氨基酸分析法对蛋白定量的初步分析论文

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氨基酸分析法对蛋白定量的初步分析论文（精选11篇）

篇1：氨基酸分析法对蛋白定量的初步分析论文

Scaffold蛋白介导细胞信号转导专一性的定量分析

细胞使用相对有限的蛋白质组分传递大量的信号,因此不同的信号通常由相同的蛋白质组分传递.这些蛋白质组分是如何选择性地参与不同的信号通路,“高保真”地传递不同的刺激,从而产生特定的细胞应答,是目前细胞生物学领域中的研究热点和难点之一.鉴于Scaffold蛋白在确保信号转导专一性和保真性中的关键作用,作者基于酵母S. cerevisiae的`生物学实验数据,建立了由Scaffold介导的丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)级联信号转导网络的数学模型.并对已报道的工作进行扩展,给出了多条信号级联网络的“专一性(specificity)”和“保真性(fidelity)”的精确数学定义,计算了MAPK信号网络的专一性和保真性的解析解.用这些解定量分析细胞信号转导的专一性和保真性与信号通路各种动力学参数(输入信号的强度和时间、反应率、磷酸化和去磷酸化系数、降解系数等)之间的关系,从理论上阐述Scaffold蛋白通过隔离(sequestration)和选择性激活(selective activation)等机制增强信号转导网络的专一性和保真性.从而有助于加佑深对细胞信号转导及其调控过程的系统理解,为揭示某些因细胞信号转导异常所致疾病的发生机理,寻找治疗药物提供新的思路.

作 者：邹秀芬 许志强 潘兹书 ZOU Xiu-fen XU Zhi-qiang PAN Zi-shu 作者单位：邹秀芬,许志强,ZOU Xiu-fen,XU Zhi-qiang(武汉大学数学与统计学院,武汉,430072)

潘兹书,PAN Zi-shu(武汉大学生命科学学院,武汉,430072)

刊 名：生物物理学报 ISTIC PKU英文刊名：ACTA BIOPHYSICA SINICA年，卷(期)：22(4)分类号：Q6关键词：信号转导 数学模型 专一性 保真性 Scaffold蛋白

篇2：氨基酸分析法对蛋白定量的初步分析论文

体制改革对中国经济增长贡献的定量分析

我们研究所最近正在完成一项研究,就是对过去30年的中国经济的增长和各种要素、因素进行分析,经济学上用计量的`方法来研究究竟哪些因素对过去中国经济的增长作出贡献.做这个研究也是为了进一步分析哪些因素在今后还存在不存在,它的贡献还会不会持续,哪些贡献可能会少一点,哪些贡献多一点.当然未来还有未来的新的因素.当然过去的因素还会继续存在.希望用定量的方法来论证,中国经济是不是还能不能继续增长,当然预测是有风险的事情,但是我们尽量想提供分析的基础,如果这些因素还继续存在的话,那么中国未来的增长还是有保证的.

作 者：樊纲 作者单位：中国经济改革研究基金会刊 名：理论导报英文刊名：LILUN DAOBAO年，卷(期)：“”(2)分类号：关键词：

篇3：氨基酸分析法对蛋白定量的初步分析论文

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验材料

灰树花(Grifola frondosa)GF-932菌株由作者实验室分离驯化,保存于中国普通微生物菌种保藏中心,保藏号CGMCC No.1709。

1.1.2 试剂

Q Sepharose FF(Amersham)、蛋白 Marker(2-212 kDa,NEB)、PNGase F(NEB),其它试剂均为国产分析纯。

1.1.3 仪器

中空纤维微滤膜组件(MOF,天津膜天膜科技有限公司);中空纤维超滤膜组件(VEOS,天津膜天膜科技有限公司);PP-6蠕动泵(常州市科健蠕动泵厂);FD-ID-55冷冻干燥机(北京博医康实验仪器有限公司);离子交换柱(20mm×300mm);HD-3紫外检测仪(上海沪西分析仪器厂有限公司);BT-200恒流泵(上海沪西分析仪器厂);DYY-10型电泳仪(北京市六一仪器厂);TS-8型脱色摇床(海门市其林贝尔仪器制造有限公司)。

1.1.4 培养基

斜面培养基:PDA培养基。

种子培养基:葡萄糖10g,玉米粉2.5g,蛋白胨1.5g,酵母粉0.75g,KH2PO4 0.25g,MgSO4 0.5g,水1 000mL,pH自然。

生产用培养基:马铃薯14g,麸皮28g,葡萄糖28g,玉米粉12g,蛋白胨4.2g,酵母膏2.1g,KH2PO4 0.7g,MgSO4 1.4g,水1 000mL,pH自然。

1.2 方法

1.2.1 灰树花菌丝粉的制备

将斜面培养的菌种接种于无菌种子培养基中,28℃摇床(100r/min)培养3d,获得种子液。将种子液以4%的接种量经一级种子罐(50L)、二级种子罐(500L)和发酵罐(5 000L)逐级培养,培养温度为28℃,搅拌速度为200 r/min,通气量为0.5vvm,培养时间各为24h、24h、48h,发酵液离心后,洗涤菌丝体沉淀,干燥、备用。

1.2.2 蛋白聚糖的提取

取100g灰树花菌丝粉,分别经80%乙醇,于80℃水浴脱脂;水,沸水浴提取;1.0mol/L NaOH,4℃提取,离心后收集滤饼,回收乙醇。滤饼再经1.0mol/L NaOH,50℃水浴提取1.5h,重复一次,离心后合并两次热碱提取的上清液,得到蛋白聚糖粗提液。粗提液经乙酸中和、离心、微滤、超滤浓缩、醇沉,干燥后即为灰树花蛋白聚糖粗品。

1.2.3 蛋白聚糖的分离纯化

将灰树花蛋白聚糖粗品配成1%的水溶液,经0.45μm微孔滤膜过滤,采用Q Sepharose FF离子交换层析纯化,洗脱液依次为含0、0.1、0.4、1.0mol/L NaCl的Tris-HCl溶液,收集各蛋白聚糖组分。将各组分分别超滤脱盐,至浓缩液电导率在100μS/cm以下,真空冷冻干燥,获得蛋白聚糖GFPⅠ、GFPⅡ、GFPⅢ。

1.2.4 蛋白聚糖含量的测定

1.2.4.1 糖含量的测定:

采用苯酚-硫酸法[6,7]进行测定。

1.2.4.2 蛋白质含量的测定:

采用Lowry法[8,9,10]进行测定。

1.2.5 蛋白聚糖的SDS-PAGE分离

将蛋白聚糖及经过PNGase F 酶切的样品,进行SDS-PAGE电泳分离、检测。电泳采用pH 8.3的Tris-甘氨酸缓冲体系,6%浓缩胶,16%分离胶,上样量40～80μg,考马斯亮蓝R-250染色。以标准分子量蛋白为标准,将各蛋白迁移率对分子量的对数作图,获得一条标准曲线,根据目的蛋白的迁移率从标准曲线上求得分子量。

1.2.6 蛋白聚糖的纯度及相对分子量的测定

采用高效液相色谱法鉴定蛋白聚糖粗品和GFPⅢ的纯度,样品液浓度为2mg/ml,分析条件为:OHpak SB-804 HQ凝胶色谱柱,进样量20μL,流动相为0.02%NaN3水溶液,流速0.5mL/min,柱温35℃,示差折光检测器。根据保留时间得到测定曲线,并采用GPC软件分析样品的重均相对分子量。

