艾滋病检测实验室基本标准

关键词： 实验室 检测 艾滋病

艾滋病检测实验室基本标准（通用8篇）

篇1：艾滋病检测实验室基本标准

全国艾滋病检测工作管理办法

附：艾滋病检测实验室基本标准

二、艾滋病检测确证实验室

(一)人员条件。至少由5名医技人员组成，其中专职人员至少2名，具有副高级卫生技术职称人员至少1名。负责确证试验的技术人员需具有3年以上从事艾滋病病毒抗体检测工作经验、接受过省级以上艾滋病检测技术培训，并获得培训证书。

(二)建筑条件。需有独立的血清学检测实验室，分为清洁区、半污染区和污染区，符合二级生物安全实验室(BSL-2)要求。根据需要可设置核酸检测、免疫学检测等建筑区域。

(三)仪器设备条件。配备血清学检测和二级生物安全实验室(BSL-2)所需仪器设备，至少包括酶标读数仪、洗板机、普通冰箱、低温冰箱、水浴箱(或温箱)、离心机、旋转震荡器、摇床、加样器(仪)、专用计算机和必要的摄像器材、消毒和污物处理设备、实验室恒温设备、安全防护用品和生物安全柜。具有建立血清库和数据库的设备条件。

三、艾滋病检测筛查实验室

(一)艾滋病筛查中心实验室及艾滋病筛查实验室。

1、人员条件：至少由3名医技人员组成，其中具有中级卫生技术职称人员至少1名。负责筛查试验的技术人员需具有2年以上从事病毒性疾病血清学检测工作经验，接受过省级以上艾滋病检测技术培训，并获得培训证书。

2、建筑条件：实验室或检测区域应分为清洁区、半污染区和污染区，应符合二级生物安全实验室(BSL-2)要求。

3、仪器设备条件：配备艾滋病病毒抗体筛查试验所需设备，至少包括酶标读数仪、洗板机、普通冰箱、水浴箱(或温箱)、离心机、加样器(仪)、消毒与污物处理设备、实验室恒温设备、安全防护用品和生物安全柜。

(二)艾滋病检测点。

1、人员条件：至少由2名经过艾滋病检测技术培训并获得培训证书的专业人员组成。

2、建筑条件：需有艾滋病检测区域或专用实验台，能开展简便、快速检测。

3、设备条件：需配备快速试验所必须的物品，包括普通冰箱、消毒与污物处理设备、一次性消耗品、安全防护用品。

篇2：艾滋病检测实验室基本标准

一、人员要求：

有3名以上的医技人员，其中中级技术职称人员1名以上（采供血机构从事HIV抗体检测人员须具有技师以上卫生技术职称）；从事病毒血清学检测技术工作2年以上；接受过省疾病预防控制中心艾滋病确认实验室举办的HIV抗体检测技术培训，并获得合格证书。

二、设备要求：

（一）有独立的实验用房，实验室墙面、地板及工作台面必须采用耐酸、耐碱材料，工作台面上方按规定安装紫外灯。实验室内污染区和清洁区标志明显，易于区分。

（二）具有从事艾滋病抗体检测工作所必需的仪器设备并能正常使用，通过强制性计量检定合格。

仪器设备包括：

1、酶标读数仪和洗板机各1台；

2、可调精确微量移液器（10—50ul;50—250ul;1000ul）各2支；

3、普通冰箱1台；

4、低温冰箱1台；

5、离心机1台；

6、恒温培养箱或水浴锅1台；

7、恒温空调设备1台以上；

8、相应的消毒与污物处理设施。

（三）所用检测试剂齐全,符合国家质量要求，并经国家药品监督管理局批准，有批准检验号和注册文号，经过检定合格且在有效期内。

三、实验室质量管理

（一）实验室工作管理制度健全并上墙。包括：样品采集运送与保存制度，样品处理制度，实验室消毒隔离制度，检测仪器使用、保管与维护制度，安全和事故处理制度，实验操作规程等，并遵照执行。

（二）仪器设备有专人管理。千元以上仪器设备建卡，万元以上仪器设备建档（包括使用说明书，使用、维护记录等，并按照计量检定的规定进行检定且有检定证书）。

（三）采用国家和省艾滋病抗体检测确认实验室规定的检测方法进行检测，遵守操作规程，不得自行更改检测方法及操作规程。

（四）检测所用的仪器、试剂必须采用国家推荐的产品，不得使用过期试剂或劣质品牌试剂。

（五）原始记录有专用记录本。记录内容包括：送样单位（样品来源）、样品名称、收（采）样日期、送（采）样人；被采样人姓名、性别、年龄、职业、国籍或民族、住址；检测日期、检测方法、所用试剂名称及厂家、批号、有效期；空白、阴性和阳性及样品检测所呈现现象及结果等；

（六）原始记录书写规范。要用钢笔或签字笔，不得用铅笔和圆珠笔书写，字迹清晰。如记录有错误应在错误处划2条横线，在其上方写下纠正文字，不随意涂改、删减，不得在其它纸上记录然后再誊抄。

（七）检测报告按照《全国艾滋病检测工作规范》中规定的“HIV抗体初筛阳性送检化验单”统一格式填写，检验人员签名齐全，文字简洁，字迹清楚。检测报告书由检验人员填写或打印。

（八）原始记录和检验报告书必须经同一检测室的审核人员审核签字，由检测机构负责人终审签字发出。

四、检测资料的档案管理

检测技术资料完整，原始记录及有关资料随检测报告书编号按顺序存档。

五、考核方法

篇3：艾滋病病毒抗体的实验室检测方法

1 筛查试验方法

筛查试验主要包括酶联免疫吸附试验 (ELISA) 、免疫斑点试验、免疫层析试验和凝集试验等方法, 后3种方法是为提供自愿咨询检测 (VCT) 的需求使用的简单而快速的试验方法。

1.1 ELISA试验

这种方法是使用最早, 也是最常用的HIV抗体筛查方法。目前, 试剂已经发展到第四代。

第一代试剂于1985年开始在美国使用, 主要用于献血员的筛查。试剂使用的抗原是完全病毒的裂解产物, 采用间接ELISA试验检测抗体。由于抗原常常含有细胞培养的蛋白成分而出现较多假阳性反应, 使特异度降低;而提高特异度的措施是稀释标本, 反而又使敏感度下降。同时, 抗原制备和纯化较困难, 危险性较大。

1990年, 第二代ELISA试剂使用重组或合成多肽抗原, 仍采用间接ELISA试验检测抗体, 能同时检测HIV-l和HIV-2。由于选择、使用了重要的抗原决定簇, 特异度和敏感度都有所提高, 抗原制备更加安全、容易, 重复性也较好。但是, 由于重组抗原有时含有载体的组分, 出现假阳性反应;多肽抗原缺乏合适的立体构象, 可能使敏感度下降。

1992年, 美国研制出第三代试剂, 与第一代和第二代试剂的检测方法不同, 采用双抗原夹心法检测抗体。这种试剂可以检出针对HIV抗原的所有抗体亚型, 不需要过度稀释标本保证特异度, 相对第二代试剂敏感度有所提高, 但还存在漏检现象。

第四代试剂是新发展起来的HIV抗原、抗体联合检测试剂, 可同时检测HIVP24抗原和HIV-1和HIV-2抗体。同时, 试剂的敏感度提高了, 缩短了窗口期, 减少急性感染者窗口期漏检, 降低了血源筛查的残余危险度。与第三代试剂相比, 第四代试剂可提前1～2周作出诊断。目前国内主要使用第三代试剂, 少数使用第二代试剂。

1.2 免疫斑点试验

免疫斑点试验通过使用硝酸纤维素膜为截体, 将HIV抗原滴在膜上成点状, 即为固相抗原。如果待测血清标本中存在HIV抗体, 即可与HIV抗原发生免疫反应, 形成的抗原抗体复合物可以与酶标记的抗人免疫球蛋白结合, 阳性结果在膜上抗原部位显示出肉眼可见的有色斑点。该方法具有反应时间短 (10min内) , 抗原用量少的优点。

