病毒筛查（精选九篇）
病毒筛查 篇1
1 资料与方法
1.1 一般资料
2009年7月～2010年10月在本院儿科住院的临床疑似CMV感染[3]的患儿565例。年龄14天～2岁。
1.2 标本收集
采集所有被检验者静脉血2 ml,3000 r/min,离心5 min分离血清,置4℃冰箱保存,24 h内进行CMV-IgM检测。同时,留取所有被检验者尿液5～10 ml,-20℃冰箱保存,24 h内进行CMV DNA检测。
1.3 试剂及实验设备
荧光定量PCR(FQ-PCR)检测:采用中山医科大学达安基因诊断公司CMV DNA荧光定量试剂盒。包括DNA提取液,单人单管反应液,CMV标准阳性模板,阴性对照。实时荧光定量PCR扩增仪(DA7600):中山大学达安基因股份公司生产。CMV IgM抗体检测:采用美国Hope公司ELISA试剂盒进行常规血清CMV IgM抗体检测。
1.4 统计学处理
采用SPSS 11.5统计软件对数据进行处理,计数资料比较采用卡方检验。以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 疑诊CMV感染565患儿尿液中CMV DNA定量检测阳性242例,阳性率为42.83%。
565例患儿血清中CMV IgM抗体检测阳性114例,阳性率为20.18%。两种检测均阳性108例,均阴性317例,二者对CMV感染诊断的一致率为76.46%。FQ-PCR方法检测尿液CMV DNA阳性率显著高于ELISA方法检测血清CMV IgM阳性率,两者比较,差异有统计学意义(χ2=33.59,P<0.01)。
2.2 感染年龄分布
疑诊CMV感染565患儿中尿液CMV DNA定量或血清中CMV IgM抗体检测阳性共248例,其中14～30天8例,1～3个月182例,4～12个月49例,1～2岁9例。
3 讨论
儿童巨细胞病毒感染多发生于婴幼儿期,巨细胞病毒感染是我国儿科婴儿期最为常见的一种肝脏疾病。表现为黄疽型、非黄疸型肝炎,轻中度肝脾肿大,常有不同程度淤胆[4];严重的宫内感染可影响中枢神经系统导致发育畸形及生长落后。CMV感染引起的疾病缺乏特异临床表现,诊断困难。实验室检查是诊断巨细胞病毒感染的重要手段。病毒分离作为“金标准”显然是不实用,无法广泛推广的。目前我国主要是以间接酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清CMV IgM抗体作为实验室诊断指标。IgM阳性提示近期有CMV活动性感染或潜伏的病毒可能被激活。但是CMV抗体产生有一段“窗口期”,由于IgM抗体产生本身有滞后性,当患者被病原体感染后约2周后IgM抗体才能达到被检测到的水平。另一方面,有些患者,尤其是部分婴幼儿,免疫系统发育不完善,不能产生被测量的特异性IgM抗体或滞后产生IgM抗体,易造成假阴性结果。CMV IgM抗体检测阳性114例中,其中108例尿液CMV DNA检测阳性,说明FQ-PCR检测对于CMV活动性感染诊断有很好的敏感性。本文248例病例中有190例为30 d内感染,占76.61%,与文献报道婴幼儿期高发相符[5]。
FQ-PCR是目前准确和快速的微生物定量方法[6],能早期、灵敏检测到病毒感染,甚至比出现临床症状的时间提前3～10 d[7]。且可以进行抗病毒治疗效果监测[8]。由于尿液标本取材方便、无创,易为家长和小儿接受。本研究中,FQ-PCR方法检测尿液CMV DNA阳性率显著高于ELISA方法检测血清CMV IgM阳性率,两种方法比较有显著性差异(χ2=33.59,P<0.01),说明了尿CMV DNA定量检测方法的敏感性高于血清CMV IgM抗体检测法。尿FQ-PCR检测CMV DNA可以提高小儿CMV感染的检出率。与定性PCR方法相比,实时荧光定量PCR采用完全闭管检测,无PCR后处理,避免了交叉污染,通过探针杂交进一步提高了特异性;检测信号实时检测产物,定量结果准确,重复性好,可用于体内CMV的动态监测。实时荧光定量PCR法测定尿CMV DNA含量可用于临床早期快速诊断小儿CMV感染,对于指导临床治疗、评价观察抗病毒治疗的效果具有重要意义。
参考文献
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病毒筛查 篇2
一、范围在全县范围内，以行政村为单位，开展既往有偿供血人员（指自1990年至1998年期间参与有偿供血者）的筛查工作。通过宣传发动、群众举报、线索追踪等手段，充分掌握1990年以来参与有偿供血人员信息，确定实施艾滋病病毒抗体检测，掌握既往供血(浆)人员感染艾滋病情况。
二、方法与步骤
（一）人员登记（～年2月1日-～年2月16日）
1、各乡镇、行政村两级组成专门调查队伍，重点依靠乡镇卫生院，充分发挥乡村医生的积极作用，实行层层责任制，分片包干，责任到人。以行政村为单位，逐户登记填写《既往有偿供血员调查表》，并填写《既往有偿供血者登记表》。若没有既往有偿供血人员，由户主签名记录在册。
2、凡登记在册但拒绝参与筛查的既往供血人员，先由各乡镇卫生院派人做思想工作，仍拒绝筛查的要记录在册。
3、对既往有偿供血人员中的外出者尽可能找回，长期离家外出或已经死亡者通过其家属或邻居进行调查，并在备注栏注明（死亡者要注明死亡时间）。
4、在充分掌握既往有偿供血浆人员信息的基础上，确定重点筛查乡镇。
（二）既往有偿供血人员艾滋病病毒感染者和病人的筛查。（～年2月16日-3月8日）。
1、依既往有偿供血者登记册，对既往有偿供血人员的检测前后咨询和血标本的采集由县卫生局配合疾控机构的工作人员共同完成，同时抽调县级医院检验人员配合。标本采集使用负压采血管，采静脉血5ml，及时分离血清，并将血清封好置于-20度保存。
2、艾滋病抗体初筛检查：在市疾控中心、市中心血站实验室完成，初筛阳性者送省确认实验室确认。（3月10日-3月底）
3、凡初筛艾滋病病毒抗体阳性者，根据全国艾滋病检测技术规范的要求做确认实验（WB）。
（三）阳性检测结果的通知与个案调查
1、按照属地管理的原则，由疾病预防控制机构的医师当面通知感染者，同时提供检测后咨询（咨询电话：7366885）。所有工作人员不得向无关人员透露调查对象的检测结果。
2、对筛查中被确诊感染者和病人进行个案调查，并按《中华人民共和国传染病防治法》的要求及时上报疫情。
3、县疾病预防控制中心医师在对感染者进行个案调查的同时，应对感染者的配偶和年龄小于14岁的子女进行登记，填写登记表，并采集静脉血，做抗体检测。
（四）在外地务工的既往供血者的调查与检测。登记在册但在外地务工的既往供血者，由乡镇政府给本人发信，要求在规定的时间内回乡参加艾滋病调查和检测。对于难以回乡的，要求持通知信在务工地区的县（区）级以上疾病预防控制机构参加艾滋病自愿咨询检测，并将检测结果寄回县卫生局。
（五）数据收集、录入、整理和传输
1、数据收集：调查表及登记表由乡镇收集后于05年2月17日前上报县疾控中心，县汇总后上报市疾控中心，血样检测由市疾病预防控制中心指定专人负责收集和管理筛查数据库。调查问卷编号的市、县码按国标码统一标记，乡、村、户或个人的编码由县级疾病预防控制中心设定，调查问卷应注意编号的唯一性（即本县的同类调查人群中编号不能重复）。