1.2.7 氨基酸组成分析

依据GB/T18246-2000,采用氨基酸分析仪对灰树花菌丝粉及蛋白聚糖GFPⅢ的18种氨基酸进行分析,由农业部食品质量监督检验测试中心(济南)完成。

2 结果与分析

2.1 灰树花蛋白聚糖的提取与分离纯化

采用碱提法提取的蛋白聚糖,经脱色、超滤浓缩、除游离蛋白、醇沉后粗干品为浅棕黄色絮状,得率为1.13%(见表1),极易溶于水,不溶于乙醇、丙酮等有机溶剂。取1.13g粗样经Q Sepharose FF离子交换层析纯化后,得到GFPⅠ、GFPⅡ和GFPⅢ三个组分,得率分别为7.48%、24.55%、17.52%。

2.2 蛋白聚糖含量测定

灰树花蛋白聚糖的糖含量测定采用苯酚-硫酸法。该方法不仅适合于单糖、寡糖和多糖定性和定量分析,而且可用于各种糖复合物如糖蛋白、糖肽和糖脂中总糖的定性分析中,尚未见该法用于中性糖蛋白中总糖定量分析[11]。蛋白质含量测定采用Lowry法,此法经Folin-酚试剂法改良而来,是蛋白质含量测定常用的方法之一。本研究测定的糖和蛋白含量结果见表2,粗蛋白聚糖、GFPⅠ、GFPⅡ、GFPⅢ糖含量分别为:19.61%、43.69%、40.88%、28.33%,蛋白含量分别为:67.34%、40.42%、34.65%、51.19%。由于GFPⅠ得率较低,故只进行了此项测定。

2.3 SDS-PAGE电泳结果

蛋白聚糖是β-葡聚糖与蛋白质结合而成的缀合物,分子量较大,利用PNGase F可将结合蛋白切分下来,在SDS-PAGE电泳后形成明显的蛋白条带。由图1可见,蛋白聚糖GFPⅢ在凝胶上缘呈现单一谱带,且其结合蛋白同样在凝胶中呈现单一谱带,只是酶切不完全,仍留有较少的蛋白聚糖。而蛋白聚糖GFPⅡ在凝胶中只模糊的呈现了蛋白谱带。由此说明GFPⅢ纯化效果较好,达到了电泳级纯度。由标准曲线可求得GFPⅢ的分子量约为33.0kDa。

2.4 GFPⅢ的纯度及相对分子量的测定

经HPLC分析,蛋白聚糖粗品在谱图中呈现一个主要的蛋白聚糖不对称峰(图2),出峰时间为12.8～19min之间,最高峰在15.65min,纯度较高。而GFPⅢ却呈现出一单一对称主峰(图3),出峰时间为12.5～17.5min之间,最高峰在15.29min,纯度为93.61%,与蛋白聚糖粗品检测结果极为相似,表明GFPⅢ已经被纯化,经GPC软件分析得出重均相对分子量(Mr)为150kDa,为分子量较大,成分均一的蛋白聚糖。

2.5 氨基酸组成分析

由表3可见,灰树花脱脂菌丝粉和GFPⅢ的中18种氨基酸含量高低顺序基本一致,其中Asp、Glu、Leu、Ala和Lys含量较高,而Cys、Try含量较低;氨基酸总和分别为33.51和66.60g/100g。GFPⅢ中必需氨基酸(Lys、Try、Met、Thr、Phe、Ile、Leu、Val)总量为26.14g/100g,呈味氨基酸总量(Glu、Asp、Ala、Gly)为25.43g/100g。

3 讨论

灰树花是一种药食两用的大型真菌,具有很高的营养价值以及重大疾病预防和治疗的作用。目前灰树花的研究大多是集中在多糖的提取和功能上[12],而对灰树花蛋白聚糖的研究鲜有报道。周昌艳[13]、徐泽平[14]等虽然提出了灰树花蛋白聚糖的制备方法,但对其组成成分和结构研究的深入程度仍不及其他真菌多糖。在徐泽平[14]所述的制备方法中,以无机盐诱导菌丝体自溶后,经过酶解、离心,获得粗提液,再超滤脱盐和浓缩,干燥获得蛋白聚糖,虽然有较高的含量,但没有进一步分离纯化。因此,本研究在灰树花蛋白聚糖现有制备工艺的基础上,进行了进一步的分离纯化及氨基酸组成分析,为其生物活性研究及产业化开发打下坚实的基础。

本研究以灰树花菌丝粉为原料,通过脱脂、热水提取去除杂多糖、冷碱提取去除非目的碱溶性多糖后,再经50℃热碱提取获得了灰树花蛋白聚糖粗体液。粗体液依次经0.2μm的微滤膜去除大分子和胶体类物质,截留分子量10KD的超滤膜进行脱盐,离子交换层析法进行分离纯化,最终获得GFPⅠ、GFPⅡ和GFPⅢ三个组分。为进一步检测蛋白聚糖的分离纯化效果,本研究首先进行了SDS-PAGE电泳分析,由结果可知,蛋白聚糖GFPⅢ被有效地分离纯化出来,其结合蛋白呈现单一谱带,蛋白分子量约为33.0kDa。其次对GFPⅢ进行了HPLC分析,得到一单一对称主峰,纯度为93.61%,重均相对分子量(Mr)为150kDa,表明已经获得GFPⅢ纯品。说明微滤、超滤技术和离子交换层析法适合本样品的分离纯化,得到了蛋白含量较高、分子量较大、纯度较高的蛋白聚糖,为以后的工业化生产提供理论依据。

同时对GFPⅢ进行了氨基酸组成分析,据农业部食品质量监督检验测试中心(济南)检验,GFPⅢ所含18种氨基酸总量为66.60g/100g,其中8种必需氨基酸和4种呈味氨基酸含量较高,分别为26.14g/100g和25.43 g/100g,具有重要的研究和应用价值。

4 结论

篇4：蛋白质定量分析的研究进展

【关键词】蛋白质；定量分析；研究

【中图分类号】R【文献标识码】A【文章编号】1007-8517(2009)08-0049-02

1蛋白质定量检测的生物化学方法

1.1凯氏定氮(Kjeldahls Method)及分光光度法利用蛋白质含氮量进行检测的经典方法，优点是定量准确，但操作烦琐，仅用于标定蛋白质标准品和校正其他测定方法。凯氏定氮法有半微量法、微量法及全量法。样品与H₂SO4一同加热消化，分析有机物，释放出的NH3与结合，碱化蒸馏使氨游离，硼酸吸收，HCI或H₂SO4标准溶液滴定，从而计算蛋白质的含量。该方法是以Hantzsch反应为原理所建立的一种测试蛋白质含量的新的分光光度法。适用于各类食品中蛋白质的测定，且不需要特殊的凯氏定氮装置。取样且少，消化时间短，精密度高准确度好，适用于大批样品同时测定，亦适用于微量蛋白质分析，是一种蛋白质快速、准确测定的新途径。

1.2双缩脲法(Biuret Assay)双缩脲法简便易行，但检测灵敏度相对较低，最低测定值100μg。必须在测定前先使蛋白完全沉淀，除去干扰物质，才能得到较准确的结果。除三氯乙酸作沉淀剂外．还可用钨酸、磷钨酸和Tsuchiya试剂，双缩脲法优点是对白、红蛋白产生颜色反应相近、干扰物质少，不受温度的影响。但灵敏度低，0.01吸光度相当于l66.7μg蛋白，且操作复杂，很难用于自动化仪器分析。

1.3Lowry法（Lowry Assay）结合双缩脲法中铜盐反应与Folin-ciocalteau试剂反应的特点，通过芳香族氨基酸残基Tyr和Try的迅速反应与肽链、极性侧链或两者的铜络合物较慢的反应．而把磷钼酸发色团还原成暗蓝色、在波长750nm处测定Amax。

