酶抑制剂

关键词： 血管 临床

酶抑制剂（精选十篇）

酶抑制剂 篇1

关键词：酪氨酸酶,抑制剂,植物来源,人工合成

酪氨酸酶 (Tyrosinase) , 又称多酚氧化酶, 是一种含铜金属酶, 广泛存在于细菌、真菌、裸子植物、被子植物、哺乳动物等生物中, 并存在于生物界系统发育阶段的各个水平。一般认为, 羽毛, 毛发, 眼睛, 昆虫表皮, 种子等呈现出黑色、褐色、浅黄色等色素, 都是酪氨酸酶作用的结果。酪氨酸酶在不同的生物中具有各异但却都很重要的功能。酪氨酸酶兼有单加氧酶和氧化酶双重功能, 是生物体内参与黑色素 (melanin) 合成的关键酶。酪氨酸酶催化L-酪氨酸最终形成黑色素是一个非常复杂的过程。黑色素的合成途径一般被分为两个阶段:远端步骤和近端步骤。近端步骤包括单酚和/或邻-二酚的酶氧化, 由含铜酪氨酸酶催化形成邻醌;远端步骤包括化学反应和酶反应, 最终合成黑色素。

酪氨酸酶抑制剂作为黑色素祛除剂可以在皮肤美白化妆品具有重要作用, 因此, 可以通过酪氨酸酶的活性抑制实验来确定这些美白剂。

酪氨酸酶抑制剂的来源非常广泛, 不仅有天然产物, 而且有很多是人工合成化合物。如表1和表2所列, 这些化合物在抑制酪氨酸酶单酚酶酶活的同时也抑制了二酚酶的酶活。

1 植物来源的酪氨酸酶抑制剂

众多的具有生物活性、副作用小的化合物来源于植物。如表1所示, 很多植物源的天然产物对酪氨酸酶活性具有抑制作用, 并且这些化合物的抑制能力及其抑制类型不尽相同。

1.1 高等植物来源的酪氨酸酶抑制剂

多酚类化合物, 如单宁酸, 广泛的存在于自然界中, 与花的颜色有关。一些存在于植物中的树皮、根和叶子的多酚类化合物结构复杂, 另一些存在于新鲜水果、蔬菜和茶叶中多酚类化合物结构却相对简单。酪氨酸酶强抑制剂黄酮类化合物, 如4’, 5, 7-三羟基黄酮、槲皮素、苦参酮、苦参碱F均在植物中被分离出来。Kubo等人详细研究了天然产物对酪氨酸酶抑制的构效关系。研究发现, 文献中所有的黄酮类化合物之所以能够作用酶的活性中心来抑制酶的活性, 原因是3位上自由羟基的存在。但是, 进一步的研究发现, 对于另一些不含3位羟基的黄酮类衍生物, 如4’-O-葡萄糖甙取代的四羟黄酮和7-O-葡萄糖甙取代的四羟黄酮, 仍然对酪氨酸酶具有抑制性。Badria和el Gayyar发现含α-酮基的黄酮类衍生物对酪氨酸酶也具有抑制效果, 原因可能是L-DOPA和含α-酮基的黄酮类衍生物具有相同的二羟苯基。上述的结果揭示了天然产物中新的酪氨酸酶抑制剂, 这些化合物会被进一步研究以便将来用于治疗色素沉着。另一类重要的多酚类化合物是没食子酸及其衍生物, 以D-葡萄糖多酯的结构出现, 并且这类化合物在食品工业上作为添加剂应用非常广泛。各种没食子酸衍生物从绿茶和五倍子中被分离出来, 并且其中的一些对酪氨酸酶抑制作用很强。研究发现, 没食子酸在3位和黄酮成酯后对于酪氨酸酶活性具有很大影响。有趣的是从五倍子中分离而得的1, 2, 3, 4, 6-五-没食子酰-β-D-葡萄糖 (PGG) 抑制酪氨酸酶的活力并没有因为被苯环上酯化、羟基化、甲基化而下降。

1.2 醛类及其他类别化合物

大量的醛类及其他类别化合物在高等植物中被分离。这些化合物, 诸如肉桂醛、2-烯醛类、2-羟基-4-甲氧基苯甲醛、茴香醛、枯茗醛、3, 4-二羟基肉桂酸、4-羟基-3-甲氧基肉桂酸等均是酪氨酸酶抑制剂。醛基和巯基、氨基、羟基一样, 是一种具有生物活性的亲核基团, 因此能够和酶的伯氨基形成席夫碱反应。比较各种醛类及其结构类似物, 如肉桂酸、茴香酸、枯茗醛、枯茗酸、安息香酸对酪氨酸酶的抑制能力, 其中枯茗醛最强, 因为枯茗醛的醛基受到异丙基和甲氧基这两种供电子基团的诱导效应的影响容易在酶的活性部位形成比较稳定的席夫碱。如2-烯醛类化合物, 亲油性烷基链的长短对抑制性会产生影响。因为酪氨酸酶的活性中心是疏水性的“口袋”, 随着碳链增长, 分子的亲酯性提高, 因此与酶的结合力增强。Kubo等人研究发现, 除了2-羟基-4-甲氧基苯甲醛之外, 芳香类的醛是酪氨酸酶的非竞争性抑制剂。大部分的抑制研究是通过衡量酶的半抑制浓度 (IC50) 来确定的, 当然, IC50是一个重要的指标, 但是不是唯一的指标, 它仅在于描述二酚酶活性抑制上比较准确。因此, 研究更多的酪氨酸酶单酚酶和二酚酶抑制动力学参数必要的。

1.3 真菌来源酪氨酸酶抑制剂

除了来自于高等植物, 从真菌中也发现了很多酪氨酸酶抑制剂。M a d h o s i n g h和Sundberg从圆生蘑菇分离、纯化得到了两种酪氨酸酶抑制剂, 通过Lineweaver-Burk双倒数方程发现, 抑制剂Ia为竞争性抑制剂, 而另个抑制剂Ib为非竞争性抑制剂。从黑曲霉中分离得到的金属硫蛋白对酪氨酸酶活性中心的铜原子具有很强的螯合性, 因此对酪氨酸酶的抑制性非常强。分析其抑制机理, 可能为蛋白所带的巯基能够和醌发生亲核反应, 生成无色的硫醚。经体外研究发现, 从圆蘑菇中分离的蘑菇氨酸不仅是酪氨酸酶二酚酶的非竞争性抑制剂, 而且是单酚酶的竞争性抑制剂。

2 人工合成酪氨酸酶抑制剂

表2列出了各种通过人工合成而来的酪氨酸酶抑制剂。有一些市售药物也是酪氨酸酶抑制剂, 尽管它们的结构比较简单。

2.1 药物

抗高血压药卡托普利通过不可逆的非竞争性抑制单酚酶和竞争性的抑制二酚酶活性, 从而阻止了黑色素生成, 机理为生产的醌受到亲核进攻形成无色的产物]。对单酚酶和二酚酶的抑制为正协同性。该药会和酶形成卡托普利-铜复合物以及能够与活性部位的半胱氨酸残基形成二硫键。抗甲状腺药物甲硫咪唑对单、二酚酶均有抑制作用。和卡托普利相比较, 和酶的作用机制类似, 但是抑制类型却不同。

