实验室检测方法确认（精选6篇）
篇1：实验室检测方法确认
检验检测方法的确认
检验检测方法是指实验室用于实施检验检测工作所依据的标准检验检测方法和技术规范。检验检测方法是实验室实施检验检测工作的主要依据，是开展检验检测工作所必须的资源，如果方法及程序不同就会造成结果不同。
《实验室资质认定评审准则》5.3.2条款中规定：“实验室应确认能否正确使用所选用的新方法。如果方法发生了变化，应重新进行确认。实验室应确保使用标准的最新有效版本。”在《GB/T 27025-2008 检测和校准实验室能力的通用要求》条款中也有相应的规定。实验室采用的检验检测方法包括样品的抽取、处理、运输、存储和制备等各个环节，确认时应当记录确认所获得的结果、使用确认的程序、确认对方法是否适合于预期的用途等，必要时还应包括不确定度和分析数据的统计学处理技术。
方法发生变更时或颁布新标准时，对方法如何进行确认：
1.在首次对外出具数据之前应确认标准方法已被正确的运用。2.标准方法发生了变化应重新确认。
3.对标准方法定期清理或者查新，以确保最新有效版本。
一、检测方法的选择及使用要求
实验室资质认定(或认可)现场考核时确定的检测项目的依据是国家标准、行业标准和地方标准。所以说，当没有国际、国家、行业、地方规定的检验检测方法时，实验室应尽可能选择已经公布或由知名的技术组织或有关科技文献或杂志上公布的方法，但应经实验室技术主管确认。如是在实验室计量认证或认可批准业务范围内，因客户的特殊要求而发生的情况，其检验检测结果和报告上应有明确的说明。
另外需要使用非标准方法时，这些方法应征得委托方同意，并形成有效文件，使出具的报告为委托方和用户所接受。这是指必须在实验室计量认证或认可批准业务范围内使用，所谓有效文件是指甲乙双方对使用非标准方法检测达成协议，一般来说应有双方签字盖章，也可以在检测委托（协议）书上注明，实验室在检测报告中也必需加以
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说明。因此，在检测方法的选择上，优先使用国家标准，然后是行业标准、地方标准，非标准方法仅限于委托方同意才使用。
对于实验室完成的每一项或每一系列检验检测的结果，均应按照检验检测方法中的规定，准确、清晰、明确、客观地在检验检测证书或报告中表述，应采用法定计量单位。证书或报告中还应包括为说明检验检测结果所必需的各种信息采用方法所要求的全部信息。除上述明确的要求外，检测报告中必需有检测数据和结论。
所以说，检测方法选择的核心就是方法有效性，要特别注意的是：要使用最新有效版本的方法。
二、检测方法的验证及确认
当实验室将标准方法引入到自身的检测工作时，则应对引入的标准方法进行验证，并正确有效地运用。
标准方法确认准则：所用的设备、环境条件、人员技术等。以证明实验室能够正确使用该新标准实施检测过程。
标准方法的确认或是通过核查方式，并提供客观证据，以证实某一特定预期用途的特殊要求得到满足。用于确定某方法性能的技术宜是下列情况之一，或是其组合：
a.使用参考标准或标准物质(参考物质)进行校准； b.与其他方法所得的结果进行比较； c.实验室间比对；
d.对影响结果的因素作系统评审；
e.根据对方法的理论原理和实践经验的科学理解，对所得结果不确定度进行的评定。
实验室应按照制定的相关工作程序选择上述方法进行验证，确认将要使用的检测方法是否满足要求，在确认方法确实可行后，方可投入使用。
对于方法确认来说主要有：变更后的标准确认和新方法的确认。在确认时应该做方法的标准曲线、添加标准回收率试验、最低检出限试验和精密度试验等，并考虑方法的特异性和耐用性，如果需要时还应进行不确定度评估。应用实验数据真实地证明方法的适用性、准确性和灵敏性。
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1.非标方法的确认
在《实验室资质认定评审准则》 5.3.5条款中规定：实验室自行制订的非标方法，经确认后，可以作为资质认定项目，但仅限特定委托方的检测。非标准方法是指未经相应标准化组织批准的检测/校准方法。只有在尚无国家标准、行业标准、地方标准时，实验室方可自制非标检测方法，应经过确认:
a、从理论到实际对方法的理解；
b、使用标准物质或参考标准进行校准；
c、与不同方法所得的结果进行比较；
d、实验室间的比对试验；
e、结果不确定度评定。
必要时对方法确认过程得到的测量值是否满足顾客的技术要求进行评审，这些值可包括：测量结果的不确定度、检出限、方法的选择性、线性、重复性限、复现性限、抵抗外来影响的稳健性和抵抗来自样品的基体干扰的交互灵敏度，可根据具体方法确定。当缺乏信息时，一些指标如：准确度、检出限、选择性、线性、重复性、复现性、稳健度和交互灵敏度等的范围和不确定度，可以用简化方式给出。经过验证和确认后形成文件，方可依据该方法检测（限在特定委托方的检测），并应征得客户同意。实验室应使用适当的方法和程序进行所有检测工作及职责范围内的其他有关业务活动（包括样品的抽取、处置、传送和贮存、制备，测量不确定度的估算，检验检测数据的分析）；这些方法和程序应与所要求的准确度有关检验检测的标准规范一致。主要的目的要求是建立符合实际的检测流程图，通过流程图找出关键的要素。不同的检测对象应有不同的检测流程图。
