hiv实验室检测

关键词： 缺陷 免疫 艾滋病

hiv实验室检测（通用12篇）

篇1：hiv实验室检测

HIV初筛实验室操作规范

（一）一、抽 血 标 准 操 作 规 程

1、适 用 范 围

需做血液检测的对象。

2、试 剂 与 材 料

碘酒、酒精棉、棉签、橡皮止血带、注射器（一次性采血器）、试管、止血棉。

3、操 作 步 骤

3.1 核对被检者姓名并标价试管；

3.2 请被检者入座，伸出手臂放在采血垫上；

3.3 用橡皮止血带扎紧并请被检者握紧拳头；

3.4 选择静脉，用碘酒棉在采血部位由里向外擦拭（直径约6cm左右）消毒；

3.5 用酒精棉脱碘；

3.6 把一次性注射器（一次性采血器）打开，在采血部位穿刺静脉，抽取血液；

3.7 放松橡皮止血带，拔出针头，同时请被检者用止血棉压迫止血。

二、酒 精 棉 球 的 制 备 1.试剂与材料

无水乙醇（分析纯）、消毒蒸馏水若干、消毒量筒（1000ml）、消毒盛器 2.操作步骤

2.1 把消毒棉放入消毒盛器中待用。

2.2 取165ml消毒蒸馏水到入消毒好的量筒中，再加入一瓶500ml无水乙醇充分 混匀。2.3 把配好的75％酒精到入放有消毒棉的盛器中

三、样品的采集和处理.范围

本章规定了用于艾滋病病毒（HIV）检测的血清、浆和全血样品的采集和处理方法，适用于HIV抗体检测、抗原检测、核酸检测、CD4+/CD8+T淋巴细胞测定和HIV分离培养。.操作步骤.1 样品的采集和处理

艾滋病检测最常用的样品是血液，包括血清、血浆和全血。唾液或尿液有时也可作为测试样品。常用的血液样品的采集和处理方法如下： 2.1.1血清样品采集和处理

2.1.1.1 用一次性注射器（或真空采血管）抽取一定量静脉血，室温下自然放置1~2小时，待血液凝固、血块收缩后再用3、000r/min离心15min，吸出血请备用。

2.1.1.2如用滤纸片采样，则手指或耳垂局部严格按常规进行消毒，在刺破皮肤，迅速把滤纸片沾上，切勿让血液滴落在其它物体表面造成污染。采血后要待血样干燥后再包装送检。

2.1.2 抗凝血样品采集和处理

2.1.2.1用加有抗凝剂的真空采血管（或一次性注射器抽去静脉血，转移至加有抗凝剂的试管），反复轻摇，分离血浆和血细胞备用。

2.1.2.2应根据实验要求选用适当的抗凝剂，如CD4+/CD8+T淋巴细胞测定可选用K3EDTA或肝素或柠檬酸钠，HIV病毒分离、核酸定性/定量检测可选用K3EDTA或枸橼酸钠。

2.1.2.3用于核酸定性检测时，采集的抗凝全血应在4~8h内分离PBMC和血浆，否则应在24~48h内分离血浆和血细胞。(病毒载量测定不同方法对样品的要求见第四章4.1中表2；CD4+/CD8+T淋巴细胞测定样品采集要求见第五章4.1。)2.1.3 采集样品注意事项

2.1.3.1采集样品原则上应按临床采血技术规范操作（试剂盒有特殊要求）。

2.1.3.2采集样品时应注意安全，建议采用真空采血管及蝶形针具，以避免直接接触血液；直接接触HIV感染者/艾滋病（AIDS）病人血液/体液的操作，应带双层手套。2.2 样品的保存

2.2.1 用于抗体检测的血清或血浆样品，应存放于-20度以下，短期（1周）内进行检测的样品可存放于2-8度。

2.2.2用于抗原和核酸检测的血浆和血细胞样品应冻存于-20以下，进行病毒RNA检测的样品如需保存3个月以上应置于-80度。

2.2.3 用于CD4+/CD8+T淋巴细胞测定的样品不能长期保存，样品采集时间超过48h则不可检测。2.3 样品的运送

2.3.1 实验室间传递的样品应为血清或血浆，除特殊情况外一般不运送全血。2.3.2应采用WHO提出的三级包装系统

2.3.2.1 第一层容器：装样品，要求防渗漏。样品应置于带盖的试管内，试管上应有明显的标记，标明样品的编号或受检者姓名、种类和采集时间。在试管的周围应垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。随样品应附有送检单，送检单应与样品分开放置。

2.3.2.2 第二层容器：要求耐受性好、防渗漏、容纳并保护第一层容器，可以装若干个第一层容器。将试管装入专用带盖的容器内，容器的材料要易于消毒处理。

2.3.2.3 第三层容器：放在一个运输用外层包装内，应易于消毒。在第三层容器外面要贴标签（数量，收、发件人）。

2.3.3 血清和血浆样品应在2~8度条件下由专人运送。用于CD4+/CD8+T淋巴细胞测定的样品应在室温下18~23度运送。每一包装的体积以不超过50ml为宜。2.3.4 运送感染性材料必须有记录。

2.3.5 如分离血浆仍有困难，可直接将抗凝血-20度以下冻存，采用冰壶冷藏运输，避免冻融。

2.3.6 特殊情况下如需对个别样品进行复测，可以用特快专递形式投寄，但必须按三级包装系统将盛样品的试管包扎好，避免使用玻璃容器，以保证不会破碎和溢漏。2.4 样品的接收

2.4.1 含有感染性样品的包裹必须在具有处理感染源设备的实验室内由经过培训的、穿戴防护衣的工作人员打开，用后的包裹应进行消毒。

2.4.2 核对样品与送检单，检查样品管有无破损和溢漏。如发现溢漏应立即将尚存留的样品移出，对样品管和盛器消毒，同时报告有关领导和专家。

2.4.3 检查样品的状况，记录有无严重溶血、微生物污染、血脂过多以及黄疸等情况。如果污染过重或者认为样品不能被接受，则应将样品安全废弃。并要将样品情况立即通知送样人。