2.2 合成化合物

很多文献报导了诸多化合物, 如过氧化氢、羟胺、钛铁试剂和芳香族羧酸均是酪氨酸酶抑制剂。另外一些文献报导了抑制剂与酶是慢结合型抑制机理。过氧化氢抑制酪氨酸酶可以分两个阶段, 并且第一阶段相对第二阶段迅速。酶的抑制程度大小取决于过氧化氢浓度及其环境的p H, 并且在限氧条件下抑制速度比供氧条件下要快。铜螯合剂 (如环庚三烯酚酮和叠氮钠) 和底物类似物 (如L-含羞草碱、L-苯丙氨酸、对氟苯丙氨酸、苯甲酸钠) 均能够阻止过氧化氢对酪氨酸酶的失活, 表明酶活性中心的铜原子对于失活至关重要。另一种酪氨酸酶抑制剂羟胺在低浓度 (33mmol/L) 时会缩短单酚酶的延滞时间, 而当浓度大于20mmol/L时, 羟胺将会抑制二酚酶酶活, 减少了黑色素的生成, 并且在限氧条件下的失活速率会加快, 原因为羟胺会和醌形成具有颜色的肟。羟胺和二酚酶作用导致了酶的抑制是由于有色产物引起的光谱变化和羟胺对酶的失活。在N-取代亚硝基胍类化合物中抑制能力最大的是N-环戊基-N-亚硝基胍, 其IC50值为0.6μmol/L, 去掉亚硝基或者羟基, 化合物对酪氨酸酶没有抑制性, 说明这两个官能团是影响酪氨酸酶活性的必须官能团, 作用机理可能为化合物对活性中心的铜原子有影响。与L-DOPA相比, 钛铁试剂是一种弱的还原剂, 当酪氨酸在羟基化时, 少量还原剂的存在能够促进反应, 钛铁试剂只延长反应的延滞时间, 而几乎不会影响L-DOPA的生成。然而, 钛铁试剂在较高浓度下还原性增加, 而延滞时间会缩短。

半胱氨酸和大量的芳香族羧酸是酪氨酸酶的抑制剂。通过抑制剂的本身属性和酶的测活途径来判断是竞争性、非竞争性、混合型、还是反竞争性类型。但是, 半胱氨酸和谷胱甘肽这类含巯基的化合物在较高浓度时, 氧气变得无关紧要, 都能够使酶失活。研究发现二甲硫醚是蘑菇酪氨酸酶的竞争性慢结合抑制剂, 是研究的第一个挥发性的酪氨酸酶抑制剂。二甲硫醚在植物组织中有一定的生理作用, 高浓度的二甲硫醚会抑制酪氨酸酶的表达, 因此可以抑制植物的褐变。

参考文献

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酶抑制剂 篇2

酶抑制法快速测定果蔬中残留农药的实验

介绍了用乙酰胆碱酯酶抑制法快速测定水果、蔬菜中残留农药的`实验方法.实验将该校环境科学研究所的科研成果“便携式农药残留检测仪”应用于环境化学实验教学,不仅使学生掌握了一种实用的农残检测技术,增强了环境食品安全意识,同时提高了学生的科研热情和研究能力.

作 者：周永莉 王琳玲 陆晓华 ZHOU Yong-li WANG Lin-ling LU Xiao-hua 作者单位：华中科技大学,环境科学与工程学院,湖北,武汉,430074刊 名：实验技术与管理 ISTIC PKU英文刊名：EXPERIMENTAL TECHNOLOGY AND MANAGEMENT年，卷(期)：23(5)分类号：X835关键词：实验 酶抑制 快速测定 残留农药 果蔬

多肽类DNA甲基化转移酶抑制剂 篇3

【关键词】异常DNA甲基化；DNA甲基化转移酶抑制剂；多肽类抑制剂

【中图分类号】R394．3 【文献标识码】A【文章编号】1044-5511（2011）11-0175-02

【Abstract 】 Recently, the epigenetics has come to the fore in cancer research. DNA methylation, one of the best studied of epigenetic modifications, has accepted more and more attention. Aberrant DNA methylation can induce cancer. DNMT inhibitors can invert the aberrant methylation and thereby cure the cancer. Diverse classes of chemical compounds including peptide are being discovered and evaluated as DNMT inhibitors targeting DNA hypermethylation. This review will mainly discuss the developing peptide inhibitors of DNMT for cancer.

【Key words】Aberrant DNA methylation； DNMT inhibitors； Peptide inhibitors.

DNA甲基化与组蛋白去乙酰化作为研究最广泛的两种表觀遗传修饰方式备受关注［1］。DNA甲基化主要发生在CpG岛的胞嘧啶, 使用S-腺苷蛋氨酸(SAM 或 AdoMet)作为甲基供体，甲基基团与二核苷酸的胞嘧啶环第5号碳原子以共价键的形式结合，形成5-甲基胞嘧啶。整个过程由DNA甲基化转移酶（DNMTs）催化。到目前为止，已经发现的DNA甲基化转移酶包括：Dnmt1, Dnmt1b, Dnmt1o, Dnmt1p, DDnmt3a,Dnmt3a2, Dnmt3b和Dnmt3L ［2］。

全基因组低甲基化和局部特定基因的高甲基化都可以诱导肿瘤的发生。药物干预可以改变DNA的甲基化状态。目前作用于全基因组甲基化的药物鲜有报道［3］。大多数已报道的化合物均指向降低DNA甲基化水平，并激活抑癌基因的表达［4-5］。

1 DNA甲基化转移酶抑制剂

DNA甲基化转移酶抑制剂根据其结构可以划分为［6］：核苷类和非核苷类抑制剂（见表1）。核苷类DNA甲基化转移酶抑制剂主要包括5-氮胞苷（5-azacytidine），地西他滨（zebularine）等［7］。由于5-azacytidine，zebularine这类药物需要以共价键的形式并入到DNA链中，而且缺少特异性，会与其他DNA结合蛋白作用。因此该类药物显示了较高的毒性。而直接作用于DNMT催化区域的药物可以避免这种毒副作用［8］。

近年来，各种非核苷类DNA甲基化转移酶抑制剂被检测到具有去甲基活性。包括被FDA批准上市的药物普鲁卡因和普鲁卡因胺；第一个通过合理药物设计得到的合成类药物RG108；各种天然产物类分子如EGCG，姜黄素，小白菊内酯，psammaplin A，mahaniene等［9］；第二代寡义核苷酸药物MG98［10］。

表1 DNA甲基化转移酶抑制剂

2 多肽类抑制剂

多肽药物是当前医药市场的亮点。目前，FDA已批准上市了各种作用于不同靶点的多肽药物［11］。目前已报道的作用于DNMT的多肽药物并没有被广泛研究。

2.1 Pep515p：1997年，Glickman等研究了Dnmt1的翻译后修饰［12］。2007年，Goyal等进一步研究并鉴定了Dnmt的磷酸化位置［13］。Serine515是N端调控区域的主要磷酸化位点。EKIYISKIVVE是来源于Dnmt1的Ser515附近的多肽序列。该序列在多种已知的Dnmt1蛋白中具有较高的同源性。

EKIYISPKIVVE的设计依赖于蛋白的磷酸化对酶活性的影响可以通过区域-区域间的相互作用调节。而Ser 515位于DNA甲基化转移酶的N端调控区域, 正好可以与C端催化区域发生相互作用。在所测条件下，未磷酸化的多肽Pep515（EKIYISKIVVE）对Dnmt1的IC50为1500uM而磷酸化的多肽Pep515p（EKIYISPKIVVE）IC50值为150uM。而且，Pep515p可以特异性的抑制Dnmt1的催化区域，对Dnmt3a的活性无影响。在实验中用于对照的化合物WDGMAAGNAIER和KIVSEIYKIVE只有在高浓度时才会影响到Dnmt1的活性。这项数据显示了丝氨酸的磷酸化会影响甲基化转移酶的N端调节区与C端催化区域间的相互作用，进一步影响该多肽对DNMT1的抑制活性。