1.4BCA法(Bicichoninic Acid Assay)BCA法的灵敏度为0．5～10μg/ml，其最低测定值与反应温度有关。有37℃和60℃(增强法)2种反应温度：在37℃时，一般适用于浓度较高的样品(＞50μg/ml)，但是色氨酸、酪氨酸和肽键在此温度下得不到彻底的氧化(37℃时该方法检测的蛋白质浓度范围为20～2000μg/ml)；在60℃(增强法)时，一般适用于浓度较低的样品(＜50μg／ml)，色氨酸、酪氨酸和肽键在此温度下能得到充分氧化，因此能大大提高检测灵敏度(60℃时该方法检测的蛋白质浓度最低可达5μg/ml)。

1.5丹宁酸法丹宁酸用来沉淀蛋白质，但沉淀结构松散。可用Caiilne取代蛋白，蛋白游离出后用免疫法或空氮法测定，但此法操作麻烦、加FeCl3与丹宁酸蛋白沉淀反应显色，5min后在510nm比色，0.1mol的丹宁酸可结合0.333μg白蛋白、灵敏度达5ml•L-1，线性范围为0.05～1.8g•L-1。

1.6浊度法(比浊法)利用沉淀剂与蛋白质反应所产生的浊度与标准溶液浊度比较而定量测得未知蛋白浓度的定量分析法。磺基水杨酸和三氯化铁是常用的蛋白质沉淀剂。30g•L-1磺基水杨酸作为沉淀剂可沉淀白蛋白、球蛋白及血红蛋白。50g•L-1三氯乙酸蛋白作沉淀剂，可沉淀白蛋白和球蛋白。

1.7染料结合法(Dye Combination Assay)是利用蛋白质与染料结合的性质进行检测的方法。常用的染料有：考马斯亮蓝(coomassie bril1iant blue，CBB)G-250或R-250、丽春红S(ponceau S)、氨基黑(amido black)、溴甲酚绿(bromcreso1 green，BCG)和溴甲酚紫(bromcreso1 purple，BCP)等。

1.8紫外分光光度法(ultravio1et Spectrophotometry)是利用蛋白质在紫外280nm处有最大吸收峰的现象，进行检测的方法，具有简便、快速且可回收样品的优点。紫外分光光度法检测蛋白质的最低测定值为10Pg。

1.9荧光法这是近几年兴起的一种新的定量测定蛋白质的方法，观已报道的络天青S、次氯酸盐—硫胺素及白蛋白蓝670法测定蛋白质的方法，其灵敏度较低。

1.10金属离子-染料结合法借用金属离子－染料和蛋白质在适宜条件下反应进而检测蛋白的方法发展很快，钛-4，5-二溴基荧光酮(DBPF)-Tween-80与蛋白质的显色反应用来测定微量尿蛋白。在pH2．9，血清蛋白能与钛-DBPF-Tween-80形成蓝色络合物．λmax＝605nm，加入少量乙醇能提高方法的灵敏度及稳定性。

2蛋白质定量检测的免疫法

2.1免疫扩散法所谓抗原是指引起机体产生抗体的物质，而抗体是指在抗原的刺激下机体产生的物质。抗原与抗体结合生成沉淀以达到机体免疫的目的，抗原与抗体属于蛋白质化合物。

2.1.1环状免疫单扩展法将一定量的抗体（一般常用单价抗血清)与含缓冲液的琼脂糖凝胶混匀铺成适当厚度的凝胶板，再把抗原滴进凝胶板的小孔个，在合适的浓度和湿度环境中、经过一定的时间，抗原由小孔向四周扩散(呈辐射状)，与已沉匀在琼脂糖凝胶中的抗体相互作用。

2.1.2双向扩展法一定浓度的琼脂糖(或琼脂)凝胶是多孔的网状结构，大分子物质可自由通过，这种分子的扩散作用可使分别在两处的抗原和相应抗体相遇．形成抗原－抗体复合物．比例合适时出现沉淀，沉淀的特征与位置取决于抗原分子量的大小、分子结构、扩散系数和浓度。如果抗体存在于多种有机大分子中出现多条沉淀线，即可定性抗原，诊断疾病。此法操作简单且灵敏度高，是最常用的免疫法。

2.2琼脂糖免疫电泳法免疫化学与琼脂电泳相结合形成了免疫电泳技术，这是一种灵敏度很高的蛋白质分离及鉴定技术，可用于定性、定量测定抗原或抗体。此技术是1953年由Grabar及wilillims提出，后来由Scheigger改进形成的一种微量蛋白质测定法。可分为以下几种常用免疫电泳法：

2.2.1微量免疫电泳法在有离子的琼脂糖的玻璃中心各挖一长槽，槽的两侧各挖一个小圆孔，孔内加入待测样品，电泳时，由于样品中各蛋白质的等电点不同，其带电性不同，因而被分离成几个区带。电泳后在长槽中加入相应的抗血清37℃时扩散，分离的蛋白质就与相应的抗体形成大小不同、深浅各异的沉淀弧。一般情况下每一沉淀弧代表蛋白质混合物中一种成分，以此进行定性、定量。

2.2.2对流免疫电泳将抗原和抗体分别加入琼脂板样品孔内同时进行电泳，抗原由阴极向阳极移动，抗体向阴极倒退，两成分相遇，特效抗原与抗体结合，形成可见的白色沉淀物，即对流免疫电泳．这种方法是抗原与抗体在电场作用下定向移动，限制了抗原与抗体的自由式扩散，可提高灵敏度16倍。

2.2.3火箭电泳法取一定量单价血清，与一定量琼脂凝胶混匀，然后铺板，板上挖几个小孔，每孔中加不同浓度的相应抗原，将此板放在pH8.6的电泳槽中进行电泳，在电场作用下抗原向正极泳动，在泳动中与凝胶中的抗体反应，逐渐形成类似火箭的沉淀峰．其峰的高度与抗原的浓度成正比，以此可定量抗原。国外有人用此法测定了全血清中的C-活性蛋白质。如果被测抗原等电点与单价血清(抗体)的等电点相同，不仅需要用琼脂糖，而且需对抗原进行化学处理，使负电荷相对增加，这样处理后才能出现火箭峰。处理时，一般用氰酸钾或甲醛。

2.2.4双向定量免疫电泳法双向定量免疫电泳法又称交叉电泳。先将抗原进行电泳分离蛋白质的各组分；放在抗体琼脂板上，使各组分在垂直方向再电泳一次，根据各组分和沉淀峰便可定性、定量抗原。

2.2.5放射免疫电泳法RIA法是将放射性同位素测定法和免疫反应相互结合的一种技术，优点是特效、敏感、精确、简单。一般不需要复杂的提纯步骤。目前该法已用于细菌和病毒抗原的分析、抗体的测定，各种免疫球蛋白和血清蛋白的定量测定及肿瘤有关的抗原测定等。

2.3毛细管电泳免疫法在用琼脂糖免疫法定量分析抗原和抗体蛋白质时，抗原和抗体的纯化是非常麻烦的问题。近年来发展较快的是毛细管免疫电泳，它的分离速度快、分辨率高且不受染色时间、温度、染色剂浓度、显色时间等因素影响。诸多优点使其广泛地应用于包括球蛋白在内的各种临床指标的检测。

蛋白质定量检测技术发展至今已经建立了许多成熟的方法，且衍生出了众多试剂盒。但在实际工作中，无论是使用自配试剂还是商品试剂盒来进行蛋白定量，往往忽视了需根据待测定蛋白质的特性选择合适的方法和标准品，造成蛋白定量结果的不可靠。随着蛋白质定量检测的日趋频繁和检测要求的日益提高，正确选择、应用蛋白质定量方法和标准品，应该引起有关人员的高度重视。

参考文献

[1]赵峰．脂蛋白(a)检测在临床诊断中的价值[J]．职业与健康，2002，18

[2]康建．一种简单快速的聚丙烯酰胺凝胶电泳染色法一铜染色法[J]．生物化学与生物物理进展，1990，17

[3]张滨．人体血液蛋白的毛细管电泳分析进展[J]．分析化学，1997，25(8)：973-977

篇5：氨基酸分析法对蛋白定量的初步分析论文

本文对武汉测绘科技大学(WTUSM)重力基准点在暴雨后不久引起的观测异常进行了测试和研究,包括对测点附近的土壤在饱和前后的密度、孔隙度等及由此而引起的重力变化进行计算和分析.结果表明,该项效应与雨后相对于正常天气情况下3次观测结果(平均值)的.偏离相当接近.文中还对今后在绝对重力测量中,如何注意土壤浸湿的影响提出了建议.

