油乳剂疫苗

关键词：

油乳剂疫苗（精选八篇）

油乳剂疫苗 篇1

关键词：大肠肝菌,油乳剂,灭活苗,检测

大肠杆菌是引起重要畜禽疾病的病原菌之一, 近年来, 随着大量高效抗菌药物的普遍应用, 大肠杆菌的抗药性也越来越强, 这给防治大肠杆菌病带来很大的困难。因此研制大肠杆菌不同血清型的油乳剂疫苗特别是自家灭活疫苗, 越来越受到重视并被广泛的采用。本试验对致病性大肠杆菌进行了培养, 研制了大肠杆菌油乳剂灭活疫苗, 对油乳剂疫苗的制备、检测作以阐述。

1 材料方法

1.1 材料

1.1.1 大肠杆菌样品

来自山东聊城临清市5个肉仔鸡养殖场的大肠杆菌病病死鸡, 无菌采取心、肝、脾病料, 于麦康凯琼脂培养基划线分离纯化培养;并通过试管凝集试验确定其血清型主要为O32, O68, O78, 扩大培养作为大肠杆菌种液。

1.1.2 培养基

麦康凯琼脂, 普通肉汤, 普通琼脂等培养基, 购自天津英博伦生化试剂有限公司。

1.1.3 试验动物

家兔和健康鸡, 由山东农业大学动科院畜牧场提供。

1.1.4 试剂

10号医用白油;Span-80 (去水梨醇单油酸酯) 或Span-85 (去水梨醇三油酸酯) , Tween-80 (聚氧乙烯脱水山梨酸) ;甲醛液、硬脂酸铝。

1.1.5 仪器及设备

光学显微镜, 温箱, 高压灭菌锅, 组织粉碎机, 离心机等由山东农业大学动科院临床系实验室提供。

1.2 方法

1.2.1 细菌培养液的制备

制备100ml普通肉汤培养基高压灭菌15磅20min冷却;同时制备多个100ml营养琼脂培养基, 灭菌备用。

1.2.2 增菌培养及细菌灭活检验

在普通肉汤培养中接种大肠杆菌种液, 每个三角烧瓶接种5ml, 37℃培养24h后细菌计数。加0.5%的福尔马林灭活菌液24h。

1.2.3 细菌计数 (倾注培养法)

检测样品→做成8个适当倍数稀释→选择最后2～3管, 每个稀释加1ml于2个平皿中→加营养琼脂培养基 (取6个平皿) →37℃, 24h培养→计数。

1.2.4 油乳剂的配制及灭活疫苗的制备

白油佐剂配制方法:白油:Span-80:Tween-80=90:7.6:2.4混合再加总重量2%的硬脂酸铝混合均匀, 116℃高压灭菌及为白油佐剂。本试验制备的油乳剂为单向性油包水型 (W/O) , 以10号白油为油相, 以Span-80为油相乳化剂, 硬脂酸铝为稳定剂, 以Tween-80为水相乳化剂。将油相与水相按一定3:1比例混合, 组织捣碎机高速10000r/min搅拌5min, 经48h灭活制成油乳剂疫苗, 抽检、分装备用。

1.2.5 油苗品质检查

(1) 无菌检验。取油乳剂疫苗5ml, 接种于普通营养琼脂及厌氧肉汤中, 37℃培养24h, 观察有无细菌生长。 (2) 安全检验。取健康的20日龄AA肉鸡5只、家兔2只肌内注射2ml, 又取同样数量的肉鸡和家兔腹腔注射2ml, 并做对照组, 饲养15d, 观察肉鸡家兔临床表现。 (3) 效力检验。取油苗肌肉注射20日龄雏鸡10只, 0.13ml/只, 另设10只对照, 25d以后, 用以上致病性大肠杆菌血清型108～109个/只, 腹腔注射, 观察15d。 (4) 物理性状检查油苗滴于蒸馏水表面试验:将疫苗滴于蒸馏水表面, 观察油苗扩撒程度;粘度测定:用1ml直径1.2mm吸管, 室温垂直放出0.4ml, 记录所需时间;稳定性测定:油苗经3000r/min离心15min;颗粒大小:抹片镜检观察颗粒大小。

2 试验结果

试验结果表明大肠肝菌种液增菌效果良好, 数量多, 符合疫苗制作要求;油乳剂灭活为油包水型无细菌, 性质稳定, 颗粒均匀 (表1) 。安全性和效力检查结果表明该疫苗安全可靠 (表2) 。