2.2 Bovine lactoferricin

牛乳铁素LactoferricinB（FKCRRWQWRMKKLGAPSITCVRRAF），一个富含阳离子的多肽，具有抗菌、抗病毒、抗炎症、抗肿瘤等多种生物学功能。25个氨基酸中，六个氨基酸残基即LfcinB 4-9（RRWQWR-NH2）组成了牛乳铁素的活性中心，尤其是位于6位及8位的Trp对LFB的抗菌活性有着重要的影响［14-15］。

牛乳铁素因为其卓有成效的抗菌作用受到广泛的关注。近来研究表明牛乳铁素对多种肿瘤细胞具有毒性作用。Roy等证实牛乳铁素还可抑制白血病细胞HL-60的转移。Vogel等推测该多肽可能通过影响DNMT的表达而起到抗肿瘤的作用。随后，Zhang等［16］通过qRT-PCR，Western Blot等实验证实，牛乳铁素可以降低DNMT蛋白及mRNA在Jurkat T-leukemia细胞中的表达。

2.3 Depsipeptide：HDAC环肽抑制剂包含已经上市的FK228(也被称为FR-901228，NSC-630176) 及FR901375等。FK228于2009年12月5日被FDA批准上市，用于甲状腺肿瘤﹑白血病﹑胰腺癌等多种疾病的治疗。研究表明FK228以前药的形式存在，当进入细胞中，它的二硫键即被还原为二个硫醇，从而与HDAC的锌离子结合。很多研究者报道了有效合成FK228的方法。Maro等合成了一系列相对于FK228活性更高的衍生物并研究了它们的构效关系［17-18］。

资料显示去甲基化药物5-aza-CdR和去乙酰化抑制剂在调节基因表达时起着相互重叠的作用，DNA甲基化，组蛋白去乙酰化及组蛋白甲基化可能共同组成了影响基因表达的调控体系。组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA等可以抑制Dnmt3b的表达。所以我们有理由推断组蛋白去乙酰化酶抑制剂可以直接影响DNA甲基化转移酶的活性。Wu等研究发现HDAC环肽类抑制剂具有去甲基能力［19］。当给予0.5 nM到5 nM的Depsipeptide 96小时时，RT-PCR显示Dnmt3a的表达以剂量依赖性方式在降低。然而，HDAC环肽抑制剂不能影响Dnmt1的表达，但它却可以阻止Dnmt1与p16, SALL3等抑制癌基因的结合。

3 結语

DNA甲基化作为表观遗传最主要的修饰方式之一受到众多关注。异常的DNA甲基化使得DNA甲基化转移酶抑制剂成为了极具潜能的抗肿瘤药物。由于核苷类DNA甲基化转移酶抑制剂毒副作用，非核苷类DNA甲基化转移酶抑制剂成为了当前该领域药物开发的热点。近几年，作用于Dnmts的抑制剂取得了较快的进展。Kuck及Franco等利用Dnmt1的同源模型分别对小分子化合物及天然产物进行了虚拟筛选，得到了若干相对于RG108活性较好的化合物［20-21］。当前，对已作用于DNA甲基化转移酶的多肽药物研究甚少，我们是否可以以现有的多肽药物为基础得到更加有效的去甲基化药物。

参考文献

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血管紧张素转化酶抑制剂研究进展 篇4

关键词：血管紧张素转化酶抑制剂,作用,用途,不良反应

近年来, 各种治疗心血管疾病的药物不断问世, 血管紧张素转化酶抑制剂 (ACEI) 得到了广泛的应用, 现就该类药综述如下。

1 发展史

于1981年第一代ACEI卡托普利在美国上市。第2代ACEI依那普利是于1976年日本化学家发现的, 并于1984年在德国上市。相继第三代的ACEI赖诺普利于1987年在美国和新西兰上市[1]。

2 作用机制、结构特点及分类

肾素-血管紧张素-醛固酮系统 (RAS) 在高血压发生、发展中起着重要作用, 其中血管紧张素II (AngⅡ) 是主要的效应肽。ACEI阻止血管紧张素I转换为血管紧张素II, 不灭活缓激肽, 产生降压作用。作用机理如下:抑制循环中RAS;抑制组织中的RAS;降低交感神经兴奋性, 减少神经末梢去甲肾上腺素释放;减少内皮细胞形成内皮素;增加扩血管的缓激肽和前列腺素的量;醛固酮分泌减少, 以减少水钠潴留[2]。ACEI按其对ACE活性配基锌离子作用特性的不同分为三类[3]:含有巯基的卡托普利等;含有羧基的依那普利等;含有磷酸基的福辛普利等。

3 药理作用与临床应用

3.1 降压作用

应用ACEI使Ang I转变成Ang II受阻, 降低血浆中Ang II的浓度, Ang II还可以使体内醛固酮分泌减少, 从而使血管舒张, 血压下降;降低Ang II的水平, 同时还可以降低交感神经兴奋性, 使去甲肾上腺素的合成与释放减少, 使血管舒张, 血压下降;ACEI还可以抑制缓激肽的降解, 使体内缓激肽的量增大, 血管舒张, 血压下降。

ACEI在临床试验中作为单药治疗, 其降低血压的效应相当于利尿药和β受体阻断药。单药治疗大约60%~70%患者都有效。大多数1小时内出现降压效应。ACEI也可和钙通道阻滞药合用增加效应。该类药尤其适用于伴有心力衰竭、急性心梗、左心室肥厚的高血压患者。该类药与利尿药及β受体阻断药合用于重症或顽固性高血压疗效较好[4]。

3.2 改善心功能

Ang II及醛固酮是促进心肌细胞增生、胶原蛋白增加、心肌间质纤维化, 导致心肌及血管重构的主要因素[5]。小剂量的ACEI可减少Ang II及醛固酮的生成, 因此能预防和逆转心血管重构, 改善心功能。ACEI可抑制体循环及局部组织中Ang I向Ang II的转化, 使血液及组织中Ang II含量降低, 从而减弱了Ang II的收缩血管作用, ACEI还能抑制缓激肽的降解, 使血中缓激肽的量增多, 从而使血管扩张, 减轻心脏负荷, 降低心肌耗氧量。ACEI可用于治疗轻、中、重度心力衰竭, 是目前常用的抗慢性心功能不全药。

3.3 抗心律失常

研究表明ACEI可使心梗、心功能不全患者心房颤动的发生率降低, 预防心房颤动的发生, 减少致命性心律失常引起的猝死[6]。

3.4 保护肾脏

ACEI的肾脏保护功能的主要机制是通过影响肾小管间质和抑制肾小球高压与肥大, 改善肾小球滤过和减少蛋白质的排泄量[7]。ACEI可以减缓血压正常或伴有高血压的Ⅰ型糖尿病患者的肾病进程。ACEI能有效的治疗糖尿病伴有的高血压、心衰、动脉粥样硬化, 显著降低冠心病的发病率与死亡率。

3.5 抗动脉粥样硬化

引起动脉粥样硬化 (SA) 的主要原因是血管内皮损伤, 血管内皮受损时, 成纤维细胞生长因子释放增多, 而且Ang II促进血小板释放血小板生长因子, 从而刺激血管平滑肌细胞增生。由于ACEI抑制ACE减少Ang II的生成, 从而产生抗动脉粥样硬化的作用[8]。有人在高血脂的兔子和猴身上证实了卡托普利的抗SA作用。

3.6 抗肿瘤

通过实验观察, ACEI可以抑制肿瘤细胞生长[9]。希望在不久的将来ACEI将作为抗肿瘤药物的新成员得到临床应用。

4 不良反应

ACEI较常见的不良反应为血管神经性水肿、刺激性干咳;皮疹、味觉异常;皮肤瘙痒;眩晕、头痛、倦怠;高钾血症、低血压;恶心、腹泻;中性粒细胞减少;蛋白尿、肾功能异常;致畸等[10]。其中发生率最高的是刺激性干咳和血管神经性水肿。