1.3 免疫层析试验

该方法是在硝酸纤维素膜的加样区包被用特殊材料标记的 (通常用金或硒标记) 的HIV抗原, 在检测区和对照区包被重组或多肽HIV抗原。如果被检测标本中含有HIV抗体, 则样品中的抗体首先与标记的抗原结合, 发生抗原抗体反应形成复合物, 该复合物由于层析作用向前移动, 与包被在检测区的抗原结合, 形成标记HIV抗原-HIV抗体-重组多肽HIV抗原抗体复合物而显色。免疫层析试验大部分为一步法, 操作简便, 结果容易判定。

结果判断:检测区和对照区各出现一条红线, 被认为是HIV抗体阳性;只在对照区出现一条红线, 被认为是HIV抗体阴性;没有条带出现, 则认为试验无效。

少数免疫层析试剂在固相载体的不同部分包被不同的抗原来检测HIV-l M群和O群以及HIV-2抗体。该方法可以用血清、血浆或尿液检测, 检测时间为5min, 阳性结果一般在2min左右出现, 弱阳性结果5min左右出现;该方法适合基层医院快速筛查, 对不同基因型的区别有助于流行病学调查。

1.4 凝集试验

凝集试验将明胶颗粒、乳胶颗粒或自身红细胞等作为固相载体, 通过被HIV抗原致敏的固相载体与抗体发生免疫反应, 根据固相载体在孔中的凝集情况, 来检测标本中的HIV-1/2抗体。凝集试验操作时不需要仪器设备, 操作人员不需要很强的实验操作能力和结果解释能力。但是, 由于每次操作需要U板、样品、致敏和末致敏颗粒, 需设立阳性对照, 需要按要求稀释, 孵育时间长达2h等原因, 目前尚不能再基层医疗单位得到广泛应用。

另外, 唾液、尿液等生物材料也可以用于HIV抗体的检测。如艾滋病唾液检测卡, 在硝酸纤维素膜上包被人工合成的HIVgp41gp36蛋白抗原, 可同时检测含在唾液中的HIV-1/2抗体, 原理为酶免疫间接法。主要检测HIV IgA和IgG, 敏感度和特异度与ELISA相似, 避免了静脉穿刺;但样品预处理时间长, 且售价较高。尿液HIV-1抗体检测试剂在1996年由美国FDA首次批准, 主要用于静脉注射毒品人群和其他高危险人群的大规模流行病学调查。如我国赵立庆等[1]研究表明, CalypteTM尿液试剂盒的真阳性率为100%, 真阴性率为99.1%;与确认试验结果比较, 阳性符合率为100%, 可以作为快速筛查的方法。

2 确认试验方法

确认试验包括免疫印迹试验 (WB) 、线性免疫试验和免疫荧光试验等方法, 其中WB为最常用的方法 (金标准) 。

2.1 免疫印迹试验 (WB)

该方法通过对HIV不同抗原组分的分离以及浓缩和纯化, 能够检测针对不同抗原成分的抗体, 所以其敏感度一般不低于筛查试验, 特异度也很高。就HIV的病原诊断而言, 是目前使用最多的HIV抗体确认试验方法。但是, 尽管病毒经过浓缩和纯化, 但条膜上仍然可能含有病毒赖以生存的宿主细胞成分, 可出现非特异性反应, 大多出现在中分子量区域。因而, 这种方法的缺点是在某些情况下, 产生大量的不确定结果。

2.2 线性免疫试验 (LIA)

该方法将HIV不同型别和亚型的特异性抗原 (重组蛋白和合成肽) 以及质量控制带包被在一条尼龙膜条上, 用于检测样本中的HIV-1和/或HIV-2抗体。在检测抗体的同时, 还可以区分是HIV-1感染还是HIV-2感染。LIA可以减少WB出现的大量不确定结果。

2.3 免疫荧光试验

该方法以固定在玻片上的感染细胞内的HIV为抗原, 与待测血清反应后, 加入荧光素标记的抗人免疫球蛋白, 洗掉没有结合的荧光抗体, 在荧光显微镜下观察结果, 胞浆内出现特异性荧光而对照孔没有出现, 可判定为HIV抗体阳性。但该试验不宜在一般的实验室开展和应用。

HIV抗体检测工作应该按照《全国艾滋病检测技术规范》的要求, 在合格的实验室内进行, 要采取严格的质量保证、质量控制和质量评价措施, 注意实验室生物安全管理和防护, 注意职业暴露的预防, 严格遵守实验室标准操作程序, 防止样品间交叉污染, 切实保证样品检测质量。

我们坚信, 随着检验技术的快速发展, 将有更多的试剂和新方法用于HIV抗体检测, 使HIV感染者得以早期诊断。

参考文献

篇4：艾滋病的实验室检测及管理

【关键词】实验室；检测；管理

【中图分类号】R5 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2012）09-0337-01

艾滋病，又名“获得性免疫缺陷综合征”，从1981年美国诊断出全球首例患者至今的25年间，已有2500万人不治身亡，感染者达到3950万人，资料表明全球目前每8秒钟就新增1例感染者。这些感染者是如何通过实验室检测出来的？我们该怎样科学检测和管理呢？

1实验室检测

1.2免疫学检查　循环淋巴细胞显著下降，TH细胞减少，TH/TS小于0.1；T细胞功能下降，迟发型皮肤试验转阴，体外试验证明以非特异性有丝分裂原刺激时，T细胞反应降低，T细胞的细胞毒作用下降，产生白细胞介素2及a-干扰素下降。B细胞功能失调，多克隆性高球蛋白血症，对新抗原刺激不产生应有的抗体反应，自然杀伤细胞活性下降。

1.2HIV抗体检测目前，艾滋病病毒（HIV）的主要检测方法是做HIV抗体检测，它是诊断HIV感染者和艾滋病病人的主要指标。检测方法包括：1.酶联免疫吸附法（ELISA）；2.明胶颗粒凝集试验（PA）；3.免疫荧光检测法（IFA）；4.免疫印迹检测法（Western Blot，简称WB法）；5.放射免疫沉淀法（RIP）。其中前三项常用于筛选试验，后二者用于確证试验。HIV感染后数周或数日内常不能检出抗体，95%的受染者在5个月内可测出抗体。但也有感染后3-4年仍不能检出抗体者，此时有必要检测HIV病毒。

HIV抗体检测流程是：受检者先要到国家批准的有资质的艾滋病筛查实验室做筛查试验。需要说明的是，筛查实验室是不能发出HIV抗体阳性报告的。如筛查结果为阳性，需要用两种试剂复测，若复测两种试剂均为阴性，则报告“HIV抗体阴性”；若两种试剂均为阳性或一阴一阳，必须再将标本送到国家批准的艾滋病确证实验室做确证试验，如确证试验结果无法确证为阴性或阳性，则报告确证试验结果为“HIV抗体不确定”，一般要求在3个月的“窗口期”后复查，复查结果如果仍为不确定，必须再过3个月复查，最终结果仍为不确定或为阴性，则可排除受检者为艾滋病感染者。

2实验室管理

艾滋病检测实验室是艾滋病预防控制工作中的一个重要组成部分,其提供的检测数据是制定遏制艾滋病的传播流行措施的重要依据。至2006年底,全国共有初筛检测实验室6000多家,116家确证实验室。随着艾滋病检测面的不断扩大,艾滋病确证实验室无法完成更多的初筛检测任务,因而更多的初筛检测就由初筛检测实验室来承担。而对艾滋病初筛实验室进行规范化的管理是全面提高艾滋病初筛实验室的技术水平，提高检测质量，确保检测准确性的重要保证。

2.1加大对实验室硬件的投入，根据《全国艾滋病检测工作管理办法》对初筛实验室的建设条件和仪器设备进行资金的投入。保证实验室人员业务能力、设施环境等条件满足检测要求。

2.2健全和规范管理制度，根据《全国艾滋病检测工作管理办法》和《全国艾滋病检测技术规范》的要求，制定一系列管理制度，如样品的管理、职业暴露预防和处理制度、实验室安全措施、实验室工作制度等，并严格按制度执行。

2.3在初筛实验室引入先进的管理模式，实验室建立检测标准操作程序文件和实验室管理文档，建立检测数据库，制定废弃物管理及处理制度，使实验室的工作得到规范化的管理。

参考文献：

[1] 现代预防医学，[M]科学技术出版社，2011.

