氨基酸模型

关键词：

氨基酸模型（精选七篇）

氨基酸模型篇1

1 材料与方法

1.1 动物来源及分组

成年SD雄性大鼠40只(由中南大学湘雅医学院动物实验中心提供),体重200～250 g,经过机械痛阐和热痛阐测量的筛选,反应异常鼠被剔除。保证12 h明暗交替,大鼠自由饮水和饮食,给其1周的时间适应环境后,进行实验。分为5组:假手术组、CCI组、对乙酰氨基酚组、强痛定组和联合组。

1.2 CCI模型的建立

根据文献[4]建立坐骨神经慢性压迫模型(CCI)。10%水合氯醒300 mg/kg腹腔注射麻醉大鼠,左侧股骨区消毒铺无菌巾,左侧大腿中部股骨外缘与股骨平行的方向切开皮肤,分离肌间筋膜,暴露坐骨神经主干,在坐骨神经三叉分支的近侧端约5 mm处,用4-0羊肠线均匀结扎四处,间隔约1 mm,松紧程度以引起小腿肌肉轻微颤动且不影响坐骨神经血运为宜。结扎完毕,缝合皮肤。手术完毕每只大鼠肌注庆大霉素霉素8万U单位,置于温暖清洁的环境中。假手术组仅暴露坐骨神经而不进行结扎,剩余4组建立CCI模型。CCI组:不进行任何治疗。对乙酰氨基酚组:100 mg/kg腹腔注射。强痛定组:1 mg/kg腹腔注射。联合组:对乙酰氨基酚100 mg/kg+强痛定1 mg/kg腹腔注射。

1.3 行为学测试

1.3.1 测定各组大鼠左侧后爪热痛阈值(PWTL)

大鼠被置于热痛仪透明隔断里并盖上盖子,待大鼠适应环境后开始测量热痛阈值。测量时将热痛仪十字交叉处的红光对准大鼠后爪中央部位。按下测量钮,当大鼠自觉疼痛出现抬足、舔足反射时,控制面板上记录到的时间即为大鼠此次测量的PWTL。同一只大鼠至少间隔5 min进行下次测试,每只大鼠测定3次,取平均值作为该大鼠的PWTL值。

1.3.2 测试大鼠左后肢机械痛阈值(PWMT)

将Von-Frey探针装入测量仪上,开启仪器,在网格板下持探针垂直向上接触大鼠后爪中心部位,大鼠适应后再加大力量继续往上。大鼠自感疼痛出现抬足、舔足反射时,仪器记录到的数值即为此次大鼠的PWMT。测试次数和平均值方法同上。各组大鼠均在CCI建模前、建模后1、3、5 d及7 d测试PWTL和PWMT。

1.4 ELISA测定脊髓肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1(IL-l)、前列腺素E2(PGE2)浓度

术后第8天大鼠断头处死,取出整段脊髓组织放入-80℃冰箱保存。将100 mg脊髓组织提取液中研磨至匀浆,取出上清液冰冻保存。采用考马斯亮蓝比色法测定蛋白浓度,在紫外分光光度仪上测定吸光值。采用大鼠TNF-α、IL-1、和PGE2酶联免疫吸附实验试剂盒,在波长449 mm测定光密度,代入标准曲线并乘以相应的稀释倍数,计算出样品细胞因子蛋白浓度。

1.5 统计学方法

采用SPSS 17.0统计软件包进行统计。计量资料数据以均数±标准差(±s)表示,两独立样本的计量资料采用t检验,多组间的比较采用方差分析,两两比较采用LSD-t检验。计数资料以率表示,采用χ2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 行为学测试

建立模型前各组大鼠机械痛阈值PWMT和PWMT比较,差异无统计学意义(P>0.05);假手术组术前和术后各时间点PWMT和PWMT比较,差异无统计学意义(P>0.05),CCI组术后各时间点PWMT和PWMT值下降,假手术组与CCI组比较,差异有统计学意义(P<0.05),对乙酰氨基酚组、强痛定组和联合组术后PWMT和PWMT值也下降,随着用药时间的延长PWMT和PWMT上升,与模型组术后3、5、7 d比较,差异无统计学意义(P>0.05);大鼠左后肢跛行、缩爪等现象明显改善,但联合组上升幅度最大。见表1～4。

