3以上两个条件俊被接受后,根据试剂盒要求计算cutoff值。小于cutoff值的标本为阴性,大于或等于cutoff值得标本为阳性,在cutoff±10%的标本为灰色带反应。阳性及灰色反应区标本,用原有的试剂盒另一种试剂重复试验。
3.14 结果登记和报告 将试验结果登记在级路标和标本试剂表上,将OD值打印结果贴在原始记录表上,检查原始记录表是否填写完整,操作者,复核者签字。阴性结果出具HIV抗体筛查报考,阴性结果填写HIV抗体筛查阳性送检单。3.15 标本留存转送 阴性标本收集血清冷冻保存一年。并填写阴性血清保存记录表,阳性标本收集血清封口包好,冷藏运送送确认实验室。4.支持性文件
全国艾滋病监测工作规范
艾滋病实验室安全操作及防护措施
1.目的
保证艾滋病病毒抗体ELISA实验的准确性。2.适用范围
艾滋病病毒抗体ELISA实验。
3.具体要求 3.1样品采集 样品采集安试剂盒要求采集。采血时注意安全,用一次性注射器谨慎操作,防止发生刺伤和造成外界污染。血样如即时用可存于普通冰箱,如要长期保存,分离血清置于-20 及以下。同时做好记录。3.2样品运送
样品转送,除特殊需要外,必须是血清或血浆,置于带有盖帽的试管内,或将塑料试管用酒精灯封死,防止样品流出。试管上标明姓名、时间、编号,将试管放入专门带盖的容器内,容器的材料要易于消毒处理,在所放试管周围上下垫有软性物质,以免碰碎,容器外标有HIV检测专用字样和生物危害标志。路途较远或气候炎热时,容器应置于4 以下运送。这样同时附送检单。3.3样品登记和处理
3.3.1收到样品后,及时填写标本登记记录表,送样人、收样人签字,如已进行过初检,登记初检结果和实验方法及所用试剂情况。
3.3.2对从其他实验室送来的样品,检查并注明送检单与标本记录的符合、样品管破损、溢漏等情况。如有溢漏应立即将尚存的血样移出,并对管壁和盛器消毒。检查并记录样品的质量有无严重溶血、细菌污染、血脂过多以及黄疸等情况。
3.3.3对实验室自采的样品,最好将血液先放置1-2个小时,再用3000 离心15分钟,吸出上清液备用,如在几天内检测可放在2-8 冰箱中,如要贮存,置于-20冰箱。3.4实验准备
3.4.1将试剂从冰箱中取出,按试剂盒要求时间恢复室温。3.4.2检查并记录冰箱、温箱温度。
3.4.3按照试剂盒要求准备实验原始记录表,标明空白、阴性对照、阳性对照、外部质控血清以及检测样本的位置:登记日期和实验起止时间,记录环境条件及试剂盒厂家、批号、效期:整个实验过程中每一步操作都要在原始记录表上详细登记。3.4.4按照试剂盒的要求配置洗液及其他所需要的试剂。
3.5加样和稀释 根据样品数量将合适数量的酶标板条固定在板架上,为了不损坏洗扳机,每道上的酶标板条必须保持完整{不足部分可用废弃的微孔添充},检查加样器加样刻度是否与试剂盒要求的加样量相符,按照原始记录表表明的位置加入各种质控品和检测样品,注意:空白只加标本稀释液。加样量和稀释度严格按照试剂盒说明书规定的操作,一般先加样品稀释液后再加入样品。加样要准确,小心不要使吸头碰着酶标板空上是包被抗原。为保证加样的准确,最好使用多孔道加样器,使用时注意防止吸头间的交叉污染。
3.6温育 贴好封板膜,按照试剂盒要求的温度和时间进行温育,最好选择湿育方法。3.7洗板 开启洗板机前,先检查洗板机废液瓶是否已排空,开启后先用蒸馏水冲洗管道,再换上洗液瓶。按照试剂盒的要求,选择、修改洗扳方式、洗涤次数和浸泡时间,根据所用酶标板的条数确定洗板道数,根据酶标板的位置调节洗头的位置,然后开始洗板,洗板结束后用蒸馏水冲洗管道。
3.8加酶结合物对于二步法ELISA实验需加酶结合物,按试剂盒要求完成。3.9加底物洗好板后应立即加底物,需加自配的底物应现配现用。3.10终止反应 在规定的时间内用试剂盒中的或根据要求自行配置的终止液终止反应。3.11酶标仪读物 按照试剂盒的要求选择滤光片,确定空白孔位置,选择合适达的打印报告格式,读数并打印结果。
3.12所用仪器在使用后及时填写使用记录。3.13结果判断计算
3.13.1根据试剂盒说明书要求的阴阳对照OD值范围判断实验的准确性,阴阳性对照OD值在范围之内,试验方可成立,超出范围,试验失败,整个实验重做。