[2] 艾滋病的实验室检查，[J]中华检验医学杂志，2009.3.

篇5：艾滋病检测实验室基本标准

1、目的：

为了规范本卫生院艾滋病检测点的正常运行，保证艾滋病抗体检测的准确，确保实验室生物安全，特制定本操作规程。

2、适用范围：

适用于本卫生院艾滋病抗体检测从标本的采集、处理、检测到报告的全过程。

3、职责：

各检测工作人员按标准操作规程进行艾滋病抗体检测，本院艾滋病检测工作领导小组负责对检测活动全过程及各项生物安全措施执行情况进行监督。

4、标准操作程序：

4.1样品的采集和处理 4.1.1样品的采集：

4.1.1.1血清样品采集：用真空采血管抽取5mL静脉血，室温下自然放置1-2小时，待血清凝固和血块收缩后在用4000rmp离心15min，吸出血清备用。

4.1.1.2抗凝血样品采集：用加有抗凝剂的真空管或用消毒注射器抽取静脉血，转移至加有抗凝剂的试管，反复轻摇，分离血浆和血细胞备用。

4.1.1.3采样注意事项：

4.1.1.3.1采集样品应按临床采血技术规范及试剂盒说明书要求进行。

4.1.1.3.2采集标本时应注意安全，直接接触HIV感染者或艾滋病病人血液和体液的操作应戴双层手套。

4.1.2样品的保存：

用于抗体检测的血清或血浆样品应存放与-20℃以下，短期（1周）内进行检测的样品可存放于2-8℃。

4.1.3样品的运送：

4.1.3.1实验室间传递的样品应为血清或血浆，除特殊情况外一般不运送全血。样品应置于带盖的试管内，试管上应有明显的标记，标明样品的编号或受检者姓名、种类、采样时间。

4.1.3.2将试管放入专用带盖的容器内，容器的材料要易于消毒。在试管的周围垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。

4.1.4样品的接收：

4.1.4.1含有感染性样品的包裹必须在具有处理感染源设备的实验室内由经过培训的工作人员打开，用后的包裹应进行消毒。

4.1.4.2核对标本与送检单，检查样品管有无破损及遗漏。如发现遗漏应立即将尚存留的样品移出、对样品管和盛器消毒，同时还要报告有关领导和专家。

4.2检验方法和步骤

4.2.2快速检测法（胶体金法）4.2.2.1原理

采用胶体金免疫技术和层析原理，定性测定血清样本中的HIV1+2抗体。4.2.2.2操作步骤

4.2.2.2.1将标本平衡至室温。

4.2.2.2.2将所需数量的测试卡从包装盒中拿出平衡至室温，打开铝箔包装袋，平置于台面上并编号（与样本编号相对应）。

4.2.2.2.3用微量加样器取试剂说明书规定的样本血清或血浆，加到测试卡的加样处。4.2.2.2.4在试剂说明书规定的时间内观察结果。4.2.2.3结果判定：

4.2.2.3.1阳性：在检测区和对照区位置出现两条紫红色条带。如果检测区的条带隐约可见，建议对该样本重复试验，并使用其他厂家的试剂确认。

4.2.2.3.2阴性：只在对照区出现一条紫红色条带。4.2.2.3.3无效：对照区未出现紫红色条带。

4.2.2.3.4注意：在规定的时间内不论测试区内的色带颜色深浅与否均应判为阳性。4.3仪器的使用和维护

4.3.1设立常用仪器的维护制度，以保证正常运转；根据使用情况更换必要的部件： 4.3.2冰箱

定期检查温度并作好记录，必须每天检查和记录冷冻和冷藏室的温度。

4.3.3定期检查其他仪器设备。

4.4 HIV抗体筛查结果的记录、解释与报告

4.4.1筛查试验呈阴性反应出具HIV抗体阴性报告。

4.4.2筛查试验呈阳性反应，可出具“HIV抗体待复检”报告，不能出阳性报告。同时应尽快进行以下处理：

4.4.2.1填写HIV抗体筛查报告，经检测者、复核者和签发者审核签字。4.4.2.2尽可能重新采集受检者的血样。

4.4.2.3将二份血样（或仅原血样，特指无法采集受检者血样时）连同HIV抗体筛查报告一并送当地艾滋病筛查实验室。

4.4.2.5做好检测后咨询。4.5保密程序

4.5.1要有专人负责妥善保存各种实验记录，不得擅自修改和销毁。严格遵守保密制度，未经省级卫生行政部门许可，不得向无关人员或单位提供任何情况。

4.5.2检测的阳性结果不是最终结果，应及时做进一步确认，HIV抗体检测点不能出具HIV抗体阳性的结果报告，更不能告知受检者本人。

4.6实验室的清理和消毒 4.6.1带入和带出实验室的物品

4.6.1.1对所有带入实验室的物品都应进行检查。含有测试样品的包裹应在实验室的专用实验台上打开。

4.6.1.2将HIV测试样品转送其他实验室时，应防止对人员和环境的污染。护送样品的人应明确接收地点和接收人，实验室负责人或其指定的人员应及时确认样品已送达指定的实验室，被转入安全位置并得到妥善处理。

4.6.1.3污染或可能造成污染的材料在带出实验室前应进行消毒。4.6.2减少利器的使用

4.6.2.1尽量避免在实验室使用针头、刀片等利器，如果必须使用，在处理或清洗时应采取措施防止刺伤或划伤，并应对用过的物品进行消毒处理。

4.6.2.2最好不使用玻璃制品。

4.6.2.3尽量使用安全针具采血，如蝶形真空针，自毁性针具等，以降低直接接触血液和刺伤的危险性。应将用过的针头直接放入坚固的容器内，消毒后废弃。

4.6.3.实验室常用物品的消毒方法：

4.6.3.1废弃物缸：10%（v/v）次氯酸钠（含10000 ppm有效氯）。4.6.3.2工作台面和仪器表面：75%乙醇。4.6.3.3溢出物：10%次氯酸钠（w/v）。

4.6.3.4实验室：甲醛蒸气熏蒸。福尔马林和水加热沸腾，其体积根据实验室的大小而定。

4.6.3.5污染的台面和器具：40%甲醛水溶液，也可以用过氧化氢或过氧乙酸。4.7艾滋病检测实验室安全防护 4.7.1.建立安全制度

4.7.1.1实验室的设备、建筑和设施的安全性应通过专家的评审。

4.7.1.2建立安全标准操作程序，该程序应适用于现有的实验条件，并与实验室其他规章制度一致。

4.7.1.3无论是否发生意外事故，每年都要对安全标准操作程序及其实施情况进行检查。

4.7.1.4制定意外事故处理预案，建立意外事故的登记和报告制度。

4.7.1.5实验室主任要按照规定，对突发事件和职业暴露事故进行调查、处理和报告。4.7.2人员管理

4.7.2.1实验室主任应了解所有工作人员。在安排工作区域时，要根据人员的工作种类和所涉及的生物材料，对实验室环境做安全检查。

4.7.2.2新调入人员、外来合作、进修和学习的人员在进入实验室之前必须经过实验室主任的批准。非实验室人员和非实验室物品不得进入实验室。

4.7.2.3严格执行实验室工作人员采血检测HIV抗体和备案制度，工作人员血清应长期保留。

4.7.3所有工作人员必须经过HIV检测技术和实验室安全培训，包括上岗培训和复训，并接受实验室管理人员的监督。实验室的安全责任人要对工作和环境的安全负责，所有工作人员都有责任保护自己和他人的安全。

