关键词：
定量测定（精选八篇）
定量测定 篇1
一、分光光度法
(一) 乙酰丙酮分光光度法
乙酰丙酮分光光度法原理是甲醛在过量铵盐存在的情况下, 与乙酰丙酮反应生成黄色的2, 5-二乙基-1, 4-二氢卢剔啶, 在该化合物的特征吸收波长下用分光光度计测定其吸光度值, 然后根据标准曲线计算样品中的甲醛含量[1]。此方法受金属离子干扰小, 显色液常温下可稳定10小时以上, 检出限为0.2mg/kg。
(二) 变色酸分光光度法
原理是甲醛在浓酸存在的条件下与变色酸 (1, 8-二羟基萘-3, 6-二磺酸) 生成紫色化合物, 在该物质的最大吸收波长 (580nm) 处, 用分光光度计测量定量[2], 检出限为0.1mg/L[3]。刘劭钢等用0.1%变色酸和86%浓硫酸作吸收液, 检测限达到20μg/L[4]。柏林洋等使用浓磷酸和过氧化氢混合体系替代原来具有危险腐蚀性的浓硫酸, 与甲醛生成紫红色化合物, 在特征波长570nm处作光度测定, 使原方法更为简便安全[5]。
(三) 乙酸乙酯分光光度法
乙酸乙酯法测定甲醛的原理是甲醛在弱酸环境下与乙酸乙酯及氨反应, 生成的化合物在375nm处有最大吸收, 甲醛浓度与其吸光度符合比尔定律[4]。
(四) 荧光分光光度法
荧光法的原理是利用乙酰丙酮、铵盐和醛基反应生成黄色的荧光产物, 然后用荧光光谱仪进行测定。
二、色谱法
现阶段, 用色谱法检测食品中甲醛的方法主要有气相色谱法和高效液相色谱法。由于甲醛分子太小, 若直接进入GC分析, 出峰太快且在FID检测器上无反应。液相色谱法也因甲醛极性太大而与溶剂峰同时流出, 且在紫外光处无吸收而无法检测。因此, 食品中的甲醛测定一般要先将其衍生, 再进行测定。
(一) 衍生气相色谱法
衍生气相色谱法常用的衍生剂是2, 4-二硝基苯肼。含有甲醛的样品与DNPH的硫酸溶液反应生成2, 4-二硝基苯腙, 用二硫化碳洗脱, 经2000mm×3mm OV色谱柱分离, 用氢焰离子化检测器测定, 保留时间定性, 峰高定量。王佰华等[6]用此种方法测定水产品中的游离甲醛, 结果显示, 甲醛的检出限为0.05mg/kg, 在0.1~20.0mg/L范围内, 甲醛线性关系良好。在0.5~5.0mg/kg浓度水平下, 分别请3个不同实验室用此种方法进行甲醛测定, 3个实验室间的RSD为2.7~4.4%, 说明此方法的准确度良好。徐天源等[7]将此种方法用于水产品中甲醛的测定, 检出限为0.1μg/ml, 甲醛浓度在0.2~10μg/ml范围内线性良好。在干扰试验中, 当甲醛浓度为4.0μg/ml, 相对误差控制在±5%时, 钾离子、500倍的钠离子、铵根离子、400倍的乙醇、锌离子、钙离子、300倍的镁离子、铅离子、200倍的乙醚、铜离子、10倍的钡离子均不产生干扰, 表明该方法具有较好的选择性。由此可见, 使用衍生气相色谱法测定甲醛具有准确度高和选择性好的优点。
(二) 高效液相色谱法
高效液相色谱法是近年来广泛应用的甲醛检测方法之一, 目前已被美国环保局 (EPA) 和世界卫生组织 (WHO) 等采纳为标准方法[8~9]。该方法的主要原理是在酸性条件下, 甲醛与衍生剂2, 4-二硝基苯肼反应生成2, 4-二硝基苯腙, 经萃取剂二氯甲烷提取、浓缩、干燥, 再经甲醇溶解, ODS-C18柱分离, 紫外检测器在65nm处检测, 以峰的保留时间定性, 峰面积定量。国内有很多学者已将此种方法应用于食品中甲醛的检测实验中。彭锦峰等[10]用此方法测定六种食用香菇中的甲醛含量, 以乙腈和水 (V/V=70/30) 为流动相, 352nm为检测波长, 结果是六个样品中有五种均检测到甲醛, 甲醛质量分数为34~292mg/kg。甲醛的检测限为8.2μg/L, 线性范围在10.7~856μg/L, 加标回收率为72%~93%。殷茂荣等[11]在对水发海参的测定实验中, 用甲醇和水 (V/V=65/35) 作为流动相, 365nm为检测波长进行测定, 方法检出限为0.05mg/L, 并对样品衍生后的稳定性进行实验, 结果表明, 样品衍生后室温放置72小时后分析, 结果无明显改变。用高效液相色谱法, 彭科怀等[12]对啤酒中的微量甲醛进行了检测, 实验表明, 该法分离效果良好, 定量准确, 平均回收率为94%, 变异系数2.96%, 标准工作曲线在0.0125~0.1μg范围内线性关系良好, 实测样品甲醛含量在0.04~0.043ppm范围内结果较好。
用色谱法测定食品中的甲醛, 具有精密度好, 回收率高, 线性关系良好, 性能稳定, 结果准确, 抗干扰能力强等优点, 其不足之处是检测前需将样品衍生化, 检测较为费时, 对仪器设备要求高, 不适于现场快速检测。
三、滴定法
定量测定 篇2
光合细菌荧光定量PCR计数方法与其他测定方法的比较
光合细菌具有复杂多样的`代谢功能、丰富的营养及生理活性物质,而使其在农业应用中显示了越来越巨大的潜力,前景十分广阔.目前,以光合细菌为菌种生产的微生物肥料企业已有几十家,产品在水稻、蔬菜、果树和烟草等作物上都取得了较好效果.