2.变更后的标准确认
标准如果一旦变更，就要对照新旧标准的变化情况，对方法涉及的仪器设备、实验材料、环境条件的变化，以及技术人员的配备是否满足标准方法要求进行分析，将这些信息反馈给技术负责人，让技术负责人决策是否提供相关的资源来适应标准变更后的要求。当相关的资源配备后，实验室应通过做实验来验证能够正确运用变更后的标准方法。这个过程就是标准方法的确认。
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标准变更的处置：
①.对于只是标准代号或年号变更，其检验检测方法、技术指标或技术参数没有变化的原已通过的认证项目，只需将标准名称和代号用文字说明统一汇总后，填写《计量认证检测标准变更备案审批表》，报实验室资质认定部门办理标准变更手续。
②.对于不仅是标准年号发生变化，检验检测方法、技术指标或技术参数也随之提高，实验室必须配备新的相应仪器设备才能满足标准要求，或人员须经过培训才能操作仪器设备。属于检测性质发生变化，实验室应申请扩项（扩标准）评审，接受实验室资质认定部门组织的评审，经评审组现场确认后，由发证机关发放新的项目附表。
如果涉及标准方法换版时，应重新对检测方法进行验证及确认，验证及确认包括以下内容：
a、新旧标准的差异分析；
b、执行新标准所需人员的评价，必要时进行培训，经考核确认后授权上岗；
c、现有仪器设备适用性以及校准方法的评价，必要时补充相应仪器设备或重新校准；
d、环境条件的评审，必要时增添设施；
e、原始记录表格和报告格式的评审，必要时要进行修订。对换版后的标准方法经上述各方面验证及确认后，条件均能满足要求，方可按照该标准方法实施投入检测使用。
3.新方法的确认
凡是未使用过的标准方法对实验室来说就意味着是新方法，对新方法也都应进行确认。检测方法确认的技术要求有如下方法: ①.回收率试验
对于食品中的禁用物质，回收率应在方法的测定低限、两倍方法测定低限和十倍方法测定低限进行三水平试验；对于已制定最高残留量(MRL)的，回收率应在方法测定低限、MRL，选一适合点进行三水平试验；对于未制定MRL的，回收率应在方法测定低限、常见限量指标，选一适合点进行三水平试验。回收率的参考范围见表1。
②.校准曲线
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应描述校准曲线的数学方程式以及校准曲线的工作范围，浓度范围尽可能覆盖一个数量级，至少作5个检测点(不包括空白)。对于筛选方法，线性回归方程的相关系数(r)不应压于0.98，对于验证方法，相关系数(r)不应低于0.99。测试溶液中被测组分浓度应在校准曲线的线性范围内。
③.精密度试验
对于食品中禁用物质，精密度实验应在方法测定低限、两倍方法测定低限和十倍方法测定低限三水平进行：对于需制定MRL的，精密度试验应在方法测定低限、常见限量指标、选一适合点三水平进行。重复测定次数至少为6次。实验室内部的变异系数参考范围见表2。
④.测定低限
方法的测定低限按下式计算:
CL =3Sb/b 式中: CL—方法的测定低限；
Sb—空白值标准偏差(一般平行测定20次得到)；
b—方法校准曲线的斜率。
对于已制定MRL的物质，方法测定低限加上样品在MRL处的标准偏差的三倍，应超过MRL值。对于禁用物质，方法测定低限应尽可能低。（也可采用标准加入试验法确定。）
⑤.准确度
重复分析标准物质（实物标样）或水平测试样品，测定含量（经回收率校正后），得出平均值与真值的偏差（变异系数）。指导范围见表3。
⑥.提取效率
提取效率可用以下方法进行试验：
a、用阳性的标准物质和水平测试的阳性样品进行试验； b、阳性样品用桶—溶剂反复提取，观察被分析物的浓度变化； c、用不同提取技术或不同提取溶剂进行比较。
三、标准的查新和受控使用
对实验室使用的标准，应定期进行清理和查新，实验室应确保使用的标准为最新有效版本。可通过网络查询在用标准的现行有效性，5 / 6
查新方式：
①向标准情报部门查询； ②订购权威机构出版的国家标准； ③从期刊获取最新信息； ④应用互联网查询； ⑤参加技术交流会。
与实验室工作有关的标准、手册、指导书等都应现行有效并便于工作人员使用。对于现行有效的标准版本要受控发放，对于已作废的标准，要加盖作废标识并撤离实验场所，以免误用。
在标准文件查新、更新工作中，各相关部门要配合和协助质量管理部门跟踪查新、更新工作，质量管理部门要定期发放更新信息，并将查新内容汇总及做好保留查新、更新工作记录。