2.4.4 打开标本容器时要小心，以防内容物泼溅。样品处理时若内容物有可能溅出，则应在生物安全柜中戴手套进行。同时应戴口罩、防护眼镜，以防皮肤或粘膜污染。2.4.5 因特殊临床治疗导致自发荧光的样品不可用于荧光方法测试。2.4.6 接受样品时应填写样品接受单。

四、电 热 恒 温 水 浴 箱 操 作 规 程 1.概 述：

本电热恒温水浴箱主要用于科研单位、医疗单位及化验所检查化验病理血清等用。2.技术性能：

工作环境：常温常压条件下正常工作。

技术指标：温度调节范围：37℃~65℃

温度波动： ±

1℃

温度均匀性： ± 1℃ 3.使用方法：

3.1使用是必须加入温水，可缩短加热时间和节约用电。3.2打开电源开关，电源指示灯亮表示电源接通。

3.3旋转恒温控制器旋钮，加热指示灯亮表示电源接通，当温度表上的温度达到所需使用的温度时，将恒温控制器的旋钮调整在恒温指示灯忽亮忽熄点，待数分钟后即能自动恒温控制。

3.4恒温控制器的刻度，仅可作温度对照指示，并非温度指示刻度。4.点检程序：

4.1 为保证水浴箱温度的 准确性必须每日使用温度计测量水浴箱内水温，并做好日温度记录。

4.2每半年由设备科检测校正一次，且附有原始记录。5.注意事项：

5.1箱外壳必须有效接地。

5.2在未加水前，切勿开电源，以防止电热管内的电热丝烧坏。5.3非必要时，请勿拆开右册盖板，以利安全。

文县妇幼保健站

篇2：hiv实验室检测

HIV快速检测点实验室基本标准

（一）艾滋病筛查中心实验室及艾滋病筛查实验室。

1、人员条件

至少由3名医技人员组成，其中具有中级卫生技术职称人员至少1名。负责筛查试验的技术人员需具有2年以上从事病毒性疾病血清学检测工作经验，接受过省级以上艾滋病检测技术培训，并获得培训证书。

2、建筑条件：实验室或检测区域应分为清洁区、半污染区和污染区，应符合二级生物安全实验室（BSL-2）要求。

3、仪器设备条件

配备艾滋病病毒抗体筛查试验所需设备，至少包括酶标读数仪、洗板机、普通冰箱、水浴箱（或温箱）、离心机、加样器（仪）、温度计、消毒与污物处理设备、实验室恒温设备、安全防护用品和生物安全柜。

（二）艾滋病检测点。

1、人员条件：至少由2名经过艾滋病检测技术培训并获得培训证书的专业人员组成。

2、建筑条件：需有艾滋病检测区域或专用实验台，能开展简便、快速检测。

3、设备条件：需配备快速试验所必须的物品，包括普通冰箱、消毒与污物处理设备、一次性消耗品、安全防护用品。

篇3：hiv实验室检测

1 资料与方法

1.1 聊城市艾滋病筛查实验室建设情况

全市共建立艾滋病筛查实验室25个,其中疾控9个,血站/单采血浆站3个,综合医疗单位13个。

1.2 监测对象

性病门诊就诊者、暗娼、嫖客、男同性恋者、HIV阳性者的配偶(固定性伴)、非注射吸毒者、有偿供血(浆)者、输注血液(制品)者、婴幼儿(儿童)(0~13岁)、公共场所从业人员、入境体检者、出境体检者、临床可疑者、义务献血员、羁押人员、术前检查者、新兵体检者、职业暴露者、自愿检测者、孕产妇和其他。

1.3 资料来源

疫情资料来源于中国疾病预防控制艾滋病综合防治信息系统。

1.4 统计学方法

采用Excel数据库和SPSS 11.5统计软件对资料进行整理和分析。

2 结果

2.1 HIV筛查实验室检测情况

25家实验室1997~2008年共检测206 100人,检测出HIV/AIDS 46例,检出率为0.022%。其中,疾控机构检测12 109人,检出27例;综合医院检测54 454人,检出15例;采供血机构检测139 537人,检出4例。术前检测34 363人,检出1例;其他就诊者检测2 849人,检出11例;孕产期检查16 303人,检出1例;VCT 3 322人,检出6例;阳性者配偶或性伴检测1人,检出1例;无偿献血人员检测34 658人,检出4例;新兵体检2 336人,检出1例;在押人员13 237人,检出18例;其他人员检测11 346例,检出1例,专题调查外来媳妇检测13 401人,检出2例。受血(制品)前检测6 651人;性病门诊1 939人;婚前检测27人,娱乐场所人员体检11 835人;有偿供血(浆)人员检测43 830人,出入镜人员体检2人。各种样本来源检出的病例比例见图1。

2.2 检出的HIV/AIDS疫情分析

1998年4月本市检测出第1例感染者,截止2008年全市共报告HIV/AIDS 46例,其中,报告AIDS患者3例、感染者43例,AIDS已死亡3例,HIV死亡7例。

2.2.1 历年检出情况

1998年1例,1999年2例,2002年1例,2004年6例,2005年5例,2006年4例,2007年8例,2008年19例,2000、2001和2003年未检出。见图2。

2.2.2 地区分布情况

本市23例,本省外市2例,外省21例。外市包括济南1例,泰安1例;外省包括四川16例、广东2例、黑龙江1例、新疆1例、陕西1例,四川16例均来自凉山彝族自治州的在押人员。

2.2.3 人群分布

46例AIDS/HIV中,男性32例、女性14例,年龄最小6岁,最大55岁,年龄分布在20~40岁者占97.5%。农民32例,公共场所服务人员4例,工人3例,商业服务者1例,干部职员1例,家政、家务及待业1例,学生1例,民工1例,其他1例,不详1例。

2.2.4 传播途径

经静脉注射吸毒传播12例,异性性传播16例,男性同性性传播5例,采血(浆)4例,输血(血制品)1例,其他1例,不详7例。见图3。

3 讨论

检测资料显示,本市1998年初次检测出1例艾滋病病毒感染者,2002年从当地居民中检测出首例经性途径传播的艾滋病病毒感染者,2005年检测出首例配偶间经性途径传播的艾滋病病毒感染者,2006年从女性性工作者中首次检测出艾滋病病毒感染者,2007年检测出首例男性同性恋者感染艾滋病病毒病例,2007年首次从孕产妇中检测出艾滋病病毒感染病例,2007年首次从新兵入伍体检者中检测出艾滋病病毒感染者,2008年发现第1例经母婴途径传播的艾滋病病例。