作 者：关大伟 李俊 沈德龙 曹凤明 杨小红 作者单位：农业部微生物肥料与食用菌菌种质量监督检验测试中心,北京,100081刊 名：农业质量标准英文刊名：AGRICULTURAL QUALITY & STANDARDS年，卷(期)：2009“”(1)分类号：Q94关键词：
定量测定 篇3
1资料与方法
1.1纳入与排除标准
1.1.1研究类型。关于诊断准确性的诊断性试验;可提取四格表数据, 文献发表语种限于中、英文。
1.1.2研究对象。门诊或住院患者的血清标本。
1.1.3诊断试验方法。可定量测定乙肝抗体的诊断方法, 包括电化学发光免疫技术、微粒子酶免分析法、时间分辨荧光免疫分析法、化学发光微粒子免疫分析法及化学发光法等。对照采用ELISA或TRFIA。
1.1.4测量指标。合并敏感度 (SEN) 、合并特异度 (SPE) 、 合并阳性似然比 (+LR) 、合并阴性似然比 (-LR) 及SROC曲线下面积。
1.1.5排除标准。 (1) 研究对象为动物; (2) 评价对象不含抗乙型肝炎表面抗原的抗体 (Anti-HBs) ; (3) 样本量小于30或仅采用描述性统计; (4) 无Anti-HBs诊断数据; (5) 定量比较数据, 如均数、标准差、相关系数等。
1.2检索策略
1.2.1数据库。计算机检索MEDLINE (1946-2013年4月) 、 EMBASE (1974-2013年4月) 、EBM REVIEWS (1991-2013年4月) 、中国生物医学文献数据库 (CBM, 1982-2013年5月) 、中文科技期刊全文数据库 (CNKI, 1994-2013年4月) 、万方数据库 (1998-2013年4月) 等。
1.2.2检索策略。以中国生物医学文献数据库为例, 检索策略如下: (时间分辨荧光免疫分析OR微粒子酶免疫OR胶体金免疫层析法OR电化学发光法OR化学发光测定法/AND肝炎抗体, 乙型/AND定量) ; (乙肝表面抗体AND定量) OR (乙肝表面抗体AND比较) ;" 肝炎抗体, 乙型"AND (准确性OR灵敏度OR特异度) 。以OVID数据库为例, 检索策略如下: (Electrochemistry/OR Colloid Gold Chromatography.mp. OR Immunoenzyme Techniques/OR Fluoroimmunoassay/) AND Hepatitis B Antibodies/AND ("Sensitivity and Specificity"/ OR false negative reactions/ OR False Positive Reactions/) ;Hepatitis B Antibodies.sh. and quantitative.ab. ; (comparison or evaluation) .ab.and methods. ab. and Hepatitis B Antibodies.sh.。
1.3文献筛选和资料提取
由两位评价按照设定的纳入、排除标准筛选文献并对最终纳入文献进行数据提取, 如有不一致, 通过讨论解决或由第三位研究者决定。提取资料包括:作者、年代、 国家、标本来源、样本数量、诊断方法、截断值、仪器设备名称、诊断数据等。
1.4质量评价
根据QUADAS声明 (quality assessment of diagnostic accuracy studies) , 制定本研究纳入文献的质量评价标准如下: (1) 纳入的疾病谱是否能够代表临床实践中的检查人群; (2) 研究对象选择标准是否明确; (3) 参考试验和待评价试验检测的间隔时间是否足够短, 以避免出现检测值的变化; (4) 是否所有的样本均接受了参考试验; (5) 参考标准试验是否独立于待评价试验; (6) 待评价试验的结果判读是否是在不知晓参考试验结果的情况下进行的; (7) 参考标准试验的结果判读是否是在不知晓待评价试验结果的情况下进行的; (8) 是否报告了难以解释的中间试验结果; (9) 是否对退出病例进行解释。对以上每条标准以“是”、“否”或“不清楚”评价。
1.5资料分析
统计分析采用Meta-Di Sc和Stata11.0软件。首先, 检验研究间是否存在异质性, 采用Spearman相关系数评价阈值效应和Chi-Square评价非阈值效应。其次, 分组比较不同方法间合并敏感度 (SEN) 、合并特异度 (SPE) 、合并阳性似然比 (+LR) 、合并阴性似然比 (-LR) 。拟合受试者工作特征曲线 (summary receiver operator characteristic curve, SROC) 。如SROC曲线是对称的, 采用Mantel- Haenszel固定效应模型, 否则采用Moses-Shapiro-Littenber模型。
2结果
2.1文献检索
共检索到相关文献791篇, 最终纳入28个试验［1-28］ (图1) , 包括5 243例患者, 样本最大的研究为536例, 最小为88例。其中100例以上的研究为24篇, 占纳入研究总数的86% (表1, 表2) 。
2.2纳入文献评价
纳入研究的整体质量不高。纳入的28项研究中包括34项比较数据。文献质量评价显示仅有2篇提及研究对象选择标准, 无文献提及诊断试验的间隔时间、盲法及受试者有无退出等 (表3) 。
2.3方法学准确性评价
2.3.1以ELISA法为参照标准, 11项诊断试验为TRFIA, 9项为ECISA, 3项研究为MEIA, 2项为CMIA。前三项试验Spearman相关系数和P值分别为 (0.2, 0.56) 、 (0.512, 0.13) 及 (-1, 0) , 提示TRFIA及MEIA诊断试验无阈值效应。SROC曲线均对称 (P>0.1) , 均未发现发表偏倚 (P=0.437, 0.321, 0.528) 。
(1) 时间分辨荧光免疫分析法 (TRFIA) 11项诊断试验的合并敏感度0.97[95%CI (0.96, 0.99) ], 合并特异度0.92[95%CI (0.90, 0.93) ], 合并阳性似然比11.43[95%CI (8.33, 15.69) ], 合并阴性似然比0.04[95%CI (0.02, 0.08) ] (表4) 。SROC曲线下面积及Q值分别为0.982 2及0.941 5[图2- (a) ]。
(2) 电化学发光免疫技术 (ECISA) 9项诊断试验的合并敏感度0.94[95%CI (0.92, 0.96) ], 合并特异度0.77 [95%CI (0.75, 0.80) ], 合并阳性似然比13.83[95%CI (1.33, 143.52) ], 合并阴性似然比0.11[95%CI (0.04, 0.3) ] (表4) 。SROC曲线下面积及Q值分别为0.971 5及0.922 3[图2- (b) ]。