作 者：张为民 王勇 张赤军 作者单位：中国科学院测量与地球物理研究所 刊 名：测绘学报 ISTIC EI PKU英文刊名：ACTA GEODAETICA ET CARTOGRAPHICA SINICA 年，卷(期)： 30(2) 分类号：P223 关键词：土壤浸湿   重力变化   绝对重力测量

篇6：氨基酸分析法对蛋白定量的初步分析论文

湖泊污染对淡水渔业发展影响的初步分析

污水大量排放、生态环境恶化、过度养殖开发、盲目围垦等因素对淡水渔业的发展产生了巨大影响.介绍了我国湖泊污染的`现状、产生污染原因,分析了湖泊污染对我国淡水养殖生物及其饵料生物的生长发育和繁殖的影响,并提出了防治湖泊污染的对策.

作 者：贺诗水 王洪凯 王明山 HE Shi-shui WANG Hong-kai WANG Ming-shan 作者单位：枣庄学院生命科学系,山东,枣庄,277100刊 名：河北农业科学英文刊名：JOURNAL OF HEBEI AGRICULTURAL SCIENCES年，卷(期)：200812(2)分类号：X524关键词：湖泊 水污染 淡水渔业 防治对策

篇7：氨基酸分析法对蛋白定量的初步分析论文

预培养6 d的薰衣草下胚轴在添加100 μmol・L-1乙酰丁香酮(AS)的`根癌农杆菌重悬液中浸染10min后共培养2～3d,再经过7～10 d的恢复培养之后用包含10 mg・L-1潮霉素B和200 mg・L-1头孢霉素的筛选培养基进行筛选是较为理想的遗传转化条件.通过GFP观察和GUS染色以及对筛选得到的抗性芽的PCR检测证明,外源目的基因(雪莲冷诱导蛋白基因scp)已整合到薰衣草基因组中,阳性率为40%.

作 者：邢文超 O强 赵民安 曹旭 XING Wen-Chao YUN Qiang ZHAO Min-An CAO Xu 作者单位：邢文超,XING Wen-Chao(中国科学院新疆理化技术研究所,乌鲁木齐,830011;中国科学院研究生院,北京,100039)

O强,赵民安,曹旭,YUN Qiang,ZHAO Min-An,CAO Xu(中国科学院新疆理化技术研究所,乌鲁木齐,830011)

篇8：氨基酸分析法对蛋白定量的初步分析论文

关键词：菊芋渣,蛋白,氨基酸组成,功能特性

目前，以菊芋为原料可以生产菊粉、低聚果糖、高果糖浆、结晶果糖和畜禽用原生素。因此菊芋既是一种有广阔发展前景的经济作物，又是一种有利用价值的饲料作物。大力开发菊芋资源，生产菊芋系列产品，有巨大的经济效益、广泛的社会效益和持久的生态效益。菊芋渣里含有纤维、淀粉、蛋白等物质，均是可利用的重要资源，而且菊粉工业排渣量很大，1t菊芋块茎加工后可得菊芋渣650kg(水分含量约为83%)，如不进行综合利用，不仅造成资源的浪费，还会造成严重的环境污染。菊芋渣可作为饲料直接饲用，但蛋白质含量较低、适口性差，饲料品质低。本试验着重对菊芋渣蛋白质的氨基酸组成及其功能特性进行了研究，为今后菊芋渣饲料的大规模生产和其产品的深加工提供了可行性依据，以期对菊芋的综合利用及新产品的开发提供基础研究资料。

1 试验材料与方法

1.1 材料与仪器

菊芋渣，白银熙瑞生物工程有限公司;菊芋渣蛋白，试验室自制;大豆色拉油，市售;盐酸为优级纯;考马斯亮蓝试剂、牛血清白蛋白、磷酸、氢氧化钠、硫酸铜、酒石酸钾钠、碘化钾等，均为分析纯。

TGL-16高速冷冻离心机，湘仪离心机公司;FD-1-55冷冻干燥机，北京博医康试验仪器有限公司;835-50氨基酸自动分析仪，日本Hitachi公司;PHS-2C型精密酸度计，上海雷磁仪器厂;UV-2800H型紫外可见分光光度计，尤尼柯(上海)仪器有限公司。

1.2 试验方法

1.2.1 菊芋渣蛋白的分离制备

采用碱提酸沉法。

1.2.2 蛋白主要理化指标分析

水分的测定参照GB/T 5009.3-2003;灰分的测定参照GB/T 5009.4-2003;粗脂肪的测定参照GB/T 14722-2008;总蛋白含量的测定参照GB/T 5009.5-2003。

1.2.3 减法提取菊芋渣蛋白

菊芋渣→自然风干→粉碎→碱液浸泡(pH值14)→离心分离→蛋白质→加稀酸(调至pH值4.0)→离心分离→沉淀水洗→调pH值至中性→冷冻干燥→菊芋渣蛋白

1.3 蛋白氨基酸组成分析

准确称取研细的待测样品0.5g，装于10mL水解管中，加入8mL 6mol/L的盐酸，真空泵抽至真空后充入高纯氮气，重复3次，用酒精喷灯封管，110℃水解24h。取出，打开水解管，转入50mL容量瓶中并用水稀释至刻度，过滤，取滤液10mL于蒸馏烧瓶中55℃水浴蒸发至干，加样品稀释液10mL，超声溶解后过0.45μm膜，置于2mL进样瓶中供仪器测定用，用碱水解法测定色氨酸。

1.4 菊芋渣蛋白功能特性评价方法

1.4.1 蛋白质持水性评价方法

蛋白质持水性是指配制一定浓度的蛋白质水溶液，经离心分离后，蛋白质中残留的水分含量。取0.5g样品和4mL水放入10mL刻度离心管中，用细金属丝搅拌混合1min，使样品分散在水中，40℃水浴30min，在500r/min离心25min，读出游离水的体积，按下式计算持水性：

WHC=(4-游离水体积)/0.5

1.4.2 蛋白质吸油性评价方法

准确量取2.0mL色拉油，放入5mL的刻度离心管，再称取0.3g样品加入离心管中，用玻璃棒搅拌1min，静置30min后，用3000r/min的速度离心5min，记下游离油的体积，则吸油性计算如下：

吸油性=(2.0-游离油的体积)/0.3

1.4.3 蛋白质溶解性评价方法

制取菊芋渣蛋白质溶液(浓度1%)，调节p H值7.0，在不同温度下水浴30min, 3000r/min离心10min，测定上清液蛋白质含量。

菊芋渣蛋白质的溶解性PDI=溶于水中的蛋白质质量/蛋白质质量×100%

1.4.4 蛋白质乳化性和乳化稳定性评价方法

称取不同质量的菊芋渣蛋白粉溶解到20mL蒸馏水中，调节p H值7.0，加入20mL植物油，在2000r/min匀浆1min，移入10mL离心管中，离心(1200r/min) 5min，记下乳化层高度，按下式计算乳化能力：