3.13.2在指控图上标出外部指控血清的S/CO值,判断实验结果是否被接受。
3.13.3以上两个条件俊被接受后,根据试剂盒要求计算cutoff值。小于cutoff值的标本为阴性,大于或等于cutoff值得标本为阳性,在cutoff±10%的标本为灰色带反应。阳性及灰色反应区标本,用原有的试剂盒另一种试剂重复试验。
3.14 结果登记和报告 将试验结果登记在级路标和标本试剂表上,将OD值打印结果贴在原始记录表上,检查原始记录表是否填写完整,操作者,复核者签字。阴性结果出具HIV抗体筛查报考,阴性结果填写HIV抗体筛查阳性送检单。3.15 标本留存转送 阴性标本收集血清冷冻保存一年。并填写阴性血清保存记录表,阳性标本收集血清封口包好,冷藏运送送确认实验室。4.支持性文件
全国艾滋病监测工作规范
篇6:关于艾滋病实名检测的调查报告
调查地点:全国
调查内容:关于艾滋病实名检测的调查
调查方式:网络调查
近日,新华网推出了“艾滋病检测该不该实名制?”的网上调查。结果显示,近半数网友支持艾滋病“实名检测”。
截 至24日15时,共有1492名网友参与了“艾滋病检测该不该实名制?”的调查。调查显示,49.5%的网友支持艾滋病检测实名制,认为实名制有利于艾滋病防控;33.9%的网友反对实行实名制,认为有可能会暴露病人的隐私,吓退潜在感染者;15.7%的网友认为实名检测有利有弊,但问题多,应慎重推 行;0.8%的网友认为跟自己关系不大,不会去做检测。
图表:近半数网友支持艾滋病“实名检测”
近半数网友支持艾滋病“实名检测”,认为实名制有利于艾滋病防控。新华网发 展论坛网友“雨中睡莲” 说,实施艾滋病实名制是非常必要和紧迫的。他认为健立健全艾滋病人档案,一是便于管理,二是便于帮扶,三是便于保护其他健康人群。网友“照雪青莲”认为艾滋病患者实名制,确实会对患者带来一定的心理压力,但是却降低了艾滋病病毒传播的几率,从社会道德和社会责任感的角度上考虑,是减轻大众心理压力、提高全民身体素质、保障大众生命健康安全。
中国疾控中心艾滋病预防控制中心政策研究室主任吕繁认为,实名 制实际上的直接受益者是感染者和病人,如果不实名的话,就有可能在一旦确认阳性之后,一些后续服务就会跟不上,因为找不到人。其次,是对整体的防控有利。很多国内外的研究证明,实名制及时把感染的状况告知本人,以及相关的人员,有利于感染者和其他人员采取必要的措施,来减少高危行为,进而减少艾滋病的传 播。
33.9%的网友反对实行实名制,担心强推艾滋病检测实名制会造成高危人群拒绝检测。网友“tomatoes”认为,“实名制”可能带来更多的问题,使更多的可能得了艾滋病的病人不敢去检测,以至出现更多的隐蔽病人,那危险性会更大。
篇7:艾滋病检测
1、全身乏力、食欲不振、连续发低烧、体重明显下降,会在短时间中突然消瘦下来。其中有些症状与患感冒相类似。
2、长时间咳嗽难以停止,咳出的痰液中带有血,伴有胸口疼痛症状。
3、皮肤上陆续出现疱疹情况,而且疱疹范围呈扩大趋势,具有明显疼痛感,以及经过几个月时间治疗,仍然不见起色。另外,口腔以及咽喉处出现黏膜发炎以及溃烂情况。
4、在没有明确原因下出现腹泻情况,经过长时间治疗后还是没有痊愈。
5、艾滋病会对神经系造成影响,所以患艾滋病的话,会伴有智力不断减弱、抽风偏瘫,感觉头晕和疼痛等症状。另外,身体衰老状况也会加快。
6、连续半年以上时间出现淋巴肿大症状,而且对于普通治疗没什么效果。这种情况下,需警惕是患艾滋病初期症状表现。
有些人喜欢用艾滋病初期症状来怀疑自己是否感染了艾滋病?其实,艾滋病初期症状不是判断艾滋病感染的标准,艾滋病只能通过检测手段来判断,在没有检测之前,勿要自己诊断,以免给自己带来太大的心理压力,如果怀疑自己有可能感染上艾滋病病毒时,应到有条件的医院或其他指定的卫生部门去作艾滋病病毒抗体检测,以确定是不是感染了艾滋病病毒,也可以到网站nothiv_net购买艾滋病检测试纸自行检测,建议用2种不同试纸或者检测2次以上排除感染艾滋病的可能。
问3:艾滋病传播途径【相关关键词:艾滋病的传播途径,艾滋病性传播途径,艾滋病主要传播途径,艾滋病不会传播途径,蚊子能传播艾滋病吗,艾滋病传染途径,艾滋传播途径,爱滋病传播途径,艾滋病传播方式】