3 讨论与小结

本试验证明, 研制的鸡大肠杆菌油乳剂灭活苗物理性状符合要求, 制苗工艺合理, 所选菌株可以用于油乳剂灭活苗制苗使用, 并能产生较好的免疫应答。

由于大肠杆菌致病性血清型较多, 且不同血清型间交叉保护率低。为提高免疫效果, 在制备灭活疫苗时宜从本地区或本鸡场分离到的不同血清型的菌株作为制苗菌种, 方能取得更好的免疫效果。灭活疫苗的保护率除与血清型有关外, 还与疫苗的灭活方法、水相与油相的比例、乳化剂的选择剂量以及乳化工艺有关。

本油乳剂油乳剂经试验证明安全可靠, 可以用于本地大肠杆菌病防控。但由于条件有限, 本试验在进行在安全性和效力检验时, 所用试验动物数量偏少, 今后应扩大试验动物数量, 保证疫苗安全性。

参考文献

[1]兰信海, 冯永胜, 祝贵华.鸡大肠杆菌油乳剂灭活疫苗的研制及效果观察[J].山东畜牧兽医.2003 (5) :1-2.

[2]周继宏, 庄国宏, 朱国强等.鸡大肠杆菌多价油乳剂灭活苗的研制[J].中国畜禽传染病.1998 (20) 1, 16-17.

[3]崔锦鹏, 颜世敢, 徐培莲等.鸡大肠杆菌多价油乳剂灭活疫苗的研制及应用[J].山东农业科学.2000 (6) :45-46.

[4]王海珍, 郑明学, 李赟等.鸡致病性大肠杆菌油乳剂灭活苗的制备[J].兽医研究.2007 (213) :10-11.

[5]姚火春.兽医微生物学试验指导[M].第2版.中国农业出版社.2002.

[6]郝永清, 张爱荣, 陈晓杰.鸡大肠杆菌多价油乳剂[J].中国家禽.2003 (25) :6.

油乳剂疫苗 篇2

鸡减蛋综合症(EDS-76)是20世纪70年代后期发现的一种病毒性传染病,既可水平传播,又能垂直传播.不同年龄的肉鸡、蛋鸡均可感染本病,6-8日龄母鸡处于发病危险期.

作 者：陈智华 贺奋义 郭慧琳 陈伯祥 作者单位：陈智华(甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州,730070)

贺奋义(甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州,730070;甘肃省畜牧兽医研究所)

郭慧琳,陈伯祥(甘肃省畜牧兽医研究所)

油乳剂疫苗 篇3

按照乳化工艺和乳化设备发展的先后顺序, 本文仅对油乳剂 (W/O) 疫苗生产需要的设备及乳化设备的工作原理进行介绍:

1 搅拌

通过外力的帮助下将两种或者两种以上的物料通过流动的方式在彼此之间相互分布的一种操作, 以实现物料的混合均匀。

1.1 代表设备

注射器、组织捣碎机。

1.2 搅拌混合机理

(1) 通过注射器不断地将油水混合液抽入注射器, 打入搅拌容器, 形成对流、涡流以达到乳化目的。缺点是机械能太小, 不能将油水混合均匀, 达到充分乳化的效果, 乳化颗粒较大, 并且不均匀。保存时间较短, 易于破乳、分层。

(2) 组织捣碎机是通过高速旋转的搅拌桨将油水混合物充分混合均匀, 达到乳化效果。优点具有一定的剪切作用, 乳化效果也较注射器有了很大提高。缺点是容易形成切向流, 同心旋转, 形成乳化死角, 且容器较小, 产量有限。

2 胶体磨

胶体磨属于初级定子-转子系统, 由一可高速旋转的磨盘 (转动件) 与一固定的磨面 (固定件) 所组成。两表面间有可调节的微小间隙, 通常为50~150m, 当物料从此间隙通过时, 由于磨盘高速旋转, 附于旋转面上的物料速度最大, 而附于固定面上的物料速度为零, 其间产生较高的速度梯度, 从而使物料受到强烈的剪切摩擦和湍动骚扰, 产生微粒化分散化作用。

胶体磨有卧式和立式两种, 一般用于中低等粘度的料液。

3 真空乳化机

是物料在真空的状态下, 利用高剪切乳化器快速均匀地将禽流感抗原液水相分布与白油油相中, 其利用机械带来的强劲动能, 使物料在定转子狭窄的间隙中, 每分钟承受几十万次的液力剪切。离心挤压撞击撕裂等综合作用, 瞬间均匀地分散乳化, 经过高频的循环往复, 最终得到无气泡细腻及稳定的禽流感油乳剂疫苗。