乳化能力=被乳化层高度/离心管中液体总高度×100%

乳化稳定性的测定：将以上乳化样品置于80℃水浴中加热30min，再于自来水中冷却15min，于离心机中(1200r/min)离心5min，则乳化稳定性如下计算：

乳化稳定性=仍保持乳化状态的液层高度/原乳化层高度×100%

1.4.5 蛋白质起泡性及泡沫稳定性评价方法

称取3g样品加50mL去离子水，用0.1mol/L NaOH或HCl调p H值至7后搅拌10min，再加去离子水至100mL作为测试液，用电搅拌器快速(1000r/min)搅拌3min，立即记录上部出现的泡沫体积V0 (mL)，以此代表起泡性，静置30min后，再次记录其泡沫体积V30 (mL)，并计算其泡沫稳定性。按下式计算起泡性及泡沫稳定性：

起泡性(F.A)=V0/100×100%

泡沫稳定性(FS)=V30/V0×100%

1.4.6 菊芋渣蛋白等电点的测定

在最佳料液比、最佳碱提条件下，制备菊芋渣蛋白质溶液，分别调节p H值3.14、3.54、3.77、3.94、4.16、4.36、4.57、4.84、5.26，混匀，1000r/min离心5min，然后用考马斯亮蓝法测定上清液中蛋白质的含量。

2 结果与分析

2.1 菊芋渣和提取蛋白主要理化指标

2.2 鲜菊芋和菊芋渣蛋白氨基酸组成分析

注:﹡为必须氨基酸

鲜菊芋中共含有18种氨基酸(见表1)，鲜菊芋中氨基酸总量达1 446.91mg/100g，其中谷氨酸含量最高(242.1mg/100g)，其次是天门冬氨酸(187.7mg/100g)。谷氨酸在人体内可促进氮基丁酸的合成，从而降低血氨，促进脑细胞呼吸，可以用于治疗神经精神疾病，如精神分裂症和脑血管障碍等引起的记忆和语言障碍、小儿智力不全等。天门冬氨酸是一种良好的营养增补剂，可用于治疗心脏病、肝脏病、高血压症，具有防止和恢复疲劳的作用。由表1可知：鲜菊芋中人体必需的8种氨基酸含量为431.6mg/100g，必需氨基酸占总氨基酸的比值(EAA/TAA)为29.83%，必需氨基酸与非必需氨基酸的比值(EAA/NEAA)为42.51%。

菊芋渣蛋白中共含有18种氨基酸(见表1)，菊芋渣蛋白中氨基酸总量达22.86%，其中，谷氨酸含量也最高(2.91%)，其次也是天门冬氨酸(2.30%)。由表1还可知：菊芋渣蛋白中人体必需的8种氨基酸含量为10.87%，必需氨基酸占总氨基酸的比值(EAA/TAA) 为47.51%，必需氨基酸与非必需氨基酸的比值(EAA/NEAA)为90.66%，这与FAO/WHO提出的EAA/TAA比值为40%左右，EAA/NEAA为60%以上的参考蛋白模式相近，说明菊芋渣中蛋白质属于优质蛋白。

2.3 菊芋渣蛋白质的持水性

持水性是蛋白质在食品加工中，对原料中的水分以及添加到制品中参与加工的水分的保持能力。持水性的高低直接决定着制品的质地、风味和组织状态。

由表3可知：菊芋渣蛋白质持水性的影响因素依次为A>B>C;最佳条件为A3B2C3，即菊芋渣蛋白质浓度3%、温度60℃、时间1.5h。

2.4 菊芋渣蛋白质的吸油性

蛋白质的吸油性是指蛋白产品吸附油脂的能力。蛋白质的吸油性表现在促进脂肪吸收作用和控制脂肪吸收作用。吸油性与蛋白质产品的种类、来源、温度、加工方法等因素有关，而且也与所用油脂有关，本试验选用市售大豆色拉油来测定菊芋渣蛋白的吸油性。

由图1可知：当温度在60～80℃时，菊芋渣蛋白的吸油性逐渐增大，到70℃时，菊芋渣蛋白吸油性最大，可能是由于碱法提取菊芋渣蛋白质过程中，蛋白质的疏水性基团暴露出来，疏水性增强，变性程度增高。当温度到达80℃时，菊芋渣蛋白质的吸油性最低。当温度在80～100℃时，吸油性又逐渐增大，90℃以后，变化趋势趋于平缓。

2.5 菊芋渣蛋白质的溶解性

由图2可知：菊芋渣蛋白质的PDI在温度为60℃时最大，60℃以上PDI开始下降，70℃以后变化不大。由此可见，60℃是菊芋渣蛋白质开始变性的临界温度。

2.6 菊芋渣蛋白质乳化性和乳化稳定性

蛋白质具有乳化剂的特征结构，即两亲结构，在蛋白质分子中同时含有亲水基团和亲油基团，能够降低水和油的表面张力。因此，蛋白质聚集于油-水界面，使其表面张力降低，促进形成油-水乳化液。形成乳化液后，乳化的油滴被聚集在其表面的蛋白质所稳定，形成一种保护层，这个保护层可以防止油滴聚积和乳化状态破坏。同时，蛋白质还能降低水和空气的表面张力，即蛋白质的乳化稳定性，使蛋白质、水和脂肪乳胶体稳定。

由图3可知：随着蛋白质浓度增大，界面膜的厚度增加，从而提高了膜的强度，增加了乳化性。当蛋白质浓度高于2%时，乳化性趋于稳定。菊芋渣蛋白质乳化稳定性在浓度为2%～4%范围内变化不大。

2.7 菊芋渣蛋白质起泡性与泡沫稳定性

由图4可知：菊芋渣蛋白质的起泡能力随其浓度增高而增大，泡沫稳定性在浓度为3%时最高。超过3%时起泡性和泡沫稳定性随浓度升高而下降，其原因可能是蛋白质浓度过高时，扩散速度快，拉伸形成的新界面能迅速得到蛋白质的覆盖，减弱泡沫粗化、稳定性降低。

2.8 菊芋渣蛋白等电点测定

由图5可知：pH值在4.0左右时，上清液中蛋白的量最低，这说明菊芋渣蛋白的等电点在4.0左右。当pH值达到5.2左右时，菊芋渣蛋白基本上全部溶解。

3 结果与讨论

(1)鲜菊芋中，总氨基酸含量为1446.91mg/100g。菊芋渣蛋白中，总氨基酸含量为22.86%。鲜菊芋中人体必需的8种氨基酸含量为431.6mg/100g，必需氨基酸占总氨基酸的比值(EAA/TAA)为29.83%，必需氨基酸与非必需氨基酸的比值(EAA/NEAA)为42.51%。菊芋渣蛋白中人体必需的8种氨基酸含量为10.87%，必需氨基酸占总氨基酸的比值(EAA/TAA)为47.51%，必需氨基酸与非必需氨基酸的比值(EAA/NEAA)为90.66%。

(2)菊芋渣蛋白的功能特性为：在其浓度3%、60℃、1.5h条件下持水性最好;蛋白质吸油性在80℃时最低，为5.10 mL/g;其蛋白质分散指数(PDI)在60℃时最大，60℃以上PDI开始下降，70℃以后变化不大;菊芋渣蛋白质起泡性在浓度为3%时最高，泡沫稳定性在浓度为3%时最大;其乳化性在浓度为2%时最大，静置的温度对乳化稳定性影响很小。

(3)菊芋渣蛋白等电点在4.00左右。

(4)本试验还表明，采用碱提酸沉的方法，从菊芋渣中提取蛋白质的方法，虽成本低，但所得产物纯度不高。要做菊芋蛋白肽生物活性等方面的研究，蛋白分离纯化工艺仍有待进一步研究。

(5)本试验结果表明：菊芋渣中蛋白质属于优质蛋白，但到目前为止，国内外对菊芋渣的研究未见报道，因此，为了充分开发利用菊芋渣蛋白这一植物蛋白资源，仍需加大科研力度，完善菊芋蛋白提取分离基本理论和方法，满足工业产业化生产的要求。

参考文献

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[3]张丙云, 袁亚兰, 高瑜璟, 等.芸豆蛋白的营养价值和功能特性研究[J].食品工业科技, 2010, 31 (11) :347-350.