(3) 微粒子酶免疫分析法 (MEIA) 3项诊断试验的合并敏感度0.90[95%CI (0.86, 0.99) ], 合并特异度0.94 [95%CI (0.89, 0.99) ], 合并阳性似然比17.99[95%CI (2.26, 142.97) ], 合并阴性似然比0.09[95%CI (0.01, 0.72) ] (表4) 。SROC曲线下面积及Q值分别为0.965 2及0.912 3[图2- (c) ]。
(4) 化学发光微粒子免疫分析法 (CMIA) 2项诊断试验的合并敏感度1.00[95%CI (0.98, 1.00) ], 合并特异度0.90[95%CI (0.85, 0.94) ], 合并阳性似然比9.99[95%CI (3.07, 32.47) ], 合并阴性似然比0.01[95%CI (0.00, 0.04) ] (表4) 。
*:研究包括多个结果数据
*:研究包括多个结果数据
*:各评价指标含义详见资料与方法部分
*:χ2=25.9, ν=10, P=0.004, 异质性 (I2) =61.4%;**:χ2=25.8, ν=10, P=0.004, 异质性 (I2) =61.3%;***:χ2=21.2, ν=10, P=0.02, 异质性 (I2) =53.0%;****:χ2=16.3, ν=10, P=0.09, 异质性 (I2) =38.5%;:χ2=108.4, ν=8, P=0.001, 异质性 (I2) =92.6%;:χ2=922.6, ν=8, P=0.001, 异质性 (I2) =99.1%;:χ2=1364.6, ν=8, P=0.001, 异质性 (I2) =99.4%;:χ2=75.1, ν=8, P=0.001, 异质性 (I2) =89.3%;:χ2=16.5, ν=2, P=0.001, 异质性 (I2) =87.9%;:χ2=14.9, ν=2, P=0.001, 异质性 (I2) =86.6%;:χ2=16.9, ν=2, P=0.001, 异质性 (I2) =88.2%;:χ2=21.2, ν=2, P=0.001, 异质性 (I2) =90.6%;:χ2=0.0, ν=1, P=1.00, 异质性 (I2) =0.0%;:χ2=8.3, ν=1, P=0.004, 异质性 (I2) =88.0%;:χ2=7.3, ν=1, P=0.007, 异质性 (I2) =86.3%;:χ2=0.03, ν=1, P=0.862, 异质性 (I2) =0.0%
2.3.2以TRFIA为参考标准, 3项诊断试验为ECLIA, 4项为MEIA。两项试验Spearman相关系数和P值分别为 (1, 0.0) 、 (0.4, 0.6) , ECLIA存在阈值效应, SROC曲线对称 (P>0.1) 。统计学检验未发现发表偏倚 (P=0.711, 0.293) 。
(1) 电化学发光免疫技术 (ECISA) 3项诊断试验的合并敏感度0.92[95%CI (0.84, 0.97) ], 合并特异度0.96 [95%CI (0.94, 0.97) ], 合并阳性似然比22.01[95%CI (14.27, 33.95) ], 合并阴性似然比0.09[95%CI (0.04, 0.19) ] (表5) 。SROC曲线下面积及Q值分别为0.989 0及0.956 1[图3- (a) ]。
(2) 微粒子酶免疫分析法 (MEIA) 4项诊断试验的合并敏感度0.91[95%CI (0.87, 0.94) ], 合并特异度0.99 [95%CI (0.97, 1.00) ], 合并阳性似然比57.43[95%CI (20.08, 164.23) ], 合并阴性似然比0.09[95%CI (0.05, 0.20) ] (表5) 。SROC曲线下面积及Q值分别为0.991 8及0.963 0[图3- (b) ]。
*:χ2=1.43, ν=2, P=0.49, 异质性 (I2) =0.0%;**:χ2=0.04, ν=2, P=0.981, 异质性 (I2) =0.0%;***:χ2=0.0, ν=2, P=1.00, 异质性 (I2) =0.0%;****:χ2=1.6, ν=2, P=0.449, 异质性 (I2) =0.0%;:χ2=10.4, ν=3, P=0.02, 异质性 (I2) =71.2%;:χ2=6.36, ν=3, P=0.09, 异质性 (I2) =52.8%;:χ2=4.43, ν=3, P=0.22, 异质性 (I2) =32.2%;:χ2=11.1, ν=3, P=0.01, 异质性 (I2) =73.0%
3讨论
本系统评价显示:以4种定量方法在检测乙肝表面抗体方面具有较高的灵敏度和特异度, 表面定量检测的漏诊率和误诊率较低。SROC曲线下面积都在0.9以上, 表明诊断价值较高。以ELISA法为参考试验, 不同方法的阳性似然比均较高, 最高为MEIA, 为17.99, 其次是ECISA和TRFIA ;表明在乙肝表面抗体阳性时诊断准确的可能性很大;各诊断试验的阴性似然比均较低, 最低为CMIA, 为0.01, 其次为TRFIA和MEIA ;提示当乙肝抗体阴性时被诊断为阴性的可能性较高。部分诊断试验的阳性似然比可信区间较宽, ECLSA及MEIA合并区间范围明显宽于TRFIA, 提示两项诊断试验阳性预测的精度不高。 以TRFIA为参考试验, MEIA阳性似然比估计可信区间明显较ECLSA大, 但SROC曲线下面积及Q值均较ECLSA高, 与以ELISA法为参考试验的结果不同, 可能与研究数量少, 变异较大引起。
研究显示多数诊断试验的各项指标存在较强的异质性, 主要为非阈值效益, 原因与各实验所采用的诊断设备、诊断试剂及阳性截断值不同的客观直接相关。另外, 由于各项试验的灵敏度和特异度均较高, 因此, 采取随机效应模型的方法进行合并和拟合SROC曲线, 可作为比较各方法准确性的参考和探索, 应进一步限定研究类型和具体指标。另外, 由于纳入的研究质量总体不高, 在诊断试剂及截断取值等上缺乏描述信息, 使得研究没有进行亚组分析, 以具体确认异质性来源。再次, 由于本次采用相同对照来间接比较各定量试验的准确性, 分析方法多采用随机效应模型, 多数研究数量较少, 没有开展不同方法间及研究数量纳入退出等敏感度分析验证, 也有待于进一步分析。
研究显示我国乙肝表面抗体定量诊断试验的研究设计相对较差。根据QUADAS声明发现各研究在选择病例、 检测时间间隔、盲法及退出病例解释等方面缺乏描述, 使得研究总体评价质量不高。另外, 除TRFIA诊断试验相对较多外, 其它方法相对较少, 且各定量方法间的直接比较效果研究更少。