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篇2：实验室检测方法确认
（4）《更新标准审批表》（5）《标准变更确认记录》 1 目的
为确保本中心在检测工作中选择合适的检测方法，充分利用现有资源，合理地扩大检测服务范围，更好地为客户服务，制订本程序。2 范围
本程序适用于对检测方法的选择和确认。3 职责
3.1 常规检测项目由综合业务室负责接待客户，协商选择适用检测方法。
3.2 新项目由综合业务室主任和检验室主任共同负责接待客户，所选择的检测方法，经技术负责人批准、委托方书面确认后，由检验室主任编制检测实施细则并实施检测。3.3检验室主任负责对非标准方法和本中心制定方法进行验证及负责审核。3.4 技术负责人负责对自制定方法的立项、管理和审批。4 程序
4.1认可范围内检测方法的选择和确认程序如下：
4.1.1认可范围的标准，由检验室负责跟踪，检测主任应向检验室提供有关标准的编制和修订信息。
4.1.2 认可范围的标准更新后，检验室主任应及时收集并发至技术负责人和相关检测负责人。4.1.3根据标准的变化对环境条件和检验设备没有影响或影响较小的，可由实验室技术负责人组织有关技术人员论证，并填写《标准一般变更备案表》，报省质监局认证处备案； 4.1.4标准发生重大变化，使现有环境条件或检验设备达不到标准要求的，实验室需填写《标准重大变更审批表》，由省局认证处指派评审员进行现场或书面确认后，予以批准。4.2 新增项目的选择和确认程序如下：
4.2.1当本中心管理层根据市场需要决定增加检测项目，或产品标准修订增加了新的检测项目，或客户提出认可范围以外的检测项目时按新增项目进行选择和确认。4.2.2检验室主任填写“新增检测项目审批表”，并报技术负责人审批。
4.2.3 新增检测项目获批准后，由检验室主任安排专人研究有关技术标准，编制检测细则、设计原始记录格式；检验室负责编制检测报告格式。
4.2.4检验室主任负责配置所需要的设备、环境设施，并对检测人员按《人员培训程序》进行培训。
4.2.5 技术负责人对检测细则、原始记录和检测报告格式进行审批。4.2.6 在完成全部准备工作后，由主任负责组织资质认定的扩项工作。5 相关文件
（1）《设备使用程序》
篇3：化学检测实验室的方法验证与确认
关键词：化学检测,方法验证,方法确认
化学检验实验室主要依靠准确掌握检验方法和掌控测试结果的有效性两个方面来保障检测结果的准确性, 通常对检测方法的控制要求有两个控制理念, 分别为方法验证和方法确认。一部分实验室工作人员在进行检测时, 不区分标准方法和非标准方法, 直接使用同一种方式和操作方法进行检测, 这就会在实验室检测标准技术方面出现很大的不确定度, 影响检测结果的准确性。本文首先介绍了化学检验实验室人员应掌握的方法验证和方法确认两个基本概念, 然后采用几种的技术方法手段, 满足检测结果准确行的要求, 达到客户的检测目标。
1 方法验证和方法确认的区别
方法验证的对象:实验室应该在引入检测或校准前, 能够证实并正确应用标准方法。所谓标准方法, 是由相关专业机构评价确认后, 向社会公开的技术规范文件。方法验证是指实验室在进行检测前所需要证实其自身技术能力是否满足符合了相关的规定要求。
方法确认的对象:实验室在使用非标准方法或其它超出、扩充修改后的方法等情形时, 要首先进行方法确认, 确认这些方法的目标是能够获得准确有效的检测结果。
2 方法验证和方法确认的步骤
2.1 方法验证的步骤
在进行新检测验证时, 实验室要首先对所对应的新建立的检测标准进行分析, 对实验室人员、设备、试剂材料和检测环境等进行评估, 判别实验室是否符合检测工作的基本标准要求。当评估结果满足条件后, 要验证实验室是否具备准确执行检测标准的技术能力。针对化学检测实验室, 要经过试验进行验证实验室人员所工作的技术参数是否达到检测标准要求, 具体参数有标准曲线、检出限、回收率和精密度等。如表1~3。
当检测标准发生变化后, 首先要对新标准进行评估, 若发现新标准技术仅仅是名称、文本格式、技术参数单位等方面变化的话, 直接通过技术评审, 通过实验室认证机构更改需要变更项目就可以满足实验室审核需求。若发现新标准技术与之前的技术路线有重大变化, 需要对实验室所有资源条件重新进行评审, 通过检测标准的需求后, 再通过试验验证相关技术参数是否具备能够执行新检测标准的技术能力。
2.2 方法确认的步骤
在使用标准方法和制定实验室方法等情况下, 实验室工作人员要首先进行试验, 确认技术路线和技术参数是否合理, 并进行相关不确定度评估;之后通过做比对试验或与外部实验室进行对比等方法, 完成非标准方法的准确有效性评价, 根据相关规定通过技术审批, 在使用前告知客户;在进行技术确认中, 还要完成方法特异性、抗干扰性、不确定度等评估。