5 展望

目前, ACEI在高血压、心力衰竭、心梗、糖尿病等方面得到了广泛应用。期望在不久的将来, 除心血管疾病外, ACEI也能用于其他疾病的治疗, 如肿瘤、阿尔茨海默病等。

参考文献

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酶抑制剂 篇5

摘要：新型脲酶抑制剂对提高尿素氮肥利用率有良好的作用，测试不同用量的力谋士尿素在不同时期施用对玉米的增产效果。通过实验表明：玉米施用脲酶抑制剂处理的尿素，长势平稳旺盛，玉米穗秃顶少，籽粒饱满，对穗粒数、千粒重影响明显。同等氮素施用量情况下，脲酶抑制剂尿素处理增产165.9公斤/亩，高于常规处理106.3公斤/亩，增产率34.73%，高于普通尿素施肥处理的22.25%。80%氮素用量的抑制剂尿素处理在保证高于普通尿素玉米产量的情况下，投入产出比达到了1∶14.46，优于普通尿素的1∶12.37。通过示范实验，该肥料用量少，效果好，增产作用明显，具有良好的推广前景，可在粮食等作物上大面积推广应用。

关键词：脲酶抑制剂；玉米；肥效；示范

中图分类号： S143.1 文献标识码： A DOI编号： 10.14025/j.cnki.jlny.2016.14.035

1 时间与地点

试验时间：2015年6月12日～2015年10月7日。

试验地点：东昌府区斗虎屯镇斗虎屯村。

2 材料与方法

2.1试验准备

供试土壤：见表1；供试肥料：普通尿素（46%）、0.05%力谋仕增效尿素（46%）由巴斯夫（中国）有限公司提供；供试品种及栽培方式：玉米，登海605，露地栽培。

表1 试验地块土壤情况

2.2 试验方法

试验设计：试验设四个处理，不设重复。处理1面积2亩；处理2、处理3、处理4面积分别为6亩。处理间用土埂隔离，各处理单灌单排。处理1（对照）：无氮空白对照（磷钾用量同习惯施肥）；处理2：常规尿素大喇叭口期土表施肥，常规灌溉处理（磷钾用量为习惯施肥）；处理3：0.05%力谋仕增效尿素大喇叭口期土表施肥，灌溉2天后撒施处理（磷钾用量为习惯施肥）；处理4：0.05%力谋仕增效尿素80%用量大喇叭口期土表施肥，灌溉2天后撒施处理（磷钾用量为习惯施肥）。

田间操作：无氮空白对照。在玉米播后苗前，离播种沟10厘米处沟施过磷酸钙（0-16-0≥16% ）126.56公斤/公顷（五氧化二磷20.25公斤/公顷）。在玉米大喇叭口期沟施氯化钾（0-0-60≥60% ）117.5公斤/公顷，过磷酸钙（0-16-0≥16% ）276.54公斤/公顷；其他处理。在玉米播后苗前，离播种沟10厘米处沟施磷酸二铵112.5公斤/公顷，在玉米大喇叭口期沟施氯化钾（0-0-60≥60% ）117.5公斤/公顷，过磷酸钙（0-16-0≥16% ）276.54公斤/公顷。试验肥料在玉米大喇叭口期根据实验要求结合天气情况一次性土表撒施。各处理氮肥用量，见表2。

田间管理。2015年6月14日，整理地块，6月15日播种，并按要求施肥，6月26日喷施啶虫脒，防治烟飞虱，7月1日间苗，定苗，种植密度3824株/亩。8月12日，1%杀螟灵颗粒剂，防治玉米螟一次，10月7日进行收获测产。

3 结果与分析摘要：新型脲酶抑制剂对提高尿素氮肥利用率有良好的作用，测试不同用量的力谋士尿素在不同时期施用对玉米的增产效果。通过实验表明：玉米施用脲酶抑制剂处理的尿素，长势平稳旺盛，玉米穗秃顶少，籽粒饱满，对穗粒数、千粒重影响明显。同等氮素施用量情况下，脲酶抑制剂尿素处理增产165.9公斤/亩，高于常规处理106.3公斤/亩，增产率34.73%，高于普通尿素施肥处理的22.25%。80%氮素用量的抑制剂尿素处理在保证高于普通尿素玉米产量的情况下，投入产出比达到了1∶14.46，优于普通尿素的1∶12.37。通过示范实验，该肥料用量少，效果好，增产作用明显，具有良好的推广前景，可在粮食等作物上大面积推广应用。

关键词：脲酶抑制剂；玉米；肥效；示范

中图分类号： S143.1 文献标识码： A DOI编号： 10.14025/j.cnki.jlny.2016.14.035

3.1 不同施肥处理对生物学性状的影响

根据田间观察，施用力谋士尿素处理，均比无氮处理及常规尿素处理玉米长势平稳旺盛，叶色鲜绿，叶片宽大，玉米穗秃顶少，籽粒饱满，籽粒光泽度好。

3.2对穗粒数的影响

由表3可知，与无氮处理1相比较，各施氮肥处理的穗粒数都有所增加。说明施氮肥对玉米穗粒数有影响。通过数据的整理发现：常规用量的普通尿素施肥处理比无氮对照处理增加穗粒数125.8粒，增加30.90%；常规用量力谋士尿素处理比无氮对照处理增加穗粒数达到了147.8粒，增加36.31%的穗粒数。80%用量的力谋士尿素处理比无氮对照处理增加穗粒数达到了127.7粒，增加31.37%。通过和常规用量的普通尿素施肥比较，常规用量力谋士尿素处理和80%用量的力谋士尿素处理穗粒数分别增加22粒和1.9粒，增加率达4.13%和0.36%。上述数据说明，氮素对籽粒结实率、穗粒数的形成有很大的影响。同样氮素施肥量情况下，不同形式的氮素对玉米穗粒数的多少有影响。等量施氮量，力谋士尿素增加了植株对氮素的吸收量，从而增加了穗粒数。

3.3 对千粒重的影响

表4 试验点各处理玉米千粒重统计表

单位：克

由表4可知，与无氮处理1相比较，各施氮肥处理的千粒重都有所增加。说明施氮肥对玉米千粒重有影响。通过数据的整理发现：常规用量的普通尿素施肥处理比无氮对照处理增加9.3克，增加2.84%；常规用量力谋士尿素处理比无氮对照处理增加18克，增加5.44%；80%用量的力谋士尿素处理比无氮对照处理增加13.7克，增加4.14%。通过和常规用量的普通尿素施肥比较，常规用量力谋士尿素处理和80%用量的力谋士尿素处理千粒重分别增加8.7克和4.4克，增加率达2.56%和1.29%。上述数据说明，同样氮素施肥量情况下，不同形式的氮素对玉米千粒重的大小有影响。等量施氮量，力谋士尿素增加了植株对氮素的吸收量，从而增加了千粒重。

3.4 对产量的影响

表5 试验点各处理玉米产量统计表

单位公斤/亩

由表5可知，与无氮对照处理1相比较，施肥处理的产量都有所增加。处理1与处理2、处理3、处理4之间产量差异明显。常规用量的普通尿素施肥处理比无氮对照处理增产106.3公斤/亩，增加22.25%；常规用量力谋士尿素处理比无氮对照处理增加产165.9公斤/亩，增加34.73%；80%用量的力谋士尿素处理比无氮对照处理增产120.7公斤/亩，增加25.27%。同样氮素施肥量情况下，不同形式的氮素对玉米的产量大小有影响。等量施氮量，力谋士尿素增加了植株对氮素的吸收量，从而增加了产量。

4 效益情况分析

由表6可知，玉米施用供试肥料的处理均比无氮处理亩产值高。施用供试肥料的两个处理均比普通尿素处理亩纯增收幅度大，80%用量的力谋士尿素处理在保证高于普通尿素玉米产量的情况下，投入产出比达到了1∶14.46，优于普通尿素的1∶12.37。