本次研究的化学发光法在上海收费价格为26元, 定性的免疫学方法价格为12元, 在上海各级医院化学发光法应用的人次及费用均明显占优。鉴于其灵敏度、特异度等准确性指标较好, 在东部发达地区已被广泛应用。但对于西部贫困地区, 定性方法成本效果比可能相对较低, 较适宜推广应用。由于目前乙肝表面抗体诊断试验的经济学评价研究证据, 且各地的疾病谱不同, 在确定推广应用时应综合考虑, 制定适宜本地的主流方法学。
本研究的局限性包括:文献检索上对灰色文献的检索较少, 另外排除了动物实验、其他非中、英语文献等, 使得部分证据可能未被纳入, 通过追踪参考文献等途径尽可能降低选择偏倚。另一方面, 纳入国外研究少, 基本为国内文献, 在病例纳入标准、试验过程描述、盲法、病例报告等方面存在不足。另外部分实验研究数量少及研究存在明显的异质性, 这可能会影响到Meta分析结论的可靠性。由于直接开展定量比较的文献较少, 本次分析采用了间接比较的方法, 选用了两种参照系相互验证, 但结论尚需要更多高质量的研究支撑。
X射线荧光光谱法定量测定湿法磷酸 篇4
关键词：X射线荧光光谱,湿法磷酸,液体样品
湿法磷酸生产中P2O5、Fe2O3、Al2O3、SO3含量的测定一般采用传统的化学分析方法, 虽然化学分析方法分析准确度高, 但分析方法步骤多, 分析流程长, 很难满足生产控制需求。X荧光分析仪测定湿法磷酸虽有报道[1], 但要使用到铂金坩埚。本文介绍了将湿法磷酸样品经稀盐酸分解过滤后用液体样品盒采用X射线荧光光谱仪测定其含量, 解决了化学分析速度慢的问题, 测量一个湿法磷酸中的P2O5、Fe2O3、Al2O3、SO3含量仅需50 min左右, 比采用化学分析法要缩短3 h, 结果令人满意。
1 实验部分
1. 1 仪器和试剂
德国布鲁克S8 TIGER型X射线荧光光谱仪, 铑靶端窗X射线管; 专用液体样品杯; 6 μm麦拉膜。
1 + 1 盐酸; 1 + 1 硝酸; 1 + 1 氨水; 75 g / L EDTA溶液。
1. 2 工作条件
各元素的工作条件见表1。
1. 3 实验方法
1. 3. 1 标准样品的制备
选择合适的实际生产中的10 个湿法磷酸样品, P2O5、Fe2O3、Al2O3、SO3含量采用化学分析法测定, 作为标准样品。
称取1.5 g (准确至0.000 2 g) 样品于100 mL烧杯中, 加入1+1盐酸5 mL, 1+1硝酸1mL, 在电热板上加热微沸1~2 min, 取下加入20 mL 75g/L EDTA溶液, 加热至沸。用1+1氨水调节pH至6.0, 冷却至室温, 用水稀释至刻度, 混匀, 干过滤, 弃去最初10 mL滤液, 吸取7.0 mL滤液于液体样品杯中。以上作为标准样品溶液。
1. 3. 2 工作曲线的制作
在X射线荧光光谱仪上将要测定元素的测量条件设置好, 按顺序把制好的标准样品溶液在X射线荧光光谱仪上测量其各组分元素的荧光强度, 以标准样品的各组分的化学分析值 ( 质量分数) , 分别以P2O5、Fe2O3、Al2O3、SO3计为横坐标, 以测得的各组分元素的荧光强度为纵坐标, 分别制作各组分的工作曲线。各组分工作曲线的系数见表2。
由表2 数据可看出工作曲线很好, 可以满足生产的需要。
1. 3. 3 分析样品的制备
同标准样品的制备。
1. 4 工作曲线的校正和数据处理
1. 4. 1 工作曲线的数学模式
试样在X荧光分析仪测得的各元素的荧光强度 ( 以kcp) 计, 代入 ( 1) 式进行计算含量。
式中: Ci为i组分的荧光分析值;
ai, bi为i组分的曲线常数;
I为i组分的荧光强度;
αij为j组分对i组分的影响系数;
Cj为j组分含量。
1. 4. 2 漂移校正
为克服仪器的漂移, 在实测样品时需进行标准化, 即在结果计算中不采用绝对强度而采用标准化校正后的强度计算分析结果。本法采用随机带来的标准样品来进行校正。
2 结果与讨论
2. 1 样品溶液制备
湿法磷酸中的主要成分是P2O5以及少量的Fe2O3、Al2O3、SO3、MgO和固含量, 其样品一般采用稀硝酸或稀盐酸或高氯酸进行分解[2，3], 通过试验, 采用1 + 1 盐酸和1 + 1 硝酸来分解样品能够满足测定需求。
2. 2 络合剂选择试验
荧光分析仪测定液体样品, 要冒泄漏的危险, 万一发生即有可能损坏仪器的X射线管, 样品的酸性越强, 危险性越大, 因此测定过程需在中性环境下进行。为避免在中性环境下金属离子沉淀, 必须加入一种络合剂使金属离子保持在溶液中。分别采用了柠檬酸、三乙醇胺、酒石酸、EDTA等试剂进行比较, 发现EDTA具有良好的络合作用, 即使在p H = 8 时也未发生沉淀。
在试样溶液中加入不同量75 g /L的EDTA后调节p H为6 ~ 7, 静置20 min, 发现当加入量低于20 mL时有沉淀出现, 当加入量大于22 mL有结晶现象。其最佳加入量为20 mL。
2. 3 方法的精密度
分别对1 个浓磷酸和1 个稀磷酸样品各测定10 次, 结果见表3。
w / %
2. 4 方法的准确度
分别测量10 个已知化学分析值的浓磷酸样品和8 个已知化学分析值的稀磷酸样品, 结果见表4。
w / %
3 结论
1) 本方法采用荧光仪直接测定湿法磷酸液体样品, 具有简单快速的特点, 方法的精密度和准确度基本能满足要求, 在实际生产中能大大降低劳动强度和缩短分析时间, 对指导湿法磷酸生产有积极的意义。
2) 不存在基体效应, 并且测定线性范围宽, 浓磷酸和稀磷酸都能同时测定, 方法具有一定的推广价值。
3) 在分析中应注意, 制作液体样品杯时, 要求麦拉膜平整无刮痕, 如果不平整以及有刮痕要重新制作, 以防液体泄漏。
参考文献
[1]李张胜.X射线荧光光谱法定量测定湿法磷酸中主次成分[J].云南化工, 2006, 33 (5) :71.
[2]HG/T 3826-2006, 肥料级商品磷酸[S].
定量测定 篇5
1 检测系统的标准和规范化, 有利于检测结果的互认
为方便资源共享, 有利于患者, 卫生部专门发文要求推广检测结果互认。乙肝病毒血清标志物定性测定由于检测系统局限, 测定结果可比性差, 结果互认欠科学。而定量检测系统仪器智能化程度高, 重复性好, 标准品可溯源至国际标准或行业标准, 报告结果单位采用WHO推荐或国际常用单位, 如HBsAg和HBsAb采用m IU/mL, HBeAg、HBeAb和HBcAb采用PEIU/ml (Paul-Ehrlich Institute Unite/ml) , 可比性好, 适合检测结果互认。
2 提高了灵敏度, 更适合临床应用