真空乳化机主要由预处理锅、主锅、真空泵、液压、电器控制系统等组成。水锅与油锅的物料经充分溶解后被真空吸入主锅进行混合、均质乳化。

4 高剪切均质机

高剪切均质机是目前用的最广泛的均质机, 由转子或转子-定子系统构成, 工作时高速回转, 在叶片作用下流入的液体通过窄小的缝隙, 在很高的剪切力作用下破碎、分散、混合。经过高剪切均质机的物料粒径可达到1μm, 且稳定性好, 能耗低, 对禽流感抗原的破坏也小。

油乳剂疫苗 篇4

关键词：静水压力,病毒灭活,免疫原性

1895年Rogar等首次报道超高压可以破坏微生物的活性以来，超高压技术在各领域应用的研究不断深入。作为一种有效的灭菌消毒手段应用于食品保藏，不但提高了食品的安全性和稳定性，而且还不破坏食品的营养成分[1,2,3]。在食品加工工业广泛应用这种不需加热的新型食品保藏技术是一种趋势。超高压技术在生物领域应用的研究也取得了进展，如血制品制备、转化大分子结构、修饰酶活性、改变微生物代谢及基因表达[4]。近年来，国内外都报道了超高压对病毒结构和性质影响的研究[5,6,7,8,9]。

超高压技术处理病毒破坏了囊膜结构，不破坏颗粒的完整性，因此病毒毒力降低甚至失去感染性，却完整保留了免疫原性，可以诱导产生与原病毒相同的免疫反应[10,11,12,13,14,15,16]。Rogar等在20世纪50年代中期利用压力对寡聚蛋白质和病毒衣壳结构影响的研究制备脊髓灰质炎疫苗[17]。本研究采用静水压技术处理新城疫病毒La Sota株，探讨其灭活的合适压力和时间。并将静水压灭活的病毒液制成疫苗免疫SPF鸡，测定免疫后鸡血清抗体效价和强毒攻击保护试验，以常规灭活(甲醛)疫苗作对照，研究2种方法灭活病毒制成疫苗的免疫效果，以进一步探讨静水压灭活病毒制备油乳剂疫苗的工艺。

1 材料和方法

1.1 设备

HPP.L3-600/0.6型标准型超高压试验机(天津市森森生物工程技术有限公司)。

1.2 试验动物及毒种

SPF种蛋购自北京梅里亚维通实验动物技术有限公司;10日龄SPF鸡胚、30日龄SPF鸡由青岛宝依特生物制药有限公司质检室提供;新城疫毒种(La Sota株)。

1.3 制苗用病毒液制备

将NDV La Sota毒种作104或105倍稀释，尿囊腔内接种10日龄鸡胚，每胚0.1 mL，密封针孔，置37℃继续孵育，不必翻蛋。48 h前，每日照蛋1次，弃去不用，之后，每隔6 h照蛋1次，死亡的鸡胚随时取出，直至96 h，无论死亡与否，全部取出。置2～8℃隔夜。将冷却的鸡胚取出，用碘酊消毒气室部位，剥除气室部蛋壳，吸取胚液前，检查每枚鸡胚，凡胚胎腐败、胚液混浊及有任何污染可疑者弃去，无菌方法吸取胚液，放入灭菌的容器内并留样，测定血凝价及EID50[18]。

1.4 常规灭活（甲醛灭活）及检验

取检验合格的病毒液混合于罐内，加入0.1%甲醛溶液，37℃灭活16 h。抽样检验。取灭活病毒液，尿囊腔接种10日龄SPF鸡胚5枚，每胚接种0.2 mL，并盲传1代，检查鸡胚液血凝性，同时进行无菌检验。

1.5 对照疫苗制备（甲醛灭活）

取油相2份(94份白油、6份司本-80、2份硬脂酸铝，混合、加热熔化至透明，高压灭菌)放入乳化罐内，开动电机预乳化，同时徐徐加入水相1份(96份灭活病毒液加4份吐温-80)，加完后再以3 000 r/min乳化35 min。乳化后取10 mL以3 000 r/min离心15 min，若有分层现象，应重复搅拌1次。

1.6 静水压处理病毒

取检验合格的病毒液，按每袋100 mL分装于采血袋，在100、150、200、250、300、350、400 MPa的静水压力下分别保持10、15、30、45、60 min，取样无菌检验及测定EID50，根据试验结果选择合适的压力和时间灭活新城疫病毒。

1.7 电镜检查

将样品用2%磷钨酸 (pH6.8) 染色，采用悬滴法对经过不同静水压力处理的NDV样品以及大气压力处理的对照病毒样品进行负染后，在电镜下观察病毒粒子的形态。

1.8 RT-PCR检测

根据Genebank的NDV的F基因核酸序列利用DNA Star软件设计一对简并引物，对经过不同静水压力处理的新城疫病毒样品以及对照NDV La Sota株样品进行RT-PCR检测。