2、数据录入：市疾控中心指定专业人员负责录入。每类调查人群对应一个独立的数据库，数据库保存和命名采取全省统一命名方式。
3、数据汇总和整理：本次调查的所有调查表格的数据库录入由市疾病预防控制中心负责完成。县疾病预防控制中心在数据整理中若发现数据错误、空项或其它问题，应尽快联系数据来源单位及时更正。
三、组织实施
（一）各乡镇要切实加强对此次筛查工作的组织领导，成立由乡镇政府领导任组长，卫生院主要领导任副组长的筛查工作领导小组。要实行工作责任制，层层签订责任状，确保筛查工作保质保量完成。
（二）强化职责，实行责任制
1、筛查工作由县政府统一组织实施。各乡镇政府具体落实。
2、县疾病预防控制机构成立技术指导组，为筛查工作提供技术支持。
3、既往有偿供血人员的逐户登记工作由乡、村两级政府和卫生部门负责，各部门工作人员配合完成。
4、艾滋病病毒抗体筛查工作均有市疾控中心负责，市疾控中心将检测结果及时反馈给县疾控中心，以便对艾滋病病人进行管理。
（三）加强督导检查，保证工作进度。县要成立筛查工作督导组，组织实施对各地筛查工作的督导、检查和评估工作。
（四）时间安排。本次筛查工作分两个阶段进行。第一阶段为宣传发动、调查摸底阶段（～年2月1日-～年2月16日）：由各乡镇统一组织，通过宣传发动、群众举报、线索追踪等多种形式的调查，充分掌握既往有偿供血人员的信息，确定本乡镇重点筛查行政村。第二阶段为实施筛查、总结上报阶段（～年2月16日-3月8日）：由各乡镇统一组织，对乡镇行政村需开展筛查的人员进行上报。县卫生局组织人员进行血样采集，并按要求将血样于3月10日前送市疾控中心，市疾控中心将3月底前完成监测和资料录入汇总等工作，并按时上报省疾控中心。
四、质量控制与督导评估
（一）筛查人员的选择与培训参加全面筛查的登记、调查、检测等工作人员，都应认真进行相关的各类培训，使其具备开展此项工作的能力，县卫生局负责培训乡级师资力量，各乡镇卫生院负责对基层登记人员的培训，县级疾病预防控制中心将对现场采血、血样保存、个案调查等进行专业技术指导。
（二）筛查过程质控
1、按照全国艾滋病检测技术规范的要求执行。为了提高工作效率，保障检测质量，检测工作在市疾控中心艾滋病中心实验室进行集中检测。
2、实验室质控：接受省确认中心实验室对筛查实验室进行的质量控制。
3、每日调查结束，由调查组长对当日调查所有问卷进行核查，要检查调查表的完整性、逻辑性、编号唯一性等；对有问题的调查表，调查员负责及时弥补和更正。县卫生局设立质控小组，负责调查问卷的检查和复核，复核率至少达5%。
4、县卫生局将专门派出督导组对各乡镇的筛查工作进行督导、检查和验收。各乡镇要建立督导组加强对筛查工作的督导检查。督导、检查和验收的主要指标为：既往有偿供血人员的登记率、采血样率、初筛检测率、确认检测率、阳性者个案调查率、数据入库率等。河东县人民政府
病毒筛查 篇3
[关键词] 液基薄层细胞学；人乳头瘤病毒；宫颈疾病；筛查
[中图分类号] R737.33 [文献标识码] B [文章编号] 2095-0616（2012）01-67-02
目前，随着各种宫颈病变高危因素的增加，宫颈病变的发生已有年轻化、日益上升的趋势[1]。由于子宫颈易于暴露，可以直接进行细胞学及活体组织检查，故临床上多以其作为进行早期诊断的参考物。细胞学检测多以巴氏分级的方法，由于该分级系统易受人为因素的影响，特异性和敏感性不强，并有2%～50%的假阴性率[2]，随着细胞学诊断的不断发展，液基薄层细胞学检查（TCT）已逐步取代传统的脱落细胞巴氏分级法检查。高危型人乳头瘤病毒（HR-HPV）的持续感染是发生宫颈癌的生物学病因和必要条件，因此，高危型人乳头瘤病毒的检测作为一项重要手段，越来越多地被应用于宫颈病变的筛查。现就笔者所在医院160例妇科患者的TCT检测阳性结果与HPV-DNA定性结果进行对比分析，报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择笔者所在医院体检的160例白带异常、有接触性出血史的慢性宫颈炎或疑似宫颈病变的患者，提取其宫颈口脱落细胞样本。年龄22～64岁，进行TCT检测及HPV-DNA检测。
1.2 方法
1.2.1 TCT检测及诊断标准 先以无菌干棉球轻轻擦去宫颈表面黏液，再将宫颈细胞刷插入宫颈管内约1 cm左右，保持适当压力，使细胞刷呈扇形，逆时针旋转3～5圈，停留10 s，在官颈外口及宫颈管收集脱落细胞，并将其洗入盛有细胞保存液的小瓶中。通过比重液离心后，经自然沉淀法将标本中的黏液、血液和炎性细胞分离，收集余下的上皮细胞制成直径为13 mm超薄层细胞于载玻片上，制片过程中自动完成细胞染色。
诊断标准:采用TBS分类法[3]，即正常范围、不明意义的非典型鳞状细胞（ASC-US）、低度鳞状上皮内病变（LSIL=鳞状上皮轻度非典型增生CINⅠ）、高度鳞状上皮内病变（HSIL，分为鳞状上皮中度非典型增生CINⅡ、鳞状上皮重度非典型增生CINⅢ和原位鳞状细胞癌SCC）。报告包括有无HPV感染。
1.2.2 HPV-DNA检测及诊断标准 标本采集均使用一次性取样器插入宫颈管逆时针方向旋转6～8圈，取颈管分泌物装入保存液中。通过杂交捕获二代检查（HC-Ⅱ）检测高危型人头瘤病毒分型，16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59和68等13种高危亚型。当RLU/PC≥10时为阳性。
1.2.3 宫颈病理活检 对两种方法确定的高危HPV阳性的患者行阴道镜检查，可疑部位取活检送病理检查，选取3、6、9、12点等多个点位，必要时行锥切处理，所有标本均送病理科进行病理诊断。病理组织学诊断阳性为CINⅠ以上病变，以病理组织学检查结果作为金标准。
1.3 统计学处理
本研究数据分析采用SPSS13.0统计软件进行，计量资料以（）的形式表示，采用t检验，计数资料用x2检验，检验水准α=0.05。
2 结果
2.1 TCT与HPV-DNA的阳性检出率比较
160例患者分别经TCT和HPV-DNA检测，阳性高危HPV检测结果，HPV-DNA检出率为41.9%，显著高于TCT检测阳性率（16.2%），差异具有统计学意义（P＜0.01）。见表1。
2.2 TCT、HPV-DNA与疗理结果符合率比较
两种方法HPV检测结果经病理检验符合情况见表2。TCT检测HPV阳性26例，经病理确认19例，阳性符合率为73.1%，HPV-DNA检测HPV阳性67例，经病理确认33例，阳性符合率为49.3%，两种方法在阳性符合率方面存在统计学意义（P＜0.05），TCT检测HPV阳性结果与真实情况相符合度好于HPV-DNA法。
3 讨论
人乳头瘤病毒是一种共价双链环状DNA病毒，广泛存在于自然界中，具有高度组织和宿主特异性，可致人类皮肤和黏膜异常增生，引起宿主组织疣状病变及乳头状瘤。目前认为持续高危型HPV感染是宫颈疾病进一步发展为宫颈癌的必经过程[4]。
目前，HPV-DNA检查已作为宫颈癌的筛查手段。临床上主要应用的是第二代杂交捕获法，该检测方法简单、效率高，对高危型HPV病毒检测敏感度较高，有较高的HPV检测谱。而且，HC-Ⅱ法克服了传统细胞学普查法存在的假阴性较高的弊端，提升了可操作性。本研究表明HPV-DNA法检测HPV阳性检出率显著高于TCT法（P＜0.01），表明HPV-DNA法灵敏度要高于TCT法。