酶联免疫吸附试验 (ELISA) 测定灵敏度为0.25～0.5 ng/mL, 金免疫层析试验 (GICA) 测定HBs Ag灵敏度为1～5 ng/mL。而荧光免疫分析法 (TRFIA) 和化学发光免疫测定法 (CLIA) 测定HBsAg灵敏度为0.005～0.1 ng/mL, 对于其他乙肝病毒血清标志物测定也有很高的灵敏度, 因此更适合临床应用[4]。在HBV感染早期、或HBsAg-HBsAb血清学转换期、S基因变异、丙肝病毒和丁肝病毒重叠感染情况下, 都会影响HBsAg表达, 致HBsAg浓度低于ELISA和金免疫层析试验检测下限, 造成漏检。而定量测定所采用方法学的灵敏度高于传统方法, 可检出低浓度HBsAg, 及早判断HBV感染。
3 评价乙肝疫苗接种效果
全程 (3针) 免疫结束后1个月检测保护性HBsAb的浓度, 据此值将乙肝疫苗接种者分为四种情况: (1) 无应答者:抗体浓度小于1 m IU/m L, 无抗体产生或非特异性结合反应, 约占接种者的5%, 应继续加大剂量或更换疫苗厂家全程 (3针) 免疫注射。 (2) 低应答者:抗体浓度为1～10 m IU/m L, 保护作用比较弱, 约占接种者的10%, 须加强2针疫苗注射。 (3) 中应答者:抗体浓度为10～100 m IU/m L, 已有一定的保护力, 约占接种者65%, 须加强1针疫苗注射。 (4) 高应答者:抗体浓度大于100 m IU/mL, 免疫效果最好, 约占接种者20%, 不需要加强注射。
传统HBsAb测定多采用定性测定, 结果报告阴阳性, 无法溯源至国际或行业标准, 也就无法采用通行标准判断免疫力强弱。对于婴幼儿预防接种、防止高危人群职业暴露、免疫力评价以及预防策略的选择, 定量测定都具有重要意义。
4 有助于抗病毒治疗选择、疗效和预后效果评价
(1) HBV感染过程中, 因为S基因变异、不同亚型感染、干扰素诱导等因素影响, 可造成HBsAg和HBsAb共存。而HBsAg和HBsAb浓度的消长, 可反映病情转归和疗效。高浓度HBsAg经抗病毒治疗后或自然转变成阴性或持续低浓度;自然感染或抗病毒治疗后, HBsAb保持较高浓度, 说明治疗有效, 预后良好。在急性乙肝恢复期中约有3%的个例可同时检出低水平HBsAg和HBsAb, 然后HBsAg消失而HBsAb水平渐增高。 (2) HBeAg是核心抗原的可溶性成分, 与Dane颗粒、HBsAg、HBVDNA和前S1抗原呈正相关, HBeAg出现, 提示HBV感染和复制。HBeAb出现, 通常表示复制减少, 传染性变弱, 病情好转。HBeAg和HBeAb可在血清中共存, 其浓度消长, 可以反映病情变化和治疗效果。高浓度的HBeAb一方面提示病情的好转, 而在表达前C信号肽基因突变时, 虽不能表达HBeAg, 也可能出现肝硬化、肝坏死、肝癌, 应进一步结合肝功生化指标如丙氨酸转氨酶 (ALT) 、天冬氨酸转氨酶 (AST) 、血清胆红素 (BIL) 等进行综合判定。 (3) HBcAb是HBV感染“窗口期”惟一能检出的HBV血清标志物, 也是乙肝恢复期甚至好转期长期存在的标志物, 其浓度的高低可以反映病毒感染的状态及疾病的转归。 (4) 急性乙型肝炎一般会在6个内病情缓解, 甚至自愈。病情超过6个月仍未缓解者, 多转为慢性化, 但通过五项联合定量分析, 再结合肝功能指标和HBV-DNA的水平, 即若表现为HBeAg下降、HBeAb出现或渐升, HBsAg和HBV-DNA血清水平降低, 这是病变恢复的时相, 可望在1年～2年病毒被清除而疾病痊愈;若HBeAg和HBV-DNA血清水平持续很高的患者, 预期可能保留慢性无症状携带 (AsC) 或慢性乙型肝炎。
总之, 乙肝病毒血清标志物定量测定的广泛应用, 越发彰显其在乙型肝炎的预防、诊断、治疗和预后评估方面的重要性, 势必成为临床检测的方向。
参考文献
[1]吴殿磊, 徐光华, 郭贤利, 等.乙型肝炎病毒血清标志物免疫学检测方法发展现状[J].延安大学学报 (医学科学版) , 2006, 4 (1) :5-6.
[2]贾继东, 李海.HBsAg和HBVe抗原定量检测的临床意义[J].中华检验医学杂志, 2009, 32 (9) :965-966.
[3]魏来.HBV标志物定量和标准化是临床检测的方向[J].中华检验医学杂志, 2009, 32 (9) :967-970.
壬基酚聚氧乙烯醚的裂解及定量测定 篇6
在过去的几十年内,NPnEO作为皮革化工材料合成过程中最常用的组份,已经广泛存在于皮革/毛皮生产的每个阶段,浸水助剂、浸灰助剂、脱脂剂、加脂剂及涂饰剂中均含有不同量的NPnEO。尤其是NPnEO作为加脂剂的组份之一,可显著提高加脂剂对酸、碱、盐等介质的稳定性,并促进油脂向革内的渗透,是加脂剂生产及复配过程中必不可少的材料。然而,进入到皮革内部的NPnEO,虽然部分可通过水洗去除,但其仍能与胶原纤维的极性基团结合,残留在皮革中,成为皮革、毛皮及其制品中NPnEO的主要来源。
鉴于日趋严格的欧盟指令,积极应对欧盟NPnEO技术贸易壁垒,加强对皮革中NPnEO的监测是非常必要的。然而,至今国内外各个行业仍无统一的NPnEO测试标准,原因在于NPnEO中不同环氧乙烷EO单元数(n=2~20)再加之NPs自身的十几种同分异构体,使其组份太复杂,在技术上难以获得标准品,不能准确定量。尽管已有有大量的文献集中于NPnEO的测试技术研究[3,4],但这些研究仅局限于实验室内部的应用,难以形成统一的方法。
NPs的技术层面上的人工合成,实现了NPs的准确定量,这也促使了NPs的GC-MS测试方法标准的形成。那么实验中若能将NPnEO全部转化为NPs进行测试,则有望实现NPnEO的定量,并形成统一的测试方法标准。依据这一思想,实验中采用对醚键具有定向分解作用的氢碘酸[5]对NPnEO进行裂解,找出最佳的裂解条件,为NPnEO的定量测定奠定基础。
1 实验部分
1.1 仪器与材料
气相色谱-质谱仪(GC 7890A/MSD 5975):Agilent;色谱柱DB-5MS(30 m×0.25 mm×1μm):Agilent;油浴锅:国产;硬质玻璃管(可密封、容量150m L):自制。
壬基酚标准品NP(CAS:84852-15-3,同分异构体混合物,技术级,纯度≥97%):Sigma Aldrich;壬基酚乙氧化物NPnEO(CAS:9016-45-9,纯度≥99%):Fluka;丙酮、二氯甲烷、正己烷(残留农药分析纯):Fisher;氢碘酸(分析纯,浓度≥45%):天津科密欧;无水硫酸钠(优级纯):天津科密欧;次磷酸钠(分析纯,纯度≥98%):Alfa Aesar;其它试剂均为分析纯。
皮革用浸灰助剂、皮革用脱脂剂、三种皮革用加脂剂均由制革厂提供(工业级)。
1.2 溶液配制