[4]石晓, 浮吟梅.花生蛋白持水性研究[J].粮油加工, 2006 (9) :56-58.

[5]张维农, 刘大川, 胡小泓.花生蛋白产品功能特性的研究[J].中国油脂, 2002, 27 (5) :60-64.

[6]刘大川, 张维农, 胡小泓.花生蛋白制备工艺和功能性的研究[J].武汉工业学院学报, 2001 (4) :1-3.

篇9：氨基酸分析法对蛋白定量的初步分析论文

关键词：固有无序蛋白质；功能位点；无序区；序列分析

中图分类号： Q516 文献标志码： A 文章编号：1002-1302（2014）04-0038-02

收稿日期：2013-08-23

基金项目：山东省自然科学基金（编号：ZR2010CQ041）。

作者简介：王红梅（1974—），女，山东德州人，硕士，副教授，主要从事生物信息学的研究。E-mail：whm_2327@126.com。蛋白质是生物体中最重要的两类大分子之一，传统思想认为蛋白质要实现其生物功能，必须先折叠成一个稳定的三维结构，因此形成了蛋白质结构决定其功能的主流观点[1]。然而随着基因工程方法和实验技术的发展以及基因组计划的开展，在20世纪90年代初，人们发现有些蛋白质或蛋白质序列中的一部分区域在生理条件下不具有一个确定的三维结构，但是依然能够正常行使生物学功能。进一步研究发现的这类蛋白质越来越多，并逐渐形成了一种新的蛋白质类型，称为固有无序蛋白质（intrinsically disordered proteins，简称为IDPs）[1-3]。对目前存在的大量基因库数据进行分析发现：蛋白质的无序结构与蛋白质功能之间关系密切，无序蛋白质在诸如转录、翻译、调控细胞信号转导、蛋白质磷酸化及小分子存储等过程中发挥着重要的作用；另一方面，无序蛋白质又经常与多种疾病联系在一起。与人类癌症相关的蛋白质中，无序蛋白质的含量高达79%；在心血管疾病有关的蛋白质中，无序蛋白质的含量也高达57%。无序区是固有无序蛋白质发挥功能的主要区域，功能位点大多分布在该区域，因此预测蛋白质的无序区成为判断蛋白质是否无序的热点问题。Romero 等在1997年首次对蛋白质无序区域进行预测，他们预测的准确性达到70%，此后无序蛋白质的预测方法得到了迅速发展，目前应用于无序蛋白质序列预测的方法已经超过50种，并且这些预测方法的准确性普遍达到85%以上。

本研究基于序列分析的方法，以DisProt数据库中的固有无序蛋白质为研究对象，通过CD-HIT程序对数据进行去冗余处理，将处理后的数据利用编程软件Matlab 7.0进行统计而得到新的数据；对新数据进行分析，通过编程把序列的无序区和有序区分别提取出来，再分析无序区和有序区氨基酸组成的偏好性。本研究有助于进一步挖掘固有无序蛋白质的序列特征，从而为固有无序蛋白质的预测提供借鉴。

1数据来源及去冗余处理

1.1数据来源

本研究以固有无序蛋白质数据库DisProt（版本6.01）[4]（http：//www.disprot.org/index.php）為研究对象（发布日期为2012年10月15日），下载数据库中最新的固有无序蛋白质进行研究，共有无序蛋白质684个，无序区1 513个。

1.2去冗余处理

由于蛋白质序列数据库中都含有大量的冗余序列，它们通常不能提供更多的信息，而且不利于数据的统计分析，并且由于冗余序列要占用更多的计算机存储和处理资源，因此去除这些冗余信息具有很高的实用价值，不但可以减小数据库的大小、提高序列搜索的速度，而且有助于对数据的统计分析。本研究利用去冗余程序CD-HIT[5-6]（http：//weizhong-lab.ucsd.edu/cdhit_suite/cgi-bin/index.cgi）对数据进行处理，将相似度阈值设为30%。结果显示：去冗余前，固有无序蛋白质共有684条序列；去冗余后，蛋白质共有549条序列。

2固有无序蛋白质无序区和有序区的氨基酸组成偏好性分析

用Matlab编程对全部序列（去冗余后）提取无序区和有序区。无序区包括112个全部无序区（如DisProtDP00001，108个氨基酸都是无序的）以及非全部无序蛋白质（蛋白质中含有无序片段）序列中的各条无序区；无序区的氨基酸总数为64 243，约占固有无序蛋白质氨基酸总数的28.67%。因此可以看出：固有无序蛋白质中有序区的氨基酸数大约是无序区氨基酸数的3.5倍。结果表明，固有无序蛋白质的氨基酸在有序区的含量要大大高于无序区，即固有无序蛋白质的大部分组分都是有序部分。

对固有无序蛋白质中的所有无序区及有序区的氨基酸个数和含量进行对比，以分析每种氨基酸的偏好性。通过 Matlab 软件进行处理得到了固有无序蛋白质中的无序区和有序区的所有氨基酸含量及差值，详见表1。

3结论

本研究以DisProt数据库中的固有无序蛋白质为研究对象，先通过程序CD-HIT对数据进行去冗余处理，然后利用编程软件Matlab7.0对数据进行统计而得到新的数据，再对数据进行分析。结果表明：氨基酸Val、Ile、Leu、Phe、Trp、Asn、Tyr、His具有形成有序结构的偏好性；氨基酸Pro、Ser、Gln、Asp、Lys具有形成无序结构的偏好性。

无序蛋白质具有独特的氨基酸组成特点，这些独特的氨基酸序列决定了其无序的结构。无序蛋白质的研究将促进人们重新认识蛋白质的结构和功能关系，也将为蛋白质的全新设计和疾病的治疗提供新的思路。相信随着研究数据的增加，对固有无序蛋白质的研究将更深入和全面，从而能够进一步加深对这类蛋白质的认识。

参考文献：

[1]Uversky V N. Natively unfolded proteins：A point where biology waits for physics[J]. Protein Science，2002，11（4）：739-756.

[2]Dunker A K，Obradovic Z，Romero P，et al. Intrinsic protein disorder in complete genomes[J]. Genome Informatics，2000，11：161-171.

[3]Dunker A K，Oldfield C J，Meng J，et al. The unfoldomics decade：an update on intrinsically disordered proteins[J]. BMC Genomics，2008，9（S2）：12-18

[4]Sickmeier M，Hamilton J A，LeGall T，et al. DisProt：the database of disordered proteins[J]. Nucleic Acids Research，2007，35（S1）：786-793.

[5]Li W，Godzik A.Cd-hit：a fast program for clustering and comparing large sets of protein or nucleotide sequences[J]. Bioinformatics，2006，22（13）：1658-1659.

[6]Li W，Jaroszewski L，Godzik A. Clustering of highly homologous sequences to reduce the size of large protein databases[J]. Bioinformatics，2001，17（3）：282-283.

[7]黄永棋，刘志荣. 天然无序蛋白质：序列-结构-功能的新关系[J]. 物理化学学报2010，26（8）：2061-2072.刘思言，高玮，夏海丰，等.