1.9 疫苗的制备（静水压灭活）

按1.5项对照疫苗制备(甲醛灭活)方法制备静水压灭活疫苗。

1.1 0 疫苗安全性检验

用30日龄SPF鸡20羽，随机分为3组，对照疫苗组10羽、静水压灭活疫苗组10羽，试验组翅翼内侧肌肉注射疫苗1.0 mL，另设对照组5羽，饲养观察21 d。

用18～22 g小白鼠10只，随机分为对照疫苗组与静水压灭活疫苗组各5只，皮下注射疫苗0.5 m L，饲养观察7 d。

1.1 1 免疫原性试验

对照疫苗、静水压灭活疫苗分别用30日龄SPF鸡60羽，各分8组，其中肌肉注射3组，每组10羽分别注射20μL、10μL、5μL;皮下注射3组每组10羽分别注射20μL、10μL、5μL;另设5羽不免疫作为对照。21 d后，采血分离血清，测HI抗体效价。同时连同对照鸡每羽肌肉注射鸡新城疫病毒强毒北京株(CVCC AV1611株)1.0 m L(含105.0ELD50)，观察14 d。

2 结果

2.1 制苗用病毒液制备

灭活前取出的鸡胚液病毒含量测定结果为108.83EID50/0.1 mL, HA效价为10 log2。

2.2 常规灭活（甲醛灭活）及检验

灭活病毒液接种10日龄鸡胚，盲传一代，两代接种鸡胚5/5健活，鸡胚没有病变，尿囊膜无病变，鸡胚液无血凝性。

2.3 对照疫苗制备（甲醛灭活）

乳白色油包水型，流出0.4 mL疫苗为3.5 s, 3 000 r/min离心15 min无水相析出，菌检结果无菌生长，甲醛残留量为0.067%。

2.4 静水压处理病毒

结果显示，150、200、250、300、350 MPa静水压力病毒灭活时间分别为60、50、30、20、20 min。结果表明静水压力越高病毒失活越快，作用越长病毒感染性就越弱，低压力长时间与高压力短时间灭活病毒的效果相同(见表1、图1)。

注：表示lgEID50的值。

2.5 电镜检查

电镜检查结果显示，NDV分别在150、200、250 MPa的静水压力处理20、15、10 min后，核衣壳和囊膜表面形态发生了明显的变化，即病毒粒子表面都有凸起形成，且静水压力越高时间越长，凸起越明显。

2.6 RT-PCR检测

用NDV F基因一对简并引物，不同静水压力保压不同时间处理后的NDV样品及对照病毒样品进行RT-PCR检测，结果所有的样品均扩增出0.5 kb条带。

2.7 疫苗的制备（静水压灭活）

乳白色油包水型，流出0.4 mL疫苗为3.3 s, 3 000 r/min离心15 min无水相析出，菌检结果无菌生长。

2.8 疫苗安全性检验

2组试验鸡都全部健活，对照疫苗组鸡注射部位有轻微的红肿，5 d内红肿全部消退，第21 d剖检2组都有部分鸡注射的疫苗未吸收完全，对照疫苗组3/10鸡有轻微炎症，而静水压灭活疫苗组则10/10鸡无炎症。

对照疫苗组小白鼠注射部位有较为明显的红肿，且第5 d红肿才逐步消退，对照疫苗注射部位有明显肿块，第21 d剖检2组小白鼠注射的注射疫苗未吸收完全，对照疫苗组10/10小白鼠有轻微炎症，而静水压灭活疫苗组则10/10小白鼠无炎症。

2.9 免疫原性试验

免疫21 d后采血测定血清中HI抗体效价，结果显示，静水压疫苗免疫20、10、5μL免疫组NDV HI抗体效价几何平均值分别为7.7～7.8log2、5.9～6.2log2、4.1～4.2log2，攻毒保护为10/10、9/10、7/10;对照疫苗(甲醛灭活)免疫20、10、5μL免疫组NDV HI抗体效价几何平均值分别为6.8～7.0log2、5.5～5.6log2、2.6～3.0log2，攻毒保护为10/10、8/10、3/10;对照鸡5/5死亡。结果表明静水压灭活病毒不会破坏其免疫原性(见表2-表3)。