用丙酮配制质量浓度约为1.0 g/L的NPs储备液,使用时用正己烷稀释至所需要的浓度。
用丙酮配制质量浓度约为1.0 g/L的NPnEO工作液。
1.3 NPnEO的裂解及产物的预处理
准确移取2.0 m L NPnEO丙酮溶液于硬质玻璃管中,用氮气流将玻璃管中的丙酮吹干,然后依次加入20 m L的氢碘酸和次磷酸钠,密封后置于已设定温度的油浴锅中,在规定的时间内进行裂解反应。
裂解完毕后,打开玻璃管,加入100 m L蒸馏水,将反应物稀释混匀,然后将溶液完全转移至分液漏斗中;加入20 m L正己烷,振荡萃取,将上层正己烷收集,重复操作2次;再将正己烷转移至分液漏斗中,加入20 m L蒸馏水洗涤,弃去水层,重复操作2次;正己烷通过无水硫酸钠柱过滤脱水后定容至50 m L,样液膜过滤后进行GC-MS测定。
1.4 裂解方案的正交实验设计
本实验中,以产物中NPs的含量(GC-MS峰面积)考察裂解效果。裂解过程中需要考察的因素有温度、氢碘酸浓度、次磷酸钠用量及反应时间,该四因素因素之间的影响是相互联系的。为全面考察影响因素,设计了四因素三水平[L9(34)]的正交实验,如表1所示。
1.5 样品中NPn EO含量的测定
准确称取1 g浸灰助剂样品,用丙酮溶解、过滤、定容于50 m L;再准确移取该溶液2.0 m L于硬质玻璃管中,采用1.4实验中优化后的实验条件进行裂解,其它操作同1.3中叙述,裂解产物中NPs的含量通过GC-MS检测确定。一式两份进行平行实验。
通过与确定浓度的壬基酚标准物GC-MS峰面积的比较,计算出裂解产物中NPs的含量(单位mg/L)。并采用式1计算样品中NPnEO含量:
式中:WNPEO—样品中NPnEO(壬基酚聚氧乙烯醚)的含量,单位mg/kg;
CNPs-裂解产物中NPs的含量,单位mg/L;
β—稀释倍数;
m-样品的质量,单位g。
1.6 GC-MS分析条件
进样口温度:250℃;离子源温度:250℃;四级杆温度,200℃;电子能量:70 ev;氦气流速:恒流1.0 m L/min;进样量:1μL;溶剂延迟:5 min;升温程序:80℃保持1 min,10℃/min升温至280℃,保持10 min。
检测方式参考文献进行,采用选择离子监测模式(SIM,m/z=121-135-149)。色谱分析时根据SIM离子流图中峰面积总和进行定量。
2 结果与讨论
2.1 裂解效果的正交实验
裂解法是非离子表面活性剂纯度的检验常规实验方法[6]。在一定的条件下,氢碘酸对表面活性剂中环氧乙烷EO单元间的醚键具有选择性裂解作用[7]。NPn EO中环氧乙烷EO通过醚键同苯环相连,在同氢碘酸作用过程中,该醚键也将断裂开。理论上的反应示意图如图1。由于壬基酚在水中的溶解度较低,采用弱极性溶剂可将其萃取出。
由于氢碘酸酸性极强,在强酸、长时间加热下,苯环也将被破坏,这种结果将导致产物中NPs降低,因此需要对裂解过程控制。实验中采取了L9(34)正交实验对裂解过程条件进行优化,以裂解产物中NPs通过GC-MS检测时所响应的峰面积表征裂解效果,不同条件下的测定结果见表2。
从表2中可看出,实验条件中以4#方案得到的产物中含量最高,表明该条件下裂解效果较好。同时从极差统计结果可知,温度所对应的的峰面积极差最大(269752),其次是裂解时间(极差为236324),氢碘酸浓度所对应的峰面积极差最小(89186)。这表明在温度、氢碘酸浓度、次磷酸钠用量及时间四个因素中,影响裂解效果的因素主要是温度,其次是裂解时间。因此实验中应针对该两个因素进行优化实验,以获得最佳裂解效果。
2.2 温度对裂解效果的影响
实验中,以表2中4#实验条件为基础,对不同温度(95℃-120℃)下裂解效果进行系统实验,结果见表3。
1)反应过程中,氢碘酸浓度36%、次磷酸钠量1.0 g、时间14 h
从表3可知,在实验温度范围内,产物中NPs的含量先增加、然后降低,其中在100℃-105℃范围内,NPs的含量最高;在温度95℃及120℃时,NPs的含量均很低,表明100℃-105℃范围为最佳裂解温度。
95℃下裂解后产物中低NPs含量反映了裂解过程中反应活化能的存在,这表明该反应过程符合Arrhenius定律,即通过升温的方式,增加I-亲核能力,克服反应活化能,加快反应速率,在较短的时间内使醚键的完全断裂。但是随着温度的逐渐升高,氢碘酸分解加剧,通过比较裂解后瓶内液体棕红色的深浅可明显看出120℃下游离出碘的量最多。这种情况将降低裂解效果,导致产物中NPs的含量较低。因此实验过程中应将温度控制在100℃-105℃之间。
2.3 反应时间对裂解效果的影响
同样,实验中以表2中4#实验条件为基础,考察了裂解时间(10~20 h)对裂解产物中NP含量的影响,结果见表4。
1)反应过程中,氢碘酸浓度36%、次磷酸钠量1.0g、温度105℃。
从表4中可看出,当裂解时间低于13 h时,该条件下裂解的产物中NPs的含量不能达到最大值,最大含量所对应的裂解时间在14~15 h之间,当裂解时间超过15 h后,产物中NPs的含量又开始逐渐降低,20 h内裂解产物中NPs的含量(93769)仅为最高含量(1001370)的10%左右。
15 h后NPs含量随时间的延长而降低表明,该实验条件下氢碘酸对苯环具有一定的分解作用。尽管理论上认为苯环的共轭体系赋予其耐热、耐氧化性能,但在强酸、长时间加热下,苯环仍然可以被破坏。因此根据表4中的实验结果,应将裂解时间控制在14~15 h之间。
2.4 次磷酸钠用量对裂解效果的影响
在热、光作用下,HI中的I-极易成为单质碘而游离出,丧失亲核能力。次磷酸根的还原能力大于I-,因此裂解过程中加入次磷酸钠可有效防止单质碘的生成。
为更准确了解次磷酸钠用量对裂解效果的影响,实验中以表2中4#实验条件为基础,考察了次磷酸钠用量对裂解效果的影响,结果如表3。结果表明,无次磷酸钠时,裂解产物中NP的含量较低(峰面积为494267),同时,反应瓶内液体为深棕色,表明有大量单质碘的生成,因此加入次磷酸钠是必要的。
同时从表5中可清楚看出,当次磷酸钠的量在0.5~1.0 g之间时,裂解产物中NP的含量最高;当用量再逐渐增加时,产物中NPs的含量逐渐降低。当次磷酸钠用量为4.0 g时,NPs的峰面积为194531,仅为最大值(1093120)的18%,表明裂解效果显著降低。原因可能在于次磷酸根转化为次磷酸或磷酸后,消耗了溶液中的H+,抑制了中间产物佯盐的生成[5],导致I-对醚键作用程度降低。因此次磷酸钠的用量应控制在0.5~1.0 g之间。
1)反应过程中,氢碘酸浓度36%、温度105℃、裂解时间14.5 h。
2.5 裂解效果的重现性