另一方面，TCT法改善了传统的涂片方法，提高了涂片的质量，便于对上皮细胞的辨认，尤其是对体积小、数量较少的鳞状上皮病变的识别能力，提高了诊断的阳性率。本研究发现TCT法与病理检测法阳性符合率非常高（73.1%），显著高于HPV-DNA法（49.3%），说明TCT法精确度要高于HPV-DNA法。HPV-DNA法阳性检出率高，但与病理金标准的阳性符合率低，表明高危型HPV阳性不一定存在宫颈疾病，只有高危HPV的持续感染才会引发宫颈癌的发生。
总之，两种方法各有优缺点，因此在临床宫颈病变诊断中，尤其是宫颈癌的早期诊断，应将两种方法联合使用[5-6]。TCT技术提高了诊断的准确性，而HPV-DNA检测技术敏感度高，对宫颈病变的早期诊断具有重要意义。两种方法联合使用，有较高的临床使用价值和推广前景。
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（收稿日期：2011-11-21）
（上接第66页）
变程度有关[4-5]。沈金虎等[6]对极外侧型腰椎间盘突出症的诊治进行分析，结果认为极外侧型腰椎间盘突出症常累及同序数神经根，CT扫描是较好的检查手段；手术可选取不同的术式，单纯极外侧者以椎旁肌间隙为佳；缺乏系统认识是其延误诊断的主要原因。
后正中入路椎板扩大开窗术[7]，适用于椎间孔型，具有解剖结构熟悉、手术视野好、安全性高的优点。横突间入路单纯椎间盘切除术，特点是手术创伤小，不打开腰椎管和不影响腰椎的稳定性[8]。李有方等[9]探讨极外侧型腰椎间盘突出症的临床特点和手术方法，认为极外侧型椎间盘突出症与典型的腰椎间盘突出症不同，其多累及同序数腰神经根，并以下肢痛为主要症状，CT或MRI是诊断的主要依据；对极外侧型椎间盘突出的患者，采用不同的手术方法，其手术治疗效果良好。本研究中，对极外侧型腰椎间盘突出症患者依据突出椎间盘组织占位、病理类型及是否合并椎管内病变等情况分别采用后正中入路椎板扩大开窗术或横突间入路单纯椎间盘切除术。术后VAS评分低于术前；而且末次随访Macnab评定：优43.75%，良31.25%，可12.50%，提示手术治疗外侧腰椎间盘突出症可获得良好近期效果，但手术方式应依据病情决定。
[参考文献]
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病毒筛查 篇4
1.1 资料来源
2007年城关镇卫生院为参考新农合村民免费健康体检，男女共计1101人。
1.2 方法
用乙型肝炎病毒HBsAg（全血/血清）试纸条筛查[1]，全部静脉采血；对阳性者又用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测乙型肝炎五项，仅做定性。
2 结果
2.1 城关镇14个行政自然村1101名村民，乙型肝炎病毒HBsAg和乙型肝炎五项都阳性55人，阳性率5.00%，见表1。
从表1可以看出，个别行政村阳性率偏高，根据此结果，对这几个村入村作了调查分析，结果如下：A村是旅游比较发达，流动人口较多，可能使其传染率增加。其余几个村是村与村之间紧密相连，且这几个地区自然经济条件差，村医执业水平相对其他地区差，还有这几个村都有家族遗传病史，和遗传因素有关。
2.2 1101名村民HBsAg全血试纸条和乙型肝炎五项检测结果
见表2。
从表2可以看到, 小三阳的患者所占比率最高。
2.3 阳性结果年龄结构
统计结果发现，发病率最高年龄组为41～60岁人群，依次为21～40岁、61～70岁、1～20岁，见表3。
3 讨论
城关镇地区乙型肝炎病毒感染的阳性率为5.14%，比文献报道HBsAg的携带率为10.17%相比偏低[2]。可能与人们生活习惯，思想意识提高有关，但也于知道自己是乙型肝炎的患者就不来榆中县城关镇卫生院体检怕人们知道这一心理因素的有关。从表1统计结果可以看出，自然村1、4、5、6、9平均阳性率7.41%，明显高于其他村，其原因可能是： (1) 这几个村外出务工人员多，由于健康意识淡薄，传染了乙型肝炎。 (2) 还可能与家庭易感有关。 (3) 从表2中看出，小三阳患者最多，其次就是病毒携带者。从表3年龄分布来看，注射乙型肝炎疫苗可能是预防乙型肝炎发病的最有效办法。
总之，乙型肝炎病毒主要通过血液、母婴、性传染，也可通过唾液、尿液、精液、汗液和乳液等分泌物传染，也就是密切接触者最易感，所以应该从家庭中避免并切断传播途径，最有效的就是全程接种乙型肝炎疫苗；使其产生抗体从而有效地防止传播。乙型肝炎的主要传染源是乙型肝炎患者和携带者，肝炎的潜伏期为60～160d，平均90d，所以防治乙型肝炎，除了有效接种乙型肝炎疫苗外，还要加大健康教育力度，提高人们防病意识，了解防病知识，提高从业人员执业水平和执业道德，改善乡村级医疗条件，从而更有效预防乙型肝炎。加大宣传力度把这种健康教育纳入当地的教育规划，是人人都懂得有病及时治疗无病要加大预防的基本知识，这会让我们远离乙型肝炎。
摘要：为了解城关镇乙型肝炎病毒感染的发病率, 作者收集汇总了2007年城关镇村民免费健康体检的新农合资料, 现报道如下。
关键词：城关镇村民,乙型肝炎病毒,发病率,ELISA:筛查
参考文献
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病毒筛查 篇5
1 资料与方法
1.1 一般资料:研究对象2012年1月至2014年12月7627例在我站孕前优生健康检查的待孕育龄妇女。
1.2 体检方法:对7627例孕前健康检查参检待孕妇女每人抽取外周静脉血5 m L, 通过酶联免疫法使用北京贝尔生物工程有限公司试剂盒测定弓形虫Ig G抗体、Ig M抗体;巨细胞病毒Ig G抗体、Ig M抗体;风疹病毒Ig G抗体。通过酶联免疫法使用上海科华生物工程股份有限公司的试剂盒测定梅毒螺旋体。操作和结果判定严格按试剂说明要求进行。操作人员由具有相应的专业学历和资历的检验人员担任。孕前优生健康检查的流程、基本服务内容及实验室要求严格按照《国家免费孕前优生健康检查项目试点工作技术服务规范 (试行) 》执行。
2 结果
实验室检查结果:7627例待孕育龄妇女中弓形虫Ig G抗体阳性4683例, 弓形虫Ig M抗体阳性22例。巨细胞病毒Ig G抗体阳性1365例, 巨细胞病毒Ig M抗体阳性15例。风疹病毒Ig G抗体阳性502例, 梅毒螺旋体阳性24例。见表1。
3 讨论
为降低出生缺陷发生风险, 提高出生人口素质, 经国务院批准, 2010年4月22日国家免费孕前优生健康检查项目正式启动。为符合生育政策、计划怀孕的农村夫妇, 包括流动人口计划怀孕夫妇进行包括优生健康教育、病史询问、体格检查、临床实验室检查、影像学检查、风险评估、咨询指导、早孕及妊娠结局跟踪随访等8方面工作。通过检查及时发现对怀孕产生影响的疾病, 积极治疗, 消除一切导致不良妊娠结局的风险因素。虽然待孕育龄妇女中感染弓形虫、巨细胞病毒、风疹病毒、梅毒螺旋体的比例较低, 但一旦感染后果严重, 当孕妇感染弓形虫后出现弓形虫血症时, 弓形虫通过血流经胎盘垂直传播, 导致流产、早产、死胎、及胎儿感染等, 如视网膜炎、脑积水、小头畸形、脑内钙化[3]。巨细胞病毒感染可引起流产、早产、胎死宫内和胎儿畸形。胎儿畸形包括小头畸形伴智力低下、脉络膜视网膜炎、听力减退、耳聋等。风疹病毒感染可能导致流产、死胎和先天风疹综合征。先天风疹综合征表现为先天性心脏畸形、先天性白内障、耳聋[4]。梅毒螺旋体感染易造成不孕、流产、早产、死胎、胎儿畸形和先天梅毒儿, 具有极高的病死率和致残率[4]。