注：HI抗体效价为log2对数的几何平均值。

注：HI抗体效价为log2对数的几何平均值。

3 讨论

1)静水压力作用会使病毒毒力下降或完全失活，压力越高病毒毒力下降越快。由于静止液体内任意一点任意方位的压力都相等，因此病毒颗粒经静水压力处理体积缩小，但不改变其形状[9]。Silva等研究表明不同的病毒对压力的敏感性不同，有囊膜病毒对压力比较敏感[16]。受静水压力作用而改变的囊膜双层脂质结构、衣壳蛋白亚基“构像漂移”改变壳粒对称性结构、核酸空间结构破坏致使病毒降低甚至失去感染性。Silva等[16]研究发现260 MPa处理VSV，感染性降低了4个数量级。Jlukiewicz等[17]发现200 MPa处理3 h，猴免疫缺陷病毒失活。Pontes等研究表明病毒压力灭活时间和液体成分有关系[18]。池元斌等[9]以250 MPa静水压力处理30 min犬瘟热病毒失去活性。如人巨细胞病毒(HCMV)、单纯疱疹病毒(HSV)、艾滋病病毒(HIV)、乙型肝炎病毒 (HBV) 等，25℃时300 MPa作用10 min即可灭活[8]。

2)静水压技术灭活病毒可以保留完整的病毒颗粒，仅丧失了原有的感染性而保持了病毒的免疫原性。Ishimaru等[19]利用透射电镜技术、光散射测量技术、荧光光谱技术及蔗糖密度梯度离心技术对静水压处理的口蹄疫病毒(FMDV)的结构进行研究，发现超高压前后病毒的结构没有发生明显的变化，光的散射值和荧光光谱在高压作用时发生了很大改变，表明其衣壳蛋白质的三级和四级结构发生了改变，蔗糖密度梯度离心结果沉降模式相同，表明超高压使病毒表面结构发生轻微变化而使其感染性丧失，但并不破坏二硫键、碳-碳键等共价键。

油乳剂疫苗 篇5

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 毒种

检验用强毒为PRRSV–S15株, 美洲型毒株, 毒价≥105.5TCID50/ml。由山东省农业科学院畜牧兽医研究所与青岛市畜牧兽医研究提供。

1.1.2 细胞

Marc-145细胞, 由山东省农业科学院畜牧兽医研究所提供。

1.1.3 疫苗来源

哈尔滨维科生物技术开发公司, 批号20050320。

1.1.4 试验动物

PRRS抗体阴性猪, 其中包括4周龄仔猪、母猪及种公猪。

1.2 方法

1.2.1 仔猪中和抗体测定与免疫攻毒

将4周龄仔猪分成3组, 每组5头, 其中1组作为对照。另2组试验仔猪免疫剂量分别为1ml/头和2ml/头, 颈部肌肉注射。免疫后14d、21d和28d采血、分离血清, 采用血清中和试验测定抗体效价。仔猪最后1次采血后, 连同对照组仔猪, 用PRRSV-S15进行攻毒, 滴鼻4ml/头 (4×105.5TCID50) , 注意观察攻毒猪群的临床症状。

1.2.2 母猪中和抗体测定与免疫攻毒

将配种前5～7d的母猪分成2个组, 每组3头, 其中1组作为对照, 对照组不免疫。试验组免疫剂量为4ml/头, 颈部肌肉注射。间隔20d后以相同剂量加强免疫1次。首免后14d、21d和28d采血、分离血清, 测定中和抗体效价。至怀孕90d时, 用PRRSV-S15进行攻毒, 滴鼻4ml/头 (4×105.5TCID50) , 注意观察攻毒猪群的临床症状和母猪产仔状况。

1.2.3 公猪中和抗体测定

将成年公猪分成2个组, 每组3头, 其中1组作为对照, 对照组不免疫。试验猪免疫剂量为4ml/头, 间隔20d以相同剂量加强免疫1次, 颈部肌肉注射。免疫后14d、21d和28d采血、分离血清, 采用中和试验测定血清抗体效价。

2 结果

2.1 仔猪免疫效力与攻毒保护

试验结果 (表1) 显示, 仔猪免疫PRRS疫苗1ml时, 14d中和抗体<1:9, 21d时中和抗体在<1:8～1:21之间, 28d时有3头仔猪产生的中和抗体<1:26, 攻毒后食欲下降, 体温升高至40℃以上, 维持5～8d, 剖检观察, 大部分发病仔猪淋巴结、扁桃体肿大, 肺脏充血, 有斑块状实变区, 另2头仔猪抗体达到1:26, 攻毒后体温、食欲等基本正常, 无不良反应。免疫2ml时, 14d中和抗体≤1:11, 21d时抗体在1:14～1:21之间, 至28d时, 80%的仔猪 (4/5) 抗体≥1:26, 攻毒后食欲体温均正常, 另外1头仔猪中和抗体为1:21, 攻毒后食欲下降, 体温升高。对照组仔猪攻毒后, 其中4头仔猪表现被毛粗乱、食欲减退、体温升高和不同程度的呼吸道症状, 1头对照仔猪攻毒后症状不明显。