答3:艾滋病病毒感染者虽然外表和正常人一样,但他们的血液、精液、阴道分泌物、皮肤粘膜破损或炎症溃疡的渗出液里都含有大量艾滋病病毒,具有很强的
***1111 传染性;乳汁也含病毒,有传染性。唾液、泪水、汗液和尿液中也能发现病毒,但含病毒很少,传染性不大。中国艾滋病网【nothiv_net】已经证实的艾滋病传染途径有四条:
1、性传播
2、血液传播
通过静脉注射毒品的人共用未经过消毒的注射器:输用未经艾滋病病毒抗体检查的供血者的血或血液制品,以及类似情况下的输骨髓和器官移值;注射器和针头消毒不彻底或不消毒,特别是儿童预防注射未做到一人一针一管危险更大;被艾滋病病毒污染的注射器及针头是通过血液传播艾滋病的重要媒介。在西方国家,静脉注射毒物成隐者是仅次于同性恋者的第二最大艾滋病危险人群,尤其女性艾滋病病人中的静脉药瘾者达半数以上。许多静脉注射毒物成瘾者往往共用一个注射器和针头,如果有一位艾滋病病毒携带者,针头或注射器就会被污染,也就在他们之间造成了相互感染的机会。目前普遍认为,未经消毒的公用针头,传播艾滋病病毒模式与乙型肝炎相似。在非洲一些国家,使有未经消毒洗涤的注射器、注射针头,是该地区艾滋病高发的原因之一。
口腔科器械、接生器械、外科手术器械、针刺治疗用针消毒不严密或不消毒;理发、美容(如纹眉、穿耳)、纹身等的刀具、针具、浴室的修脚刀不消毒;和他人共用刮脸刀、剃须刀、或共用牙刷;救护流血的伤员时,救护者本身破损的皮肤接触伤员的血液。在实验室已从病人的血液、唾液、眼泪、乳汁、尿液和脑脊液中分离了艾滋病病毒,但从流行病学证据只证明血液和精液有传播作用。目前通过输血传播艾滋病在发展中国家,特别是在一些非洲国家和地区是一个亟待解决的问题。几乎大部分非洲国家,主要以非志愿献血为主,他们大多是青壮年,都处在性活动高潮的年龄段,这意味着他们所提供的血液很可能具有感染艾滋病病毒的机会。将这些血及血液制品输给其它病人,便可能感染艾滋病。如血友病是一种遗传性出血性疫病,该病由于缺乏体内不可少的凝血因子VM或IX引起,血友病治疗主要是定期注射血浆冻干浓缩制剂或冷沉淀制剂。每一批号浓缩制剂来自2000-5000名不同供血者的血浆,只要其中任何一份供血者中有艾滋病病毒,制剂就会被污染,接受治疗的血友病人也就随这被感染。我国发现艾滋病病毒感染者中,有4例就是由于输入了外国进口的血液制品而被感染。有资料表明,***1111 美国制备的浓缩凝血因子VM或IX在艾滋病传播中曾一度起重要作用,在该国接受凝血因子治疗的血友病病人,艾滋病发生率比欧洲高,可能与美国制备的血液制品污染程度较高有关。
3、母婴传播
已受艾滋病病毒感染的孕妇可通过胎盘,或分娩时通过产道,也可通过哺乳,将病毒传染给婴儿。患有艾滋病或携带有艾滋病病毒的孕妇可通过胎盘将艾滋病病毒直接传染给胎儿,另外还能够在产前、产程中(出生时通过产道)和产后(通过哺乳)感染新生儿。有资料表明,艾滋病婴儿的父母一方约73%为艾滋病病人或是艾滋病的高危人群;所有被艾滋病病毒感染的婴儿其母亲均是血清学试验阳性的病毒携带者;而在父亲带有病毒,母亲不带病毒的家庭中,到目前为止尚未发现过艾滋病婴儿。这说明:婴儿艾滋病病毒感染总是来自母亲而不是父亲。在多数情况下,往往是父亲先受感染,然后传染给母亲,既而又传染给了婴儿。
4、其它途径
如使用被艾滋病病毒污染的器官作移植术的同时,也将艾滋病病毒植入体内。另外在人工肥精过程中,接受了感染艾滋病病毒的精液也同样造成了感染艾滋病的机会。在与艾滋病病人接触的职业人员(如医务人员、警察、理发师、监狱看守、殡葬人员),如果皮肤有破损时,接触艾滋病病毒,则可能被感染。尽管艾滋病病人的唾液中含有艾滋病病毒,但至今,还未普曾发现通过唾液或共用口杯而发生艾滋病的传播病例,这可能是唾液中含有防止艾滋病病毒感染因子,可以阻止艾滋病病毒的侵犯,因此,接吻可能不是艾滋病的传播的途径。1988年7月《美国医学协会杂志》刊登了有关艾滋病传播途经的报告,该报告指出,目前没有任何迹象表明艾滋病病毒是通过唾液、泪液、尿液、餐具、疫菌偶然的接触或昆虫传播的,说明艾滋病病毒不会通过日常生活接触而传染。艾滋病病毒也不会通过空气、饮水、食品、以及未消费的餐具、衣服被褥、货币等物品而传染。一般也不必担心与艾滋病病人握手、轻吻或共用电话、马桶、桌椅等而被感染。旅游池和公共浴池一般也不会传染艾滋病。各种家养动物不可能携带艾滋病病毒,因此,艾滋病也不能通过动物的咬伤,抓伤而传播。