实验中,采用优化后的条件对裂解效果的重现性进行实验,该裂解条件如下:温度(103±1)℃、氢碘酸浓度36%、次磷酸钠用量0.7 g、裂解时间(14.5±0.5)h。表6中给出了6个平行实验的测定结果,计算出该结果的相对标准偏差RSD=9.4%,达到一般标准方法中对测量结果的要求(RSD≤10%),表明该裂解条件具有较强的可行性。
2.6 预处理过程中壬基酚的损失率
裂解产物中经过了正己烷萃取、蒸馏水洗涤等净化处理,该过程可能导致目标物壬基酚的损失。实验中,采用2.5中的实验条件,但未加入含NPnEO的丙酮溶液,得到空白溶液,然后向该溶液中加入一定量的壬基酚标准物(20~100μg),对预处理过程中壬基酚的损失率进行测试,结果如表7所示。从表中可知,该预处理过程中,壬基酚的损失率低于3%,考虑到实验中的操作误差,可认为该预处理过程对壬基酚的测定结果影响不大。
1)预处理过程为1.3.中方法2)预处理后样液中壬基酚含量以壬基酚标准物浓度(0.89μg/m L)所对应的峰面积(2315129)校正得到。
2.7 实际样品中NPn EO含量测试
NPnEO中EO数的多寡,形成了一个不同性能的非离子表面活性剂系列,但EO数n一般不高于20[8]。由于难以确定NPnEO系列中n值,欧盟的2003/53/EC指令中在对NPnEO的总量(1000mg/kg)进行限制的同时,并对EO数未作限定,这表明采用不同n值将导致不同的结果,但目前并无统一标准。本实验中以n=10作为计算基准,该条件下相同物质当量的NPnEO的质量为NPs质量的3倍,因此样品中NPnEO含量可按照式1进行计算。
1)峰面积为两次实验结果的平均值;2)以壬基酚标准物浓度(0.89μg/m L)所对应的峰面积(2315129)校正得到;3)根据式1计算;
实验中采用2.5中的裂解条件,对五种皮革用化工材料中NPnEO的含量进行测试,测定结果如表7。结果表明,所测试的5种材料中,有4种均含有不同程度的NPnEO,其中2种(浸灰助剂、加脂剂1#)含量明显偏高,皮革加工过程中使用该类材料,将必然导致成品革中NPnEO的残留。同时表7也表明NPnEO因其优良的性能、低廉的成本,目前依然具有较大的市场。可以推测,NPnEO将是皮革行业中继甲醛、六价铬、AZO之后又一个倍受关注的焦点。
3 结论
氢碘酸对NPnEO裂解过程受温度、裂解时间、次磷酸钠用量及氢碘酸浓度的影响。正交实验结果表明,温度和裂解时间是影响裂解效果的主要因素。同时,实验中单独考察了温度、裂解时间及次磷酸钠用量的影响,得出优化后的裂解条件为:温度100~105℃、氢碘酸浓度36%、次磷酸钠用量0.5 g~1.0 g、时间14 h~15 h,该条件下的重现性满足实验室测试要求。
实际样品测试结果表明,5种皮革用化工材料的裂解产物中有4种含有一定量的NPnEO,而且2种样品中NPnEO含量显著,反映出NPnEO在制革中应用的普遍性,因此NPnEO问题应引起行业足够的重视。
摘要：采用氢碘酸对壬基酚聚氧乙烯醚NPnEO进行裂解处理,通过GC-MS测定裂解产物中壬基酚NPs的含量。正交实验[L9(34)]表明温度、裂解时间是影响裂解效果的主要因素。实验中优化后的裂解条件为:温度100～105℃、次磷酸钠用量0.5～1.0g、氢碘酸浓度36%、时间14～15h,该条件下测试结果的重现性(RSD)为9.4%。采用该条件对5类皮革用化工材料中NPnEO进行定量测试,2类样品中NPnEO含量显著。
关键词：壬基酚聚氧乙烯醚,氢碘酸,壬基酚,裂解
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定量测定 篇7
关键词：X射线荧光光谱法,镍钛合金,定量测定
X射线荧光光谱法(XRF法)作为一种快速、无损、精密度较高的元素含量测定方法,被广泛应用于钢铁、有色金属、石油化工等诸多领域[1～5],能够很好地解决由医用Ni-Ti合金制备的医疗器械产品因成品价格昂贵、单个用量小、无法满足常规化学分析的难题。还可避免因仅对原材料检测,而无法评价产品制备过程因加工处理可能产生的变化,同时还能减少企业的检测成本。但目前国内外并无市售成品Ni-Ti合金标准样块,只能采用“无标样定量测试技术”进行Ni-Ti合金主成分的半定量测试,即便测试结果与常规化学方法比较接近,也无法达到检测机构对于定量测定结果需采用标准物质的溯源要求。
本研究制备了Ni-Ti合金系列标准样块,采用常规化学法多次重复测试的方式,对主成分含量进行测定、定值,可作为Ni-Ti合金光谱标样的准确结果用于X射线荧光光谱法的定量测定之用,样品精密度<0.02%,见图1。
1.实验部分
1.1仪器与测量条件
S8-Tiger波长色散型X射线荧光光谱仪,铑靶X光管,真空光路,其他测量条件列于表1 (德国布鲁克公司)。
1.2标准样品的制备
将电解镍Ni9996和海绵钛MHT-100按照各批号的镍钛合金中镍含量和钛含量准确称重,按照表2的投料量,在真空感应熔炼炉内熔炼。熔炼过程均处在氩气保护气氛下进行,浇铸为合金铸锭。合金铸锭经高温均匀化热处理、扒皮、切冒口、取样分析,在电阻炉内加热850～900度保温热透后空气锤自由锻造为直径Φ42mm的圆棒,车削加工为直径Φ38的车光棒,线切割下断为厚度18mm的圆块,表面依次用200、300、400号砂纸磨平,最后用稀土抛光粉将其表面抛光,洗净、干燥,完成Φ38×18试样块的加工。
采用常规化学分析方法进行重复测定(n=20)对含量进行定值,并将标样熔块切片分别检测每片的荧光强度进行均匀性考察。
1.3建立X射线荧光光谱法定量测定镍钛合金成分方法
1.3.1建立标准曲线
上述制备好的Ni-Ti合金样块经依次抛磨机在240#、600#、1200#砂纸打磨,并利用6μm、3μm、0.05μm抛光液进行粗抛光、细抛光、精抛光,样品依次经去离子水、无水乙醇超声清洗后,吹干得到平整镜面光滑的测试表面,于X射线荧光光谱仪中进行扫描,按照S8 Tiger系统软件创建流程,将常规化学方法测定的Ni、Ti含量录入Ni-Ti合金标准曲线进行计算拟合,进行谱线优化、测定参数设定,通过系统对所建标准曲线的方法一致性检验。
1.3.2利用X射线荧光光谱法定量测定镍钛合金成分
1.3.2.1对不同形状样品的X-荧光光谱法(XRF)前处理制备方法研究。
因多数样品均形状不规则,无法直接参考ASTM E539-11 X射线荧光光谱法测定钛合金中元素的分析方法测定相关材料的元素成分,对样品主要采用线切割后打磨(拼接)的方法进行处理后,方能顺利测试。
(Ni-Ti记忆合金成品主要由兰州西脉记忆合金股份有限公提供)
1.3.2.2样品测试