本站三年的免费孕前优生健康检查7627例中弓形虫Ig G抗体阳性4683例, 弓形虫Ig M抗体阳性22例。巨细胞病毒Ig G抗体阳性1365例, 巨细胞病毒Ig M抗体阳性15例。风疹病毒Ig G抗体阳性502例, 梅毒螺旋体阳性24例。 (1) 弓形虫Ig M抗体阳性、Ig G抗体阴性22例, 提示近期感染, 暂不宜怀孕, 治疗Ig M抗体转阴后再准备怀孕。弓形虫Ig M抗体阴性、Ig G抗体阳性1365例, 曾经感染弓形虫可以怀孕。弓形虫Ig M抗体阴性、Ig G抗体阴性, 可以怀孕, 但孕期避免接触猫、狗等宠物。 (2) 巨细胞病毒Ig M抗体阳性15例, 孕前应用抗病毒治疗待巨细胞病毒Ig M抗体转阴后再怀孕。巨细胞Ig M抗体阴性、Ig G抗体阳性例, 可以怀孕。 (3) 通过风疹病毒Ig G抗体测定风疹病毒的免疫力。风疹病毒Ig G抗体阴性者, 建议详细询问月经史排除妊娠及可疑妊娠后接种风疹疫苗, 接种疫苗3个月后再怀孕。 (4) 梅毒螺旋体阳性24例, 建议待孕育龄夫妇共同转诊到疾病预防控制中心做进一步诊断, 确诊后接受规范治疗, 在疾病得到有效治疗前暂缓怀孕。
综上所述, 通过对7627例待孕夫妇进行孕前优生健康检查中的病毒筛查, 增强待孕夫妇对病毒感染的防治意识, 改善待孕夫妇的健康状况, 消除影响优生的风险因素, 指导待孕夫妇以健康良好的状态进入怀孕阶段。
摘要：目的 研究孕前优生健康检查病毒筛查的临床意义。方法 对扎赉特旗2012年1月至2014年12月7627例待孕育龄妇女进行免费孕前优生健康检查。采取受检者外周静脉血5 m L通过酶联免疫法, 检测弓形虫IgG抗体、IgM抗体;巨细胞病毒IgG抗体、IgM抗体;风疹病毒IgG抗体;梅毒螺旋体;对检查结果进行统计分析。结果 7627例待孕育龄妇女中弓形虫IgG抗体阳性4683例, 弓形虫IgM抗体阳性22例。巨细胞病毒IgG抗体阳性1365例, 巨细胞病毒IgM抗体阳性15例。风疹病毒IgG抗体阳性502例, 梅毒螺旋体阳性24例。结论 通过对7627例待孕育龄妇女免费孕前优生健康检查中病毒筛查的检查结果进行分析, 对检查结果阳性的待孕育龄妇女进行病毒的防治, 从而达到降低出生缺陷率, 提高出生人口素质的目的。
关键词：孕前优生健康检查,病毒筛查,待孕育龄妇女
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病毒筛查 篇6
正是因为有了这样逐步深入的认识, HPV检测用于宫颈癌筛查也经历了如下不断变化。
1 是否要用HPV检测筛查宫颈癌
持续HPV感染是宫颈癌的病因。流行病学所需要的因果强度关系、特异性都已经被证实。全球多中心研究显示HPV感染会使宫颈癌发病机会增加20~100倍。19世纪90年代Walboomers对近千例宫颈癌患者组织标本进行检测, 99.7%检出HPV, 由此确定了与宫颈癌有关的高危病毒亚型。其中, 宫颈鳞癌中常见的病毒感染类型依次是HPV16、18、45、31、33;宫颈腺癌中常见的感染类型依次是HPV18、16、45。不同地区HPV流行情况有所不同, 但是与HPV16、18感染有关的宫颈癌始终占前两位, 并且与近70%浸润癌有关。
鉴于此, HPV检测已经成为宫颈癌筛查手段。目前广泛采用的方法是检测宫颈脱落细胞中DNA片段, 常用的有两种: (1) 信号放大法 (基因杂交捕获二代, HCII) :通过杂交捕获试验检测特异DNA片段, 并利用荧光技术放大信号, 可以检出13型高危型HPV。 (2) 靶向扩增 (聚合酶链反应, PCR) 技术。检测特异的基因片段并进行靶向扩增, 其中基因芯片技术将不同HPV特异片段固定在诊断芯片上, 可以检测多达43型HPV。北京大学第三医院妇产科利用HCⅡ技术检测CINⅢ及以上患者, HPV阳性率为96.8%。
2 HPV检测和现阶段占主导地位的宫颈脱落细胞学筛查如何联合或者单独使用
宫颈脱落细胞学是最早的筛查宫颈癌及癌前病变的筛查技术。由希腊医生Papanicolaou发明, 采集宫颈脱落细胞, 固定、染色后读片。因其无创及经济的特点, 非常适合大规模人群的普查。该方法于19世纪40年代开始用于宫颈癌筛查, 经有效的系统筛查, 可以降低宫颈癌发病率70%。单次细胞学检查对CINⅡ及以上的疾病筛查敏感性一般在50%~70%, 漏诊原因包括取材不满意、固定染色技术问题以及诊断水平差异。针对这些改进包括:液基薄片细胞学技术、计算机辅助读片技术等, 使得细胞学诊断的敏感性提高到60%~90%。
细胞学诊断技术在不断改进, 但是诊断的基本原理是判断细胞有无异型性, 是细胞水平的诊断。这种检测方法受诊断者主观性影响大, 而且诊断医师需要较长培训周期, 在经济卫生不发达地区难以推广。即使经过严格培训, 依然存在可重复性不满意的情况。HPV检测技术弥补了细胞学检测的不足, 因为高危型HPV感染是宫颈癌的病因, 检出了高危HPV也就找到了“高危人群”。
在临床工作中, 什么时候应该进行HPV检测呢?科学家不断寻找最合理的卫生经济学方法的筛查策略。
目前推荐3个时机: (1) 分流管理轻度细胞学异常; (2) 单独或者联合细胞学初筛; (3) 追踪随访宫颈病变或者宫颈癌术后患者。
分流管理轻度细胞学异常, 被公认为最有卫生经济学价值的一项应用。宫颈脱落细胞学是最早应用于临床的宫颈癌筛查方法, 目前多数筛查系统建立在细胞学筛查基础上。如果细胞学提示高度鳞状上皮内瘤变 (HSIL) , 组织学诊断CINⅡ及以上病变的机会达70%~90%, 因此, 这些患者都需要阴道镜检查及宫颈活检术。实际临床工作中遇到的大部分患者为轻度细胞学异常 (包含非典型鳞状上皮细胞, 意义不明, 即ASC-US;低度鳞状上皮内瘤变, 即LSIL) , 组织学诊断CINⅡ及以上病变的机会低, 约10%~20%, 如何避免过度有创检查?ALTS研究 (ASCUS-LSIL Triage Study) 给出最佳答案。研究将细胞学轻度异常的患者分为3组: (1) 直接阴道镜下活体组织检查; (2) 细胞学随访; (3) HPV分流。细胞学报告ASC-US时, 首选HPV分流管理, 即对HPV阳性患者进一步行阴道镜检查及活组织检查, 可以及时检出CINⅡ及以上病变, 并且可以减少患者就诊次数和失访可能。而当细胞学报告为LSIL时, 约85%患者高危HPV检测阳性, 没有明显分流意义, 并不推荐HPV分流管理。HPV应用于轻度细胞学异常的价值是减少了近一半ASC-US患者宫颈活检有创检查。