非标准方法投入使用后, 也要对方法进行变更, 除了通过上述步骤方法外, 还要对新的非标准文本中的技术路线及参数做出评估与修正, 并要通过相关部门的技术审核。
3 化学检测方法与参数的确认
化学检测的对象包括禁用物质、限制使用的物质和无限制物质三类, 考虑到这三类物质的不同特性, 在进行化学检测和确认过程中要充分考虑到对试验方案和结果评价的相关影响。从方法验证和确认参数角度看, 化学检测方法制表为校准曲线、回收率、精密度、准确度;非标准方法确认技术指标出上述条件外, 还要进行方法的特异性、耐用性、不确定度评估等。
3.1 方法的校准曲线
在进行化学检测实验室方法校准曲线过程中, 校准曲线包含的工作范围至少要包含5个检测点, 对于筛选方法, 相关系数不应低于0.98, 对于确证方法, 线性回归方程相关系数不得低于0.99。
3.2 方法的回收率
回收率主要表示在检测过程中所获得测试结果的准确性程度。
影响回收率试验结果的主要因素之一是被测物浓度的变化, 因此, 在进行实验验证过程中, 对于禁用物质, 回收率应在方法测定低限、两倍方法测定低限和十倍方法测定低限进行试验;对已制定的最大化学残留量, 回收率应在方法测定低限、最大化学残留量、随机选点进行试验;对于未明文规定的化学残留量标准, 应在方法测定低限、常见限量指标、随机选点进行试验。可参考表1数据进行评价。
3.3 方法的精密度
精密度主要表示操作检测过程所获得测试结果的稳定水平。精密度试验在对于禁用物质进行检测时, 应在测定低限、两倍测定低限和十倍测定低限进行;对于已制定和未指定最大化学残留量的情况, 参照回收率方法进行试验。所选取的浓度范围需最少重复测量六次, 测试结果通过实验室内变异系数表达, 标准偏差通过Bessel公式计算, 系数如表2所示。
3.4 方法的准确度
准确度是指重复分析标准物质, 测定的含量经过回收率校准后, 得到测定值与真实值之间的偏差范围, 如表3所示。
3.5 方法的特异性
实验室在使用非标方法、实验室设计等方法时, 仅依靠色谱分析的技术手段不能够准确的区分同一种分子量物质, 因此需要使用方法特异性来进行确认。对于能够准确定量检测的方法要保证检测结果的准确性, 避免对异构体结果出现误判。根据待测物的化学结构, 使用分子光谱等其它检测技术, 最终可以达到方法的特异性检测需求。
3.6 方法的抗干扰性和耐用性
实验室采用的非标准方法应具有一定的抗干扰性, 即对外界环境及其它影响因素对检测的影响具有一定得抗干扰性能;在测试条件在一定条件及范围内发生变动时, 检测方法应具有一定的容错功能, 保证测试结果不出现大的波动改变。检测方法的技术设备、操作过程等应在多数环境条件下具有适用性和耐用性, 不宜具有苛刻的使用要求。
结语
在实验室检测工作中, 方法验证和方法确认是能够做到检测准确的重要环节之一, 只有做好这两项才能够用数据来证实实验室使用标准方法的操作能力, 证实非标准方法的准确有效性, 最终能够保证实验室检测结果的科学性、适用性及准确无误。
参考文献
[1]曹剑君, 赵文平.浅谈实验室检测方法及其确认[J].机电工程技术, 2011 (07) .
[2]张建春.如何提高实验室检测数据的准确性[J].现代测量与实验室管理, 2011 (01) .
篇4：实验室检测方法确认
关键词：检测/校准 实验室 过程控制
中图分类号：TN915.07文献标识码：A文章编号：1674-098X（2014）09（a）-0243-01
检测/校准实验室的过程控制就是将实验室的检测/校准工作来当做一个过程进行考虑，在检测/校准过程中所得到的数据信息，通过监视和分析后对出现的问题采取相应的控制措施，从而使得检测/校准的数据准确可靠，保证数据的不确定度符合相关规定的技术要求。检测/校准实验室的过程控制通过控制图等方法把检测/校准过程中的各种因素有效控制起来，对问题的全貌进行掌控，以便对薄弱环节进行综合分析，及时发现存在的问题，并采取相关措施处理，从而保证检测数据的准确可靠。
1 检测/校准实验室体系
检测实验室和校准实验室所需要承担的基本工作任务就是对相关产品进行十分专业地检测和校准，为客户提供精准可靠的检测数据和规范的检测报告。根据相关要求，为了检测/校准实验室具有专业地承担检测和完成校准工作任务的技术能力，检测/校准实验室需要建立的技术体系，必须以检测/校准过程为主体。而检测/校准实验室的质量管理体系，则是一个过程网络，是检测/校准实验室用来指挥、控制和管理质量相关方面工作的体系，检测/校准实验室的质量管理体系，是紧密围绕着技术体系而存在的，其工作的开展，就是为了控制和管理技术体系，所以，建立检测/校准实验室的质量管理体系，能够有效的保证技术体系的运行。从而给客户提供准确可靠的数据。
2 过程控制的要素和方法
2.1 过程控制的要素
影响产品的检测质量主要有五个方面的因素，即人员、设备、材料、方法和环境。