注:与CCI组比较,1)P<0.05;CCI:坐骨神经慢性压迫大鼠模型

2.2 ELISA测定脊髓TNF-α、IL-1和PGE2浓度

CCI组脊髓TNF-α、IL-1和PGE2与假手术组比较均明显升高,经乙酰氨基酚组、强痛定组和联合组治疗后TNF-α、IL-1和PGE2浓度均下降,治疗后三组IL-1和PGE2浓度与CCI组比较,差异有统计学意义(P<0.05),治疗后TNF-α浓度的变化差异无统计学意义(P>0.05)。见表5。

3 讨论

目前研究神经病理性疼痛的机制尚不清楚,CCI模型是Bennett等[4]在1988年建立的用铬制肠线轻度结扎大鼠坐骨神经干。Maves等[5]及王红等[6]认为铬制肠线含有化学物产生炎性疼痛,形成慢性束缚性的损伤。许多研究表明[7]铬制肠线和丝线结扎坐骨神经制作的CCI模型均能引起热痛阈和机械痛阈的明显下降,二者制作的CCI模型引起PWMT的下降基本相同,铬制肠线制作的CCI模型PWTL的下降的幅度较丝线制作的CCI模型明显。本试验选用丝线结扎坐骨神经制作CCI模型。试验中CCI大鼠不会有铬制肠线的炎性痛,主要为神经病理性疼痛。大鼠左侧坐骨神经干结扎后出现足趾并拢,轻度的外翻状,术后左后肢PWTL、PWMT下降,提示SD大鼠神经病理性疼痛模型造模成功。

注:与CCI组比较,1)P<0.05;CCI:坐骨神经慢性压迫大鼠模型

促炎细胞因子TNF-α、IL-1在病理性疼痛过程中有调节作用。TNF-α、IL-1由胶质细胞产生激活后与神经元上的受体结合,使神经元兴奋,导致痛阈值降低。神经元兴奋异位放电[8,9]还能促进交感神经中的儿茶酚胺释放,刺激P物质,前列腺素等多种疼痛介质的表达。PGE2既是炎症细胞因子也是疼痛介质之一,可释放多种疼痛介质,如强啡肽,降钙素基因相关肽等[10],最终病理性疼痛形成。在脊髓横断的动物模型中,使用甾体类药物可以降低脑中TNF-α、IL-1的水平,并缓解疼痛[11]。

机体内存有抗痛系统,由脑啡肽、脑啡肽神经元及阿片受体组成。强痛定为阿片类速效镇痛药物,镇痛作用为吗啡的1/3,由于我们短时间分次使用,且强痛定的成瘾性比吗啡明显少,强痛定与阿片受体结合,使阿片受体激活脑内抗痛系统,阻断痛觉传导,对乙酰氨基酚缓解轻、中度疼痛,引发多种内源性阿片途径的激活,刺激脑啡肽的释放P物质,抑制中枢NMDA或P物质介导的一氧化氮的合成[12,13],干扰痛觉传入中枢,强痛定与对乙酰氨基酚联合发挥生理性止痛的作用。

本实验用丝线结扎坐骨神经制成病理性疼痛模型,术后发现大鼠左后肢PWTL、PWMT明显下降,两药联合应用比单独应用PWMT和PWMT上升明显,提示两药联合镇痛作用增强。经过术后治疗脊髓TNF-α、IL-1和PGE2浓度上升,这表明两药联合可以通过抑制炎性细胞因子释放多种疼痛介质进行镇痛,而且还可以激活内源性阿片途径,阻断痛觉传导对慢性疼痛的调节作用。但两药联合是如何激活内源性阿片途径的机制,还需要进一步的研究。

摘要：目的观察强痛定联合对乙酰氨基酚治疗神经病理性疼痛大鼠促炎症细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1(IL-1)和前列腺素E2(PGE2)的影响。方法 40只SD大鼠随机分为5组:假手术组、坐骨神经慢性压迫模型(CCI)组、对乙酰氨基酚组、强痛定组和联合组(n=8)。手术前1天和手术后第1,3,5,7天测定各组动物的机械性痛阈和热痛阈。采用酶联免疫吸附实验方法检测脊髓TNF-α、IL-1和PGE2浓度变化。采用t检验和方差分析法进行结果分析。结果 CCI可导致大鼠机械性痛阈和热痛阈明显降低,CCI组脊髓TNF-α[(3.25±0.34)pg/mg]、IL-1[(15.36±1.49)pg/mg]和PGE2[(162.57±13.63)pg/mg]升高。与CCI组比较,两种药物联合治疗后能明显改善CCI大鼠痛敏状态,差异均有统计学意义(均P<0.05),并显著降低TNF-α[(1.58±0.27)pg/mg]、IL-1[(7.61±0.85)pg/mg]和PGE2[(95.16±8.74)pg/mg]的表达,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论两种药物联合抑制炎症细胞因子释放可减轻CCI大鼠的疼痛反应。