HIV/AIDS流行病学调查显示,新报告的HIV感染者和AIDS患者以中青年、农民为主,性传播成为主要的传播方式,2008年经性传播累计已达46.00%,这一比例高于全国(24.01%)而低于山东省(50.00%)。同时,本市男性传播为11.00%,高于全国(2.06%)和山东省(9.50%),本市男性行为人群比较活跃,致使最近几年本市男性传播有上升的趋势,这一现象与2005年山东省的调查相一致[2]。在押人员中开展HIV检测意义重大,自2005年开展在押人员检测以来,共检出18例在押人员,占疫情总数的42.00%,表明将在押人员的HIV抗体检测作为常规检测的必要性[3]。VCT逐渐发挥其作用,有高危行为的检测咨询人数逐年上升,检出的病例数也呈上升趋势,至2008年已累计检出6例感染者。医疗机构(其他就诊者、术前检查、孕产期)发现病例数逐年增多,占各类样本来源总数的29.00%,表明将HIV抗体检测纳入临床常规检查是及早发现HIV感染者的重要途径之一。无偿献血人员一般是青壮年,其中隐含着部分高危人群(嫖客、男性),因此加强对无偿献血人员的检测是保障血液安全的基本保障。有资料显示已知晓的比未知晓的艾滋病感染者(患者)二代传播的比例将降低2/3,这样将有效控制二代的传播。

综上所述,本市艾滋病疫情仍处于低流行状态,应抓住有利时机,贯彻“预防为主”的方针[4],加强艾滋病预防知识宣传教育和高危人群行为干预,健全实验室网络,加大监测力度,阻断艾滋病向一般人群传播的趋势。

参考文献

[1]邢玉兰.我国艾滋病检测实验室网络与实验室认可[J].艾滋病检测实验室网络通讯测,2006,1(1):27-28.

[2]廖玫珍,刘学真,傅继华,等.山东省男性同性恋者综合性行为监测情况分析[J].中国艾滋病性病,2005,11(4):268-270.

[3]卫生部,公安部,司法部.关于印发对监管场所被监管人员开展艾滋病病毒抗体检测工作方案的通知[S].卫疾控发366号,2005.

篇4：hiv实验室检测

[关键词] 酶联免疫吸附实验；HIV抗体；影响因素

[中图分类号] R446.61 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2012）02-0076-02

The impact factors of enzyme-linked immunosorbent assay in detection of HIV antibodies

BI Xiuxin

International Travel Health Care Center of Dandong in Liaoning Province, Dandong 118000, China

[Abstract] By analysis of all relevant factors in pre-test, during test and post-test of enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) in detection of HIV antibodies, to explore the various impact factors on the results, in order to find a solution and strengthen the quality control management, to ensure accuracy and precision of the test results.

[Key words] ELISA; HIV antibody; Impact factors

酶联免疫吸附实验因其操作简单、灵敏度高、特异性好、价格低廉等特点成为HIV抗体初筛实验的常用方法。优质的试剂、良好的仪器、正确的操作和高素质的技术人员是保证检测结果准确可靠的必要条件。由于ELISA法检测结果受很多因素影响，其中任何一项因素都可造成HIV抗体结果假阴性和假阳性结果的发生。因此必须加强HIV抗体初筛实验室的全面质量控制，保证其结果的准确可靠。笔者从事多年的HIV抗体检测工作，现将影响因素分析如下。

1 检测前

1.1 试剂

1.1.1 试剂的选择 优质的HIV抗体试剂是结果质量的基础。试剂要从灵敏度、特异性、精密度、稳定性、简便性、安全性和经济性做出全面的评价并选择好的试剂，根据实验室要求选择灵敏度高（精密度高，CV值＜15%）、特异性好的试剂。试剂的选择很关键，通过厂家了解试剂包被物的组成，如原料来源（基因组成或合成多肽）、片段组成（按比例组成或化合组成）、片段长短等来判断抗原、抗体包被的完整性和特异性。根据试剂批号检定报告了解其质量水平和试剂的优劣，还可以室间质评报告中对试剂的评价结果来客观评价、选择适合实验室的试剂。要选择和订购长效批号的试剂，避免试剂批号改变而重新建立质量控制体系[1]。

1.1.2 试剂的储存 试剂应储存在2～8℃冰箱中，力求温度恒定，并防止阳光照射。试剂盒中有3个主要的试剂，即免疫吸附剂、酶结合物和底物。酶结合物具有生物活性，保存不当，极易失活；底物容易被氧化，产生颜色。因此，必须加强试剂的储存管理，防止试剂失活和氧化。

1.2 标本

血清是最常用的标本。酶联免疫吸附实验中标本的质量也是影响结果的关键因素之一，标本的干扰物质容易引起假阳性或假阴性的结果。干扰分为外源性和内源性。外源性干扰：细菌污染、溶血、凝固不全、反复冻融和标本相互污染等；标本放置4℃冰箱冷藏一般不超过5 d，如果保存过久，其中的蛋白质可能发生聚合，可使本底加深；冻结的标本要融化后充分混匀，为防止蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分轻轻混匀，避免产生气泡；浑浊或有沉淀的样本应先离心澄清后再检测；防止反复冻融，引起效价降低。内源性干扰：一般包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异性免疫球蛋白、异嗜性抗体及某些自身抗体等，避免内源性干扰因素主要通过选择合适的试剂。①标本溶血时释放大量具有过氧化物酶活性的物质，增加了非特异显色，干扰测定结果[2]；②标本被细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应；③血清标本应充分离心，否则可因凝固不全、纤维蛋白原非特异吸附于微孔内而造成假阳性结果。