（1）人员：对相关标准和规章制度的了解是否够深，对相关设备的操作是否熟练，相关专业培训是否到位等。
（2）设备：检测设备的是否化进行日常维护、保养状态是否良好、设备是否定期校准等。
（3）材料：试剂材料的质量是否合格。
（4）方法：采用的相关标准和规章制度是否规范、制定的作业指导书是否合理、确认的方法是否有效等。
（5）环境：场所、照明、通风、能源、采暖等环境是否检测正常。
这些因素是否控制到位，在检测时，对检测结果的质量会造成较大的影响，这些因素对于检测质量的意义，同样相当于产品制造质量的意义。
2.2 过程控制的方法
（1）定期使用有证标准物质或者次级标准物质对产品进行检测质量控制；
（2）进行能力验证比对工作；
（3）更换检测方法重复多次检测；
（4）再此检测存留物品；
（5）使用质量控制图；
（6）期間核查。
3 过程控制的应用
现代的质量检测管理工作采用了新的模式，与传统的质量检测管理工作模式完全不同，提出了一种新概念和新方法，即现代的质量监测管理工作把“过程”的相关概念进行了有效利用，从而提出了一种“过程控制”的新方法。过程的基本任务就是把输入通过转化变成输出，资源是转化利用的条件，所谓的资源，一般是包括人、法、机、环、料及检测。而组织是策划“过程”的具体事项，建立相关的指标和方法，对过程的效果进行测量，对过程的流程进行控制，并且要保持对相关指标和方法的即时更新。所以，一个“过程”包含了输入、输出、资源和组织者四个基本要素。
实验室的检测/校准工作就可以看做是一个过程：过程基本要素中的输入即委托方对产品检测/校准的基本要求；过程基本要素中的输入即实验室通过对检测/校准过程中使用的资源和从事的技术活动进行有效控制和充分监督，从而保证检测/校准工作符合规定要求，为客户提供准确可靠的检测/校准数据和规范的检测/校准报告。
一个完善体系的建立，不仅要控制好过程中的每一个要素，而且对于每个过程和每个要素之间存在的接口关系也需要进行充分的控制，从而使得各项工作形成一个有机的整体，让工作中的人员能够做到各司其职，同时还能做好相互之间的配合工作，能够够为一个良好的质量目标齐心协力。实验室质量检测管理体系中涉及的各要素、各要素组合、各要素相互作用，必须要做到连续控制，才能保障实验室工作人员通过努力最终提供给客户的的检测/校准数据报告准确可靠质量高。
4 实验室检测/校准工作的流程
对客户提供的产品进行相关检测/校准工作时，需要控制很多的要素，而每一个需要控制的要素又包含了许多的子程序，每一个要素里的每一个子程序，都必须要保证其控制的严格性。只有做到严格控制每一个子程序，才能确保得出一个准确可靠的数据，而这也是实验室建立质量检测管理体系的意义所在。
（1）接洽客户。咨询台的工作人员接受客户咨询并对业务进行洽谈，经过充分的沟通后，根据客户提出的检测/校准要求，实验室明确检测/校准的类别、方法，询问客户是否需要分包或者保密等。之后双方签订相关合同，一式三份，双方各一份，一份留存。
（2）实验室受理委托的人员根据相关规定填写委托单，并将委托单和客户提供的样品一起送往检测/校准实验室，需要进行留存的样品要按照相关规范的规定进行严格的抽取和管理工作。
（3）样品的检测/校准。对样品分别进行送样检测/校准、抽样检测/校准和现场检测/校准。同时控制所有影响检测/校准工作的因素。如工作人员上岗必须持证；详细记录相关设施和环境条件；详细记录设备的工作运行；进行检测/校准工作时，要严格的按照相关的标准和规范规定进行，同时要做好各项实验的原始数据记录工作。
（4）数据的分析和处理。根据相关的标准和规范规定对实验的原始数据进行分析和处理。
（5）检测报告、校准证书。按照相关管理程序对检测报告/校准证书进行编制、审核、发出、更改、存档等。
（6）质量监督。质量监督员要对实验过程进行定期的质量监督工作，做好质量监督工作中的日常记录，若发现实验中存在不符合要求的地方，要在记录表相应的项目栏里填写不符合要求的相关情况报告，并且及时制定相关措施，来对不符合项进行纠正，并填写纠正措施的相关内容记录。
（7）委托方接收。试验完成后，要按实验室相关规定，通知委托方及时缴清费用，并前来取件，实验室发放的检测证书/校准报告，需要委托方进行签字接收。实验室要对用户的信息反馈进行定期的收集整理，并做好相关信息记录工作。
5 结语
综上所述，对检测/校准实验室实施过程控制的管理，能够保证检测/校准工作更规范化和标准化，可以提高检测/校准工作的效率，并在一定程度上节省开支，同时能确保检测/校准的数据更加准确可靠，从而增加客户的满意度和社会的认可度。
参考文献
[1]高进.检测实验室计量标准、测量设备的期间核查[J].计量技术，2012（2）：68-71.
[2]刘军，温亚雄，雷晓红，等.强化过程控制，保证检测质量[J].计量与检测技术，2011，38（12）：83-85.