HPV单独或联合细胞学筛查宫颈癌及癌前病变是因为其敏感性高。但是由于HPV感染常见于性活跃人群, 并且多为一过性, Winer报道性生活开始1年后HPV阳性率约72%。90%感染者HPV会在24个月内自然消退。因此HPV检测筛查宫颈癌的特异性低于细胞学。数据荟萃分析以HCII检测法筛查, 能成功检出90%CINⅡ~Ⅲ以及宫颈癌, 敏感性较细胞学高25%, 但是特异性低6%。
如果以HPV为初筛工具, 如何减少HPV阳性妇女不必要的阴道镜检查及活检, 合理减少公共卫生费用也是一个被广泛探索的问题。
选择1:适当推迟开始HPV检测的时间:HPV感染持续数年甚至数十年才会引起宫颈癌或者癌前病变, 因此科学家推荐可以在性生活后10~15年开始HPV检测, 因为此时发现的感染更倾向持续性感染。美国阴道镜宫颈病理学会 (ASCCP) 建议:在20岁以下年轻性活跃人群中, 不使用HPV为筛查工具;对30岁及以上妇女建议联合使用细胞学和HPV检测。
选择2:以HPV检测为初筛工具, 并对阳性患者进行细胞学分流。如果细胞学检查异常则进一步阴道镜检查及活检。约有半数患者细胞形态无改变, 避免了过度有创检查。Anttila在芬兰5万妇女的前瞻性研究者中报道此方法较传统细胞学检出CINⅢ机会增加。
选择3:合理选择筛查间隔。初次HPV阳性而细胞学阴性患者12月复查细胞学或者重复HPV检测。再次检出异常时进一步行阴道镜检查及活检。HPV阴性患者, 3年重复检查。
其他选择:提高HPV阈值。目前1pg/μl是HCⅡ检测阳性阈值, Guglielmo (意大利宫颈癌防治小组) 报道, 如果以2pg/μl为阈值, 对于35~60岁人群而言, 检出CINⅡ及以上病变的敏感性没有显著下降。目前细胞学及HPV联合筛查费用限制其广泛使用。在资源匮乏地区, 廉价及简易的自采样的HPV检测是发展方向。已经有研究显示其对CINⅡ及以上疾病的敏感性不低于细胞学。
一些国家如英国已经建立以HPV检测为初筛工具的宫颈癌筛查体系。越来越多发达国家准备推广HPV初筛, 并且已经有了大样本前瞻性随机对照研究的前期数据。欧洲2.4万妇女的队列研究显示:入组时HPV阴性妇女随访6年, CINⅢ及以上疾病发生机会为0.27%;而细胞学阴性妇女为0.97%;细胞学阴性, HPV阳性妇女为10%;细胞学阳性, HPV阴性妇女为3%。这些数据支持HPV初筛。
3 如何使HPV检测在宫颈癌及癌前病变诊断中有更高准确性, 有无方法能预测疾病进展:分型检测是否有帮助
HPV是宫颈癌的发生基础, 什么样的感染最终会进展到宫颈癌?科学家尝试从病毒感染型别、感染持续时间、有无重叠感染等角度阐述疾病进展的机理, 都没有明确的特异的预测因子。但是有一些HPV感染特点应该引起临床的重视。研究显示:与HPV阴性妇女相比, HPV16持续感染导致CINⅢ及以上疾病的相对危险度为94.6, HPV18则为90.6。HPV16和 (或) 18持续感染发生宫颈癌及癌前病变的机会为7.5~12.3。由此, 一些临床医生建议, 对于持续HPV16/18感染患者给予更积极治疗。
对于病毒的持续感染尚无确切定义, 资料荟萃显示约有半数研究以2次或者3次检测阳性为持续感染, 有25%研究以超过12月为持续阳性。一些研究设定为病毒特定型别 (PCR法) 持续阳性, 一部分研究 (HCII法) 设定任意型别阳性。资料荟萃显示, 持续感染HPV患者与HPV阴性者相比, CINⅡ及以上疾病较相对危险度为33.3倍, 一过性感染患者为14.7倍。
以上资料显示关于高危型HPV感染的研究已经很多, 但是病毒感染的情况复杂, 要想确定HPV感染后的宫颈癌的风险, 可能需要不同的角度探索。科学家从病毒、宿主细胞的分子水平阐述宫颈癌发生原因。
已知HPV基因组有2个功能区与宫颈癌发生直接有关: (1) 早期开放读码区的E6及E7基因是致癌基因; (2) 晚期开放读码 (L1和L2) 区编码病毒衣壳蛋白, L1壳蛋白是HPV重要免疫抗原。当病毒整合到宿主细胞后, 合成衣壳受阻, 可以实现免疫逃逸。所以检查到E6、E7高表达或者L1衣壳蛋白表达缺失, 提示HPV感染并已经启动细胞变异。Griesser等随访轻度细胞学异常的患者22.8月, 76.4%L1衣壳蛋白表达缺失患者进展为CINⅡ及以上疾病。
科学家试图寻找宿主细胞的周期调控的分子标记物帮助预测HPV感染结局。宫颈癌筛查新策略小组 (NTCC) 显示在HPV阳性人群中检测p16, 对诊断CINⅡ及以上病变敏感性、特异性分别为88%、61%。虽然科学家在积极探索, 尚未确定敏感性及特异性超过细胞学、HPV的分子标记物, 因此还需更多探索。
综上所述, 对于HPV检测宫颈癌及癌前病变可以这样总结: (1) HPV检测是宫颈癌筛查的重要手段。 (2) HPV检测与宫颈脱落细胞学检测相比敏感性高, 目前常用于与后者联合筛查, 有可能取代后者成为宫颈癌初筛手段。 (3) HPV感染患者的结局有差异, 有条件进行分型检测时, 应该关注HPV16、18型持续感染者。
值得一提的是, 随着高危型HPV与宫颈癌的关系被社会广泛认知, 不恰当的检查可能增加患者精神压力。因为这种感染主要通过性传播, 因此使感染者对性生活产生困扰;对宫颈癌的恐惧带来焦虑。因此, 通过公众的卫生宣教减少患者精神负担也是卫生工作者的重要任务之一。
病毒筛查 篇7
1 对象与方法
1.1 研究对象
选择2011年6月至2012年10月在暨南大学附属第一医院及南方医科大学第三附属医院妇科门诊就诊, 自愿行宫颈癌筛查的1628例患者, 剔除标本不满意及二次送检者, 共1568例, 均同时行宫颈TCT检查和细胞DNA倍体分析, 其中有502例经过了高危型HPV DNA分型检测 (高危型HPV检测) 。截至2012年12月, 已有78例获病理学结果。患者年龄最大67岁, 最小19岁, 平均年龄36.3±2.6岁。
1.2 研究方法
1.2.1 取材
首先使用专用一次性宫颈细胞采集刷收集宫颈阴道部和颈管的脱落细胞, 置于固定液内, 再取材行高危型HPV检测。
1.2.2 染色
固定液内的细胞制成薄层涂片2张, 1张采用巴氏染色做常规细胞学诊断, 另一张行Feulgen染色, 行细胞核DNA含量测定与倍体分析。常规细胞学和细胞核DNA倍体分析实验试剂及仪器均由武汉兰丁医学高科技有限公司提供。
1.2.3 检测方法
HPV检测采用分子导流杂交技术, 可检测21种HPV亚型, 包括15种高危亚型和6种低危亚型, 检测仪器试剂购自广州凯普生物科技有限公司。TCT诊断采用2001年Bethesda的TBS系统分级判断, 同时行细胞DNA倍体分析的全自动扫描定量, 以细胞DNA定量5 C的细胞数量 (N) 为诊断依据。每份被扫描标本细胞总数可达8000个以上, 上皮细胞在5000个以上为合格, 检测仪自动将载玻片上有细胞的部分划分成1080个小区域自动扫描, 并且记录下每个视野下每一个细胞的图片供定位及重复阅片检查。与同一张标本上淋巴细胞作对照。
1.2.4 阴道镜检查及病理学检查