1.3 仪器

酶联免疫吸附实验中会用到移液器、水浴箱或恒温箱、洗板机、酶标仪等。移液器是一种比较精密的工具，要求比较高，必须定期对加样器进行维护和校准[3]。每次加样需更换吸嘴，以免交叉污染。水浴箱温度要准确恒定；洗板机要定期维护，检测残液量。

2 检测中

2.1 加样

在HIV抗体检测中加样3次，即加标本、加酶结合物、加底物。加样时要将所加物加入板孔底部，避免加在孔壁外部，产生气泡，吸取样品速度要均匀，保证加样量准确；加完样品要在微量振荡器上震荡1min以保证混合均匀。

2.2 温育的时间和温度

要力求保证温育的时间和温度，酶联免疫吸附实验属于固相免疫测定，抗原、抗体的结合只在固相的表面发生，样品中的抗体并不是都有均等的机会与固相的抗原结合，而是最贴近孔壁的一层溶液中的直接与抗原接触，是一个逐渐平衡的过程，因此需要经过扩散才能达到反应的终点，要保证足够的温育时间，才能使产物生成达到顶峰，有的实验室为加快速度，提高反应温度，但盲目提高温度会影响酶的活性。

2.3 温育的方式

常采用温箱法、微波辐射法和水浴法。其中水浴法能较好地解决因受热不均衡所致周围孔与中央孔结果的吸光度差异（即边缘效应），可将ELISA板置于水浴箱中。无论温育还是水浴，反应板不可叠放，以保证各板的温度尽快达到平衡，反应板要贴近水面，温育时要防止挥发或水珠溅入影响结果。

2.4 洗涤

洗涤虽然不是一个反应步骤，但也影响实验的成败。洗涤的目的是分离游离和结合的酶标记物，通过洗涤来实现清除残留在板孔中的没能与固相抗原结合的物质以及在反应过程中非特异性吸附于固相载体的干扰物质，洗液的配制要按照要求，太浓会解离包被在固相的抗原，过低削弱洗涤效果。可以说洗涤是HIV抗体ELISA法检测的最主要的技术，操作者要严格按照要求洗涤，不能马虎，否则前功尽弃。洗涤包括仪器自动洗涤和手工洗涤。仪器洗涤要注意定期检测残余量，检测吸液针和注液针是否堵塞，及时更换洗液和废液，防止时间过长引起细菌污染和废液倒流；手工洗涤包括有浸泡式和流水冲洗式两种。手工洗板要注意孔间的交叉污染和洗涤间隔时间。

2.5 显色与比色

显色是ELISA法中最后一步温育反应，反应时间和温度仍是影响显色的因素。TMB受光照影响不大，但OPD底物受光照会自行变色，因此，显色反应应避光进行。显色的温度和时间要力求准确充分，并在规定的时间内比色，防止时间过长会褪色。比色时应尽量选用双波长进行比色，这样可以排除干扰，比色前要用吸水纸拭干板底附着的液体，防止孔内产生气泡，对测定结果产生干扰。

3 质量控制

3.1 开展室内质量控制（IQC）

室内质量控制程序，每次或每天之间不可能没有误差，决定允许的误差范围以临床上不造成误诊和漏诊为准，选择一个弱阳性的室内质量控制品，其S/CO值应该为2～4之间。利用L-J质量控制图，认真分析每次的失控的原因，要解决失控，必须分析造成失控是随机的还是系统的很重要，随机误差表现离散度增大，而系统误差逐渐产生，如漂移或者倾向性，如果是系统误差，再对系统误差进行分析。实验室每月、每一季度要对室内质量控制结果进行分析总结，对当月的均值、变异系数等进行比对分析，及时发现问题，及时采取纠正措施来提高检测结果的可靠性。

3.2 外部质量控制

积极参加室间质评能力验证活动，通过室间质评和能力验证，利用实验室间比对来确定实验室检测或校准能力的活动，判断和监控实验室内部质量控制方法，有效消除偏差，对分析结果起到校准和复核作用。有效地实施能力验证，在实验室质量控制中起着非常重要的作用。利用实验室间的比对和能力验证来不断提升实验室的能力。

3.3 加强人员培训

人员是实验室最宝贵的资源，一个实验室水平的高低很大程度上取决于人员的素质，尤其是关键的技术岗位人员，因此，有针对性地加强人员培训，对艾滋病初筛实验室是非常重要的[4]。

[参考文献]

[1] 于振喜，李连洁. 用ELISA法检测HIV抗体时如何避免“花板”[J]. 中国医药导报，2006，3（23）：56.

[2] 陈云钰. ELISA法检测HIV抗体需注意的影响因素[J]. 中国卫生检验杂志，2011，21（6）：1564-1565.

[3] 全国艾滋病检测技术规范（2009年修订版）[S]. 中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心，2009：1-5.

[4] 张斌. 实验室管理、认可与运作[M]. 北京：中国标准出版社，2005：162-164.

（收稿日期：2011-11-18）

篇5：HIV抗体初筛检测程序

文件编号：MXMBY/W66－001 标题：HIV实验室各项规章制度及标准操作规程

版号：第 1 版

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HIV抗体初筛检测程序

1.实验准备：试验开始前将试剂和样品放置在室温，按实验室SOP或者试剂说明书做好试剂准备。

2.实验操作（以华大吉比爱生物技术公司的Anti-HIV 1+2 Antibody ELISA Kit 为例）：

a 取出HIV抗原包被板。每次试验设空白对照1孔，阴、阳性对照2孔。除空白对照外，分别加入HIV阴、阳性对照各50微升，其余孔加入待检血清各50微升。贴上封口胶，置37℃温育30分钟

b 将50倍浓缩液用纯化水50倍稀释后备用

c 弃去各孔中样品、拍干。每孔加满洗液，静置数秒后弃去，如此重复洗5次，拍干。

D 除空白孔外，每孔加入酶标抗原工作液50微升，贴上封口胶。37℃温育20分钟。

e 弃去各孔中酶液，用洗液反复洗涤5次（操作同步骤3）f 每孔加入底物液A 50微升，再加入底物液B 50微升，轻拍混匀，置37℃避光显色10分钟

g 显色完毕后，每孔加入终止液50微升，轻拍混匀，立即以空白孔调零，置酶标仪450nm波长处测定OD值（参考波长为630nm）3.结果报告：对呈阴性反应的样品，可由初筛实验室出具HIV抗体阴性报告；对呈阳性反应的样品，须进行复查，不能出阳性报告，可出具“HIV抗体待复查”报告。梅县区慢性病防治院作业指导书