4.7.3.2必须告知新上岗人员实验室工作的潜在危险，进行安全教育，直至有能力后方可单独工作。

4.7.3.3 HIV检测技术人员必须参加上级单位组织的生物安全培训，并考核合格。4.7.4个人保健

4.7.4.1高标准的个人保健对于减少感染的危险性很重要。皮肤受损、患病都会增加感染的危险。皮肤的伤口和擦伤都应以防水敷料覆盖。

4.7.4.2进实验室前要摘除首饰，修剪长的带刺的指甲，以免刺破手套。

4.7.4.3进入实验室应穿工作服，戴手套。如果接触物传染危险性大，则应戴双层手套和防护眼镜。

4.7.4.4离开实验室前必须脱去工作服并洗手。4.7.4.5严禁在实验室内进食、饮水、吸烟和化妆。

4.7.5实验室职业暴露及应急处理

4.7.5.1皮肤针刺伤或切割伤：立即用肥皂和大量流水冲洗，尽可能挤出损伤处的血液，用70%乙醇或其他消毒剂消毒伤口。

4.7.5.2皮肤污染：用水和肥皂冲洗污染部位，并用适当的消毒剂浸泡，如75%乙醇或其他皮肤消毒剂。

4.7.5.3粘膜污染：用大量流水或生理盐水彻底冲洗污染部位。4.7.5.4衣物污染：尽快脱掉污染的衣物，进行消毒处理。

4.7.5.5污染物泼溅：发生小范围污染物泼溅事故时，应立即进行消毒处理。发生大范围污染物泼溅事故时，应立即通知实验室主管领导和安全负责人到达事故现场查清情况，确定消毒的程序。

4.7.6职业暴露事故登记：

4.7.6.1事故发生的时间、地点及详细经过。

4.7.6.2暴露方式；受伤部位、伤口深浅、暴露程度；污染物种类（血液或其他体液）以及其中含有HIV的情况。

4.7.6.3处理方法和经过，包括专家或领导赴现场指导和处理的情况。

4.7.6.4是否采用暴露后药物预防，如果是，应详细记录用药情况、包括首次用药时间、服药方案和毒副作用。

4.7.6.5随访检测的日期、项目和结果。4.7.7报告和检测

4.7.7.1发生重大事故时，在紧急处理的同时要立即向主管领导和专家报告。同时抽血检测HIV抗体，暴露一年内要定期检测。

4.7.7.2发生小型事故时可在紧急处理后立即将事故情况和处理方法报告主管领导和专家，检测同前。

4.8 HIV职业暴露后的药物预防

参见中国疾病预防控制中心《全国艾滋病检测技术规范》（2009版）。

5、参考文件

5.1中国疾病预防控制中心《全国艾滋病检测技术规范》（2009版）5.2鄂卫办发[2011]140号文件 省卫生厅办公室关于进一步加强艾滋病

检测实验室工作的通知

6、质量记录表格

篇6：实验小学办学基本标准

——实验小学

根据上级相关文件和部门提出的要求，对照评估方案及标准，我校细致扎实 地开展了自查自评。对照“义务教育学校办学基本标准”现将我校情况汇报如下：

一、学校基本情况：

通山县实验小学是县教育局直属小学，是一座可容纳60个教学班、近3000名学生的大型学校。我校主校区位于凤池山脚，分校建设于隆鼎丽都内，校园环境幽雅，空气清新，是学生求学的理想场所。学校现占地12008平方米，建筑面积16530多平方米，各类教育教学设施配备齐全。拥有现代信息技术专用教室、多媒体教室、音乐教室、多功能会议室，网络教室，录播室以及实验室、图书室、远程教育室等配套设施。

我校秉承“以人为本，为学生的发展为本”的办学宗旨，狠抓课堂教学质量，狠抓学生素质发展。多年来，我校在教研教改方面一直走在全县前列，为全县小学教学改革的示范窗口学校。2008年以来，我校教师在各级报刊杂志上发表论文有六十多篇，在各级论文评选活动中获奖的有二百余篇，近50人次在国、省、市、县优质课竞赛中获奖。我校学生参加语数外各项比赛中取得国级奖42人，省级奖78人，市级奖102人，县级奖245人的佳绩，参加全国科普知识竞赛56人获国级一二三等奖，在报纸上发表作文上百余篇，在各级书画比赛中获奖达200多人。

我校先后被评为市级交通安全实验学校，市、县级教学常规管理 1 示范学校，市教育科研实验学校，市级卫生先进单位，市依法治校示范学校，省级电化教育试点学校，省艺术教育实验学校，省级写字教学先进学校，省级语言文字规范化学校，省级消防安全示范学校，省级少先队示范学校，湖北省“综合实力50强学校”、“湖北省学校文化建设百强校”等。

二、各项指标完成情况

（一）、办学条件

1、学校设置与班额

学校按照划片招生，就近入学的原则，保障辖区的小学生就近入学，服务半径基本上是凤池社区，还有部分的古塔社区和双泉社区，距离适宜。校园环境优美，绿化、美化、净化到位，是教书育人、求知和修身的理想场所。一直以来，实验小学以“学生的健康成长和未来发展高于一切”为办学理念，坚持“育人为本，德育为首”，以优良的教育教学成绩赢得了群众的赞誉。

2、校舍建设

占地面积 ：校园总占地面积12008平方米，总建筑面积16536平方米。教学楼有60多个教室，每个教室配有日光灯4支，电风扇2台，班班通一套，教室地面硬化防滑。

教学及辅助用房齐备，其中体育器材室2个、美术音乐室各2个、书法室1个、科学实验室3个、仪器室2个、计算机室3个、图书室2个、阅览室1个、网络教室1个、录播室1个、多功能教室2个、门卫室2个。各室配备齐全，能为教学服务。

办公用房：学校设校长和财务综合办公室、教师办公室、教务处、政教处、会议室，教工之家等，并配齐了处室办公用品，保证正常工作。

3、设备设施和场地

图书：学校藏书43200万册，生均图书约15册。建有学生阅览室，有专门的图书管理员。各班级建有图书角，保证学生的阅读量。学校开展图书漂流活动，师生捐出自己的图书，大家相互借阅，讨论交流，共同提高。

教学仪器： 学校建有科学实验室、实验器材室，各种仪器配备达到规定标准。教学实验仪器设备按1类标配已配齐了3套。各实验室、器材室配备专人管理。

教育信息化基础设施： 现在56个班级，全部实现“班班通”工程，配齐推拉式多媒体配置，建有学生微机室，配备微机总共220台，学生上课基本上能一人一机。各处室、办公室配齐电脑和打印机，为教师的办公、教学创造条件。实现光钎入网，建有校园有线光纤网络，保证师生流畅快捷上网，达到资源共享。

体音美器材：体音美器材、数学教具、科学实验仪器设备等达到了标准。

体育运动场地：学校建有专用操场，共5500平方米，塑胶运动场，整洁舒适，建有篮球场2个，排球场2个，羽毛球场2个，足球场1个，有多个乒乓球台，有直跑道150米，有环形跑道300米。但场地不能满足全体学生活动。我们充分利用风池山脚下和龙鼎丽都湖畔的这些有利地势，带领学生爬山锻炼和环湖跑步。

（二）教师队伍

1、现有专任教师145名，全部具备相应的教师资格，专任教师均取得信息技术培训合格证书并按有关规定完成教师继续教育，其中语文专任教师56人，数学专任教师48人，英语兼职教师8人，科学教师5人，思品教师3人，体育教师8人，音乐教师7人，美术教师5人，信息教师2人，地方课程的教师3人。这些教师均能适应2门以上学科教学。在校生2950名，师生比1：20.3，已达到验收标准。