凡是宫颈常规细胞学检查结果高于未明确诊断意义的不典型鳞状上皮细胞 (ASCUS) 的病变:包括不排除高级别鳞状上皮内病变的ASCUS (ASC-H) 、低级别鳞状上皮内病变 (LSIL) 、高级别鳞状上皮内病变 (HSIL) 、不典型腺细胞 (AGC) 、原位腺癌 (AIS) 、鳞癌、腺癌;或DNA倍体检测为见DNA倍体异常细胞≥1个;或ASCUS同时高危型HPV检测阳性;或单独高危型HPV检测16/18阳性, 均建议行阴道镜检查并多点活检。病理诊断分为正常及宫颈炎、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、鳞癌、腺癌。
1.3分组
根据检测方法分为4组:TCT组、DNA倍体检测组、TCT联合高危型HPV检测组、DNA倍体分析联合高危型HPV检测组。TCT组:TCT检查高于ASCUS的患者纳入TCT组;DNA倍体异常细胞≥1个以上者为DNA倍体分析阳性[2], 纳入DNA倍体检测组;若TCT结果为高于ASCUS (无论高危型HPV检测阳性或阴性) , 或高危型HPV检测16/18阳性 (无论TCT检测结果如何) , 或ASCUS同时高危型HPV检测阳性, 以上3种情况出现其中之一的患者, 纳入TCT联合高危型HPV检测组;若出现DNA倍体异常细胞≥3 (无论高危型HPV检测阳性或阴性) , 或高危型HPV检测16/18阳性 (无论DNA倍体检测结果如何) , 或出现DNA倍体异常细胞1~2个同时高危型HPV检测阳性, 以上3种情况出现其中之一的患者, 纳入DNA倍体分析联合高危型HPV检测组。根据组织学诊断分组:CINⅡ、CINⅢ及宫颈癌患者纳入CINⅡ+组;CINⅠ及正常和宫颈炎患者纳入非CINⅡ+组。
1.4 统计学方法
采用SPSS 13.0统计学软件进行统计学处理, 计数资料的比较采用卡方检验, 检验水准均为双侧a=0.05, 以P<0.05为差异有统计学意义。以病理结果为标准, 计算各种筛查方法的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和约登指数, 对各筛查方法进行比较研究。
2 结果
2.1 TCT结果与宫颈活检组织病理学诊断的关系
符合指征者83例, 实际行阴道镜下活检者78例, 失访5例。78例组织病理学结果中, CINⅡ+组23例, 非CINⅡ+组55例。其中3例宫颈鳞癌/腺鳞癌TCT检查仅1例为HSIL, 而2例未见异常 (1例为低分化鳞癌, 1例为腺鳞癌) , 结果见表1。
2.2 DNA倍体分析结果与宫颈活检组织病理学诊断的关系
78例组织病理学结果中, 3例宫颈鳞癌/腺鳞癌DNA倍体检测有1例为正常 (未发现DNA异倍体细胞) , 2例为异常 (其中1例发现1~2个DNA异倍体细胞, 另一例发现≥15个DNA异倍体细胞) 。结果见表2。
2.3 不同级别宫颈病变中高危型HPV感染情况
在有病理结果的78例中, CINⅡ+组高危型HPV阳性率为95.65% (22/23) , 其中, HPV16阳性者11例, HPV18阳性者2例, HPV16/18总阳性率为56.52% (13/23) 。非CINⅡ+组高危型HPV阳性率为69.09% (38/55) , 其中, HPV16阳性者15例, HPV18阳性者1例, HPV16/18总阳性率为29.10% (16/55) 。CINⅡ+组HPV16/18阳性率较非CINⅡ+组明显增加, 两组差异有统计学意义 (!2=5.225, P=0.022) 。2例鳞癌均有HPV16感染, 1例腺鳞癌伴HPV18感染。
2.4 几种宫颈癌筛查方法诊断试验的评价结果
既往文献[4]提示, 宫颈细胞学检查和HPV检测结果均为阴性时, 对宫颈高度病变的阴性预测值为100.00%。据此, 我们将3种检测结果均为正常者共342例认为无宫颈高度病变, 未行阴道镜检查及活检, 并在此基础上进行各检测方法诊断价值的评价, 结果见表3。其中, TCT诊断CINⅡ+ (宫颈高度病变及宫颈癌) 的敏感度为52.17%, 有47.83%的假阴性率;DNA倍体分析诊断CINⅡ+的敏感度为78.26%, 漏诊率为21.74%。
2.5 仅TCT结果为ASCUS和仅高危型HPV检测阳性者病理随访结果
我们对筛查有异常, 但未达到活检标准的77例患者随访了12个月, 每6个月随访1次。其中ASCUS 25例, 6个月后20例复查TCT转为正常 (未见恶性上皮细胞或上皮内病变) , 5例仍为ASCUS;高危型HPV检测阳性 (非HPV16/18) 者52例, 复查高危型HPV检测45例转为阴性或所感染的HPV亚型改变。对持续异常的12例进行阴道镜下活检, 结果为CINⅠ共3例, 慢性宫颈炎9例, 未发现CINⅡ+病变。3例CINⅠ患者, 征求患者意见, 未行治疗, 予随访观察。12个月后复查, 同时行TCT及高危型HPV检测, 77例患者中, 有6例高危型HPV检测阳性患者失访。有随访结果的71例患者中, 25例ASCUS患者仅1例仍为ASCUS, 高危型HPV检测阴性, 阴道镜下活检结果为慢性宫颈炎。46例高危型HPV检测阳性患者, 6例高危型HPV检测阳性且为同一亚型感染, 复查TCT检查正常, 行阴道镜下活检, 1例为CINⅠ (为6个月复查时3例CINⅠ患者其中之一) , 5例为慢性宫颈炎, 未发现CINⅡ+病变。
3 讨论
3.1 单一筛查方法筛查宫颈高度病变
宫颈细胞学检查或宫颈细胞学检查联合高危型HPV检测为目前主流的宫颈癌初筛方法。单独的宫颈细胞学检查, 获取形态学检查结果的标本渐减特点的局限, 各级医院细胞病理学诊断人员缺乏定期规范的培训, 其认知及判别水平参差不齐, 无法避免检查的主观误判, 直接影响结果的判断, 导致筛查的敏感度低及重复性较差[5]。令妇产科医生忽略的另一个重要问题是TCT人工阅片检查分析后的重复性差, 另一位复审者很难找回所发现的同一异常细胞, 而且再从原标本瓶中去获取细胞时, 其标本量是渐减的。因此, TCT检测技术对古老的抹片染色来看虽已大大的改进, 但仍有较大的缺憾。肿瘤成癌机制研究发现, 致癌物质通过导致细胞产生非整倍体引发肿瘤[6]。细胞的异常增殖及分化可引起细胞核DNA倍体数的改变。DNA含量的变化通常发生在细胞形态学变化之前, 因此, 通过福尔根染色使DNA特异性着色, 基于流式细胞仪光密度分析每个细胞的500个数据, 计算积分光密度值, 检测细胞核内的相对DNA含量, 可做到对肿瘤的早期诊断。文献报道, 用于筛查宫颈高度病变, 采用细胞DNA倍体分析的敏感度高于宫颈常规细胞学检查[2,7]。
本研究显示, 用于筛查宫颈高度病变, 相对于TCT 47.83%的假阴性率, DNA倍体分析敏感度较高 (78.26%) , 而特异度稍低 (90.93%) , 但也有21.74%的漏诊率。因此, 由于敏感度不足, 这两项各自单独筛查方法均不适合作为宫颈癌理想的初筛方法。但DNA倍体分析光电自动化在临床上及基层医疗机构作为筛查手段的客观性有更广泛的研究前景。
3.2 联合方案筛查宫颈高度病变