篇5：实验室检测方法确认
个体化医学（personalized medicine）通俗顾讲，就是疾病的治疗“因人而异”的医学，确切地说，是根据每个患者的个体特征制定相应的治疗策略的医学，但并不意味着对每个病人都准备一套药物或设立一套治疗设备，而是根据患者对特定疾病的易感性以及对特定治疗的应答程度进行分类治疗，使得预防或治疗性的干预措施能集中于确定会受益的人群，从而为那些不会受益的人群节省医疗开支并减少药物的副反应。
个体化医学检测则是为疾病的个体化治疗决策服务的，也就是通过实验室检测，确定患者是否会对特定的治疗产生有效的应答。2003年人类基因组计划基本完成后，进入到后基因组时代，功能基因组的研究，揭示了占人类基因组约1%的单核苷酸多态性（SNPs）不但决定个体的“高矮胖瘦”等外在特征，也决定了个体对外在刺激应对能力以及进入机体的化学物质如药物等的代谢能力，于是产生了药物基因组学。
各种细胞信号传导通路的深入基出研究，产生了疾病的靶向治疗概念，各种靶向治疗药物研发的跟进，使得靶向治疗成为现实，但靶向治疗的有效性又与相应基因结构的改变、表达以及代谢密切相关。因此，进行相应基因及结构改变以及基因表达等的检测是相关检测的基础，在分子水平上做出临床诊断，从而增加诊断的准确性并根据患者的遗传特征选择合适的治疗方法，这就是个体化医学检测，其意义通俗地讲，就是决定特定的治疗药物或方法是否能用或用多用少。
个体化医学检测目前国内既有经国家食品药品监督管理总局（CFDA）批准的商品试剂，也有实验室自建试剂方法（laboratory developed tests，LDTs），但实验室对LDTs、性能验证（verification）和性能确认（validation）等概念通常比较模糊，如何去做性能验证和性能确认，以及在什么情况下做，性能验证的合格判决断标准等，也不清楚。本文特就上述方面谈一点个人的理解和思考。
一、国内个体化医学检测现状及特点
近几年来，国内医疗机构临床实验室已开展了一些涉及肿瘤靶向治疗基因突变和药物代谢基因多态性检测等个体化医学检测项目，并呈快速增加之势，有以下几个方面的特点。
1、采用的技术平台多
以聚合酶链反应（PCR）为基础的技术为主，如实时荧光PCR方法（包括扩增阻碍突变系统法[Amplification Refractory Mutation System，ARMS]、PCR-高分辨溶点曲线分析[HRM]等）、PCR-杂交法（如膜上、芯片[基因芯片]、乳胶颗粒[Luminex]）、PCR-质谱、PCR-Sanger测序、PCR-焦磷酸测序、PCR-新一代高通量测序等，其它较为常用的还有荧光原位杂交（FISH）和免疫组化等。
2、涉及的临床科室多
目前国内开展个体化医学检测的临床实验室所涉及的科室非常多，因为个体化药物治疗研究进展日新月异，可考虑采用基因检测来决定药物使用的药物名单越拉越长，几乎涉及所有临床科室，只要相应科室的主任有相应知识和意识，也有实验室，就有可能去开展相关检验项目。因此，国内目前开展个体化医学检测项目的实验室大部分在非检验科的其它科室或临床科室的研究实验室，如病理科、药剂科、妇产科、肿瘤科、心胸外科、眼科、耳鼻喉科、转化医学中心、中心实验室、医疗机构研究所和医学检验所等。
3、自配试剂多
个体化医学检测尽管已有一些国家食品药品监督管理总局（CFDA）批准的检测试剂，涉及约30余个检验项目，但仍有许多实验室所使用的试剂为自配试剂或方法为自建方法，即LDTs，如几乎所有PCR-Sanger测序、PCR-限制性长度片段多态性分析（RFLP）、PCR-质谱和PCR-高通量测序等。此外，有许多实验室对商品试剂盒的组份及操作进行了改变，一旦出现这种改变，所用试剂即应被视为LDTs。还有，如果使用无证商品试剂，也属于LDTs。所以LDTs目前应可以分为三类：（1）实验室通过购买试剂盒原材料如引物、探针、扩增缓冲液、酶等，配制的自用试剂；
（2）实验室购买的是经过批准的商品试剂，但对试剂盒组份或操作过程进行了改变；
（3）实验室购买的是未经过批准的无证商品试剂。
二、国内外对体外诊断产品和LDTs管理
在北美和欧洲，涉及人类基因的个体化医学检测，极少有经过批准的商品试剂盒或检测系数统，绝大部分都是由医疗机构通过使用LDTs来完成的。在美国，1976年的联邦食品、药品和化妆品医学产品法案修正案（The 1976 Medical Device Amendments to the Federal Food，Drug and Cosmetic Act，FD&CA)授权美国食品药品监督管理局（FDA）监管包括体外诊断产品（in vitro diagnostic devices，IVDs）在内的医学产品。IVDs定义为用于疾病诊断或包括为治疗或预防疾病确定患者健康状态的其它目的的试剂、仪器和系统，为作为商品销售。根据其对患者的风险评估分为三类，I类为低风险，用于患者前，不需要评估或批准；Ⅱ类为中度风险，而进行一般和特定的控制，常需通过进入市场前的告知方式或者510（K）过程由FDA进行评估；Ⅲ类为高风险，则需要进入市场前的批准（premarket approval，PMA）程序。一般的药物遗传检测属于Ⅱ类。加拿大则将IVDs的风险分为四级，遗传检测归为Ⅲ类，即对公众健康有中等风险或对个体有高风险。欧盟则制定了“体外诊断医学产品指令”（the In Vitro Diagnostic Medical Devices Directive[Council Directive 98/79/EC]），作为欧盟的IVDs监管的要求，设定了最低安全、质量和性能标准，但具体评价由成员国的监管机构进行，一旦通过一个国家的批准，则全欧盟成员国通行有效。在国内，IVDs的监管由国家食品药品监督管理总局（CFDA）负责，管理法规是以国务院令形式发布《医疗器械监督管理条例》，同样，IVDs按低、中和高风险分为三类，第一类实行产品备案管理，第二类、第三类实行产品注册管理。二类由省级药监部门负责注册，三类由CFDA负责注册。