氨基酸模型篇2

目前氨基酸的分析方法[2]主要有化学方法、荧光光谱法、电化学方法和分光光度法等。其中荧光光谱法具有较高的灵敏度和较低的检出限, 特别是全自动氨基酸分析仪[3,4,5,6,7] (荧光检测器) 分析法具有较高的灵敏度和较强的操作和分析自动化能力。本文运用酸水解-全自动氨基酸分析仪法技术, 建立了快速、简便而准确测定油菜蜜、洋槐蜜、紫云英蜜、枣花蜜等安徽省常见4种蜂蜜中17种氨基酸检测的方法, 并解析天然蜂蜜中氨基酸的含量。现将该测定方法总结如下。

1 材料与方法

1.1 主要仪器与试剂

仪器:日立L-8900氨基酸自动分析仪 (配有荧光检测器) , 干燥箱, 真空泵, 水解管:耐压螺盖玻璃管 (体积为20~30 mL) 。

试剂:盐酸 (优级纯) , 重蒸苯酚, 柠檬酸钠的缓冲溶液, 茚三酮溶液 (二甲基亚砜150 mL+pH值5.2乙酸锂溶液50 mL+水合茚三酮4 g+还原茚三酮0.12 g) 。混合氨基酸标准溶液2.5 mmo L/mL, SIGMA。

1.2 仪器分析条件

检测器类型:荧光检测器 (VIS) ;检测波长:570、440 nm;色谱柱:离子交换柱, 柱温60℃;进样体积:20μL;流动相;柠檬酸缓冲液, 流速0.4 mL/min;柱后反应柱的柱温:135℃。

1.3 试验方法

准确称取2.0~2.5 g (精确到0.000 1 g) 蜂蜜样品于水解管内, 加入6 mo L/L盐酸10 mL, 再加入新蒸馏的苯酚3~4滴, 漩涡振荡3 min后冷冻5 min, 抽真空后充入高纯氮气, 在充氮状态下拧紧耐压螺盖。将水解管置于110℃干燥箱内水解22 h后, 取出。冷却后小心打开水解管, 将水解液全部转移至50 mL容量瓶中, 用去离子水定容, 过滤。取1 mL滤液于5 mL容量瓶中, 真空干燥, 反复2次, 最后蒸干, 然后加入0.02 mo L/L柠檬酸钠缓冲液1 mL, 高速离心后经0.22μm滤膜过滤后上机。

2 结果与分析

2.1 色谱分析

蜂蜜经酸水解后, 运用氨基酸自动分析仪测定, 脯氨酸在波长440 nm测定, 其余16种氨基酸在570 nm波长下测定, 17种氨基酸在该分离条件下达到很好的分离效果, 17种氨基酸标样色谱见图1。

注:1为天门冬氨酸 (Asp) ;2为苏氨酸 (Thr) ;3为丝氨酸 (Ser) ;4为谷氨酸 (Glu) ;5为甘氨酸 (Gly) ;6为丙氨酸 (Ala) ;7为胱氨酸 (Cys) ;8为缬氨酸 (Val) ;9为蛋氨酸 (Met) ;10为异亮氨酸 (Ile) ;11为亮氨酸 (Leu) ;12为苯丙氨酸 (Phe) ;13为酪氨酸 (Tyr) ;14为赖氨酸 (Lys) ;15为组氨酸 (His) ;16为精氨酸 (Arg) ;17为脯氨酸 (Pro) 。

2.2 线性关系和检出限

为考察该方法的线性关系, 准确配制了17种氨基酸浓度分别为1、2、5、10、25、50、100μmoL/L的混合标准溶液, 按前述的条件依次进行分析, 以f (x) 值为峰面积, x值为检测浓度 (μmoL/L) , 得到标准曲线。17种氨基酸的线性方程及相关系数见表1。

该测定方法具有较宽的线性范围, 17种氨基酸的线性范围为1~100μmoL/L, 线性回归系数均达到0.999以上;17种氨基酸的方法检出限范围在0.18~0.55μmoL/L。说明了用该方法检测蜂蜜中的17种氨基酸是可行的。