表6玉米施用供试肥料的效益情况分析

注：玉米按前三年玉米市场平均价格2.3元/公斤。供试肥料3元/ 公斤计算，普通尿素2元/ 公斤，每亩次施肥用工成本15元。

5结论

酶抑制剂 篇6

1 治疗高血压

1.1 ACEI作用机制

通过竞争性抑制血管紧张素转化酶 (ACE) 而发挥作用。其降压作用主要通过抑制ACE, 阻止血液及组织液中血管紧张素Ⅱ (AngⅡ) 的形成而实现。AngⅡ是体内最强的缩血管物质, 且能促进醛固酮分泌, 导致水、钠潴留及促进细胞肥大、增生, 与高血压及心肌肥厚等疾病的形成具有密切的关系。本品的降压作用尚与下列因素有关: (1) 抑制激肽酶Ⅱ, 减少缓激肽的降解[1], 延长缓激肽的扩血管作用; (2) 增加前列腺素的释放; (3) 直接抑制AngⅡ增加血管对神经兴奋所致收缩反应的作用; (4) 大剂量时可抑制突触前膜去甲肾上腺素的释放[2]; (5) 减少内皮细胞形成内皮素。

1.2 适应证

本品用于轻、中、重度高血压病、顽固性高血压、肾血管性高血压、糖尿病性高血压、慢性肾衰所致高血压。ACEI具有改善胰岛素抵抗和减少蛋白尿的作用, 特别适用于伴有心力衰竭、心肌梗死、糖耐量减低或糖尿病肾病的高血压患者[3]。ACEI用药后外周血管扩张, 总外周阻力降低, 血压下降, 在降压同时不减少心、脑、肾等重要器官的血流量, 不干扰交感神经反射功能, 不引起体位性低血压, 对高肾素及正常肾素高血压的降压效果显著, 对低肾素高血压也有降压效果。因疗效显著, 适用范围广, 现为高血压病治疗中的首选药物。

1.3 临床应用

该类药物均需从小剂量开始, 逐渐增加剂量至最佳有效量, 对存在肾动脉粥样硬化的老年患者更应如此, 以免降压过度。本类药物《国家基本药物目录》 (2012版) 收载了卡托普利和依那普利。卡托普利开始治疗量为12.5 mg, 2~3次/d, 按需要剂量可于1~2周增加到50 mg, 2~3次/d, 若疗效仍不满意, 应及时联用其他降压药物;依那普利开始应用量为5 mg, 1次/d, 若血压达不到正常, 可将剂量增至10 mg, 1次/d。在服药3周后才可增加剂量, 维持量一般为10 mg/d, 最大剂量为40 mg/d。单药治疗大约60%~70%高血压患者有效[4]。大多1 h内出现降压效应。

1.4 联合用药

该类药物的联合首选小剂量的利尿剂, 如噻嗪类利尿剂, 可起到协同作用, 减少ACEI引起的钠潴留;ACEI也抵消了噻嗪类的副作用, 如利尿剂加强组织中的肾素活性, 而ACEI对高肾素型患者效果更佳;此外利尿剂可使血液中AngⅡ增高, 而ACEI阻止AngⅡ生成;再次噻嗪类利尿剂所致的低血钾可被ACEI升高血钾的作用所对抗。以上联合降压效果仍不满意, 可再加用钙通道阻滞剂的三联用药;如效果仍差, 心率快者加用β-受体阻滞剂、心率慢者加用α-受体阻滞剂的四联疗法。

2 治疗慢性心力衰竭

2.1 作用机制

目前已公认ACEI为治疗CHF的基本药物, 其作用机制从以下几个方面阐明: (1) 抑制肾素血管紧张素系统 (RAS) , 除对循环RAS的抑制, 可达到扩张血管、抑制交感神经兴奋性的作用, 更重要的是对心脏组织中的RAS的抑制, 在改善和延缓心室重塑中起关键作用。 (2) 抑制缓激肽的降解, 可使具有血管扩张作用的前列腺素生成增多, 同时也可抗组织增生的作用。总之, ACEI除发挥扩血管作用改善心力衰竭时的血流动力学, 减轻淤血症状外, 更重要的是降低心力衰竭患者代偿性神经-体液的不利影响, 限制心肌、小血管的重塑, 以达到维护心肌的功能, 推迟心力衰竭的进展, 降低远期死亡率的目的[5]。

2.2 适应证

临床应用于各期及轻、中、重度心力衰竭[6]。近年来国外已有不少大规模临床试验均证明即使是重度心力衰竭应用ACEI可以明显改善远期预后降低死亡率。提早对心力衰竭进行治疗, 从心脏尚处于代偿期而无明显症状时, 即开始给予ACEI的干预治疗是心力衰竭方面的重要进展。

2.3 临床应用

与治疗高血压相似, 也应从小剂量开始, 对近期使用大剂量利尿剂, 处于低钠/低血容量, 血压正常或偏低的患者, 初始剂量减半。

2.4 联合用药

ACEI在治疗CHF时常用的联合方案有: (1) ACEI+利尿剂; (2) ACEI+β-受体阻滞剂; (3) ACEI+地高辛; (4) ACEI+地高辛+利尿剂。

3 防治冠心病

3.1 预防硝酸酯类药物的耐药性

现已证实, ACEI与硝酸酯类药物合用可以减轻或避免耐药性的发生, 有间接较长期抗心绞痛的作用。

3.2 预防心肌梗死后的左心室重构

急性心肌梗死 (AMI) 后左室壁变薄, 心腔扩张, 非梗死区心肌肥厚, 造成左室容积增大, 左室变形, 此变形处心肌纤维排列异常, 破坏了收缩功能而导致泵衰竭。这种进行性左室扩大及变形, 称为左室重构。ACEI能抑制肾素及AngⅡ的活性, 扩张血管, 降低梗死区室壁的张力和室壁膨胀的程度, 从而减轻重构过程中的心肌肥厚而改善血流动力学。若长期应用可减轻心室收缩期与舒张期的负荷, 预防左室舒张末期容积的扩大和收缩功能障碍。

3.3 降低AMI的早期病死率

由于ACEI能阻抑AMI后左室的发生与发展, 减少室颤发生。AMI后患者的远期生存率, 是临床医生最关心的问题, AMI的二级预防是近20年来治疗方面的重大进展, 一些实施良好、大规模、协作性、随机化对照临床试验之后, ACEI已为临床普遍接受。目前ACEI已经是AMI (尤其是伴高危因素患者) 公认的急性期治疗和二级预防的重要措施之一。

3.4 预防动脉粥样硬化

ACEI通过改善血管内皮功能, 增加纤维蛋白溶解, 防止LDL-C的氧化修饰等作用机制在延缓动脉粥样硬化进展方面发挥着重要作用。开始卡托普利25 mg, 3次/d, 渐增至50 mg, 2次/d, 最大剂量450 mg/d[7];依那普利开始5~10 mg, 1次/d, 最大剂量40 mg/d。

4 治疗肾小球疾病

ACEI治疗肾小球疾病主要是减少蛋白尿和延缓肾损害的进展[8]。

4.1 减少蛋白尿的机制

(1) 改善肾小球内高压、高灌注及高滤过 (简称三高) [9]; (2) 改善肾小球滤过膜选择通透性。糖尿病高血压患者, 从尿白蛋白排泄率增高开始即应用ACEI, 蛋白尿较重时ACEI降尿蛋白的效果更好, 可减少尿蛋白30%~50%。

4.2 延缓肾损害进展的机制

(1) 改善肾小球三高; (2) 改善肾小球滤过膜选择通透性; (3) 减少肾脏细胞外基质蓄积 (减少产生, 促进降解) , 拮抗肾小球硬化及肾间质纤维化, 其疗效已被许多临床循证医学实验所验证。