不会传染艾滋病病毒的途径:
***1111
空气;饮水、食物;日常工作和生活接触;游泳池;吸血昆虫和蚊子、跳蚤、虱子等,目前还没有发现传播艾滋病病毒的吸血昆虫;有防护的照料、护理艾滋病人;蹲式厕所及小便池。
问4:艾滋病自测【相关关键词:艾滋病的自测,艾滋病咨询自测中心,艾滋病自测网,艾滋病自测试纸准吗,自测艾滋病准吗,艾滋病检测,艾滋自测,爱滋病自测】
答4:艾滋病无法从症状上直接判断是否感染,可以没有任何症状,或症状很轻微,容易被忽视,艾滋病检测是唯一有效的诊断途径。进行艾滋病检测,有利于控制艾滋病的蔓延,对家人和社会负责。
如何检测?可以去医院,也可以选择艾滋病自测(中国艾滋病网:nothiv_net)。艾滋病检测试纸,经国家药监局批准生产,是医院常用的快递诊断试剂(金标法),也是一种用于艾滋病自测的诊断产品,不需要辅助仪器,操作简单,15分钟出结果,准确度高,安全可靠。已广泛应用于医院、疾控中心和家庭艾滋病自测。
问5:艾滋病检测【相关关键词:艾滋病怎么检测,如何检测艾滋病,艾滋病自测,艾滋检测,爱滋病检测,艾滋病检测方法】
答5:艾滋病检测是指采用实验室方法对人体血液、其他体液、组织器官、血液衍生物等进行艾滋病病毒、艾滋病病毒抗体及相关免疫指标检测。
目前检测HIV的方法有100多种,总体来说可以分为抗体检测和病毒检测两大类。病毒检测包括细胞培养(病毒分离)、p24抗原检测和病毒核酸检测。早期对HIV的诊断主要是通过血清学试验检测抗HIV的抗体,间接地诊断HIV感染。中国艾滋病网称,近几年,分子生物学方法不断被应用到HIV的检测中,HIV的实验室诊断方法取得了很大的进展,核酸检测已经成为了HIV实验室诊断的发展方向。
抗体通常是在感染后3~8周能够被检测出来。目前,大多应用双抗原夹心法,这种方法具有很好的灵敏性和特异性。抗体检测由初筛和确认试验组成,初筛试验呈阳性的必须进行确认试验。酶联免疫吸附分析(ELISA)方法有一定的灵敏度,且操作简单、快速,适合对大量样品的检测。因此,是目前临床通用的初
***1111 筛检测方法。国际上有3种确认试验方法,包括免疫印迹试验、条带免疫试验及免疫荧光试验,目前以免疫印迹试验最为常用。
在窗口期,病毒抗体不能被检出,但可以检测到病毒相关抗原或分离病毒。抗原能够在个体感染后先于血清转化2~18 d被检测到。因此,在血清转化期通过检测p24抗原有着很大的优势,可以作为早期辅助诊断HIV感染的一种方法。
问6:艾滋病试纸【相关关键词:艾滋病检测试纸,艾滋病试纸购买,艾滋病试纸准确吗,艾滋病试纸在哪买,艾滋病检测,北京艾滋病试纸,艾康艾滋病检测试纸,艾滋试纸,爱滋病试纸,艾滋病试纸准吗】
答6:艾滋病试纸条是使用胶体金免疫层析科技研发的新一代检测试剂,可检测血清或血浆标本中的HIV-1/2特有性抗体。所有操作时间若是15分钟,动作简便、迅速、准确、自带质控对照、无需所有附加药剂。适合于临床检验、无偿献血现场筛查等。
胶体金法(金标)人类免疫缺陷病毒(HIV 1/2)抗体检测试剂盒是应用胶体金免疫层析技术建立的灵敏、特异、操作简便的一步法HIV 1/2抗体定性检测试剂。用于定性检测人血清或血浆样本中的HIV 1型和HIV 2型的特异性抗体,以辅助诊断HIV感染,其阳性结果需用免疫印迹法确认。
中国艾滋病网称,其检测原理是用HIV重组抗原和羊抗鼠IgG分别固定于硝酸纤维素膜,并和包被有胶体金标记的HIV重组抗原及鼠IgG的玻璃纤维纸片及其他试剂组成。应用胶体金免疫层析技术,采用双抗原夹心的原理检测人类血清及血浆样本中的HIV 1/2抗体。
检测过程中,血液标本加到试剂盒的加样孔中,样品首先和玻璃纤维纸片上胶体金标记的HIV重组抗原混合,接着再往硝酸纤维膜条上层析。如果样本中含有HIV 1/2抗体,这些抗体首先与包被HIV重组抗原的胶体金结合,这样混合物往硝酸纤维膜上层析时,便会被固定有HIV重组抗原的检测线(T线)捕获而形成胶体金标记抗原-抗体-抗原的双抗原夹心免疫复合物,因而在T线出现一条红色线条,为阳性结果。如果被检者血液中没有HIV 1/2抗体存在,则不会在检测线(T线)上形成红色线条,为阴性结果。在试剂盒上的质控线(C线)包被有羊抗鼠IgG,无论任何情况下都将与鼠IgG-胶体金结合在质控线上出现红色线