文件编号：MXMBY/W66－001 标题：HIV实验室各项规章制度及标准操作规程

版号：第 1 版

1/2 4.复检试验：对初筛呈阳性反应的样品用原有试剂和另外一种不同原理或不同厂家的筛查试剂重复检测。

篇6：HIV实验室安全守则

一、实验室工作人员要熟悉生物安全操作知识和消毒技术；

二、不得在实验室内喝饮料、吸烟、吃食物和化妆打扮等，不得在实验室内会客；

三、实验室用品（包括工作服）不得作其它用途；不可将私人和无关的物品带入实验室；

四、工作时要戴手套，穿工作衣和隔离衣。操作时手套破损应立即丢弃，洗手并戴上新手套；

五、不要用戴着手套的手触摸暴露的皮肤、唇、眼睛、耳朵和头发等；

六、尽量避免使用尖锐物品和器具，宜用不易破碎材料制品，禁止用口吸任何物质；

七、工作结束后要对工作台面消毒，如用消毒液清洗后干燥20分钟以上，操作时标本、检测试剂外溅时应及时消毒，平时要保持环境整洁；

八、工作完毕，脱去手套后洗手，再脱去工作衣，用肥皂和流动水洗手；

九、遇有意外事故，应立即处理并分别以口头和书面报告上级部门。如工作人员皮肤被刺伤，可用流动水局部清洗或用刺激性较轻的含氯创伤消毒剂浸泡皮肤创口；样品或检测试剂溅入眼内立即用生理盐水冲洗，溅入嘴内，先吐出残留液体后，用水反复漱；

篇7：HIV实验室安全保障措施

1、高标准的个人防护对于减少感染的危险性很重要，皮肤受损、患病都会增加感染的危险，皮肤的伤口和擦伤都应以防水辅料覆盖。

2、在进入艾滋病实验室时，要穿侧面和背面能系紧的各利益，戴一次性手套，如接触物传染性危险大，可戴两幅手套以增加保护。

3、进实验室前要摘除首饰，修剪长的带倒刺的指甲，以免刺破手套。

4、在脱去各利益、离开实验室前必须洗手。

5、严禁在艾滋病实验室内进食、饮水、吸烟、化妆等。

篇8：hiv实验室检测

1 资料与方法

1.1 临床资料:选择2013年2月至2015年2月我院收集的600份无偿献血者的血液样本以及我市疾病预防控制中心提供的20份经确认为HIV阳性的样本作为实验样本, 其中男性血液388份, 女性血液232份, 对这620份血液样本采用第三代HIV试剂和第四代HIV试剂进行平行检测, 将其两种试剂下检测出的结果分成两组, 第三代HIV试剂组 (以下简称A组) 和第四代HIV试剂组 (以下简称B组) 。

1.2 研究方法:所有血液样本均经第三代HIV检测试剂盒第四代HIV检测试剂进行检测, 第三代HIV检测试剂是由珠海丽珠生物有限公司生产, 国药准字为S20020011;第四代HIV检测试剂是由北京万泰生物有限公司生产, 国药准字为S20080008。所有试剂均在有效期内使用, 所选仪器为帝肯公司EVO150全自动加样系统, 奥斯邦FAME24/20全自动酶免系统, 严格按照实际上的说明对血液样本进行检测。对于检验结果, 若是同一标本两种试剂均呈反应性或者一种试剂呈反应性, 且经同一试剂双孔复试后仍至少有一孔呈反应性, 则将该标本送至省疾控中心HIV确认实验室进行确认[2], 我市疾病预防控制中心提供的20份经确认为HIV阳性的样本除外。

1.3 观察指标:比较两代检测试剂对于HIV病毒的灵敏度和特异性以及相关信息。

1.4 统计学方法:利用SPSS17.0统计软件分析, 计数数据比较采用χ2检验, P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

两代HIV检测试剂检验结果对比:第三代HIV试剂对于样本检测出阳性的有23例 (3.71%) , 第四代HIV试剂检测出阳性29例 (4.68%) , 即第三代HIV试剂对于HIV病毒的特异度为96.29%, 第四代HIV试剂对于HIV病毒的特异度为95.32%;经市疾病预防控制中心确认为阳性的有21例, 第三代HIV试剂的漏检率为19.05%, 显著高于第四代HIV试剂的0.00%, 差异有统计学意义 (均P >0.05) 。见表1。

3 讨论

第三代HIV酶免检测试剂是采用双抗原夹心法检测抗-HIV, 被广泛用于血液筛查, 但是据统计第三代HIV检测试剂仍具有一定的漏检率, 且耗费时间较长, 其检测结果的准确性还有待提高[3]。第四代HIV检测试剂是在第三代试剂的基础上进行的改进, 这种试剂省去p24抗体检测而增加了p24抗原检测, 而并不影响HIV抗体的检测, 大量研究表明检测过程中并没有出现第四代试剂检测为阴性而在第三代试剂中检测为阳性的情况出现, 所以并没有在p24抗原血症和血清抗体阳性转之间引入诊断的第二个窗口期, 使得检测时间缩短了4~5 d。本研究旨在探讨第三代HIV检测试剂和第四代HIV检测试剂对于HIV病毒血液样本检测结果的准确性。