相对于IVDs，临床实验室为疾病诊断和治疗进行实验室检测及报告结果，在美国应遵循“1988年的临床实验室改进修正案（the Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988，CLIA)，具体由美国医疗保险和医疗补助中心（the Centers for Medicare& Medicaid Services，CMS）监管，遵循CLIA要求对实验室检查、认证和认可由CMS或独立的授权机构如病理学家协会（the College of American Pathologists，CAP）负责。CLIA关注的是检测过程的准确性和可靠性，以及质量控制、室间质量评价（能力验证）、实验室检测人员的证书、报告结果的要求和标准操作程序（SOP）文件，实验室负责人起着核心作用。作为CLIA的一部分，FDA将实验室检测根据其复杂程度分为豁免、中度和高度复杂三类，CLIA再针对这三类检测提出不同的管理要求。CLIA允许临床实验室修改FDA批准的诊断产品以及研发其自己实验室的检测，亦即LDTs。在CLIA规则下的定期检查确保LDTs遵循必要的程序，并且LDTs检测只能是在执业医生、实验室科学家、遗传学家和分子病理学家等实验室专家的指导下进行。在美国绝大部分的基因遗传相关检测均采用LDTs，欧洲亦如此，但欧洲LDTs只适用于政府的公共医疗机构实验室，可免于IVD Directive监管，只能在自己实验室使用，如要提供给其它机构实验室，则需要走监管程序。国内针对LDTs在2000年发布的《医疗器械监督管理条例》（国务院令第276号）中的第十条规定，医疗机构根据本单位的临床需要，可以研制医疗器械，在执业医师指导下在本单位使用。2014年新发布的《医疗器械监督管理条例》（国务院令第650号）删去了这一条，但并没有规定不允许自制医疗器械。
近些年来，在美国一些商业实验室开展了直接针对消费者的检测项目（direct to consumer，DTC），主要是一些疾病风险预测的项目，均为LDTs。因为其意义的不明确和结果解读的问题，对被检者有可能造成不可预知的困惑或伤害。例如，美国好莱坞著名女演员茱莉2013年5月14日在美国《纽约时报》发表了“My Medical Choice（我的医疗选择）”一文，她表示自己由于携带乳腺癌1号基因（BRCA1），已经接受预防性的双侧乳腺切除手术，以降低罹癌风险。据茱莉介绍，自己的母亲曾经与癌症作斗争了近十年，于56岁时去世。由于妈妈给她遗传了BRCA1基因，因此患乳腺癌和卵巢癌的几率比较高，分别是87%和50%。因此，美国FDA试图对LDTs进行有限的监管，2014年7月再次向美国国会提交议案，在这份提案中FDA计划按照LDT类型分为I级低风险；II级中度风险，III级高风险，分别对应告知（reporting）、注册（registration）、510(k)认证等监管要求。对于罕见疾病，以及有巨大的临床需求，且安全性被证实的诊断技术，FDA把它划为I级低风险，仍然由CMS监管。但也有众多学者反对，提出FDA是管诊断产品的，而临床实验室研发LDTs提供的只是一种医学服务，并非产品。但强调LDTs在临床应用前，应有严格的性能确认程序，使用中有严格的质量控制和使用情况监控。国内LDTs如何能有效地为临床服务，如何进行管控是值得业界思考的一个问题。
三、性能验证和性能确认
篇6：实验室检测方法确认
(1)化学物质的检测方法： ①淀粉碘液——
②还原糖、班氏试剂——斐林试剂
③CO2——Ca(OH)2溶液或酸碱指示剂或溴麝香草酚蓝溶液 ④O2——余烬复燃
⑤蛋白质——双缩脲试剂
⑥染色体、醋酸洋红溶液——龙胆紫 ⑦DNA——二苯胺试剂 ⑧脂肪苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液—— ⑨酒精——酸化的重铬酸钾溶液
(2)实验结果的显示方法：
①光合速率——O2释放量或CO2吸收量或淀粉产生量 ②呼吸速率——O2吸收量或CO2释放量或淀粉减少量 ③原子途径——放射性同位素示踪法 ④细胞液浓度大小——质壁分离 ⑤细胞是否死亡——质壁分离
⑥甲状腺激素作用——动物耗氧量，发育速度等 ⑦生长激素作用——生长速度(体重变化，身高变化)⑧胰岛素作用——动物活动状态
(3)实验条件的控制方法：
①增加水中氧气——泵入空气或吹气或放入绿色植物 ②减少水中氧气——容器密封或油膜覆盖或用凉开水 ③除去容器中CO2——NaOH溶液
④除去叶片中原有淀粉——置于黑暗环境 ⑤除去叶片中叶绿素隔水加热——酒精
⑥除去光合作用对呼吸作用的干扰——给植株遮光 ⑦如何得到单色光——棱镜色散或彩色薄膜滤光 ⑧线粒体提取——细胞匀浆离心