篇10：氨基酸分析法对蛋白定量的初步分析论文

资料与方法

2013年11月-2014年12月收治CKD患者102例, 所有病例符合美国肾脏基金会-慢性肾脏病临床实践指南 (NKF-K/DOQI) 关于CKD的诊断标准[4], 年龄3~12岁, 男50例, 女52例。正常标本来自我院健康体检中心30例健康儿童。

检验仪器:两组标本均采用贝克曼DXC 800全自动生化分析仪。

方法:所有测试对象留取标本期间忌食高蛋白及避免剧烈运动, 于2 d内留取晨尿、随机尿和24 h尿。具体留尿方法:患者第1天留取晨尿, 然后将之后24 h的尿液都收集在同一个容器中, 记录24 h总的尿量。再在第2天的上午留取1次随机尿。正常人标本来自30例健康儿童, 尿蛋白定性试验阴性, 留取随机尿测定尿蛋白与肌酐比值。24 h尿标本、晨尿和随机尿标本均当天测定。

统计学分析:采用SPSS 11.0统计软件进行统计学分析与处理、绘制ROC曲线, 并做相关分析和t检验, 以P<0.05为差异有统计学意义。

结果

晨尿尿蛋白/肌酐与随机尿尿蛋白/肌酐相关性的分析:102例肾脏疾病患者对其晨尿尿蛋白/肌酐与随机尿尿蛋白/肌酐检验结果进行t检验, 结果显示, 差异无统计学意义 (P>0.05) , 见表1。

尿蛋白/肌酐诊断价值评价:据NKF-K/DOQI指南, 尿蛋白诊断标准为尿蛋白/肌酐>0.2 g/gcr。本试验30例健康者随机尿蛋白/肌酐均<0.2 g/gcr, 所有受试者随机尿尿蛋白/肌酐均>0.2 g/gcr。分别以24 h尿蛋白定量≥1 g及≥3 g为诊断大量蛋白尿的界值, 采用ROC曲线进行分析。随机尿尿蛋白/尿肌酐为0.93 g/gcr时的诊断效能与1 g/24 h的诊断效能相当, 此时诊断的敏感性和特异性分别为92.3%和84.7%;随机尿尿蛋白/肌酐2.59g/gcr时的诊断效能与3 g/24 h的诊断效能相当, 此时诊断的敏感性和特异性分别为96.1%和90.8%。

讨论

蛋白尿是肾脏疾病的一个较为主要的临床表现之一, 而且尿蛋白与肾功能有着较为紧密的联系, 在临床上尿蛋白定量是对肾脏疾病进行诊断以及疗效评估的一个比较重要的实验室指标。24 h尿蛋白定量对病理性蛋白尿的诊断有着较为重要的临床意义, 但是留尿较为繁琐且影响因素众多, 易对检验结果造成影响。

尿蛋白与肌酐比值可反映尿蛋白的排出。国外多数研究结果均提示尿蛋白/肌酐可以用来监测尿蛋白排泄情况[5]。美国NKF-K/DOQI也建议用随机尿和晨尿尿蛋白/肌酐替代24 h尿蛋白定量, 且有很多文献相继报告了糖尿病肾病、妊娠、狼疮性肾炎及肾移植时采用尿蛋白/肌酐比值进行监测的可行性[6,7]。

本研究观察了102例肾脏患者24 h尿蛋白与晨尿尿蛋白/肌酐与随机尿尿蛋白/肌酐之间的相关性。发现晨尿尿蛋白/肌酐与随机尿尿蛋白/尿肌酐之间无相关性, 即对于肾脏患者来说, 两种留尿的方式对检验结果差异无统计学意义 (P>0.05) 。

本研究采用客观的ROC曲线分析方法, 确定了相当于24 h尿蛋白定量1 g及3 g的诊断界点, 其分别为0.93 g/gcr和2.59 g/gcr, 此时敏感性和特异性达到最佳, 与国外报告的尿蛋白/肌酐诊断界值1 g/gcr及3 g/gcr稍有差异。因此, 尿蛋白/肌酐比值可以反映肾脏病患者尿蛋白的排泄量, 但部分专家认为虽然尿蛋白/肌酐是个较为有效的筛选方法, 但是不能完全摒弃24 h尿蛋白定量的方法。

参考文献

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篇11：对2006年物价走势的定量分析

一、当前物价形势的基本分析

据国家统计局最新统计数据，2005年我国经济保持9.9%的增长速度，CPI与2004年相比上涨1.8%，2005年全年经济总体上呈现出“高增长、低通胀”的态势。但从其它价格指数来看，除居住价格保持近三年较高位置外，其余价格指数都在逐步走低，其中包括GDP平减指数呈下降趋势，人们对通货紧缩的担忧并非毫无根据。

在分项消费价格指数中，居住价格指数2005年与2004年同期相比仍有一定幅度上涨，而粮食消费价格与食品消费价格呈明显下降趋势。

在原材料和工业品出厂价格指数中，原材料、燃动力购进价格指数、工业品出厂价格指数与生产资料价格指数分别从年初增长10.7%、5.8%和7.5%下降到11月的5.4%、3.2%和－1.2%，其中生产资料价格指数已跌到近3年来的最低水平，2005年11月与12月的增幅分别为－0.2%和－1.9%，已经是负增长。

尽管我国已逐渐从温饱阶段向小康社会迈进，但农业生产对国民经济的影响依然很大，2004年与2005年连续两年农业丰收，使得农产品生产价格开始下降，其中粮食生产价格跌幅较大，这也是近期粮食消费价格与食品消费价格下降的主要原因。据国家统计局最近对全国31000个农业生产经营单位的生产价格调查，2005年3季度全国农产品生产价格比去年同期下降0.3%，是2002年4季度以来的首次下降。其中，种植业、林业和渔业产品价格分别上涨0.6%、4.4%和3.8%，畜牧业下降3.2%。粮食生产价格下降3.2%，跌幅较2季度加大2.7个百分点。

房价虽未纳入消费价格计算范围，但房价的涨跌对居民消费价格的影响较大，现阶段多数居民购房是为了改善本身的居住条件而不是为了投资，因此房价高企在一定程度上抑制和削弱了居民其它方面的消费。2005年底国家统计局数据表明，2005年 10月与11月份房屋销售价格同比分别上涨6.6%、6.8%，涨幅比9月份分别提高了1.1%和1.3%。11月份，新建商品住房销售价格同比上涨8.3%，涨幅比10月份上升1.1%，环比上涨0.6%，涨幅与上月持平；二手住房销售价格同比上涨6.5%，环比上涨1.7%，涨幅分别比10月上升0.4%和1.3%。与此同时，房屋租赁价格涨幅略有上升。2005年3季度房屋租赁价格比2004年同季上涨2.1%，涨幅比2季度高0.2%。

综合当前价格形势的基本分析，无论是上游的工业品出厂价格指数、生产资料价格指数还是下游的消费品价格指数增幅均呈下降趋势，通货紧缩的压力的确存在。

二、影响物价变化的因素分析

虽然2005年底物价全线位于低谷，但2006年走势存在众多变数，上涨、下跌因素并存。为了更好地判断2006年物价走势，现从影响促进物价上涨与下跌两方面因素抑制上涨进行深入分析。

（一）促进物价上涨因素分析

1．消费增速的提高推动物价上涨。2005年在物价增幅下降的同时，全年经济增长仍保持9.9%的速度。社会消费品零售总额比上年增长12.9%，扣除价格因素，实际增长12.0%，实际增速比上年加快1.8个百分点，达到1997年来的较高水平。消费增长与CPI升降变化几乎同步，但消费增长与物价增长之差在扩大。从长期而言，消费合理增长有利于保持物价稳定。