根据试验结果, 将仔猪的最小免疫剂量定为2ml/头, 将1:26中和抗体水平作为能够抵御强毒攻击的临界值。

2.2 母猪免疫效力与攻毒保护

试验结果 (表2) 显示, 母猪免疫PRRS疫苗4ml, 至28d时, 9头母猪中和抗体效价均≥1:26, 攻毒后表现基本正常, 3#母猪所产仔猪有1头死亡是由挤压窒息引起的。而对照组攻毒后则表现食欲减退和发热, 5﹟母猪103d发生早产, 4﹟母猪所产仔猪中有2头死胎, 1头弱仔, 死亡胎儿的脐带出血。

2.3 公猪免疫效力试验

试验结果 (表3) 显示, 公猪免疫PRRS疫苗4ml, 28d时中和抗体效价均≥1:31。

3 小结与讨论

(1) 疫苗中的抗原含量是影响疫苗效力的重要因素之一。根据本次效力试验, PRRS疫苗剂量加大, 免疫后产生的血清抗体水平升高, 但二者之间并不呈现明显的线性关系。除疫苗抗原含量外, 免疫后产生的抗体水平高低与猪的品种、体质和环境等因素有着密不可分的关系, 也与PRRS较为复杂的免疫机制有关。通过本试验, 将中和抗体达1:26作为能够抵御强毒攻击的临界值, 这与Dewey的报道基本一致。

油乳剂疫苗 篇6

1 实验材料

1.1 药品与试剂

10%鸦薏油复方乳剂, 昌图县第一医院提供, 批号∶20081104;0.9%氯化钠注射液, 辽宁海神联盛制药有限公司, 批号:H20083483。

1.2 实验动物

猫, 体质量2.0~3.5kg, 雌雄兼用, 沈阳康平动物研究所提供, 合格证号:SCXK (辽2009-0012)

1.3 实验仪器

RM6240B型多道生理信号采集系统 (成都仪器厂) ;ECG-6511型心电图机 (上海光电医用电子仪器公司) 。

2 实验方法和结果

2.1 鸦薏油复方乳剂静脉滴注给药对猫血压、呼吸、心率及心电的影响

猫24只, 雌雄兼用, 随机分为4组 (每组6只) , 分别为空白对照组 (0.9%氯化钠注射液, 100mL/只) 、鸦薏油复方乳剂低剂量组 (5mL/kg) 、鸦薏油复方乳剂中剂量组 (10mL/kg) 和高剂量组 (20mL/kg) 。动物ip戊巴比妥钠40mg/kg麻醉后, 背位固定, 于颈部正中开口, 分离一侧颈总动脉, 插入动脉插管, 并与压力换能器相连, 测定收缩压 (SP) 、舒张压 (DP) 、平均动脉压 (MP) ;用呼吸换能器测定呼吸频率、呼吸深度, 经RM6420B多道生理信号采集系统输入到计算机, 由计算机自动采样并处理。同时四肢皮下连接电极, 测定标准Ⅱ导联心电图。待各项指标稳定后开始给药。观察记录给药后5、10、20、30、60、90及120 min的收缩压, 舒张压, 平均动脉压, 心率, 呼吸频率、深度及心电图中P波高度、宽度, T波高度、宽度, P-R间期, QRS时间, ST段和R波的变化。

1与给药前相比P<0.05;2与给药前相比P<0.01;3与生理盐水相比P<0.05;4与生理盐水相比P<0.01

注: () 上数值为平均值, () 内为标准差

2.2 实验结果

鸦薏油复方乳剂各剂量组对猫的血压有均降低作用, 大剂量组 (20mgl/kg) 尤其明显。各剂量组对猫的呼吸、心率、心电均无影响见 (表1~4) 。

3 结论

油乳剂疫苗 篇7

1 材料与方法

1.1 一般资料

收集2008年至2010年12月对20例平阳霉素碘油乳剂治疗的子宫肌瘤病例为对象, 年龄30~50岁, 平均40岁, 其中12例患者有月经过多, 经期延长, 贫血等症状。全部病例经B超、CT和子宫动脉造影确诊为子宫肌瘤, 瘤体最大5.5cm×5.6cm, 最小1.2cm×2cm。