本文研究发现, 第三代HIV试剂对于样本检测出阳性的有23例 (3.71%) , 第四代HIV试剂检测出阳性29例 (4.68%) ;经市疾病预防控制中心确认为阳性的有21例, 第三代HIV试剂的漏检率为19.05%, 显著高于第四代HIV试剂的0.00%。提示第四代HIV试剂对于HIV病毒的灵敏度更高, 但是特异性略输于第三代HIV试剂。造成漏检的原因可能是:①处于“窗口期的样本”HIV抗体还没有产生, 第三代试剂无法检测, 而第四代试剂可以检测p24抗原, 即HIV抗原, 有效的缩短了检测窗口期, 避免了漏检;②试剂本身质量有缺陷, 比如载体上包被的抗原片段不全等等因素。从表中我们也可以看出第四代HIV试剂的特异性略低于第三代, 与相关文献报道基本一致[4]。这是因为第四代HIV检测试剂酶标板的孔壁上包被的抗HIV p24抗体是鼠抗体, 因此第四代检测出的假阳性反应是源于对鼠抗体的反应。研究表明, 在献血人群中约有1%~2%的鼠抗体反应或者是不明原因的异种抗原反应发生, 因此第四代HIV检测试剂对于HIV病毒的特异性略逊于第三代。HIV窗口期感染是目前血液安全最需要注意的地方, 约为21 d, 利用第四代HIV检测试剂可将窗口期缩短11 d, 直接降低了感染的危险度。

综上所述, 第四代HIV检测试剂对于HIV病毒的灵敏性高, 操作简单方便, 与第三代检测试剂基本相同, 且能缩短“窗口期”, 降低窗口期感染的危险度, 值得采供血机构用来对血液进行常规的筛查工作。

摘要：目的 分析第四代HIV检测试剂与第三代HIV检测试剂的结果。方法 选择2013年2月至2015年2月我院收集的600份无偿献血者的血液样本以及我市疾病预防控制中心提供的20份经确认为HIV阳性的样本作为实验样本, 进行HIV病毒初筛检测, 根据所用试剂不同将结果分为第三代HIV组 (以下简称A组) 和第四代HIV组 (以下简称B组) , 比较两组的检验结果。结果 第三代HIV试剂对于样本检测出阳性的有23例 (3.71%) , 第四代HIV试剂检测出阳性29例 (4.68%) ;经市疾病预防控制中心确认为阳性的有21例, 第三代HIV试剂的漏检率为19.05%, 显著高于第四代HIV试剂的0.00%, 差异有统计学意义 (P<0.05) 。结论 第四代HIV检测试剂对于HIV病毒的灵敏性高, 操作简单方便, 与第三代检测试剂基本相同, 且能缩短“窗口期”, 降低窗口期感染的危险度, 值得采供血机构用来对血液进行常规的筛查工作。

关键词：HIV检测试剂,第四代,第三代,结果比较

参考文献

[1]赵勇.第3代和第4代HIV检测试剂在血液检测中的结果分析[J].中国医药指南, 2012, 10 (25) :390-391.

[2]庄华, 张建伟, 何亚琴, 等.第3、4代HIV检测试剂在血液筛查中的应用[J].临床输血与检验, 2012, 14 (4) :327-328.

[3]陈镇周, 肖明星, 童欣, 等.国产第3代与进口第4代HIV检测试剂的比较[J].中国生物制品学杂志, 2011, 24 (6) :705-706.

篇9：100例HIV抗体检测结果分析

【摘要】对HIV抗体检测结果进行分析，了解HIV感染情况。方法：选取2008～2012年我院接收的8664例进行HIV抗体检测的血清样本为研究对象，通过酶联免疫吸附法对血清样本进行初筛，对阳性样本采用免疫印迹法进行确认，最后对检测结果进行分析。结果：所有血清样本中，阳性100例，阳性率1.2%；其中，男性65例，占65%，女性35例，占35%，两者比较，性别间存在显著性差异（P<0.05）；性接触传播感染者72例（72%），血液传播感染者24例（24%），母婴传播感染者4例（4%）。结论：HIV感染者中，男性居多，性接触传播感染者居多，这与人们经济水平提高以及观念改变有关，必须加强宣传教育，采取积极有效的干预措施，预防HIV的感染和传播。

【关键词】HIV抗体；检测；性接触；分析

艾滋病是人体受到人类免疫缺陷病毒（HIV）的感染，导致机体产生免疫缺陷，从而引发一系列机会性感染或肿瘤的发生，最终导致死亡的重大传染病[1]。自1985年，我国发现第一例艾滋病患者以来，艾滋病感染者在我国不断增多，经评估，截止到2011年底，我国存活的艾滋病患者及感染者共78万人[2]，且大量的感染者并不知情，者就为艾滋病的传播和发展代来诸多隐患。本研究通过对我院检测出的100例HIV阳性患者的检测结果进行分析，研究HIV感染的主要传播途径及人群，进行积极有效的预防，从而降低HIV阳性患者的数量及HIV的传播与发展，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2008～2012年我院接收的8664例进行HIV抗体检测的血清样本为研究对象，其中，男性4432例，女性4232例；自愿檢测624例，吸毒人员892例，献血人员560例，从业人员5468例，娱乐场所327例，住院患者793例。

1.2 方法

执行《全国艾滋病检测技术规范》（2009版），使用HIV-1/2混合型试剂对血清样本进行检测，采用酶联免疫吸附法进行初筛，阳性样本再采用免疫印迹法进行确认。

阳性判定标准：

阴性：无HIV抗体特异带出现；

阳性：同时满足：①符合试剂盒的阳性判定标准；②至少1条p 24带和env带同时出现或至少有2条env带（即gp 160/gp 120和gp 41）出现；

如果血清样本不是阴性反应，但又不符合阳性判断标准，则说明HIV抗体不确定（±）[3]。

1.3 统计学分析

利用数学软件对所得数据进行分析，计量资料采用t检验，计数资料采用卡方检验，P<0.05表示存在显著性差异。

2 结果

2.1 HIV阳性检测结果

3 讨论

WHO报告显示，2010年全世界共3 4 0 0 万名艾滋病患者或H IV 携带者，2010年死亡180 万人，新感染2 7 0 万，平均每天新感染超过7 000人。艾滋病在世界各地均有流行， 但9 7% 以上集中在中、低收人国家。截止到2 011年底， 我国艾滋病患者或HIV感染者超过78万人，全年死亡2 名万人，新感染4.8万人。全国所有省、自治区、直辖市均有发现，且感染者已开始由吸毒、嫖娼等高危人群向一般人群扩散[4]。

目前，对于H IV 抗体的检测，初筛实验通常采用酶联免疫吸附法， 这种方法操作简单、方便，实验结果直观，灵敏度高，特异性强，在临床上被广为应用。对于初筛结果为阳性的标本，往往采用免疫印迹法（WB）进行进一步确认。