2.3 方法的回收率

为了验证该测定方法的准确性和可靠性, 对测定方法进行加标回收试验。选定油菜蜂蜜样品, 在其中加入不同量的17种氨基酸混合标液, 按照1.2中的试验方法进行处理和测定, 根据标准曲线的回归方程计算回收率, 试验结果见表2。

从以上结果可以看出, 该方法的回收率为88%~106%, 相对标准偏差RSD小于6%, 试验结果表明, 说明了用该方法检测蜂蜜中的氨基酸所得到的数据是准确可靠的。

2.4 样品测定

2.4.1样品来源的真实性。

寻求安徽天新蜂产品有限公司、安徽天保蜂园食品有限公司、安徽安粮蜂业有限责任公司、安徽王中王蜂产品有限公司、合肥众业蜂产品有限公司等蜂产品企业大力支持, 企业在收购原料时, 提供各地各种旺盛蜜源的初始样本。依据GH/T18796-2012标准各种蜂蜜感官要求, 对样品进行感官检验、花粉颗粒辨识等, 验证花种蜜单一性;并依据GB/T18932.1和GB/T18932.2进行碳-4植物糖和高果糖葡萄浆等掺假物质的检测, 确保样品来源的真实性。

2.4.2样品测定。

采集了油菜蜜、洋槐蜜、紫云英蜜、枣花蜜等4种安徽省主要蜜源, 各20个样本, 运用此方法进行氨基酸测定, 同时运用GB5009.5凯氏定氮法[4]测定蛋白质含量, 各平均值见表3。由表3可以看出, 蜂蜜中含有丰富的氨基酸, 氨基酸的含量基本在0.1%~0.3%, 且种类齐全, 具有丰富的营养价值;4种蜂蜜含有氨基酸的总量略有差异, 但含有的氨基酸种类基本相同, 且各氨基酸所占比例基本相近;4种蜂蜜皆富含天门冬氨酸、谷氨酸、亮氨酸、精氨酸等多种氨基酸, 不含胱氨酸;蜂蜜中蛋白质与氨基酸含量呈一定相关性, 蛋白质比氨基酸含量高, 基本是氨基酸含量的1.4~1.8倍。

3 结论

建立酸水解-全自动氨基酸分析仪测定蜂蜜中17种氨基酸方法, 试验结果表明, 该方法具有样品操作简便、快捷、准确度高、灵敏度高、高通量等特点。运用该方法测定了油菜蜜、洋槐蜜、紫云英蜜、枣花蜜等安徽省常见4种蜂蜜中的17种氨基酸, 试验表明这4种蜂蜜均含有天门冬氨酸、谷氨酸、亮氨酸、精氨酸等多种氨基酸, 但是不含胱氨酸, 氨基酸总量基本在0.1%~0.3%, 且种类齐全, 具有很好的营养价值。

参考文献

[1]刘小力.10种蜂产品氨基酸组成测定与比较分析[J].食品科技, 2009, 34 (1) :81-83.

[2]戴红, 张宗才, 张新申.氨基酸分析的检测方法评述[J].皮革科学与工程, 2004, 14 (3) :39-43.

[3]中华人民共和国卫生部GB/T5009.124-2003食品中氨基酸的测定[S].北京:中国标准出版社, 2004.

[4]中华人民共和国卫生部GB5009.5-2010食品中蛋白质的测定[S].北京:中国标准出版社, 2010.

[5]雷萍, 林淼.酸解法-氨基酸分析仪器测定蚕蛹中的17中氨基酸[J].饲料工业, 2011, 32 (3) :50-52.

[6]薛晓珍, 宴佩霞.蜂蜜中氨基酸最佳分析条件的确定[J].生物化学与生物物理进展, 1987 (3) :70-71.