研究表明, 持续性高危型HPV感染是导致宫颈癌发病的必要因素[8], HPV检测的高敏感度, 有效降低了宫颈癌前病变的漏诊率。据目前研究资料, 在目前公认的14种高危亚型HPV中, 有超过半数的宫颈癌与HPVl6或18相关[9,10], HPV16的持续性感染强烈预示CINⅡ+的发生。美国阴道镜与病理协会 (ASCCP) 2009年补充指南及2012美国国立综合癌症网络 (NCCN) 宫颈癌筛查指南都突出了HPV16和HPV18型的重要性, 指出只要出现HPV16或HPV18阳性就是进行阴道镜检查的指征。因此, 在我们的宫颈病变筛查联合方案中, 高危型HPV测定16/18阳性单独入组。在CINⅡ+病变中, HPV16/18的感染率为56.52% (13/23) , 与既往文献结果相似[9]。2例鳞癌均有HPV16感染, 1例腺鳞癌伴HPV18感染, 而其中2例TCT检查正常, 1例DNA倍体分析检测阴性, 提示检测HPV16和HPV18型的重要性。
作为宫颈癌的初筛, 敏感度高的检测方案应为首选。本研究发现, 相对于单项筛查, TCT联合高危型HPV检测或DNA倍体分析联合高危型HPV检测均有较高的敏感度及阴性预测值, 明显高于单独的筛查方法。与以往研究结论[4]类似, 我们的研究同样提示, 针对CINⅡ+病变, TCT联合高危型HPV检测敏感度为100%, 阴性预测值为100%, 有极高的临床价值;而细胞DNA倍体分析联合高危型HPV检测, 相对于TCT联合高危型HPV检测, 虽敏感度稍差 (91.30%) , 但阴性预测值也可达到99.46%, 也不失为一种较满意的筛查方法。通常联合方案的筛查, 在提高敏感度的同时, 特异度反而相应有所下降, 因此, 本研究中, 尝试将单一的ASCUS或高危型HPV检测阳性 (非HPV16/18) 患者未立即进行阴道镜下活检, 而是进行随访, 6个月及12个月后对持续异常的患者进行阴道镜下活检, 未发现CINⅡ+病变。这样可减少活检的例数, 减轻患者的痛苦, 并使筛查的特异度无明显下降。
另外, 在DNA倍体分析联合高危型HPV检测方案中, 单独出现DNA倍体异常细胞1~2个者并未入组, 进行阴道镜下活检, 但由于高危型HPV检测对CINⅡ+的高敏感度, 相对于单一DNA倍体分析筛查, 需活检的例数减少, 而敏感度反而有所提高 (91.30%vs 78.26%) 。
3.3 DNA倍体分析联合高危型HPV检测的优势
与既往多数研究相似, 本研究提示, TCT联合高危型HPV检测仍然为宫颈高度病变最优筛查方案, 但这需基于较高细胞病理学水平分析检查者。相对于TCT, DNA倍体分析方法客观, 被观察的细胞量大性, 可重复量化的优点, 大大减少人为的误差。细胞图像分析系统设备价格便宜、操作简单, 用于检测宫颈脱落细胞核DNA倍体分析, 所需人员及实验室条件也较简单。经短期培训后, 乡、镇卫生院均可实施, 可弥补基层医疗机构缺乏专业细胞诊断人员的空缺, 比较适合中国国情。高危型HPV检测, 也有客观性强、可重复性好的优点, 两者联合检测, 敏感度及阴性预测值均较高。因此, 有一定的临床应用价值, 尤其适合在医疗资源缺乏的地区实施。由于本研究样本量较小, 结论的准确性有待进一步积累资料完善研究结果。
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病毒筛查 篇8
1资料与方法
1.1研究对象
2013年1月 -2013年10月于本院妇科门诊就诊,自愿行宫颈HPV筛查的女性12 307例。年龄16~ 89岁,平均41.06岁;所有普查女性有性生活史,<30岁女性有 >3年性生活史,且近期无妊娠及盆腔放射治疗史。
1.2样本采集
由专业妇科医师以扩阴器暴露受试者宫颈,轻轻擦净宫口分泌物,采用专用HPV取样器完全插入子宫颈内口,顺时针或逆时针转动5~10周,取出取样器折断取样刷置于含保存液小瓶中,送实验室置入4℃冰箱保存,1周内完成检测。HPV测定采用AB I2 Prism 7000 PCR检测仪、Hybri Max医用核酸分子杂交仪(AB公司,美国),PCR试剂盒(QIAGEN公司,美国),HPV基因微阵列分型检测试剂盒和HPV取样器(广州市凯普生物科技有限公司)。
1.3统计学方法
采用SPSS 17.0软件进行数据分析,计量资料用 χ2检验,P <0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1HPV感染率与年龄分布的相关性
本研究中12 307例女性行宫颈HPV检测,共检出2 375例HPV阳性患者,HPV总感染率为19.30%(2 375/12 307),HPV的感染率高峰年龄分布于≤30岁。见表1。
注:覮≤30 岁年龄段感染率比较,P <0.05
2.2高危亚型HPV感染率的检测结果
在2 375例HPV阳性的女性患者中,检出HPV亚型共19种,其中高危型15种,低危型4种。高危型HPV感染2 148例,感染率为17.45%(2 148/12 307), 占所有HPV阳性患者的90.44%(2 148/2 375);低危型227例,感染率为1.83%(227/12 307),占所有HPV阳性患者的9.56%(227/2 375)。由于存在双重或多重复合感染病例,2 148例高危型HPV阳性患者中检出各亚型阳性为2 568例。高危型HPV阳性检出率由高到低依次为16、52、58、53、33、18、31、68、66、 39、59、56、51、35、45。见表2。
2.3不同年龄段女性高危亚型HPV检出率的比较
在2 148例高危型HPV感染女性中,对3组不同年龄女性高危亚型HPV的感染率进行比较,发现HPV18、35、52、59、68、53及66亚型的检出率差异有统计学意义(P <0.05),尤其HPV18感染率在≤30岁年轻女性中的感染率 (2.09%) 远高于其他年龄组。在≤30岁女性感染高危型亚型HPV中,前5位为16、52、58、53和18;31~59岁女性感染高危亚型HPV前5位为16、52、58、53和33;≥60岁女性感染高危亚型HPV前5位为16、52、53、58和33。见表3。
注:覮,并非感染次数
2.4不同年龄段女性高危型HPV单一感染与多重混合高危亚型感染分析
在年龄≤30岁的女性中,单一高危亚型HPV感染率为17.27%,多重高危亚型感染率为7.13%;31~ 59岁组女性单一高危亚型HPV感染率为14.89%, 多重高危亚型感染率为3.45%;≥60岁妇女中单一高危亚型HPV感染率为13.20%,混合高危亚型感染率为4.85%。单一高危亚型HPV感染中随年龄的增加感染率逐渐下降,其感染率差异有统计学意义 (P <0.05);多重混合高危亚型感染中31~59岁妇女中感染率最低,在≥60岁的老年组有所升高。3个年龄组感染率比较差异有统计学意义(P <0.05)。见表4。
3讨论
在全世界范围内,全球每年新发宫颈癌病例达50万,约23.3万妇女死于该病,其中80%的病例发生在发展中国家。我国每年新发病例14万,约占世界宫颈癌新发病例的28.8%。近年来,宫颈癌的治疗方法虽不断改进,但无重大突破,宫颈癌患者的生存率并没有明显提高,对降低宫颈癌的发病率和死亡率也收效甚微。宫颈癌前病变发展为宫颈癌需要10~20年,所以积极防治宫颈癌前病变,做到防患于未然,可以切实降低宫颈癌的发生率、死亡率。HPV检测对宫颈病变的诊断意义已得到认可,高危型HPV-DNA检测是一种简单易行的筛查方法,不仅具有高度的敏感性,而且有较高的阴性预测值。