***1111 条,以证明试剂盒工作正常。
其特点是方便、快速(10分钟出结果)、准确、是筛查艾滋病患者的首选方法
问7:艾滋病窗口期【相关关键词:艾滋病窗口期多久,艾滋病的窗口期,专家谈艾滋病窗口期,艾滋病窗口期皮疹,艾滋病窗口期传染吗,艾滋窗口期,aids窗口期,艾滋病窗口期6个月】
答7:中国艾滋病网称,艾滋病窗口期是针对两种艾滋病检测的标志物而言,并非一个笼统的概念。人体感染HIV后,一般需要2-3周,最多6周左右血液中才可检测到HIV抗体或者HIV抗原。因为从感染HIV到机体产生抗体的这一段时间检测不到HIV抗体或者HIV抗原,故称之为窗口期,又叫做空窗期,是英文Window Period的翻译。值得注意的是,感染艾滋病病毒的个体在窗口期内同样具有传染性。
HIV抗体的窗口期:
理论上HIV抗体在人体感染艾滋病病毒的最初就会出现,但当时浓度极低,已经超越了常用检测手段的范畴,当人体感染艾滋病一周左右就可以双原夹心法(金标)法进行检测,但此时抗体浓度较低,在检测上有一定的误差。当人体感染艾滋病病毒达到14~21天,大多数检测方法包括酶联法和双原夹心法就可以得到相当准确的结果。人体感染艾滋病病毒42天,也就是6周左右的时候,人体HIV抗体的浓度达到峰值,随后缓慢下降。
每一个刚感染上艾滋病病毒的人,都存在一个“窗口期”过程。所谓“窗口期”,是指HIV最初进入人体到产生可检测出病毒抗体的时间,通常为两周到三个月,甚至可能到六个月。因此如果有了一次“危险行为”,害怕自己感染上艾滋病,立即去作了艾滋病病毒抗体检测,结果为阴性,这时下结论说没有感染上艾滋病还为时过早,而应该在过了“窗口期”后再作一次检查。如果第二次检查没有问题,才能确定没有感染艾滋病病毒,但还必须确定在第二次检查前再没有过新的“危险行为”。特别要指出的是,如果一个人的确感染了艾滋病病毒,即使在所谓的“窗口期”,此人仍可传播艾滋病病毒。
***1111 窗口期的长短决定了恐艾时间的长短,多数人的窗口期为2~6周,因此过半的人能在高危6周后基本脱恐或减轻恐惧。同时,我国大部份CDC举张窗口期为3个月,因此这也直接导致恐艾者必须拿到三个月后的阴性结果,才能完全放心。不管是3个月,还是6周。对恐艾者来说,都是一个慢长的过程,影响工作,学习,甚至家人间的感情。中国艾滋病网给出以下几点建议:
1、正确认识艾滋病,了解艾滋病传播途径,可到网站查看相关资料,减轻自己的心里负担
2、任何症状都不能代表感染了HIV 事实上,在感染HIV的初期,至少有一半的人无明显的症状,另外,目前为止,也没有任何一种症状能直接就断定感染了HIV。
3、转移自己的注意力
当压力积累到一定程度时,应该找人交谈,也许交谈并不能得到某种结论,但交谈的过程却能让你释放压力。需要注意的是,平静下来后,应努力转移注意力,如果一味的关注HIV/AIDS,很快又会陷入极度恐惧当中。
4、寻找反症状
大多数人恐艾,是因为对照艾滋病初期症状的结果。与其寻找与感染相符的症状,不如找点相反的证据,比如皮肤完好,无淋巴结肿大等。
5、坚信自己能够脱恐
事实上,每个人都能脱恐,只是时间的长短不同而己。要坚信,自己能够挺过去,最终恢复正常的生活。这就好比冬天,不管有多冷,春天一定会来。问8:艾滋病窗口期症状【相关关键词:艾滋病的窗口期症状,艾滋窗口期症状,hiv窗口期症状图片,艾滋病的窗口期,艾滋病窗口期皮疹】
答8:一个在艾滋病窗口期症状表现是什么呢,很多人问这样的问题,怀疑自己
***1111 有艾滋病窗口期症状,但是就算有艾滋病窗口期症状也不能说这个人有艾滋病,要过了艾滋病窗口期才能判断,艾滋病窗口期症状也会更明显,下面来看看艾滋病窗口期症状吧。
艾滋病窗口期症状有哪些? 艾滋病窗口期症状有:淋巴结肿大、皮疹、盗汗、头痛、咳嗽、长期低热、慢性腹泻、体重下降、咳嗽、口腔病变、关节痛、肌肉痛、斑丘疹、荨麻疹、腹痛、腹泄、卡波济肉瘤。