4.3 使用中注意事项

为有效减少蛋白尿及延缓肾损害进展, 在应用ACEI时应做到: (1) ACEI常用较大剂量 (比降压药量大) ; (2) 应用ACEI时间要久 (常需数年) ; (3) 应限制食物中蛋白及食盐的摄入量。ACEI减少蛋白尿和延缓肾损害进展的治疗作用, 对有、无高血压的肾脏病患者同样适用。

4.4 ACEI的应用

使用ACEI越早, 用药时间越长, 疗效越明显。依那普利在无全身性高血压患者, 10 mg, 1次/d, 逐渐增加剂量至20 mg可能疗效会更好一些。在SCr>350μmol/L者, 应否使用仍有争论, 如使用, 则在治疗初期2个月内, 每2周观察SCr水平, 如较基础水平升高超过30%, 应停药。

5 ACEI副作用

常见的副作用有: (1) 咳嗽; (2) 血清肌酐 (SCr) 增高; (3) 血钾升高; (4) 过敏反应:血管神经性水肿、皮疹; (5) 血象异常:白细胞减少。

5.1 咳嗽

可能与激肽酶被抑制相关, 血中缓激肽及前列腺素浓度增高可引起咳嗽。严重者应停用ACEI, 改用血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂 (ARB) 。

5.2 SCr增高

(1) 用药头2个月SCr可轻度上升 (升幅<30%) , 为正常反应, 勿停药; (2) 如果用药过程中SCr上升过高 (升幅>30%~50%) 则为异常反应, 提示肾缺血, 此时应停用ACEI, 并努力寻找肾缺血病因设法解除; (3) 若肾缺血被纠正且SCr恢复至正常, 则可再用ACEI, 否则不宜再用。

5.3 血钾升高

(1) 与醛固酮被抑制相关, 肾功能不全时尤易发生; (2) 血钾过高应停服ACEI, 并按高血钾症处理原则及时治疗。

5.4 过敏反应

常见皮疹, 可能伴瘙痒和发热, 发生于治疗的4周内减量或停药, 或给抗组胺药后消失。

5.5 血象异常

白细胞与粒细胞减少, 与剂量相关, 治疗开始后3~12周出现, 以10~30 d最显著, 停药后持续2周。

综上所述, ACEI临床广泛应用抗高血压的治疗, 并能对心、脑、肾起到较好的保护作用, 使心血管事件的发生率、死亡率的危险性显著降低。近年来, 此类药物品种和临床应用等方面的发展都非常迅速, 在冠心病、慢性心衰及肾病 (尤其在糖尿病肾病方面) 等疾病的治疗中发挥重要作用。随着对ACEI的药理作用、临床应用的进一步研究和明确, 其必将应用于更多的领域。

参考文献

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美找出新的丝氨酸水解酶抑制剂 篇7

以前的研究已证实, 阻止丝氨酸水解酶的化学物可“化身为”药物治疗肥胖、糖尿病以及阿茨海默病, 并正在测试这种药物在治疗疼痛、焦虑和抑郁方面的效果。人体细胞中有200多种丝氨酸水解酶, 其中一些丝氨酸水解酶还没有找到抑制其活动的抑制剂, 新研究扩展了可使用的抑制剂范围。

斯克利普斯研究所化学生理学系主任本杰明·卡拉瓦特领导的研究团队, 在以前研究的基础上调查了一群名为尿素塑料、能抑制丝氨酸水解酶活动的分子。实验刚开始, 他们使用最新技术测量了这种分子抑制丝氨酸水解酶的强度和专一性, 结果发现, 1, 2, 3-三唑尿素塑料能强力地抑制很多丝氨酸水解酶的活动, 同时也不会影响其他酶的活动。

卡拉瓦特团队接着合成出了1, 2, 3-三唑尿素塑料的基本结构, 结果发现, 与现有抑制剂相比, 该基本结构能抑制更多丝氨酸水解酶的活动。科学家们通过简单的“点击化学” (斯克利普斯研究所的化学家巴里·夏普莱斯于2001年引入的一个合成概念, 通过小单元的拼接来快速可靠地合成出形形色色的分子) 制造出了20种化合物, 他们发现, 其中3种化合物对很多丝氨酸水解酶具有强大的抑制效果。随后, 科学家们通过两个化学步骤对该基本结构进行了修改, 让其只抑制特定的丝氨酸水解酶。其中一种抑制剂AA74-1能有效地抑制酰基缩氨酸水解酶 (APEH) 的活动, 而不会明显地影响其他酶。科学家还借用抑制剂AA74-1, 研究了APEH对蛋白质的化学修饰作用, 实验结果显示, 当APEH被抑制时, 超过20种蛋白质的浓度会显著下降。

卡拉瓦特实验室现正在使用他们制造出的抑制剂来研究丝氨酸水解酶是否具有以前不知道或不确定的生物功能。卡拉瓦特表示, 我们正使用这项技术系统化地生成很多这类抑制剂化合物, 作为厘清丝氨酸水解酶在健康和疾病方面作用的基本工具, 研制出更多有用的药物。

酶抑制剂 篇8

1 HMG-Co A还原酶抑制剂 (他汀类药物) 的分类

常用的他汀类药物有:第1代由霉菌合成或转化, 从培养液中分离提取, 包括美伐他汀、辛伐他汀、洛伐他汀、普伐他汀等;第2代是由人工合成, 结构中有含氮杂环和氟苯环的, 包括阿托伐他汀、氟伐他汀和西立伐他汀等[3]。

2 HMG-Co A还原酶抑制剂 (他汀类药物) 的结构

他汀类药物的化学结构包含三部分: (1) 药效团3, 5-二羟基羧酸, 该基团与HMG-Co A还原酶底物HMG-Co A类似, 在辛伐他汀和洛伐他汀结构中, 3, 5-二羟基羧酸的5位羟基有时会与羧基形成内脂, 体外无HMG-Co A还原酶抑制作用, 给药后通过在体内发生开环反应转化为有效的羟基酸才表现出活性。普伐他汀是在洛伐他汀基础上将内脂环开环成3, 5-二羟基戊酸与钠成盐。 (2) 疏水性环状结构, 该结构与药效团以共价键相连接的, 它在抑制剂与还原酶的结合中起着重要作用;三是取代基, 该基团连接在疏水性环状结构上, 取代基决定药动学性质和抑制剂的水溶性[3]。氟伐他汀用吲哚环代替洛伐他汀分子中的双环, 阿托伐他汀用吡咯环代替洛伐他汀分子中的双环, 与第1代他丁类相比, 第2代具有水溶性大、脂溶性低、血浆半衰期短、口服吸收迅速完全等特点[4]。

3 HMG-Co A还原酶抑制剂 (他汀类药物) 降脂作用机制

抑制HMG-Co A还原酶, 胆固醇合成降低, 进而反馈性增强细胞表面低密度脂蛋白 (LDL) 受体的表达, 增加细胞LDL受体数目与活性, 降低血液中极低密度脂蛋白 (VLDL) 、中密度脂蛋白 (IDL) 和LDL的含量。此外, 它还可抑制肝内VLDL的合成, 可明显降低总胆固醇 (TC) , 同时也可升高高密度脂蛋白 (HDL) 和降低三酰甘油 (TG) 。

4 HMG-Co A还原酶抑制剂 (他汀类药物) 的多效性研究

他汀类药具有强大的降血脂作用, 一般可使低密度脂蛋白减少35%~45%, 血浆总胆固醇减少30%~40%, 三酰甘油中等程度下降, 还可以增加高密度脂蛋白的作用[5,6]。他汀类药物的多效性除了降脂作用外还有稳定粥样斑块、抑制血小板聚集和血栓形成、抗炎抗氧化、改善内皮功能、免疫调节、神经保护、降低痴呆风险和骨折的发生率等作用。