1.1.1 仪器设备

800豪安以上数字减影X线机, 矩阵1024×1024, 采集速率1~3帧/s。

1.1.2 栓塞剂的制备

将平阳霉素8mg溶解于对比剂, 与碘油按1~1.5mg:1mL反复抽吸, 制成平阳霉素碘油乳剂。

1.2 方法

1.2.1 诊断

根据经量增多和检查子宫增大, 诊断一般无困难。粘膜下肌瘤需经宫腔探查、诊刮、B超或宫腔镜检查确诊。

1.2.2 术前准备

术前除常规的术前检查及准备外, 要进行详细的超声检查、核磁共振、宫腔镜, 了解子宫的大小、体积;肌瘤的数量、大小、体积、位置;双侧卵巢、输卵管有无异常, 及子宫体以外有无其它盆腔肿块, 如卵巢肿块等。检查子宫肌瘤的血供情况, 判断肌瘤的血供及供血动脉。高度怀疑为子宫肉瘤或子宫肌瘤恶性变的患者, 可穿刺活检, 取出肌瘤组织进行病理学检查。

1.2.3 治疗方法

局麻下采用seldinger法右侧股动脉穿刺插管, 用5F导管行双侧子宫动脉造影, 明确子宫肌瘤大小、数目和供血血管, 并结合术前影像学检查结果与病变部位相符后, 对肿瘤供血动脉超选择插管, 经供血动脉造影, 透视下缓慢、间歇推注充分乳化的平阳霉素碘油乳剂, 然后将消毒明胶海绵条或颗粒浸泡于对比剂内注入栓塞供血动脉。术中出现子宫动脉痉挛时, 在动脉内推注30~60mg罂粟碱可解除痉挛。

1.2.4 观察指标

栓塞前及栓塞后并发症发生情况, 栓塞后3~6个月复查多普勒超声、CT等。

2 结果

2.1 子宫肌瘤造影及栓塞情况

子宫动脉造影显示子宫动脉从双侧髂内动脉前干发出, 造影显示子宫动脉呈螺旋状扭曲, 肌瘤越大, 动脉越粗。子宫肌瘤大部分由双侧子宫动脉供血, 少数由单侧子宫动脉供血, 在动脉早期, 显示子宫动脉主干增粗, 弯曲, 在动脉末期见细小动脉显影, 实质期可见同侧大部分瘤体染色, 双侧染色的瘤体勾画出整个肌瘤的大小及形状, 肿瘤染色明显, 排空延迟。栓塞后可见子宫动脉远端闭塞, 瘤体染色消失。

2.2 疗效观察

本组病例的手术成功率为100%。术后随访, 90%的患者临床症状完全消失。

3 讨论

子宫肌瘤是威胁女性生殖健康的常见疾病, 多发生在30~50岁的中年妇女当中。是由子宫平滑肌组织增生所致, 表现为良性肿瘤。其多无症状, 有少数患者会出现阴道出血、腹部触及肿物以及压迫等症状。发病初期症状不明显, 也容易被忽视, 患者一般是在发觉月经异常和痛经症状后才想起去做妇科检查, 往往这个时候病情已经得到很长一段时间的发展。对于肌瘤体积大, 还继续生长的患者来说, 往往要考虑采用手术切除肌瘤。

目前对于子宫肌瘤的病因尚不明确, 可能与患者体内雌激素水平过高, 长期受雌激素刺激的因素有关。

3.1 平阳霉素碘油乳剂治疗子宫肌瘤的原理

子宫肌瘤是新生的肿瘤, 在正常情况下, 以1~2cm/年的速度呈进行性生长, 血供主要依靠双侧的子宫动脉, 新生的肿瘤血管为肿瘤提供终端营养。子宫肌瘤是雌、孕激素依赖性肿瘤。平阳霉素是由平阳链球菌产生碱性水溶性糖肤类抗肿瘤抗生素, 作用机制为抑制癌细胞DNA合成和切断DNA链, 影响癌细胞代谢功能, 促进癌细胞变性、坏死, 属于细胞周期性非特异性药物。同时, 对血管内皮有非特异性抑制和破坏作用, 称为“去血管作用”。子宫肌瘤的“去血管”是子宫动脉栓塞的重要环节。常见的不良反应有发热, 呕吐等。

3.2 子宫动脉栓塞治疗子宫肌瘤的并发症及不良反应

3.2.1 栓塞后综合征

多表现为发热、疼痛、恶心、呕吐等。本组患者大多出现恶心、呕吐及下腹疼痛, 对疼痛敏感者可肌注哌替啶50~100mg, 能有效止痛;对术后出现低热、恶心、呕吐患者经对症处置可缓解。