中国艾滋病网称,如果怀疑自己有可能艾滋病窗口期症状时,应尽早到有条件的医院、卫生防疫站、其他指定的卫生部门或用艾滋病检测试纸进行抗体检测。以确定是不是感染了艾滋病病毒。每一个刚感染上艾滋病病毒的人,都存在一个“窗口期”过程。所谓“窗口期”,是指HIV最初进入人体到产生可检测出病毒抗体的时间,通常为两周到三个月,甚至可能到六个月,此时艾滋病窗口期症状比较明显。因此一个人如果有了一次“危险行为”,害怕自己感染上艾滋病,或者怀疑有艾滋病窗口期症状,立即去作了艾滋病病毒抗体检测,结果为隂性,这时下结论说这个人没有感染上艾滋病还为时过早,而应该在过了“窗口期”后再作一次检查。其艾滋病窗口期症状表现也不能说就有艾滋病,如果第二次检查没有问题,才能确定此人没有感染艾滋病病毒,但还必须确定此人在第二次检查前再没有过新的“危险行为”。特别要指出的是,如果一个人的确感染了艾滋病病毒,即使在所谓的“窗口期”,没有艾滋病窗口期症状此人仍可传播艾滋病病毒。
问9:艾滋病检测试纸购买【相关关键词:艾滋病试纸上门购买,艾滋病自测试纸购买,艾滋病试纸购买】
答9:艾滋病试纸属于专业检测试剂,用于疾控中心等艾滋病检测机构,无法在药店和医院购买到。艾滋病检测网权威提供艾滋病检测试纸(厂家直供),选用疾控中心等医疗机构使用的专业检测试纸(没有任何区别),全部通过医疗机构严格审核与认证(可登录国家药监局网站输入认证号查询),在家自我检测十分钟就可以得到结果,准确率达到99.7%以上,简单方便,快速保密,权威准确,安全可靠。
***1111
问10:接吻会传染艾滋病吗【相关关键词:接吻会传染艾滋病,唾液会传染艾滋病吗,蚊子会传染艾滋病吗,艾滋病会传染吗,舌吻会传染艾滋病吗,口水会传染艾滋病吗,接吻会传染艾滋吗,带套会传染艾滋病吗,坐厕会传染艾滋病吗 】 答10:礼节性接吻是不会感染艾滋病的。但是非礼节性接吻,就是通常说的法式接吻是有可能传染艾滋病的,但是可能性比较小
艾滋病的传播条件是体液交换和足够的病毒量侵入。法式接吻的过程存在唾液交换,如果双方口腔内有粘膜破损(有牙周炎的人常有),就会存在血液、唾液的交换。一旦一方有携带艾滋病病毒,就有可能通过体液交换进入另一方。中国艾滋病网称,如果双方没有口腔破溃,只存在唾液交换,由于唾液中的艾滋病毒量比较少,要造成艾滋病感染的话需要很大量的唾液(2L)交换才可以,一般接吻是不太可能达到这个量的。
如果双方都有口腔破溃,存在血液交换,那么就有可能感染艾滋病。
问11:艾滋病检测的最佳时间【相关关键词:艾滋病的检测时间,艾滋病最佳检测时间,艾滋病检测多长时间,艾滋检测时间,爱滋病检测时间】
答11:很多人对艾滋病十分恐惧,有高危行为后不知道什么时间做检测,造成身心健康受到极大伤害,严重影响了工作、学习和生活。下面以科普形式提供给广大朋友,希望能给您带来帮助。北京佑安医院性病艾滋病诊疗中心李群辉
中国艾滋病网称,艾滋病检测的最佳时间,对于一个怀疑感染的人来说是件非常重要的事情。因为患有艾滋病的人,在早期极少出现让人们感到异常的症状,所以常常被人们所忽略。一直到了发现症状的时候才就诊,治疗已经极为不容易了。所以在感染早期及时进行艾滋病抗体检测、及时发现感染者并及时预防对极大地降低感染他人的机率是十分重要的。
高危行为后一般需要2-4周时间就可以检测出艾滋病HIV抗体。高危行为后2周开始可检测出艾滋病抗体,也就是说2周后就适合做艾滋病抗体检测了。时间越往后,检测的准确性就越高;绝大多数被HIV感染的人在4周后就能够产生足够多的抗体。
需要注意的是人体感染艾滋病后,都有一段“艾滋病窗口期”。窗口期的长
***1111 短存在个体差异, 大约为2周到3个月。窗口期的计算应从高危行为之时或是接受输血之时算起,一般感染HIV后产生血清抗体的平均时间为45日或更短些。高危行为后出现血清抗体阳性的时间为 2-8周,这应该是检测比较好的时间段。
艾滋病窗口期内的检测结果都不是最终的结果。目前国内专家认定的窗口期是高危后3个月。著名专家曹韵珍教授的最新研究成果表明窗口期是6周即42天。
一个个体假如感染艾滋病3个月后不产生血清抗体是极其罕见的。3个月检测为阴性就不需要再进一步检测了,除非这个个体心理极度恐惧或又发生了高危行为。