4.1 延缓动脉粥样硬化过程

动脉粥样硬化形成的主要原因是胆固醇含量增高, 他汀类药物治疗不仅降低血液中胆固醇含量, 也改变了动脉粥样硬化斑块中脂质的成分和含量。他汀类药物可以改善血管内皮细胞功能来阻断斑块形成的起始环节, 他汀类可通过调节平滑肌细胞增殖和凋亡的方式抑制动脉粥样硬化的发展、维持粥样斑块的稳定性, 减少冠脉事件的发生。

4.2 抗高血压

他汀类药物对血压正常者降压作用则不明显, 对高血压患者具有轻度的降压作用;降压药物与他汀类有协同作用, 在降低胆固醇的同时能改善周围动脉的血液流动, 具扩张血管的作用, 从而降低动脉收缩压及脉压差[1、8]。

4.3 对肾脏的保护作用

他汀类药物对糖尿病肾病 (DN) 和非DN患者均有保护肾脏得作用。DN患者血清TC及LDLC含量的增高, 常伴有脂代谢异常。羟甲基戊二酰辅酶A还原酶抑制剂可以降低糖尿病肾病患者的血脂含量, 减慢肾小球滤过率的下降, 推迟肾功能不全的发展[9]。另外, 他汀类药物还可通过改善内皮功能, 进而影响尿蛋白的代谢。

4.4 在防治痴呆中的作用

HMG-Co A还原酶抑制剂具有降低阿尔茨海默病 (AD) 及其他痴呆症风险系数的功效。通过抑制甲羟戊酸的合成减少了Apo E的分泌, 从而阻止老年斑形成, 改善患者的认知功能。

4.5 对肿瘤疾病的作用

他汀类药物对多种肿瘤细胞有诱导分化或凋亡、降低侵袭转移能力、抑制增殖、抑制血管增生等作用。有研究者提出, 抗肿瘤治疗中他汀类药物与环氧化酶-2抑制剂有协同作用, 同时降低不良反应的发生率[11]。研究显示, 他汀类药物可减少结肠癌的发病率50%, 乳腺癌等恶性肿瘤的发病率也被明显的降低[12]。

另外, 他汀类药物同样具有激活成骨细胞, 促进骨合成代谢作用, 并且不同浓度剂量对骨合成代谢作用也不同。

5 他汀类药物不良反应[13]

5.1 一般不良反应

他汀类药物耐受性好, 一般不良反应消化系统反应如恶心、腹泻或便秘等, 神经系统症状如头昏等, 皮肤反应皮疹等。这些反应一般并不严重, 随着用药时间的延长可能减轻或消失, 个别需要对症治疗或调整药物。

5.2 肌毒性

肌毒性是他汀类药物引起的最显著最普遍的不良反应。通常包括横纹肌溶解、肌痛、肌炎。横纹肌溶解症是最罕见最严重的肌病, 大概106他汀类药物服用者中有1.5人出现这种情况[13]。

5.3 神经毒性

长期使用他汀类药物可能会引发一系列神经类症状:认知能力障碍, 健忘, 记忆丧失, 自杀冲动, 多动神经症以及攻击行为。在临床出现上述症状时, 应立即停药。这些症状是可逆的, 若再次使用他汀类药物就会复发, 这可能与他汀类药物导致的认知能力下降有关[14]。

5.4 肝毒性

他汀类药物对肝脏副作用的临床表现包括无症状性转氨酶升高、胆汁淤积、肝炎甚至急性肝功能衰竭。其中以无症状性转氨酶升高最为常见。在临床动物研究中, 发现辛伐他汀和洛伐他汀能导致肝坏死和肝中毒[15,16]。

5.5 肾毒性

酶抑制剂 篇9

1 资料与方法

1.1 一般资料84 例高血压患者中男45 例, 女39 例, 年龄43 岁~87 岁, 平均年龄 (62.31±1.48) 岁, 病程2 年~13 年, 平均 (4.89±1.31) 年。随机 (前来就诊序号) 将84 例患者平均 (n=42) 分为研究组 (单) 、对照组 (双) , 2 组患者一般资料对比差异无统计学意义 (P>0.05) , 具可比性。

1.2 方法

1.2.1纳入与排除标准 (1) 符合世界卫生组织 (world health organization, WHO) 制定的高血压诊断标准。 (2) 对本次研究所需血管紧张素转换酶抑制剂等治疗药物具有良好耐受性。 (3) 排除存在肿瘤 (恶性) 者。 (4) 排除精神类疾病者。 (5) 排除心血管、脑血管意外患者。 (6) 排除存在心力衰竭、恶性心律失常等心脏疾病者。 (7) 无肝、肾等机体重要器官严重病变。 (8) 未处于妊娠、哺乳、产褥等机体特殊生理时期。 (9) 无免疫系统、血液系统疾病。 (10) 本次就诊前2 周内未使用药物降压。 (11) 本人及家属在完全知情条件下完成本次研究。

1.2.2 治疗方法对照组给予临床常规治疗, 每日钠盐摄入量不应超过6 g, 戒烟酒并提供合理饮食指导, 病情稳定者可采取散步、太极等适当运动;阿司匹林每日给药1 次, 每次剂量100 mg;阿托伐他汀钙片每日口服1 次, 每次给药10 mg;于清晨顿服氨氯地平, 每天给药1 次, 每次剂量5 mg。研究组在常规治疗基础上加用血管紧张素转换酶抑制剂, 即每日清晨顿服福辛普利10 mg。2 组高血压患者均持续治疗8 周, 记录其治疗前后血压 (舒张压、收缩压) 变化情况及不良反应发生率。

1.3 统计学方法计量资料以±s表示, 采用t检验, 计数资料采用 χ2检验, P<0.05 为差异存在统计学意义。

2 结果

2.1 治疗效果2 组高血压患者治疗前舒张压、收缩压对比并无显著差异 (P>0.05) ;治疗后2 组舒张压、收缩压均较之前显著降低, 但研究组改善效果优于对照组, 对比差异具有统计学意义 (P<0.05) 。见表1。

2.2 不良反应2 组高血压患者经不同方法治疗后, 研究组不良反应发生率 (16.67%) 与对照组 (11.90%) 对比并无显著差异 (P>0.05) , 见表2。

3 讨论

高血压是临床常见的慢性疾病, 目前尚无有效治愈措施, 患者需终身用药控制血压, 对其身心健康及生活质量均造成了严重影响[2]。研究表明, 高血压是导致多种心脑血管疾病的主要危险因素, 患者若未及时控制血压将显著增加心脑血管疾病发生率, 致残率及致死率也随之上升, 威胁其生命安全[3]。近年来, 由于多种因素 (生活环境、压力、结构、习惯等) 不断改变, 高血压发生率呈显著上升趋势, 已引起广大医务工作者高度重视。

氨氯地平是临床常用的高血压治疗药物, 属于钙离子拮抗剂, 用药后可于心肌、血管平滑肌发挥选择性作用, 有效扩张动脉血管并阻碍钙离子进入血管平滑肌, 达到降低血管收缩反应阻力及降压目的。研究表明, 氨氯地平虽可获得一定降压效果, 但由于患者间存在个体差异, 部分患者经单纯氨氯地平给药后血压改善效果并不理想, 提示可给予其他药物联合治疗达到更为显著的用药效果[4]。