2、教师中取得本科学历的52人，专科学历为92人，学历合格率为100%。其中高级职称有18人，中级职称为68人，其他职称59人。师资队伍学科配套，结构合理，能满足教育教学需要。为提高教育教学质量，规范教师的教学行为，调动教师的工作积极性，促进教师专业化成长，学校建立教师工作的考核制度，对教师的工作进行科学、公正的评价。我校领导班子团结协助，富有活力，班子结构合理，都达到了本科学历。(三)管理机制

学校所辖服务范围学生适龄儿童、少年入学率达到100%。每学年向社会公布学校招生范围及招生人数。九年义务教育巩固率达100%。

(四)教育经费

上级财政部门对我校的教育投入严格按有关政策拨付，义务教育经费保障机制改革实施及时到位，义务教育免收教科书费全部落实到位，并实行收支两条线管理，无挤占、平调、截留问题，无乱收费现象。

(五)师德建设

学校十分重视师德师风建设，经常性地开展师德师风教育，坚持抓好每周例会制度的落实，教师遵纪守法，爱岗敬业，几年来无体罚学生和违法犯罪问题。

(六)比访活动和一师一优课

“比教学、访万家”工作实现全覆盖，工作形成常态化。学校校长带头参与“比教学、访万家”工作，每名教师都能做到比教学经常化，听课、评课常态化。每位教师每学期能做到对所任教班级的学生家庭至少走访一次。“比访”专项档案资料齐全。在“一师一优课，一课一名师”评比活动中，我校教学口积极组织老师们听课、评课、讲课、录课、传课。此外，我校的还承接了我校城区小学的优质课录播工作。

(七)、教育教学质量

学校按照课程计划开齐、开足、开好课程，落实地方课程、校本课程和综合实践活动课程。扎实组织开展上级部门举办的活动，进一步减轻学生的课业负担，增强全体学生的身体素质。学校没有开设重点班，特长班。学校教师没有在校内、校外任何地点、任何时间以任何形式给学生有偿补课，或变相强迫学生参加社会上各种家教补习班的现象。

(八)办学行为

学校建立了学生课业负担监测、举报制度，确实减轻学生过重的课业负担。学校教师无利用假期、公休日、课余时间组织学生补课。无乱办班、乱收费行为。无向学生乱推销现象。

(九)关爱机制

学校对残疾儿童、少年入学权利加以保障，每学期建立留守儿童名册，建立关爱措施。落实上级相关关爱文件。让所有儿童享有平等接受义务教育的权利。

三、存在的问题

1、学校周边环境复杂，学生出行存在安全隐患。出门口的道路狭窄，摆摊设点的多，并且每天车辆过往，存在很大的安全隐患。

2、我校是一所县直学校，无论是办学条件还是办学水平，在老白姓心中都享誉很高，不但服务区内的适龄儿童，就连其他辖区家长都宁愿在周边租房送孩子到我校就读，所以大班额现象一直困惑我校。

3、由于我校主校区的选址年代较早，周边已被其他单位或居民建设，现在没有一点发展空间，且不说扩大规模，就是目前也是学生多，房屋建筑面积、绿化面积少，只要涉及到空间面积的事项，我校主校区难以达标。

4、学校操场的局限性，还不能更好的组织大型活动。恳请县委县政府、教育局帮助我们解决这一难题，能将县广播局的老宿舍区规划到我们学校发展办学的。

四、今后改进措施

1、进一步多方筹措资金，改善办学条件，提高办学水平。

2、积极争取上级支持，优化师资队伍和资源配置，提高教育教学水平。

3、积极创建和谐校园、书香校园，使学生享受高质优效教育，为学生未来发展奠定基础。

4、继续做好城乡教学资源、师资力量的交流，加强教师的合理流动，让所有的教师有紧迫感和危机感。

5、真正把教学放在第一位，进一步扎实开展有益于教育教学的师生活动，形成长效机制，争取取得实质性进展。

在以后的工作中，我们会以更加饱满的热情，开拓创新、奋发进取，力争把我校办成让上级满意、家长满意、人民满意的文明学校。

篇7：艾滋病检测实验室基本标准

（每天都测，测空白样、进水样、出水样）

化学需氧量：指在强酸并加热条件下，用重铬酸钾作为氧化剂处理水样时所消耗氧化剂的量，单位为mg/L。本厂采用的是重铬酸钾法。

（一）、方法原理

在强酸性溶液中，用一定量的重铬酸钾氧化水样中还原性物质，过量的重铬酸钾以试亚铁灵作指示剂，用硫酸亚铁铵溶液回滴。根据硫酸亚铁铵的用量算出水样中还原性物质消耗氧的量。

（二）、测定步骤

1、将取回的进水样、出水样摇匀。

2、取3个磨口锥形瓶，编号0、1、2；向3个锥形瓶中分别加入6粒玻璃珠。

3、向0号锥形瓶中加20mL蒸馏水（用胖度移液管）；向1号锥形瓶中加5mL进水样（用5mL的移液管，要用进水润洗移液管3次），然后再加入15mL蒸馏水（用胖度移液管）；向2号锥形瓶中加20mL出水样（用胖度移液管，要用进水润洗移液管3次）。

4、向3个锥形瓶中分别加入10mL重铬酸钾非标液（用10mL的重铬酸钾非标液移液管，要用重铬酸钾非标液润洗移液管3次）。

5、将锥形瓶分别放到电子万用炉上，然后打开自来水管将水充满冷凝管（自来不要开的过大，凭经验）。

6、从冷凝管上部向3个锥形瓶中分别加30mL硫酸银（用25mL的小量筒），然后分别摇匀3个锥形瓶。

7、插上电子万用炉插头，从沸腾开始计时，加热2小时。

8、加热完毕后，拔下电子万用炉插头，冷却一段时间后（多长时间凭经验）。

9、从冷凝管上部向3个锥形瓶中分别加90mL蒸馏水（加蒸馏水原因：1.从冷凝管上加水，使加热过程中冷凝管内壁的残留水样流入锥形瓶，减小误差。2.加定量的蒸馏水，使滴定过程中的显色反应更加明显）。

10、加入蒸馏水后会放热，取下锥形瓶冷却。

11、彻底冷却后，向3个锥形瓶中分别加3滴试亚铁灵指示剂，然后分别摇匀3个锥形瓶。

12、用硫酸亚铁铵滴定，溶液的颜色由黄色经蓝绿色至红褐色即为终点。（注意全自动滴定管的使用方法。滴定完一个要记得读数，并将自动滴定管液位升至最高处，进行下一个滴定）。

13、记录读数，计算结果。

二、生化需氧量（BOD）的测定

（测，测 样）

生化需氧量：指在规定条件下，微生物分解存在水中的某些可氧化物质，特别是有机物所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量，单位为mg/L。（另一种定义：水中有机污染物被好氧微生物分解时所需要的氧量称为生化需氧量，单位为mg/L。）

（一）、测定步骤

三、悬浮性固体物质（SS）的测定

（每天都测，测空白样、进水样、出水样）悬浮固体表示水中不溶解的固体物质的量。

（一）、方法原理

测定曲线内置，通过测定样品对特定波长的吸光度 转换为待测参数的浓度值，并通过液晶显示屏显示。

（二）、测定步骤

1、将取回的进水样、出水样摇匀。

2、取1支比色管加入25mL进水样，然后用蒸馏水加至刻度线（因进水SS较大，若不稀释可能会超过悬浮物测试仪的最大限度，使结果不准。当然进水取样量不固定，若进水太脏就取10mL，用蒸馏水加至刻度线）。

3、开启悬浮物测试仪，向类似于比色皿的小盒内加入蒸馏水至2/3处，擦干外壁，边摇动边按下选择键，然后快速放入悬浮物测试仪，之后按下读数键，若不为零则按清零键，将仪器清零（测一次即可）。