建议:科学研究表明:高危后2-4周做初检,满4周结果是阴,则可排除感染率为98%左右;满8周后复检,结果是阴,可排除感染率99.99%;只有约万分之一的人窗口期在8周到3个月,为了100%排除感染的可能性,最好满3个月做最终复查,阴性即可完全排除。
篇8:艾滋病的实验室检测
1 资料与方法
1.1 研究对象
56例确诊艾滋病合并马尔尼菲青霉菌感染患者及50例单纯HIV早期感染者,均符合美国疾病控制中心1993年颁布的AIDS诊断标准,均经深圳市疾病控制中心艾滋病确认实验室WB方法确认,同时也符合马尔尼菲青霉菌诊断的金标准,其血标本真菌培养分离出马尔尼菲青霉菌,结合临床症状确诊为AIDS合并马尔尼菲青霉菌感染。其中,男32人,女24人,平均年龄(34.3±10.1)岁。同时选取50例单纯HIV早期感染者作为对照组。其中,男26例,女24例,平均年龄(30.0±11.2)岁。所有研究对象均符合深圳市第三人民医院伦理委员会要求,均已签署知情同意书。
1.2 试剂与方法
1.2.1 PM培养Versa TERK细菌培养仪
法国梅里埃公司生产BACTALERT 120全自动血液培养仪;培养基:沙氏琼脂培养基,血液增菌培养液由深圳市惠安科技有限公司生产。
1.2.2 血常规分析
采用法国产MINDRAY BC-5500全自动五分类血液分析仪及配套试剂,实验方法按仪器说明书操作。
1.2.3 外周血T淋巴细胞亚群检测
试剂采用法国Immunotech公司的三色荧光标记的单克隆抗体CD4-异硫氰酸荧光素(FlTC)/CD8-藻红蛋白(PE)/CD3-PC5;用Coulter Epics XL流式细胞仪(美国Beckman Coulter公司)进行标本的CD4细胞绝对数、CD4细胞相对记数(CD4/白细胞总数)、T总淋巴细胞(CD3+)计数、辅助性T淋巴细胞(CD3+CD4+)计数、杀伤性T淋巴细胞(CD3+CD8+)细胞计数。
1.2.4 肝功能测定
血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)试剂及标准品均购自德赛诊断系统(上海)有限公司。采用日本产OLYMPUS AU2700全自动生化分析仪进行检测。血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)采用法国产STAGO全自动血凝分析仪及配套的试剂和标准品进行检测。
1.3 统计学处理
使用统计学软件SPSS 13.0统计数据以表示,组间比较用t检验,P<0.05为差异有显著性。
2 结果
2.1 艾滋病合并马尔尼菲青霉菌感染血液培养结果
马尔尼菲青霉菌的分离:取血液标本4 m L分别注入30 m L的需氧和厌氧血液增菌培养液各1瓶,37℃培养7 d,阳性瓶涂片革兰染色为真菌后,转接2个沙堡弱氯霉素培养基,分别于25℃和37℃孵箱温育[1]。2 d后从平板菌落形态,镜下菌丝、孢子形态及产色素的情况进行鉴定。
马尔尼菲青霉菌是青霉属中唯一的双相型真菌,血液标本在25℃呈菌丝型:沙氏培养基上2~3 d产生菌落,呈淡灰褐色膜样或淡黄色绒状,直径约5mm,并产生红色色素,扩散入培养基中。菌落棉兰染色镜检,镜下可见有分枝、分隔、透明菌丝,部分菌丝呈帚状枝(图1)。血液标本在37℃呈酵母相:6~8 d菌落直径约3~5 mm,呈淡灰褐色或奶酪色膜样,2~3周时直径10~16 mm,有脑回状皱褶,无色素生成,菌落涂片革兰氏染色镜检见圆形、椭圆形或长形酵母样菌体,部分呈腊肠样有横隔。结合培养和镜检特征,可排除荚膜组织胞浆菌,鉴定为马尔尼菲青霉菌(图2)。
A:菌落形态(25度,沙保弱培基培养7 d);B:镜下结构图(40×10,棉兰染色,胶带法粘取)
A:菌落形态(37度,沙保弱培基培养);B:镜下结构图(100×10,棉兰染色,盐水涂片)
2.2 艾滋病合并马尔尼菲青霉菌感染者外周血细胞计数结果
与50例HIV感染者比较,56例艾滋病合并马尔尼菲青霉菌感染者外周血三系均降低,白细胞总数(WBC)明显降低,中性粒细胞比例增高,淋巴细胞比例相对减少;红细胞总数(RBC)、血红蛋白(Hb)减少,红细胞分布宽度(RDW)增加:血小板计数(PLT)减少。以上各组数据组间比较,均P<0.05,差异具有显著性,见表1。