⑾灭菌方法——微生物培养的关键在于灭菌，对不同材料,灭菌方法不同：培养基用高压蒸气灭菌；接种环用火焰灼烧灭菌；双手用肥皂洗净，擦干后用75％酒精消毒；整个接种过程都在实验室无菌区进行。
(4)实验中控制温度的方法： ①还原糖鉴定：水浴煮沸加热 ②酶促反应：水浴保温 ③用酒精溶解叶中的叶绿素：酒精要隔水加热 ④DNA的鉴定：水浴煮沸加热
⑤细胞和组织培养以及微生物培养：恒温培养 2．斐林试剂、班氏试剂与尿糖试纸
这三种物质均可用来检验含醛基的有机物的存在，在医学上用来检验糖尿病，其原理均是利用了Cu2+的氧化性把醛基氧化，但成分略有不同：
斐林试剂：即硫酸铜、氢氧化钠和酒石酸钾钠组成的蓝色混合溶液。分为斐林试剂A和斐林试剂B，A为CuSO4溶液，B为氢氧化钠和酒石酸钾钠的混合溶液，使用时将A、B等体积混合即成斐林试剂。
班氏试剂：即硫酸铜、碳酸钠和柠檬酸钠组成的混合液，又叫本尼迪克特(Benedict)试剂，它与醛反应的结果是与斐林试剂一致的，只是比斐林试剂更稳定，所以在临床化验中更常使用。
尿糖试纸：又叫硫酸铜试纸，呈白色,带蓝色斑点，用于糖尿病患者的尿糖测试。每片含硫酸铜20毫克,枸橼酸毫克,碳酸钠80毫克，氢氧化钠235毫克。尿糖试纸法快速、方便，试纸的正确使用方法为：将试纸条放在尿液中浸湿，一秒钟后取出，在一分钟内观察试纸的颜色，并与标准色板对照，根据不同的颜色来确定尿糖阳性的程度。300 3．斐林试剂和双缩脲试剂的比较
相同点：①都由NaOH溶液和CuSO4溶液构成；
②斐林试剂甲液和双缩脲试剂A都为0．1g/mLNaOH溶液。
不同点：①CuSO4溶液浓度不一样：斐林试剂乙液为0．05g/mLCuSO4溶液，双缩脲试剂B为0．01g/mLCuSO4溶液。
②配制比例不一样。
③使用方法不一样：斐林试剂是甲、乙液一起混合后再使用，双缩脲试剂则是先向待鉴定材料加入A试剂摇匀后，再加入试剂B。
④鉴定的对象不一样：斐林试剂鉴定的是还原糖，双缩脲试剂鉴定的是蛋白质。⑤反应本质及颜色反应不一样。4．苏丹Ⅲ染液与苏丹Ⅳ染液的比较
都是用来鉴定脂肪。苏丹Ⅳ染液更易溶于脂肪，所以染色更深，同时要求染色时间更短。生物学中常用的试剂：
1、斐林试剂： 成分：0.1g/ml NaOH（甲液）和0.05g/ml CuSO4（乙液）。用法：将斐林试剂甲液和乙液等体积混合，再将混合后的斐林试剂倒入待测液，水浴加热或直接加热，如待测液中存在还原糖，则呈砖红色。
2、班氏糖定性试剂：为蓝色溶液。和葡萄糖混合后沸水浴会出现砖红色沉淀。用于尿糖的测定。
3、双缩脲试剂：成分：0.1g/ml NaOH（甲液）和0.01g/ml CuSO4（乙液）。用法：向待测液中先加入2ml甲液，摇匀，再向其中加入3~4滴乙液，摇匀。如待测中存在蛋白质，则呈现紫色。
4、苏丹Ⅲ：用法：取苏丹Ⅲ颗粒溶于95%的酒精中，摇匀。用于检测脂肪。可将脂肪染成橘黄色（被苏丹Ⅳ染成红色）。
5、二苯胺：用于鉴定DNA。DNA遇二苯胺（沸水浴）会被染成蓝色。
6、甲基绿：用于鉴定DNA。DNA遇甲基绿（常温）会被染成蓝绿色。（甲基绿使DNA呈现绿色，吡罗红使RNA呈现红色。）7、50%的酒精溶液：在脂肪鉴定中，用苏丹Ⅲ染液染色，再用50%的酒精溶液洗去浮色。8、75%的酒精溶液：用于杀菌消毒，75%的酒精能渗入细胞内，使蛋白质凝固变性。低于这个浓度，酒精的渗透脱水作用减弱，杀菌力不强；而高于这个浓度，则会使细菌表面蛋白质迅速脱水，凝固成膜，妨碍酒精透入，削弱杀菌能力。75％的酒精溶液常用于手术前、打针、换药、针灸前皮肤脱碘消毒以及机械消毒等。9、95%的酒精溶液：冷却的体积分数为95%的酒精可用于凝集DNA。10、15%的盐酸：和95%的酒精溶液等体积混合可用于解离根尖。
11、龙胆紫溶液：(浓度为0.01g/ml或0.02g/ml)用于染色体着色，可将染色体染成紫色，通常染色3~5分钟。（也可以用醋酸洋红染色）12、20%的肝脏、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁：用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率。（新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶）13、3%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鲜淀粉酶溶液：用于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验。
14、碘液：用于鉴定淀粉的存在。遇淀粉变蓝。
15、丙酮：用于提取叶绿体中的色素。
16、层析液：（成分：20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成，也可用93号汽油）可用于色素的层析，即将色素在滤纸上分离开。
17、二氧化硅：在色素的提取的分离实验中研磨绿色叶片时加入，可使研磨充分。
18、碳酸钙：研磨绿色叶片时加入，可中和有机酸，防止在研磨时叶绿体中的色素受破坏。19、0.3g/mL的蔗糖溶液：相当于30%的蔗糖溶液，比植物细胞液的浓度大，可用于质壁分离实验。20、0.1g/mL的柠檬酸钠溶液：与鸡血混合，防凝血。