4、测进水SS：将比色管内的进水样倒入小盒内润洗3次，然后将进水样加至2/3处，擦干外壁，边摇动边按下选择键，然后快速放入悬浮物测试仪，之后按下读数键，测三次，求取平均值。

5、测出水SS：将出水样摇匀，润洗三次小盒…（方法同上）

6、计算结果。

进水SS的结果为：稀释倍数*测进水样读数

出水SS的结果直接为测出水样仪器读数

四、总磷（TP）的测定

（每天都测，测空白样、进水样、出水样；而目前加几个氧化沟上的几个点的样）

（一）、方法原理

在酸性条件下，正磷酸盐与钼酸铵、酒石酸锑氧钾反应，生成磷钼杂多酸，被还原剂抗坏血酸还原，则变成蓝色络合物，通常集成磷钼蓝。

（二）、测定步骤（仅以测进、出水样为例）

1、将取回的进水样、出水样摇匀（氧化沟上点的水样要摇匀放置一段时间取上清液）。

2、取3支具塞刻度管，第一支具塞刻度管加蒸馏水加至上部刻度线；第二支具塞刻度管加5mL进水样，然后用蒸馏水加至上部刻度线；第三支具塞刻度管加10mL出水样，然后用蒸馏水加至上部刻度线。（取样量不固定，根据水质情况，水质越差，取样量相对较少。另外注意区分比色管于具塞刻度管的差别，具塞刻度管有刻度，圆底，可加热；而比色管相反）

如果要消解，此步按如下方法：（1）进、出水取样量不变，3个具塞刻度管加蒸馏水25mL左右即可。（2）向3个具塞刻度管分别加4mL5%的过硫酸钾。（3）分别摇匀3个具塞刻度管，用纱布包扎。（4）将3个具塞刻度管放入到塑料烧杯内，然后放到高压锅内加热。(5)高压锅自动断开电源后，大约20分钟后打开高压锅盖，取出塑料烧杯。（6）分别拆开3个具塞刻度管的纱布，之后自然冷却。（7）冷却后，再向3个具塞刻度管分别加蒸馏水加至上部刻度线。（注意高压锅的使用：使用高压锅时一定盖紧盖子，打开排气阀，当温度升至103℃时看从排气阀排气量确定是否关闭排气阀，若此时排气量较少等较多时再关闭。另外高压锅内的水位不要太低。高压锅温度升至120℃时会自动计时，30分钟后自动关闭。）

3、分别向3个具塞刻度管分别加1mL抗坏血酸和2mL钼酸铵溶液。

4、分别摇匀3个具塞刻度管，计时15分钟后，用分光光度计测，用波长700nm，30mm的比色皿。

5、记录读数，计算结果。

所测水样TP结果=（所测水样读数-空白样读数）*31.15/所取水样体积

五、总氮（TN）的测定

（每周一测一次，测空白样、进水样、出水样）

（一）、方法原理

在60℃以上的水溶液中，过硫酸钾按如下反应式分解，生成氢离子和氧。K2S2O8+H2O→2KHSO4+1/2O2 KHSO4→K+ + HSO4-HSO4-→H+ + SO4 2-加入氢氧化钠用一种和氢离子，使用过硫酸钾分解完全。

在120℃--124℃的碱性介质条件下，用过硫酸钾作氧化剂，不仅可将水样中的氨氮和亚硝酸盐氮氧化为硝酸盐，同时将水样中大部分有机氮化合物氧化为硝酸盐。而后，用紫外分光光度法分别于波长275nm与220nm处测定其吸光度，从而计算总氮的含量。

（二）、测定步骤

1、将取回的进水样、出水样摇匀。

2、取3个25mL的比色管（注意不是大的比色管）。第一支比色管加蒸馏水加至下部刻度线；第二支比色管加1mL进水样，然后用蒸馏水加至下部刻度线；第三支比色管加2mL出水样，然后用蒸馏水加至下部刻度线。

3、分别向3个比色管加5mL碱式过硫酸钾

4、将3个比色管放入到塑料烧杯内，然后放到高压锅内加热。进行消解。

5、加热完毕，拆开纱布，自然冷却。

6、冷却后，再向3个比色管分别加1mL1+9的盐酸。

7、向3个比色管分别加蒸馏水至上部刻度线，摇匀。

8、使用两种波长，用分光光度计测。首先用波长275nm，10mm的石英比色皿（稍旧的），测空白、进水、出水样并记数；再用波长220nm，10mm的石英比色皿（稍旧的），测空白、进水、出水样并记数。

9、计算结果。

六、氨氮（NH3-N）的测定

（每天都测，测空白样、进水样、出水样）本厂采用的是纳氏试剂光度法

（一）、方法原理 碘化汞和碘化钾的碱性溶液与氨反应生成淡红棕色胶态化合物，此颜色在较宽的波长内具强烈吸收。

（二）、测定步骤

1、将取回的进水样、出水样摇匀。

2、将进水样、出水样分别倒入到100mL的烧杯内。

3、向两个烧杯内分别加入1mL 10%的硫酸锌和5滴氢氧化钠，用2个玻璃棒分别搅拌。

4、静置3分钟后开始过滤。

5、将静置后的水样倒入到滤斗内，过滤部分后将底下烧杯内的滤液倒掉，然后再用此烧杯接漏斗内剩余的水样，直到过滤完毕再次将底下烧杯内的滤液倒掉。（换言之用一漏斗的滤液洗两次烧杯）

6、分别过滤完烧杯内的剩余水样。

7、取3个比色管。第一支比色管加蒸馏水加至刻度线；第二支比色管加3--5mL进水样滤液，然后用蒸馏水加至刻度线；第三支比色管加2mL出水样滤液，然后用蒸馏水加至刻度线。（所取进、出水样滤液的量不固定）

8、分别向3个比色管分别加1mL酒石酸钾钠和1.5mL纳氏试剂（。

9、分别摇匀，计时10分钟。用分光光度计测，用波长420nm，20mm的比色皿。记数。

10、计算结果。

七、硝酸盐氮（NO3-N）的测定

（每周一测空白样、进水样、出水样；每台都测空白样、氧化沟3号点样、氧化沟回流点样；即周一测5个样）

（一）、方法原理

硝酸盐在无水情况下与酚二磺酸反应，生成硝基二磺酸酚，在碱性溶液中生成黄色化合物进行定量测定。

（二）、测定步骤（仅以3号点和回流点的样为例）

1、将取回的3号点和回流点的样摇匀后放置澄清一段时间。

2、取3个比色管。第一支比色管加蒸馏水加至刻度线；第二支比色管加3mL3号点样上清液，然后用蒸馏水加至刻度线；第三支比色管加5mL回流点么上清液，然后用蒸馏水加至刻度线。

3、取3个蒸发皿，降3个比色管中的液体对应倒入蒸发皿中。

4、向3个蒸发皿中分别加入0.1mol/L的氢氧化钠调节PH至8。（使用精密PH试纸，范围为5.5—9.0之间的。每个约需氢氧化钠20滴左右）

5、开启水浴锅，将蒸发皿放到水浴锅上，温度设定为90℃，直至蒸干为止。（约需2小时）

6、蒸干后，取下蒸发皿冷却。

7、冷却后分别向3个蒸发皿中加1mL酚二磺酸，用玻璃棒研磨，使试剂与蒸发皿中的残渣充分接触，静置片刻后，再研磨一次。放置10分钟后，分别加入约10mL的蒸馏水。

8、分别向蒸发皿中边搅拌边加入3--4mL氨水，然后将其移到对应的比色管中。分别加蒸馏水至刻度线。

9、分别摇匀，用分光光度计测，用波长410nm，10mm的比色皿（普通玻璃的、稍新的）。并记数。

10、计算结果。

进水样、出水样的测定步骤（需要补充）

八、溶解氧（DO）的测定

(每天都测，测氧化沟9号点样)溶解在水中的分子态氧称为溶解氧。天然水中的溶解氧含量取决于水中与大气中氧的平衡。

本厂采用碘量法测溶解氧

（一）、方法原理

水样中加入硫酸锰和碱性碘化钾，水中溶解氧将低价锰氧化成高价锰，生成四价锰的氢氧化物棕色沉淀，加酸后，氢氧化物沉淀溶解并与碘离子反应释放出游离碘。以淀粉作指示剂，用硫代硫酸钠滴定释放出的碘，可计算溶解氧的含量。