目前，我国艾滋病病人和感染者中，经性接触感染占46.5%，性接触传播成为HIV 的主要传播途径，所占比例持续增高。不法人员往往选择在娱乐服务场所进行商业性交易，而通常是娱乐场所的服务小姐提供性服务，因此，各大洗浴娱乐场所的从业员因为极有可能从事商业性性交易而成为艾滋病高危人群。

而由于传统观念的影响，使得人们对艾滋病知识了解不全面而产生一定的社会歧视，使艾滋病患者或携带者容易产生自卑、恐惧的心理和绝望的情绪，造成检测结果的不确定性，也使得被检者对检测产生畏惧，不愿积极配合。另外，由于经济和交通等原因，也造成患者不能及时进行检测，从而隐匿了疾病[5]。因此，应当加大宣传力度，消除社会歧视，积极解决患者的经济等疑难问题，有效预防和治疗艾滋病。

本研究中，所有血清样本中，阳性100例，阳性率1.2%；其中，男性65例，占65%，女性35例，占35%，两者比较，性别间存在显著性差异（P<0.05）；性接触传播感染者72例（72%），血液传播感染者24例（24%），母婴传播感染者4例（4%）。

综上所述，HIV感染者中，男性居多，性接触传播感染者居多，这与人们经济水平提高以及观念改变有关，必须加强宣传教育，自律，自重，洁身自好，采取积极有效的干预措施，预防HIV的感染和传播。

参考文献

[1]邓祥军，杨斌. 3599份HIV 抗体血清检测结果的分析[J].中国医药指南，2013，11（15），271- 272.

[2]钟瑞美，陈子慧，文美贞，蔡慧霞等. 江门市2006～2009 年不同人群HIV 检测结果分析[J]. 中国热带医学，2013，13（5）：588-591.

[3]龙春平，吴周建，张昌志芝.2007-2011年湘西州艾滋病确证实验组HIV阳性检测结果分析[J].中国艾滋病性病，2013，19（7）：492-496.

[4]中国卫生部.我国目前艾滋病状况[R].2012.

篇10：HIV初筛实验室试剂管理

1、使用试剂的实验室人员必须具备临床检验资格，非实验室人员不得擅自使用。

2、使用试剂必须如实填写试剂与校准品出入库登记表，以备清点检查库存情况，同时在包装盒上写明启用日期。

3、从事初筛实验室的人员要掌握实验操作基本知识，认真阅读试剂使用说明书的相关要求，服从实验室管理人员的安排和指导。

4、使用试剂过程中，必须严格按照实验操作规程操作，严格执行《试剂管理制度》、《实验室生物安全管理规范》。

5、实验结束后，应对试剂的名称、使用量与剩余量等进行核对，确认无误后放入指定冰箱或指定位置储存。

6、工作完成后，检查试验室污染情况，造成试剂污染的应立即进行清洁处理，并作相应的记录。

篇11：HIV筛查实验室生物安全守则

1、在工作区内禁止饮食，吸烟和存放食物及使用化妆品。实验室里应保持整洁，不存放与工作无关的杂物。

2、工作台每天至少用消毒剂清洁一次，在溢渗传染物后要立即消毒、清洗。

３、进入实验室必须穿工作服，戴口罩、帽子。４、在各种操作进程中均应尽量避免或减少气溶胶产生。５、实验工作区禁止无关人员出入，尤其要严禁儿童进入。６、工作人员在处理传染性物质或动物之后，以及在离开实验室时要洗手。

７、凡发生溢漏事故或接触传染性物质后，均应立即报告实验室监督员或实验室主任，并做好书面记录及采取相应措施。８、实验务必在生物安全柜里操作。

1０、工作人员在进入实验室工作区前，应在专用的更衣室（或缓冲间）穿着背开式工作服或其它防护服。工作完毕后必须脱下工作服，不得穿工作服离开实验室。可再次使用的工作服必须先消毒后清洗。

11、工作时必须戴手套（两副为宜）。

12、在实验室中必须配备有效的消毒剂、眼部清洗剂或生理盐水，且易于取用。可配备应急药品。必须符合艾滋病实验室的通用生物安全要求。１３、严格执行分区制度

１４、按照要求严格进行实验室分区。

１５、各区域只用于特定的操作，不得从事其它工作。

１６、仪器和材料的专用制度。仪器、设备、材料、设施均应按工作区域进行标识，不得交叉混用。

１７、严格遵守废弃物处理制度、所有废弃物应按照HIV污染物品处理。

１９、由专人按特定程序和方法进行清洁和消毒。２０、熟悉各种防火器材的使用

２１、电气设备正确操作、离开实验室应检查细心检查水电暖气门窗防止事故发生。

威远县疾控中心ＨＩＶ筛查实验室

篇12：孕产妇孕期HIV初筛检测的意义

安亚丽

澄江县妇幼保健院

云南澄江652500 摘要：目的 为降低艾滋病母婴传播，提高儿童健康水平。方法：对459例孕产妇进行HIV抗体初筛检测。结果： 检出抗HIV待复查者5例。DIC确认1例。结论：孕产妇孕期HIV抗体初筛检测可为其早预防、早治疗提供依据，改善孕产妇孕期生活质量，提高儿童健康水平。