本文12 307例不同年龄段女性行宫颈HPV筛查,发现其总感染率为19.30%(2 375/12 307),较我国HPV总体感染率32.6%~38.09%降低[4,5,6,7,8,9,10,11]。HPV的感染高 峰年龄分 布于 ≤30岁和50 ~59岁 。 KAZUHIRO等[9]提出HPV感染存在两个年龄高峰, 一个是最常见的15~25岁年轻女性,另一个高峰是 > 55岁的老年妇女。年轻女性HPV感染多与性活跃期有关。第2个HPV感染高峰可能与激素替代治疗引起的免疫状态改变,导致潜伏的HPV感染恢复活力及老年人免疫力下降,感染HPV后自行消退能力下降有关。本文50~59岁女性HPV感染率与其他年龄组比较差异无统计学意义,其可能与病例采集时间较短、样本量不足有关。在2 375例HPV阳性的患者中,高危型HPV感染2 148例(90.44%),低危型227例(9.56%);感染HPV亚型共19种,其中高危型15种,低危HPV 4种。高危型HPV阳性检出率由高到低依次为16、52、58、53、33、18、31、68、66、39、59、 56、51、35、45。ZHANG等[12]研究认为,中国主要的HPV亚型是HPV16、18、52、58、31、33型,与本实验结果有所不同。在本研究中,HPV18感染高发于年轻女性,占2.09%,可能与宫颈腺癌在年轻患者中的发病率增加有关。在对单一亚型与混合多重亚型感染的分析研究中显示,单一亚型HPV感染随年龄的增加,感染率逐渐下降,但在多重混合感染老年组较中年组感染率升高。AGORASTOS[13]和BERGERON等[14]的研究亦发现,年轻组患者对高危型HPV-DNA检测有着高度的敏感性,但特异性较低; 而老年人HPV感染与宫颈上皮内瘤变明显相关,所以认为高危型HPV检测对老年妇女更有意义。
HPV的感染通常分为潜伏期、亚临床期、临床症状期和HPV感染相关的肿瘤期,是一个渐进的过程。因此,提高人们的健康意识,普及宫颈癌前病变的筛查,加强对HPV感染人群的监测、随访及复查、 积极治疗浸润前宫颈病变是降低宫颈癌发病最切实可行的方法。随着人们对宫颈癌筛查的不断深入研究,HPV检测对宫颈病变检查的深远意义必然会得到越来越多人的认可,结合不同年龄段女性的HPV的感染,针对性的进行宫颈癌筛查与治疗是十分必要的。
摘要：目的 分析辽宁地区12 307例女性宫颈高危型人乳头瘤病毒(HPV)的筛查结果,了解该地区不同年龄段女性高危型HPV的感染。方法 对2013年1月-2013年10月在中国医科大学附属第一医院妇科门诊自愿行宫颈病变筛查的12 307例女性行HPV筛查,HPV测定采用AB I2Prism7000 PCR检测仪,由专业妇科医师采用专用HPV取样器按严格规范方法采集标本,并于1周内完成检测。对不同年龄段女性的HPV检出率及感染亚型进行统计学分析。结果 1辽宁地区女性HPV的感染高峰年龄为≤30岁;2辽宁地区女性高危型HPV感染常见亚型(感染率>1%)由高到低依次为16、52、58、53、33、18及31;3HPV18感染高发于≤30岁女性;4高危型HPV单一亚型感染率随年龄的增加呈下降趋势;多重混合高危亚型的HPV感染率在≥60岁的老年组有所升高。结论 辽宁地区不同年龄段女性高危型HPV感染具有特征性分布规律,针对性的进行宫颈癌筛查十分必要。
病毒筛查 篇9
1资料与方法
1.1一般资料:选取门诊部进行宫颈癌癌前病变和宫颈癌筛查的女性1600例作为临床研究对象, 将其随机分成观察组和对照组, 每组800例。观察组研究对象年龄为23~62岁, 平均年龄 (39.6±4.5) 岁;观察组研究对象年龄为20~60岁, 平均年龄 (40.1±4.2) 岁。经比较, 两组研究对象的一般资料比较无明显差异性 (P>0.05) 。两组研究对象均有白带量增多、间歇性出血、外阴瘙痒等症状, 比较无明显差异性 (P>0.05) 。
1.2方法:对照组筛查者采用液基超薄细胞学检查以进行阳性筛查, 观察组筛查者在此基础上再做高危型人乳头瘤病毒检查。在采集检查样本的前3 d, 两组筛查者均禁止使用阴道内置药物以及禁止冲洗阴道, 在采集检查样本的前1 d禁止性生活。另外, 样本采集应避开月经期。
液基超薄细胞学检查方法为:第一, 采集样本。首先将一次性取样毛刷轻轻探入筛查者的子宫颈内, 之后轻柔地抵住取样毛刷, 按照顺时针方向转动毛刷5圈, 从而收集到筛查者宫颈口脱落的细胞, 留作液基细胞学检查的样本。第二, 漂洗样本。将取样毛刷放入装有Preserv Cyt保存液的小瓶内, 轻轻摇动使细胞样本漂洗下来。第三, 制片。将细胞标本分离之后制作成薄层涂片, 并对其进行染色。观察高倍显微镜下观察染色涂片[3]。
高危型人乳头瘤病毒检测的方法为:第一, 采集样本。将一次性取样毛刷插入筛查者的宫颈内, 之后按照顺时针方向转动毛刷5~8圈, 最后将毛刷取出, 并放进装有细胞保存液的样品管中。第二, 对样本做标记, 在样品管的外部标明筛查者的姓名、取样时间等信息, 并将样品管放置在合适的保管环境中。第三, 将样本送到检测中心进行检测。
对两组筛查样本中检出阳性的样本, 一律进行电子阴道镜下病理活检。从而最终确诊。
1.3临床观察:统计两组筛查者宫颈轻度不典型增生、宫颈中度不典型增生、宫颈重度不典型增生和鳞状上皮细胞癌抗原的发生例数;观察两种筛查方式的阳性符合率。
1.4统计学分析:患者数据采用SPSS13.0统计软件包进行统计学处理。计数资料的比较采用χ2检验, P<0.05为具有统计学意义。
2结果
观察组筛查检出阳性者共87例, 经病理检查为阳性者共96例, 临床诊断符合率为90.63%;对照组筛查检出阳性者共70例, 经病理检查为阳性者共124例, 临床诊断符合率为56.45%。观察组和对照组的阳性符合率相比具有显著差异性 (P<0.05) 。
3讨论
本次研究即针对宫颈癌癌前病变患者和宫颈癌筛查者的筛查方式做了分析与探讨, 对比了液基细胞学检查与液基细胞学检查联合人乳头瘤病毒检测之间的阳性筛查符合率, 最后的结果表明, 采用液基细胞学联合人乳头瘤病毒检测的筛查者, 其阳性符合率明显高于单独使用液基细胞学检查的筛查者。这个结果提示, 人乳头瘤病毒在宫颈癌筛查中起到了重要的作用, 提高了筛查的敏感性和准确性。
阴道镜检查和宫颈活检是最为稳妥有效的筛检方式, 但是二者的筛检成本比较高, 很多女性不同意使用这种筛查方式, 所以阴道镜检查和宫颈活检不适合作为常规筛查手段加以应用。人乳头瘤病毒检测是基于高危型人乳头瘤病毒对宫颈癌的高危险性而建立的检测方法。很多学者考虑将液基细胞学检查与人乳头瘤病毒检测联合起来使用, 以期提高检测的准确性, 降低假阳性率和假阴性率。本次研究即对这种联合筛检方式的实际效果做了分析, 分析结果表明, 采用这种检验方式的800例患者中有87例检出阳性, 诊断符合率达到了90.63%, 证实了液基细胞学检查与人乳头瘤病毒检测联合使用具有较高的应用价值。综上, 液基细胞学检查与人乳头瘤病毒检测能够互为补充, 共同提高诊断符合率, 值得在临床中推广使用。
参考文献
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