（二）、测定步骤

1、用广口瓶取回的9号点的样，静置十几分钟。（注意用的是广口瓶，并注意取样方法）

2、用玻璃弯管插入广口瓶样内，用虹吸法向溶解氧瓶中吸入上清液，先少吸一些，润洗溶解氧瓶3次，最后再吸入上清液注满溶解氧瓶。

3、向满的溶解氧瓶中加入1mL硫酸锰和2mL碱性碘化钾。（注意加的时候的注意事项，从中部加入）

4、盖上溶解氧瓶的瓶盖，上下摇匀，隔几分钟再摇，摇匀三次。

5、再向溶解氧瓶中加入2mL浓硫酸，摇匀。放在暗处静置五分钟。

6、向碱式滴定管（带橡胶管、玻璃珠的。注意酸式、碱式滴定管的区别）倒入硫代硫酸钠至刻度线，准备滴定。

7、静置5分钟后，取出放在暗处的溶解氧瓶，将溶解氧瓶中的液体倒入到100mL的塑料量筒内，润洗3次。最后倒至量筒的100mL刻度线。

8、将量筒内的液体倒入到锥形瓶中。

9、用硫代硫酸钠向锥形瓶中滴定至无色，然后加入一滴管淀粉指示剂，再用硫代硫酸钠滴定，直至褪色，记录读数。

10、计算结果。

溶解氧（mg/L）=M*V*8*1000/100 M为硫代硫酸钠溶液浓度（mol/L）

V为滴定时消耗硫代硫酸钠溶液的体积（mL）

九、总碱度（每周二测一次，测进水样、出水样）

（一）、测定步骤

1、将取回的进水样、出水样摇匀。

2、将进水样过滤（若进水较干净，则不需过滤），用100mL的量筒取滤液100mL到500mL的三角烧瓶中。用100mL的量筒取摇匀后的出水样100mL到另一个500mL的三角烧瓶中。

3、分别向两个三角烧瓶中加3滴甲基红-亚甲基兰指示剂，呈浅绿色。

4、向碱式滴定管（带橡胶管、玻璃珠的，50mL的。而溶解氧测定中用到的碱式滴定管是25mL的，注意区分）倒入0.01mol/L的氢离子标液至刻度线。

5、分别向两个三角烧瓶中用氢离子标液滴定呈现淡紫色，记录所用的体积读数。（切记滴定完一个之后读数，并加满滴定另一个。进水样约需四十多毫升，出水样约需一十多毫升）

6、计算结果。用氢离子标液的用量*5即为体积。

十、氯离子的测定

（每周三测一次，只测空白样、进水样）

（一）、测定步骤

1、将进水样摇匀，并过滤进水样。

2、取两个磨口碘量瓶，第一个碘量瓶中加入用50mL的量筒取的50mL蒸馏水；第二个碘量瓶中加50mL进水样滤液。

3、向两个碘量瓶中分别加入1mL铬酸钾指示剂。

4、向酸式滴定管（棕色的，带旋塞的）倒入0.0139mol/L的硝酸银溶液至刻度线。

5、分别向两个碘量瓶中用硝酸银溶液滴定，至出现砖红色沉淀，记录所用的体积读数。（切记滴定完一个之后读数，并加满滴定另一个。空白样约用0.2-0.5mL左右，进水样约用3-4mL左右）

6、计算结果。

氧化沟泥样相关测定指标

一、污泥沉降比（SV30）的测定

（每天都测，只测氧化沟9号点的样）

（一）、测定步骤

1、取一个100mL的量筒。

2、将取回的氧化沟9号点的样摇匀，倒入量筒至上部刻度线处。

3、开始计时30分钟后，读出分界面的刻度读数并记录。

二、污泥体积指数（SVI）的测定

（每周二、周四、周六测，只测氧化沟9号点的样）

SVI的测定是用污泥沉降比（SV30）除以污泥浓度（MLSS）即为结果。但要注意换算单位。SVI的单位为mL/g。

三、污泥浓度（MLSS）的测定

（每周二、周四、周六测，测氧化沟9号点的样和回流点的样）

（一）测定步骤

1、将取回的9号点的样和回流点的样摇匀。

2、将9号点的样和回流点的样各取100mL到量筒中。（9号点的样用测污泥沉降比所取得即可）

3、用旋片式真空泵分别过滤量筒内9号点的样和回流点的样。（注意滤纸的选用，所用的滤纸是提前称好的滤纸。若当天9号点的样要测MLVSS，过滤9号点样就要选用定量滤纸，反正选用定性滤纸。另外注意定量滤纸与定性滤纸的的区别）

4、取出过滤的滤纸泥样放到电热鼓风干燥箱，干燥箱温度升至105℃开始计时干燥2小时。

5、取出干燥后的滤纸泥样放到玻璃干燥器内冷却半小时。

6、冷却后用精密电子天平称量并记数。

7、计算结果。污泥浓度（mg/L）=（天平读数-滤纸重量）*10000

四、挥发性有机物质（MLVSS）的测定

（每周二、周四、周六测，只测氧化沟9号点的样，用定量滤纸）

（一）、测定步骤

1、将9号点的滤纸泥样用精密电子天平称量后，将滤纸泥样放入到小的瓷坩埚内。

2、开启箱式电阻炉，温度调至620℃，将小瓷坩埚放入到箱式电阻炉内约2小时。

3、两小时后，关闭箱式电阻炉，冷却3小时后将箱式电阻炉的门开一点小缝，再次冷却半小时左右，确保瓷坩埚温度不超过100℃。

4、取出瓷坩埚放到玻璃干燥器内再次冷却半小时左右，放到精密电子天平上进行称量，并记录读数。

篇8：艾滋病检测实验室基本标准

1 艾滋病检测实验室的生物安全要求

根据《病原微生物实验室生物安全管理条例》 (国务院2004年颁布424号令) , 我国对病原微生物根据其传染性及其感染后对个体或者群体的危害程度, 将病原微生物分为4类, 第1类危害最大, 第1类和第2类病原微生物属高致病性病原微生物。根据实验室对病原微生物的生物安全防护水平 (bio-safety level, BSL) , 将实验室生物安全防护水平分为4级, 1级防护级别最低, 4级最高。

卫生部《可感染人间的病原微生物名录》 (2006年) (简称《名录》) 中, HIV列为危害程度第2类病原微生物, 属于高致病性病原微生物。HIV病原抗原检测、血清学检测、核酸检测等未经培养的感染性材料的操作应在符合BSL-2要求的实验室中操作。HIV病毒的分离、细胞培养、中和试验等应在BSL-3实验室进行。

艾滋病检测实验室应按照《实验室生物安全通用要求 (GB19489-2008) 及《全国艾滋病检测工作管理办法》 (2006年) 、《全国艾滋病检测技术规范》 (2009年修订) 要求设置。BSL-2、BSL-3级实验室需配置生物安全柜、洗眼器等安全设备。除艾滋病检测点外, 艾滋病筛查及确认实验室, 生物安全柜是必备设备之一。

2 生物安全柜的防护

生物安全柜 (biological safety cabinet, BSC) 是为了满足生物安全实验室的发展而诞生的, 用于保护操作者、实验室环境、实验材料免受暴露于感染性气溶胶以及当操作含有感染性实验材料 (如检测样本、初期的培养物等) 时可能产生的溅污物所带来的危害的装置, 是生物安全装备核心仪器, 是进行高危险度生物实验工作的第一道, 也是最关键的一道安全防护屏障。