2.3 艾滋病合并马尔尼菲青霉菌感染者外周血T淋巴细胞计数结果
与50例HIV感染者比较,56例艾滋病合并播散性马尔尼菲青霉菌感染者外周血T淋巴细胞亚群计数均异常,所有患者外周血CD4细胞绝对计数均小于50/μL,T总淋巴细胞、辅助性T淋巴细胞、杀伤性T淋巴细胞、CD3+CD4+/CD3+CD8+均异常。(以上各组数据组间比较,均P<0.05,差异具有显著性,见表2。
2.4 艾滋病合并马尔尼菲青霉菌感染者肝功能测定结果
56例艾滋病合并马尔尼菲青霉菌感染者存在ALT、AST、TBIL、PT及APTT水平的异常,其水平明显高于单纯HIV感染的患者,提示马尔尼菲青霉菌感染使肝功能受到一定程度的损伤,以上各组数据组间比较,均P<0.05,差异具有显著性,见表3。
3 讨论
马尔尼菲青霉菌(penincillium marneffei,PM)为条件致病菌,可寄生于细胞内,是青霉菌中惟一的温度依赖性双相菌。该菌主要分布于东南亚及我国南方,竹鼠是它的自然宿主。它可通过竹鼠的粪便污染土壤,人可通过呼吸道、消化道以及皮肤损伤而感染该菌[2]。马尔尼菲青霉菌病(penincillionsis marneffei,PSM)是由马尔尼菲青霉菌引起的一种少见的深部真菌感染的全身性疾病,其发病与机体免疫功能密切相关,在免疫功能正常时发病率极低,且病灶局限。但对免疫功能缺陷的人群,尤其是人类获得性免疫缺陷综合征(acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)即艾滋病患者,易形成播散性感染[3],即艾滋病合并播散性马尔尼菲青霉菌感染。
马尔尼菲青霉菌病病情凶险,且临床表现各异,易误诊,若延误治疗,则死亡率高。但只要诊断明确,采取有效抗真菌治疗措施,本病是可以治愈的。资料显示:在正常人,人体抗马尔尼菲青霉菌免疫与其它细胞内病原体的免疫机制类似,是以细胞免疫为主,其过程主要涉及巨噬细胞对真菌的吞噬和由致敏T细胞所介导的迟发型超敏反应两大部分。由于马尔尼菲青霉在人体(37℃)内以酵母相生长,其大小适宜于巨噬细胞吞噬,巨噬细胞呈递真菌抗原至致敏T淋巴细胞,后者通过释放淋巴因子,活化巨噬细胞的酶系统,达到杀菌作用。
本研究显示,马尔尼菲青霉菌在不同的实验环境中培养的时间与形态是不同的,在临床工作中应注意鉴别。此外,临床上发现艾滋病合并马尔尼菲青霉菌感染者,大多数为艾滋病晚期患者[4,5,6],并且笔者发现艾滋病合并马尔尼菲青霉菌感染者的外周血三系细胞明显减少,同时患者的细胞免疫接近崩溃,同时还伴有肝功能的损伤。分析原因,主要是因为艾滋病晚期患者,CD4 T细胞数量明显减少或缺失,这时吞噬了真菌的巨噬细胞无法活化杀菌,导致巨噬细胞大量增生,其中的真菌大量繁殖,这些含菌的巨噬细胞经淋巴和血液循环造成全身播散性感染[7]。此时全身单核巨噬细胞系统均有明显的巨噬细胞增生反应:肝、脾肿大,实质受增生的巨噬细胞压迫而萎缩,也可以出现灶性干酪样坏死[8];淋巴结肿大,其中淋巴细胞数量显著减少,增生的巨噬细胞形成境界清楚或模糊的结节,有时结节中央有坏死,结节周围可见少量残存的淋巴细胞、浆细胞等[9,10,11]。播散型患者骨髓涂片经姬姆萨及瑞氏染色可见骨髓单核细胞增生极度活跃,造血成分相应减少,导致外周血细胞计数三系均降低,明显贫血,最终发展成霉菌性败血症,而霉菌性败血症往往合并肝功能损伤,ALT、AST、TBIL升高,PT、APTT延长。
对AIDS中晚期患者如出现相关的临床症状除考虑恶组、淋巴瘤等病外,还要考虑PM感染,及时送检标本查找病原体,做好相应的实验室检查,以便及早确诊,使该病得到早诊断、早治疗,防止马尔尼菲青霉菌病漏检、误诊。
参考文献
[1]CHAIWARITH R,CHAROENYOS N,SIRISANTHANA T,et al.Discontinuation of secondary prophylaxis against penicilliosismarneffei in AIDS patients after HAART[J].AIDS,2007,21(3):365-367.
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