2．货币供应量的较快增长拉动物价上涨。2005年，广义货币M2增长速度呈上升势头，从年初的13.6%上升到11月末的18.3%，增幅提高了4.7%；金融机构贷款增长先抑后扬，增速从1月末的14.2%下降到5月末的12.4%，然后又上升到年底的17.6%，全年小幅波动。广义货币M2与金融机构贷款是CPI的先行指标，先行周期一般在8—10个月之间。按照宏观经济学的基本原理，货币供应量目前的增长势头将拉动未来CPI的上涨。

3．投资推动价格上涨。虽然在国家宏观调控的影响下，固定资产投资过热得到遏制，但投资反弹的压力依然存在。自2005年6月以来，城镇固定资产投资累计同比增长速度已连续7个月在27%以上，并有逐月加快的趋势。与此相对，2005年1—11月份，城镇固定资产投资中累计施工50万元以上的项目达到230249个，比上年同期增加35733个；施工计划总投资同比增长28.2%。城镇新开工50万元以上项目160758个，同比增加29209个，新开工项目计划总投资同比增长28.1%。新增项目的投产必将继续加大生产资料的消费需求，会对上游生产资料价格和原材料与燃动力购进价格带来上涨的压力。

4．服务价格存在潜在的上涨因素。2005年1—11月份服务项目价格涨幅比上年同期上升了1.2%。在此期间，居住类和服务项目价格涨幅均有所提高，对CPI的拉动作用显著增强，两类价格合计对CPI的拉动作用达到1.53个百分点，比上年同期提高了0.37个百分点。今后，我国公共服务品价格形成机制将日趋完善，公共服务品价格与其它价格的关系也将逐步理顺。当前，医疗、教育、公共交通等服务价格存在上涨的潜在空间，服务价格的上涨将是促进CPI上升的主要动力之一。

5．资源性产品价格有上涨趋势。2005年煤、电、油、运的紧张状况较2004年虽有所缓解，但资源紧缺是制约我国经济长期稳定、健康发展的一个根本性矛盾。目前国内资源性产品价格过低，而且石油与成品油价格没有与国际接轨，不能真实反映资源稀缺和市场供求关系，适当的提高资源性产品的价格可使资源得到更有效的配置。因此未来公共资源性产品如水、电、油、气和煤炭价格将呈现一定的上升趋势，资源产品价格的上涨必将带动工业品价格乃至居民消费品价格的上涨。

6．国际市场原材料价格较高。虽然目前国际原油价格与前几个月相比已经下降，但我国原油、成品油以及铁矿砂及其精矿进口价格一直在历史最高位徘徊。我国40%左右的石油缺口依赖进口，大宗资源和原材料短缺势必导致工业生产成本增加，成本推动物价上涨的动力有增无减。

（二）物价下跌因素分析

1．居民收入增长缓慢。尽管城乡居民收入近2年来始终保持增长，但增速缓慢。2005年全年城镇居民人均可支配收入10493元，扣除价格因素，比上年实际增长9.6%，增幅比上年提高1.9个百分点；农民人均纯收入3255元，实际增长6.2%，增幅回落0.6个百分点。另一方面，我国社会保障体系还不健全，居民除必要的生活消费支出外，支出余额大多用于储蓄，使得居民潜在的消费能力没有得到充分释放，有效需求不足是抑制物价上涨的重要因素。

2．投资过度行业产能过剩导致产品价格下降。投资过度行业的产能过剩从2005年开始显现，相关产品价格相继下降。截至2005年底，钢铁、水泥、炼焦、有色金属和汽车等行业的经济效益全面滑坡，企业亏损额急剧上升。与2004年全年相比，钢铁行业利润与上年同期基本持平，但行业亏损额增加81%；水泥行业利润同比下降38.7%，行业亏损额增长73.78%；炼焦行业利润同比下降41.33%，行业亏损额增长532%；有色金属行业利润同比增加38.9%，增幅下降31%，行业亏损额增长44.7%；汽车行业利润同比下降24.2%；行业亏损额增长41%。工业企业效益的下滑不利于经济健康发展，也将抑制物价上涨。

三、物价景气指数分析

对未来价格指数走势的预测与判断不仅要分析当前各类物价指数的变化，而且还要分析产生物价波动的因素以及物价变化的规律。为此，我们利用景气指数方法，通过构建基于CPI为基准指标的价格先行合成指数和扩散指数，研究物价的波动周期和变化规律。通过定量计算得出，“工业增加值月度同比增长率”、“生产资料价格指数”、“工业品出厂价格指数”以及“狭义货币量M1月末同比增长率”四项经济指标是较好的先行指标，它们的波动转折点大约领先CPI 6—8个月，以此构建的先行合成指数与扩散合成指数分别见图１与图２。

从图１、图２中的CPI一致合成指数与先行合成指数、扩散指数以及各项分类价格指数可以看到，目前物价走势确实处于新一轮经济周期的最低点，一致扩散指数2005年末位于底谷，而且直观上CPI一致合成指数与先行合成指数还有继续下降的趋势，但就其指数值而言仍保持着1997年下半年以来相对较高的位置，而CPI先行扩散指数2005年内有所回升，年末在位于50%线上下波动，也预示着价格指数的先行指标中有涨有跌，反映出未来的物价走势“通胀”与“通缩”相互交织，这正是当今学界关于“通胀”与“通缩”会争论不休的根本原因。通过分析物价涨跌的各类因素，我们认为，2006年物价上涨因素多于物价下跌因素，特别是服务类价格、资源性产品价格以及国际原材料价格存在巨大上涨空间，由此将带动生产成本的提高和整体物价的上涨。受城乡居民收入增长缓慢以及2005年企业经济效益下滑的影响，2006年物价又难以形成大幅上涨势头，全年将保持小幅平稳上涨。

四、2006年物价指数走势预测

作者曾于2005年9月，以VAR模型以及GARCH模型对2005年底的居民消费物价指数(CPI)、生产资料价格指数等价格经济指标进行过定量预测。５个月过去，当初预测的物价及经济走势与统计局公布的数据十分接近。现利用最新数据，对2006年各类物价指数重新进行预测，结果见表1。

预测结果表明，2006年全年居民消费物价上涨1.97%，继续保持低通胀的走势，但全年物价将逐渐回暖，下半年CPI整体高于上半年。

商品零售价格走势与居民消费物价保持了高度的正相关性，但升幅小于居民消费物价。居民收入增长缓慢，消费动力不足，难以对零售物价起到拉升作用。2006年全年商品零售价格将上涨0.60%，下半年商品零售价格增幅整体高于上半年，显示零售物价也将呈现回暖迹象。

其它价格指标预测结果显示，生产资料出厂价格、原料购进价格、重工业产品价格2006年将分别上涨7.9%、9.5%、11.5%。投资拉动以及原油、成品油、铁矿砂及其精矿、电等能源价格的持续上涨，使得生产资料类价格将面临着不小的上涨压力。

2006年生产资料出厂价格指数、原料购进价格指数、重工业产品价格指数等上游物价指数步调基本一致，同涨同跌。这三个指标将止住一年多来的跌势，在经过年中的回落后稳步攀升。上游指标的回升可能预示着CPI的下一波行情（2007年）看涨，而不会持续走低。

2006年我国物价上涨与下跌因素相互并存，始终制约着物价走势。根据综合分析和计量模型预测结果判断，我们认为2006年我国消费类物价将温和增长，生产类物价稳步回升，但都处于正常范围，不会出现大的通胀和紧缩。预计2006年下半年CPI整体高于上半年，全年CPI为1.97%；生产资料出厂价格、原料购进价格、重工业产品价格也呈前低后高的态势，全年将分别上涨7.9%、9.5%、11.5%。