3.2.2 黏膜下或带蒂肌瘤栓塞后坏死并脱落可导致剧烈腹痛及子宫出血。

3.2.3卵巢功能衰竭导致的闭经卵巢的血供由卵巢动脉和子宫动脉卵巢支同时供血, 其中后者提供50%~70%的供血, 栓塞子宫动脉导致卵巢供血减少。术前检测血液激素水平, 并在术后常规给予卵泡期激素治疗。

3.2.4 感染

术中先灌注2/3量的抗生素, 再将余下的1/3量抗生素溶于栓塞剂中进行栓塞, 达到持续释放的目的。术后常规给予预防性广谱抗生素, 并延长使用时间。

通过以上研究分析表明, 经皮子宫动脉平阳霉素碘油乳剂栓塞治疗子宫肌瘤的疗效较好, 作为治疗子宫肌瘤的一种微创的非手术治疗方法是安全、有效的。患者术后月经量减少, 盆腔压迫等症状得到缓解, 是一种较为理想的栓塞方案。

油乳剂疫苗 篇8

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2010年7月-2012年7月我院收治入院的肺癌患者233例，均经临床病理检查确诊，均有胸痛、咯血、发热等临床症状和体征。排除已发生肿瘤细胞向肝、脑、肾等组织器官转移。将233例患者随机分为观察组138例和对照组95例。观察组男81例，女57例；年龄55～76岁，中位年龄（65.3±8.5）岁；肿瘤分期：Ⅰ期27例，Ⅱ期75例，Ⅲa期36例。对照组男58例，女37例；年龄58～75岁，中位年龄（66.5±7.4）岁；肿瘤分期：Ⅰ期12例，Ⅱ期58例，Ⅲa期25例。2组性别、年龄、肿瘤分期差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

2组入院后均予常规营养支持和心理疏导。在此基础上，观察组给予三维适形放疗治疗，放疗区域包括原发病灶和病变累及的淋巴结区；另予鸦胆子油乳剂30ml加入生理盐水250ml中静脉滴注治疗，1次/d。对照组仅予鸦胆子油乳剂治疗，用法用量同观察组。2组均治疗1个月为1个疗程。

1.3 观察指标

治疗前、后观察2组用力肺活量（FVC）、第1秒用力呼气容积（FEV1）等肺功能指标。

1.4 统计学方法

本文所有数据均应用SPSS16.0软件进行统计学处理。计量资料以表示，组间比较采用t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

治疗前，2组FVC、FEV1水平差异无统计学意义（P>0.05）。治疗后，2组FVC、FEV1水平高于治疗前，且观察组高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表1。

3 讨论

肺癌是目前癌症患者死亡的主要原因之一，改善患者肺功能，延长患者生存期是目前治疗的目的。放射治疗是一种有效的治疗方法，通过对病灶区的放射治疗，可使肿瘤体积缩小，减轻其对肺组织和肺泡的压迫，从而改善患者肺通气功能[2]。鸦胆子油乳剂是一种非特异性抗癌药，是提取苦木科植物鸦胆子成熟果实有效成分而制成，主要成分为油酸和亚油酸，实验证明鸦胆子油乳与癌细胞有较强的亲和力，能在癌细胞周围黏附较长时间，增加抗癌药物向癌细胞内渗入的机会，并能通过抑制肿瘤细胞DNA的合成，杀灭肿瘤细胞，配合化疗及放疗有增效减毒作用[3]。

注：与治疗前比较，*P<0.05；与对照组比较，#P<0.05。

总之，三维适形放疗联合鸦胆子油乳剂治疗肺癌临床效果显著，能明显改善患者肺功能，提高患者生活质量和生存率，值得临床推广应用。

摘要：目的:观察三维适形放疗联合鸦胆子油乳剂治疗肺癌的临床效果。方法:将233例肺癌患者随机分为观察组138例和对照组95例。在常规治疗基础上,观察组给予三维适形放疗联合鸦胆子油乳剂治疗,对照组仅予鸦胆子油乳剂治疗。观察2组治疗前、后用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FEV1)等肺功能指标。结果:治疗后,2组FVC、FEV1水平高于治疗前,且观察组高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:三维适形放疗联合鸦胆子油乳剂治疗肺癌临床效果显著,能明显改善患者肺功能,提高患者生活质量和生存率,值得临床推广应用。

关键词：肺癌,三维适形放疗,鸦胆子油乳剂

参考文献

[1]陈峰.厄洛替尼联合放疗治疗非小细胞肺癌脑转移效果的临床分析[J].中国现代药物应用,2014,8(4):169.

[2]刘鹏辉,李月敏,廖国清,等.非小细胞肺癌患者放疗前后肺功能变化与放射性肺炎的相关性研究[J].肿瘤研究与临床,2014,26(2):84-86.