关键词：孕产妇；艾滋病；母婴传播；HIV抗体初筛

艾滋病全称获得性免疫缺陷综合征（AIDS），是一种由逆转录病毒引起的人类免疫防御系统方面的疫病。婴儿和儿童感染艾滋病约有90%是通过母婴传播而获得的。艾滋病母婴传播是指感染了艾滋病病毒的孕妇把艾滋病病毒传给自己的婴儿，是艾滋病病毒传播的三种途径之一。它可以发生在妊娠（主要是孕晚期）、分娩或哺乳过程中、胎儿或婴儿可通过胎盘、母产道、母乳喂养途径感染艾滋病病毒。在没有预防措施的情况下，婴儿从感染的母亲那儿获得这种病毒的风险，在发达国家为15%到25%，发展中国家则为25%至35%，这种差别主要是因为喂养习惯；与工业化国家相比，发展中国家母孕乳喂养更为普遍，时间通常更大，传播的风险也更大。艾滋病的流行对儿童的健康影响很严重，艾滋病的流行已经吞噬了将近300万儿童的生命，现今还有100万儿童携带艾滋病病毒，世界范围内，1998年新感染艾滋病病毒的人中1/10是儿童，艾滋病可能使儿童生存方面取得的进步出现逆转，艾滋病已使流行最严重国家的婴儿死亡率成倍增加，中国累计已有9000例艾滋病母婴传播发生。据世界卫生组织估计，世界上每天大约有80万儿童受到母婴传播的威胁，至今已有50万儿童因艾滋病死亡，艾滋病病毒感染使全球新生儿死亡率增加了75%。目前，我国已全面启动预防HIV母婴传播工作，通过广泛开展预防HIV母婴传播的健康教育，提高人群预防艾滋病母婴传播意识，为孕产妇提供预防艾滋病母婴传播服务，支持感染艾滋病病毒的妇女对自己的生殖健康做出知情选择，减少母婴传播，最大限度地防止所生婴儿感染HIV，提高儿童生存率，所以，预防艾滋病母婴传播刻不容缓。

材料和方法

一、受检者

我院（澄江县妇幼保健院）2007年1月——2007年3月孕产妇共459例，取静脉血，室温下自然放置1—2h，待血液凝固和血块收缩，后再用3000rpm离心15分钟，吸出血清备用，置2—8℃冰箱保存1—7天内进行检测。

二、检验试剂

1、上海科华生物工程股份有限公司提供以人类免疫缺陷病毒HIV（1/2）抗体诊试剂盒（胶体金法）

2、美国雅培有限公司提供的人类免疫缺陷病毒HIV1+2型抗体诊断试剂（胶体硒法）

3、检测

三、检验方法

首先用ELISA双抗原夹心法进行HIV抗体筛查实验，若出现阳性结果，则再用HIV1+2型抗体诊断试剂盒（胶体硒法）和HIV（1/2）抗体诊断试剂（胶体金法）两种试剂同时进行抗体筛查实验，若出现一阴一阳或两阳送CDC进行确认。

结

果 珠海丽珠试剂有限公司提供酸免疫试剂（ELISA、双抗体原夹心法）本实验测定459例孕期孕产妇HIV抗体待复查数（待复查率）为5（1.15%）送CDC确认的阳性数（阳性率）为1（0.12%）。

讨

论

在459例孕产妇中检出5例初筛阳性，血样送省疾控中心HIV确认实验室确认为1例，阳性率为0.21%，这例HIV感染者为孕39周孕妇，无艾滋病症状或体征，否认有输血史、手术史、吸毒史和卖淫史，但自认卫生意识差和防范意识差，曾被野外带血注射器划破手指。像这类患者容易被忽略不做抗HIV抗体检测，潜在的传播气焰很大，应该引起所有医务人员的高度重视，同时也提醒广大患者加强自身保护。HIV筛查结果是阴性的，要反复解释“窗口期”的意义，若在“窗口期”的建议三个月后再做检测。

此初筛实验其检出HIV待复查5例，确认1例，确认占待复查的20%，提示此初筛实验为避免漏检HIV抗体阳性提供了重要的依据，有利于预防孕产期艾滋病母婴传播。

此初筛试验共检出HIV待复查5例，确认1例，确认占待复查的20%。提示此初筛试验为避免漏检HIV抗体真阳性提供了重要的依据。初筛试验的开展也为HIV确认试验（免疫蛋白印迹法）省去了许多不必要的麻烦。确认试验一个是成本高，方法复杂，在HIV确认实验室才能开展，不能普及。而初筛试验因方法简便，具有快速，敏感性高等优点，适合于取得HIV抗体初筛实验室资格的基层医院，县级医院开展。HIV抗体初筛试验的开展在母婴儿阻断工作方面起了很大作用，它为医生对孕妇孕期指导提供了重要的依据，提高了母婴医疗保健水平，为孕产妇提供预防艾滋病母婴传播服务，支持艾滋病病毒阳性妇女对自己的生殖健康做出知情选择，为儿童及其父母提供关怀，支持和治疗，预防育龄妇女感染艾滋病，注意孕期保健，规范HIV感染孕产妇产前、产时、产后处理 方法和新生儿喂养和随防措施，孕期、产时和新生儿产后分别应用抗艾滋病病毒药物阻断，采用有效抗逆转录病毒治疗，可明显降低艾滋病病毒传播率，从而预防控制，最大程度地减少艾滋病病毒母婴垂直传播，降低艾滋病对妇女儿童的影响，提高妇女儿童生活质量及生存率。

初筛检测的目的是检出所有的阳性者，因此对筛查试剂的质量要求

敏感 性必须好，特异性可能相对降低，在得到一个筛查试验阳性的结果时，要想到它极为可能是真正的阳性，但也有假阳性的可能，同时还要检查实验过程中有无技术性错误和误差。但假阳性反应的原因可能很多，如一些会有针对HLA抗原的抗体和患者自身免疫性疾病（如系统性红斑狼疮、风湿病）、寄生虫病（如症疾等）、其它病毒感染（如病毒性肝炎等），患者的血清标本常容易出现假阳性，越是在传染病流行率高，病种复杂的地区，发生假阳性反应的越多，这可能是由于一些传染病病原体与HIV某些抗原体决定簇有交叉反应，因此对筛查阳性结果的解释必须慎重，但初筛试剂敏感性高，可避免漏掉真正的弱阳性。

所以，初筛试验的检测因特异性、敏感性高、方法相对简便，成熟，HIV抗体除感染早期短暂的窗口期外，整个生命期间长期稳定地存在并可被检测到。国内外的经验和研究证明，实施孕期自愿咨询与HIV抗体初筛检测，可有效地预防艾滋病母婴传播，可效地降低艾滋病母婴传播的发生率，提高儿童的生存质量。

参考文献

[1]丁国芳，方利文，王克让等《预防艾滋病母婴传播培训教程》2005，3 [2] 王临虹《预防艾滋病母婴传播》