将某一批号的处理好的样品依次在抛磨机240#、600#、1200#砂纸打磨,并利用6μm、3μm、0.05μm抛光液进行粗抛光、细抛光、精抛光,样品依次经去离子水、无水乙醇超声清洗后,吹干得到平整镜面光滑的测试表面,做相应拼接,在非测试面利用不干胶固定样品,注意测试面的清洁干燥,标准样品的处理同试样的处理。将各样品表面用洗耳球吹洗后,置于XRF进样器(准直器面罩直径8mm)利用1.3.1建立的镍钛合金XRF标准曲线测定Ni、Ti含量。
仪器启动后将高压开至50kV、管流60mA,预热2h,将未知样品按试样制备要求制备,在5天的不同时间里重复测定11次考察方法精密度,平行取样7份进行常规化学法测定与XRF测定结果进行对比。
2.结果与讨论
2.1常规化学方法标定镍钛合金系列标准样块中Ni、Ti含量
2.2 Ni-Ti合金XRF标准曲线(见图2)
2.3通过样品前处理研究得到的解决方案
①对于表面积相对较大,但测试面并不平整的样品经过线切割可以形成平整的测试面,打磨后直接用于测试。
②对于表面积较小,但厚度大于lcm的样品,我们采用对角线切割方式,利用线切割工艺切成一个光滑的斜面,从而形成了一个较长的测试面,经过打磨程序和适当的拼接也可形成较为理想的可供XRF测试的试样。
③对于口腔正畸丝、丝材类材料课题组主要通过将其切割成为弧度较小近乎于直线装样品,再采用α一氰基丙烯酸乙酯(502胶)、透明胶粘接等手段将丝状材拼接成一个表面相对平滑的测试面,进行测试。经过验证实验,与仲裁法相比,拼接面测得的XRF检测结果在可接受范围内。
④对于体积极小,形状不规则的产品,如心血管支架材料,采用线切割也无法得到形状规则适合拼接的测试面。仅能对体积相对较大,材料设计较为规则的支架进行分解,拼接(见图3)。
2.4精密度
2.5常规化学法与XRF法的测试结果
表5为本方法与化学法测Ni、Ti结果比较。由表5可见,本研究的样品前处理方法由x射线荧光光谱法仪测定镍钛合金中的Ni、Ti元素具有较好准确度,两者的分析结果相符,能够满足日常检测的要求。
2.6讨论
通过对比表3、表4、表5,我们可以明显看出:
(1) XRF分析合金铸铁中的杂质元素,精密度优于化学法。
(2)镍钛合金系列标准样块的化学法测定精密度要低于镍钛合金样品的测定精密度,其原因可能由于镍钛合金镍钛含量的变化,使样品的均匀程度受到了一定影响。此外,还可能由于参加标定的多个单位之间存在一定的系统差异。因此,今后还可在标准样块的制备方面进一步提高,同时组织协作标定除编写统一的作业指导书外,如能对实验的细节进行进一步的统一规范,会得到更为理想的总体精密度。
(3)上述测试结果显示,XRF法基本与化学法测定结果相符,可用于相关产品元素成分的快速测定。Ni-Ti合金XRF定量测试方法的结果与化学法结果一致,初步达到了方法建立的基本要求。然而由于Ni-Ti合金表面采用各种改性处理,该测试方法仅适用于将表面进行打磨抛光后内部主成分的测试。下一步针对不同表面处理工艺进行更多的Ni-Ti合金光谱标样的研制,还有大量的工作要做。
(4)作为器械产品不规则小样品的XRF样品制备方法,理论上还可以采用双真空感应熔炼法(VIM)、真空电弧熔炼+真空感应熔炼法(VAM+VIM)、真空感应水冷铜端锅熔炼法等,将样品进行重熔,获得形状平滑均匀的测试面(重熔处理对样品中H、C、O、N元素影响较大,不适合再做上述元素的测定)。而具备上述熔炼能力的机构,均以大规模生产构建设备,投料量至少在数十公斤至数百公斤范围内,对于医疗器械成品检验来说,根本无法实施重熔操作。实验室级别的真空感应重熔炉,不但价格昂贵,而且样品最少处理量也接近常规化学测试方法的需要量,仅能解决一部分样品量相对较多的产品(10g以上,适合于骨板、骨钉、关节等产品),适用范围受到了一定的限制。
医疗器械产品是多学科交叉应用的典范,其性能评价涉及到其他行业、领域的众多基本方法、设备、技术,同时又存在其自身的特点,在日常检测和科研实践中,遇到的难题往往是本专业领域(如:钢铁、有色金属行业)日常生产中很少遇到的问题,需要医疗器械检验和科研人员进行有针对性的科研攻关。而且不能固步自封,更应与所属专业性更强的行业技术单位加强技术交流,共同解决这些难题,从而不断提升自身的业务水平,更好地服务于医疗器械监管。
参考文献
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定量测定 篇8
关键词：D-二聚体,定量测定,临床价值
基于免疫过滤试验原理, 将血浆加入检测卡孔内, 样品被吸入, D-二聚体分子被吸附到包被D-二聚体单克隆抗体的膜中, 然后加入D-二聚体单克隆抗体与胶体金偶联物溶液;膜中D-二聚体将子抗体金偶联物发生结合反应, 形成三明治联合体, 过剩偶联物用洗涤物洗去。样本中存在病理水平的D-二聚体, 检测膜显现微红色, 颜色的深浅与样本中的D-二聚体浓度呈正比。用读数仪 (NycoCard®-READER) 进行读数定量。该灵敏度高, 特异性强, 操作简便、快速。本文通过对60例正常人及198例有相关疾病患者的检测, 证明血浆D-二聚体金标法定量检测临床应用价值较大。
1材料与方法
耐科卡D-二聚体测定试剂盒 (胶体金方法) 由挪威AXIS-SHIELD POC AS公司生产, 待检者静脉取血2～3mL, 加入抗凝剂 (0.11mol/L柠檬酸钠) , 比例为9∶1 (血∶抗凝剂) , 然后在6h内以2000g离心力离心15min。吸取无血小板血浆按说明书测定。测定结果>0.5mg/L
判为阳性。见表1。
血浆中D-二聚体是蛋白酶消化的产物, 随纤维蛋白形成而增加。正常人血浆浓度在0.3mg/L以上, >0.5mg/L即判为阳性, 表明体内存在继发性纤溶亢进。表中显示血栓形成疾病, 如DIC、深静脉栓塞、心肌梗死, 脑梗死、中重度慢性肝炎、肝硬化、肝癌等, 阳性率均在75%以上。某些溶栓药物, 如链激酶、尿激酶用后, 如果溶栓药物已达疗效, 则D-二聚体含量在升高后随即下降, 因此其可作为临床栓塞疗效的评价与用药监测。
弥血散性血管内凝血 (DIC) 不是一种独立的疾病, 而是一个由多种病因引起的, 以严重的止血功能紊乱为主要特征的病理过程。D-二聚体是反映纤溶性的敏感指标, 也是DIC诊断的特异性指标, 典型DIC时, D-二聚体几乎100%含量增高。
当D-二聚体含量>0.5mg/L时, 表明体内有纤溶亢进, 有血栓形成, 或存在高凝状态或溶栓药物应用有效。
D-二聚体是纤维蛋白单体因子交联后, 再经纤溶酶水解产生的-种特殊降解产物, 其水平的增高反映继发性纤溶活性的增强, 可作为体内高凝状态和纤溶亢进的分子标志物之一[1]。恶性肿瘤多存在明显的高凝状态[2], 本研究12例肝癌患者, D-二聚体100%, 较正常人水平明显增高。
参考文献
[1]钱纪银, 郭国平.血浆D-二聚体定量检测在肿瘤诊疗中的应用[J].中国基层医药, 2009, 16 (1) :23.