有学者提出, 肾素- 血管紧张素- 醛固酮系统 (RAAS) 激活是导致机体发生高血压的关键因素, 其中血管紧张素Ⅱ将对小动脉起到直接收缩作用, 促进肾上腺髓质、交感神经末梢增加儿茶酚胺释放量, 最终参与心血管疾病及高血压的发生、发展过程[5]。提示在临床常规治疗基础上加用血管紧张素转换酶抑制剂可达到更为理想的降压目的。本文研究可知, 对照组高血压患者经常规治疗后血压下降幅度并不理想;研究组在常规治疗基础上加用血管紧张素转换酶抑制剂后, 其血压下降幅度显著优于对照组, 且2 组不良反应发生情况并无显著差异, 与国内外相关研究结果相符。

综上所述, 对高血压患者在常规治疗基础上加用血管紧张素转换酶抑制剂可获得较为满意的用药有效性及安全性, 可显著提高患者疗效及预后, 值得临床推广。

摘要：目的 探讨血管紧张素转换酶抑制剂治疗高血压的临床应用效果。方法 对照组给予临床常规治疗, 研究组在常规治疗基础上加用血管紧张素转换酶抑制剂。2组高血压患者均持续治疗8周, 记录其治疗前后血压变化情况及不良反应发生率。结果 2组高血压患者治疗前舒张压、收缩压对比并无显著差异 (P>0.05) ;治疗后研究组血压改善效果优于对照组 (P<0.05) ;研究组不良反应发生率 (16.67%) 与对照组 (11.90%) 对比并无显著差异 (P>0.05) 。结论 对高血压患者在常规治疗基础上加用血管紧张素转换酶抑制剂可获得较为满意的用药有效性及安全性, 可显著提高患者疗效及预后。

关键词：高血压,血管紧张素转换酶抑制剂,疗效安全性

参考文献

[1]杨蕊琳, 翟海英.血管紧张素转换酶抑制剂致老年高血压高钾血症10例[J].中外医疗, 2011, 30 (24) :95.

[2]李娟.血管紧张素转换酶抑制剂在治疗高血压病中的应用[J].当代医学, 2011, 17 (35) :33-34.

[3]朱岫方.血管紧张素转换酶抑制剂和β受体阻断剂联合应用治疗高血压的协同作用[J].中国老年学杂志, 2011, 31 (14) :2804-2805.

[4]张艺军, 刘城, 吴平生, 等.血管紧张素转换酶抑制剂和血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂对高血压患者血管僵硬度作用差异的Meta分析[J].中国全科医学, 2012, 15 (33) :3823-3826.

酶抑制剂 篇10

关键词：瘦柄红石蕊；Biruloquinone；BACE抑制活性

中图分类号：R96 文献标识码： A 文章编号： 1674-0432（2014）-06-28-1

瘦柄红石蕊（Cladonia macilenta Hoffm.）是地衣门（Lichenes）、子囊衣纲（Ascolichens）、石蕊科（Cladoniaceae）、石蕊属（Cladonia）的一种朽木生地衣。据报道，罗姮[1]等首次从C. Macilenta中分离出一种自然界罕见的菲醌化合物biruloquinone。该类化合物已被发现具有多种重要的活性，如丙肝肝炎病毒（HCV）蛋白酶抑制剂活性、CD45抑制剂活性等[2]，但对其BACE抑制剂活性研究未见报道。在阿尔茨海默病（AD）的发病机制中，β分泌酶（BACE1）是产生淀粉样β蛋白（Aβ）的关键分子[3]，BACE1抑制剂的研发在AD治疗方面已成为社会及医药工业界关注的热点之一[4]。

1 材料与方法

1.1 实验材料

供试菌株：瘦柄红石蕊采集于云南省，地衣标本存放于昆明植物研究所标本馆（CH050136），地衣体经内生真菌分离得到的紫色C.macilenta LFF保存于韩国地衣资源银行（KOLABIC），国立顺天大学。

试剂药品：β-分泌酶（BACE）抑制剂筛选分析试剂盒（欣博盛生物科技有限公司），其余化学试剂均为国产分析纯。

主要仪器：旋转蒸发器RE-52AA（上海亚荣生化仪器厂），Synergy HT多功能微孔板酶标检测仪（美国Bio Tek公司）。

1.2 试验方法

1.2.1 Biruloquinone的提取和分离 将地衣型真菌瘦柄红石蕊的菌丝体接种于PDB培养基中（5瓶×300毫升/1000毫升三角瓶），15℃、150转/分避光培养30天（发酵液呈深紫色），将全部1.5L发酵液，用乙酸乙酯等体积萃取24小时。将有机层通过Whatman No.1定性滤纸除去菌丝体。重复两次该过程，并将提取液合并，40℃真空浓缩至500毫升。将浓缩的提取物过硅胶柱（230～400目，3.5×80厘米）纯化，用甲苯-乙酸乙酯-甲酸（90∶20∶2，v/v，4升）洗脱，得到暗紫色组分（980毫升），将该组分集中在真空30℃浓缩，获得110mg biruloquinone固体粗提物。然后将粗提物用氯仿-甲醇重结晶法纯化（1：1，v/v），得到35mg暗紫色的biruloquinone晶体。

1.2.2 Biruloquinone的体外BACE抑制实验 样品准备：将biruloquinone配成6.25，12.5，25，50，75，100微克/毫升的质量浓度。BACE酶抑制率的测定：（1）向背景值检测孔加95微升检测缓冲液和2.5微升 80%乙醇溶液；（2）向空白对照孔加92.5微升检测缓冲液，2.5微升 80%乙醇和2.5微升 BACE；（3）向样品检测孔分别加95微升检测缓冲液，2.5微升不同浓度的biruloquinone和2.5微升 BACE；（4）向所有检测孔加2.5微升酶作用底物（10微米），轻轻震荡混匀，室温孵育40 分；（5）使用酶标仪以激发光（excitation，ex）340nm-发射光（emission，em）500nm检测荧光强度；（6）每个检测孔3个重复，根据以下公式计算平均抑制率：

抑制率I（%）=[（A2-A3）/A3-A1]×100%

其中：A1为缓冲液背景值；A2为抑制前酶活性；A3为抑制后剩余酶活性。

2 结果与讨论

Biruloquinone体外BACE抑制活性：本实验采用重组人BACE-1，荧光底物含有一个强荧光7-甲氧基香豆素基团，BACE能切割荧光基团和猝灭基团之间的肽酶活性，使荧光增强。因此可以根据荧光的变化值来判断样品对BACE的抑制活性。从图1可知，biruloquinone对BACE的抑制与浓度正相关，抑制率随浓度增加而迅速提高，对酶活抑制50%的浓度（IC50）为62.3微克/毫升（191微米）。在最大浓度为100微克/毫升时，抑制率达68.36%，由此可知，biruloquinone具有较强的BACE抑制活性。

图1 Biruloquinone对BACE抑制作用曲线

3 结语

Biruloquinone具有较强的BACE抑制剂活性，在最大浓度为100微克/毫升时，清除率可达68.36%（IC50=62.3微克/毫升）。由此可见，biruloquinone具有一定的治疗AD的能力，这种特性为将瘦柄红石蕊的次生代谢产物biruloquinone开发成为多靶点的抗AD的天然药物提供科学依据。

参考文献

[1] Biruloquinone ， an Acetylcholinesterase Inhibitor Produced by Lichen-Forming Fungus Cladonia macilenta[J].Microbiol. Biotechnol，2013， 23（2）：161-166.

[2] 魏其艳，罗应冈，张国林.菲醌的生物活性[J].天然产物研究与开发，2005，17（5）：665-668.

[3] Cai H， Wang Y， McCarthy D， et al. BACE1 is the major β-secretase for generation of Aβ peptides by neurons[J]. Nat Neurosci， 2001， 4（3）： 233-234.

[4] 周金武，程肖蕊，程军平，等.BACE1抑制剂分子水平高通量筛选体系的建立[J].国际药学研究杂志，2010，37（4）：302-309.