2.1 原理

生物安全柜通过安全柜内置风机或外排风机驱动气流, 产生均匀分散及单一方向的气流 (层流) 。对于直径>0.3μm的颗粒, 通过高效空气过滤器 (high efficiency particulate air filter, HEPA) 过滤及阻断。根据美国NSF49 (美国生物安全柜标准-二级生物安全柜) 标准, HEPA过滤器的截留率应为99.99%。

2.2 分类

根据BSC的气流方向和模式、排气系统及结构, BSC分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ3个级别, 其中Ⅱ级BSC又可细分为A1、A2、B1、B2型, 主要特征区别见表1。Ⅰ级BSC只对操作人员和环境提供保护, Ⅱ和Ⅲ级BSC对操作人员、环境及操作对象提供保护, Ⅲ级BSC是为BSL-4实验室而设计的, 柜体完全气密, 双倍HEPA过滤排出, 适用于高风险的生物实验。应根据实验室生物安全级别、实验操作性质及安全要求选择BSC的功能配置类型。

3 艾滋病检测实验室的BSC使用

实验室主要的检测样本是血液, 包括全血、血清和血浆, 这些样本在检查前均是未知样本, 都应该被视为具有潜在风险的样本。对于艾滋病检测实验室, 关注的重点不应仅仅局限于HIV病毒本身, 同时要考虑到血样作为未知样本可能含有其他病原微生物, 考虑可能存在的各种潜在风险。另外, 对于生物安全实验室而言, 潜在的最大危害是感染性气溶胶引起的感染[2], 实验室在检测过程中将不可避免产生气溶胶, 应将防止气溶胶和防止已产生的气溶胶进一步扩散作为生物安全防护的重点。

3.1 BSC选择

我国艾滋病检测实验室主要是BSL-2实验室, 还有个别BSL-3实验室, 这些实验室配备二级生物安全柜已经能满足正常工作需要, 常用的有A2 (原B3) 、B2型。B型安全柜必须安装外接风机, 因气体通过建筑物的排风系统直接排到实验室外, 对操作者可提供更为妥善的安全防护, 尤其是当HEPA过滤器出现故障时。所以在一些工作量大, 操作的样本复杂, 实验条件变化大的实验室多使用B2全排型BSC。但因为使用外排风系统, 相对于A2型BSC, B2型的能源消耗较大, 且需要建筑物内有送排风系统, 在一些资源有限实验室使用受到限制。

3.2 安装

通过BSC前开口的气流速度大约是0.45m/s, 气流易于受到干扰。BSC不宜放置通道附近和有潜在干扰气流的位置, 如房门、空调的对面。安装时在BSC两侧和后方应保留有一定的空间距离以便于维护, 上方也需要保留300mm以上的距离, 以能够测量通过排气滤器气体速度和便于更换排气滤器。

3.3 操作使用

BSC操作的关键原则是避免影响正常的风路状态, 要求柜内操作时手应该尽量平缓移动、实验室器材放置不要阻断侧隔层的空气循环、低污染性物品向高污染性物品移动等。大部分艾滋病检测实验室操作人员能按照基本操作规范操作, 但对BSC的操作要求有两点比较困惑, 不知如何解决。

3.3.1 可产生气溶胶的仪器在BSC内的操作

从BSC操作要求来讲, 柜内尽量避免震动仪器的使用, 例如离心机、振荡器。因为震动会使得积留在滤膜上的颗粒物质抖落, 导致操作室内部洁净度降低, 同时如果在前操作面平衡失败还易引起安全柜对操作者的污染。在实际操作时, 离心等可在BSC外进行, 但离心管的开启等操作应移至BSC内进行, 这样就减少了气溶胶泄溢的危险。如果小型振荡器的使用必须要在柜内操作, 应将设备放在BSC的后侧。

3.3.2 明火的使用

明火使用过程中产生的细小颗粒杂质将被带入滤膜区域, 这些高温杂质会损失滤膜。同时火焰能扰乱气流, 影响BSC的风路状态。如必须使用, 建议使用经过灭菌的一次性转移环或使用低火苗的本生灯。

3.4 维护检验

除最基本的BSC工作前后的运转“清洗”、及时消毒等维护, 到定期检查空气的层流、流速、噪音、泄漏、紫外线强度、高效过滤膜的破损等, 实验室都应严格执行BSC的维护检验程序。对于生物安全的关键防护设备, 必须进行有效的消毒处理后, 方可实施BSC的检修, 以保证人员的个人安全。关于BSC检测, 目前由国家建筑工程质量监督检验中心依据GB50346-2004《生物安全实验室建筑技术规范》和JG170-2005《生物安全柜》执行, 对垂直气流截面风速、气流流向、工作窗口气流评价风速、洁净度、噪声、照度等指标进行检测, 通常1年1次。

4 BSC在艾滋病检测实验室使用存在问题及建议

4.1

实验室生物安全以往没有引起足够重视, 一些实验室虽然已经配备了生物安全柜, 但因为操作人员对气溶胶的危害缺乏足够的认识, 对操作样本可能含有不明病原或多种病原同时存在的风险缺乏考虑, 认为艾滋病主要是经血传播而忽略了安全规范要求, 样本的混匀、离心、移液等操作未能按照规范要求在生物安全柜内完成。

4.2

自2004年发生SARS病毒实验室感染事件后, 实验室生物安全得到了高度重视。但在采取安全防护措施时, 检测人员由最初的个体防护意识差, 到后来的过度防护。一些实验室在生物安全柜装备上, 不考虑其所操作病原特征及实验室条件, 设备一律高要求配置。没有独立的送排风系统却配置B2型BSC, 致使BSC不能运转造成浪费。工作人员担心实验感染, 把所有操作都在BSC内操作, 过度防护反而给实验操作带来不便。

4.3

生物安全柜及个人防护用品的装备, 的确提高了实验室的生物安全防护, 但也使一些操作人员过度依赖设备屏障的防护, 而忽略了规范操作。由于缺乏对生物安全柜的工作原理等知识的掌握及规范操作的培训及人身, 生物安全柜没有被正确的使用和维护、消毒不规范等, 反而使其成为安全隐患。

4.4

目前通用的生物安全柜国际认证标准有EN12469:2000《生物技术微生物安全柜性能要求》 (欧洲生物安全柜统一标准, 欧洲标准化委员会 (CEN) ) 和NSF/ANSI49-2002《ClassⅡ (层流) 生物安全柜》 (美国生物安全柜标准-二级生物安全柜) 。我国虽然已建立BSC的行业标准, 但缺少国家强制性技术法规, 给BSC的质量控制和监督管理带来不便。另外, 一些实验室因难以承受BSC高昂的检测费用而放弃了对BSC的定期检查。

我国实验室生物安全的法律法规及规范性管理文件已陆续出台, 实验室生物安全工作正在纳入规范化管理体系。在加强实验室建设的同时, 加强人员的专业技术培训, 提高操作技能, 强调实验室安全设备的规范操作以及正确使用是非常有必要的。同时对实验室活动要进行危害 (风险) 评估, 根据实验室现况、条件、人员、以及具体实验活动等诸多因素综合考虑, 以免防护不当或过度防护。另外, 加强生物安全柜相关检定或校准技术规范的建设, 将对生物安全起到重要的指导作用。

摘要：从生物安全柜的工作原理、分类, 结合艾滋病病毒危害程度及生物安全的管理要求, 介绍了我国艾滋病检测实验室生物安全柜的选择、安装、操作维护及目前存在问题。提出只有了解并正确使用生物安全柜, 才能确保实验工作人员、检测样本和环境的安全;相关法规的进一步完善将发挥更大的指导使用。

关键词：生物安全柜,艾滋病,实验室,设备

参考文献

[1]Jiang Yan.Development and challenge of HIV/AIDS testinglaboratory network and quality assurance system in china[J].Virologica Sinica, 2007, 22 (6) :434-442.