土壤游离氨基酸研究概述篇3

关于传统陆地生态系统氮循环主要关注的是无机氮元素的循环,即矿质氮元素(NH4+,NO3-)的增加、分布、消耗等[1,2]。植物———土壤———微生物如何利用和调节生态系统无机氮源平衡的相关研究已比较成熟,并且已建立了比较完善的概念模型以供参考[3]。早期学术界普遍认为,植物并不需要直接利用有机氮源,并且在与微生物竞争利用无机氮源中处于劣势,只有微生物利用剩余的无机氮源(NH4+,NO3-),才能予以植物利用[4]。直到最近20年的相关研究揭示,陆生生态系统中的植物可以利用有机氮源,在有机氮源(氨基酸等)浓度等于或高于无机氮源(NH4+,NO3-)时,植物能够直接利用土壤中游离的氨基酸作为氮源。但目前关于土壤生态系统中氨基酸等有机氮源的利用研究仍处于初期[5,6,7]。目前土壤中游离氨基酸的相关研究主要集中两极、高海拔生态系统、北方寒冷森林系统中。这些地方气候严寒,导致氮元素矿化受到抑制,无机氮元素含量相对较低,因此这些条件下的生态系统中植物氮源主要以氨基酸为主,所以土壤中游离氨基酸对生态系统中的植物微生物具有重要作用。目前,普遍将土壤中的氨基酸作为低肥力生态系统中的氮库组成之一嵌入到生态系统中经典氮素循环模型中。Aber等人提出了植物对氮源的利用随着土壤中氮素的含量变化而改变,在低肥力的土壤中,植物主要以氨基酸为主要氮源,随着土壤肥力提高,逐步依次利用NH4+和NO3-,造成以上现象的主要原因是与生态系统中微生物的作用相关。在低肥力土壤中的微生物主要将N源合成有机物而矿化作用受到抑制,在高肥力土壤中主要是将N源进行矿化,因此低肥力土壤中植物主要利用氨基酸等有机氮源,而高肥力土壤中则利用无机氮源[1,8]。Aber等人的理论不仅与目前研究实验结果数据相吻合,同时也与两极、高海拔生态系统、北方寒冷森林系统实际情况相一致[9]。

目前相关研究显示土壤中的氨基酸不仅仅为植物还有微生物提供碳源和氮源,同时还在生态系统中碳氮循环中起到至关重要的作用[10,11]。对土壤中氨基酸等有机氮源的研究,不仅可以了解不同生态系统中物质循环的规律与机理,同时对生态系统的改造、保护及农业发展具有重要意义。

2 土壤中游离氨基酸的种类及来源

2.1 土壤中氨基酸的种类

生命系统中主要是20种天然的α-氨基酸参与生命过程中功能载体蛋白质的合成。研究发现,从土壤溶液或土壤提取液中鉴定出多种氨基酸,其中谷氨酸、天冬氨酸、甘氨酸含量相对较高,其次是丙氨酸、精氨酸、赖氨酸等氨基酸[12]。土壤中氨基酸的含量受地域、季节、采样时间、生物分布于活动等多种因素的影响,同时因为土壤中游离氨基酸易被植物吸收利用,因此土壤中主要氨基酸种类处于动态变化之中[13]。土壤中氨基酸的种类的丰富化是有机氮库的重要组成部分,也是植物氮源的保证。

2.2 土壤中氨基酸的来源

土壤中的氨基酸主要是各种来源的高分子有机物质通过微生物的分解后进入土壤中[14],其主要来源包括以下途径:

2.2.1 植物地上部分凋落腐败。

植物的枯枝落叶花瓣等凋落后,通过微生物的腐败分解作用后释放出大量的含氮物质,其中包括大量的氨基酸,释放出的氨基酸通过直接的沉降或者雨水的冲刷淋入土壤。地面植被的种类直接影响土壤中氨基酸的种类和含量[14,15]。

2.2.2 植物根系的死亡腐败。

植物根系功能复杂而强大,其中含有丰富的蛋白质,植物根系死亡腐败后能释放出各种丰富的氨基酸[14,15,16]。

2.2.3 其他来源途径。

主要包括土壤中微生物集中死亡释放出的氨基酸、植物根系自身分泌释放出的氨基酸、外源性氮源的添加如人工施肥后进入土壤中的氨基酸、动物活动因素如动物粪便偶然的动物尸体腐败而进入土壤的氨基酸。总之,蛋白质来源的氨基酸是土壤中氨基酸最稳定也是最主要的来源途径[14,15,16,17]。

3 土壤中氨基酸含量及测定方法

要保证植物的生长,提供其所需的氨基酸,则需要保证土壤中氨基酸的含量在一定指标之上。研究显示,氨基酸的含量常占土壤中氮元素含量的20%~50%,其含量与土壤中的微生物代谢息息相关,有机碳源和无机碳源共同为生态系统循环提供物质基础[18]。

土壤中氨基酸总含量是相当丰富的,然而游离的氨基酸含量却是很少。土壤中游离氨基酸的含量通常在每4μg/g以下,而土壤中氨基酸的总含量在500~1600μg/g之间,游离氨基酸占土壤中氨基酸总量1%以下,也只有土壤中游离的氨基酸才能够被植物吸收并利用。其中,丙氨酸(7%~15%)、组氨酸(5%~10%)、谷氨酸及其盐类(0~20%)、天冬氨酸及其盐类(0~20%)占游离氨基酸总量的80%以上[19]。同样,土壤中游离氨基酸的含量随地域、季节等多重因素的变化而变化。

土壤中氨基酸的鉴定与含量测定主要基于氨基酸自身特性,如分子量、碳含量,碳氮比、溶解性、离子交换性等物理化学性质[20]。如前所述,土壤中的氨基酸主要包括游离氨基酸和其他类型的氨基酸(如多肽、蛋白质中的氨基酸)。氨基酸总量的测定可以通过常规的显色反应进行,如茚三酮分光光度法、邻二苯甲醛和β-巯基乙醇荧光光度法。以上检测方法能够快速、准确、便宜地检测出土壤中氨基酸含量,但不能对氨基酸的组成进行分析。在不同地域、气候等条件下,植物对不同的氨基酸具有不同的吸收速率,因需要对土壤中的氨基酸组成进行定性和定量,才能揭示氨基酸在生态系统中氮素循环的重要作用[21]。

研究中,常用于个体氨基酸定性和定量分析的方法主要包括气相色谱法(GC)、高效液相色谱法(HPLC)、气质联用色谱法(GC-MS)、液质联用色谱法(LC-MS),柱后水合茚三酮显色阳离子交换色谱法、阴离子交换色谱-积分脉冲安培检测法等。气相色谱是发展比较成熟的分析技术,其应用于土壤中氨基酸的测定操作简便快捷;但是气相色谱法也由于专一性差等因素限制了其在土壤中氨基酸测定中的应用。随着分析技术的发展,气相色谱与其他方法联用的检测技术开始出现,如气相色谱与质谱联用(GC-MS),气相色谱与同位素比例质谱联用等技术。气相色谱与同位素比例质谱联用,不仅能测定土壤中氨基酸含量,同时能够利用同位素标记追踪土壤中氨基酸的转化和生态循环过程。高效液相色谱法是目前分析方法中最常用,也是应用最为广泛的检测方法,高效液相色谱法测定土壤中的氨基酸关键是进行衍生和检测器的选择。常用于土壤中氨基酸测定的高效液相色谱衍生方法主要是二硝基氟苯衍生法、邻苯二甲醛衍生法等[21]。不同检测方法各有特点和检测特性,需根据待检测样品的性质和实验目的综合考虑选择检测方法。

气相色谱和液相色谱在土壤中氨基酸检测中不足之处在于样品的前处理。土壤成分十分复杂,常常需要水解、提取、脱盐甚至衍生化后才能进行检测。操作步骤的繁琐常导致最终测定结果的偏差较大。目前出现的一些新兴分析技术,如毛细管电泳技术、荧光OPAME技术能够快速、准确定量,已经开始逐渐在测定土壤氨基酸含量中使用[22]。

4 影响土壤中游离氨基酸含量的因素

土壤中游离氨基酸主要来源于生物有机体蛋白质的分解。因此能够影响土壤氨基酸来源的因素均会影响土壤中氨基酸的含量。主要包括非生物因素和生物因素。

4.1 非生物因素

非生物因素主要包括地域土壤性质、温度、氨基酸本身的性质等。由于不同区域土壤组成成分存在差异,如三氧化二物能够吸附氨基酸,导致氨基酸不易流失而使得土壤中氨基酸含量相对较高。土壤中矿质元素的含量和种类对土壤中氨基酸含量变化也有影响。氨基酸会与矿质元素发生相互作用(如络合等)[23,24],从而影响氨基酸的流向。土壤的酸碱性会影响土壤中蛋白水解酶的活性,因而影响土壤中氨基酸含量的变化。相关研究显示,土壤中氨基酸的含量随土壤肥力的升高而减低,这也在一定程度上解释为什么严寒地域的植物对氨基酸的吸收利用高于无机氮源。在低湿度的土壤中,氨基酸的含量随湿度的增加无显著变化,但湿度达到一定程度后,土壤中氨基酸的含量随湿度的变化出现显著性差异,这可能是由于土壤中水分含量较高时微生物综合利用合成氨基酸量增加而导致。温度主要是通过影响土壤中水分的含量和影响蛋白水解酶的活性而影响土壤中氨基酸的含量。氨基酸本身的性质如分子量、疏水性、电性、CN比等因素会通过影响土壤对氨基酸的吸附、交换和生物利用而影响土壤中氨基酸含量。

4.2 生物因素

首先,微生物和植物吸收土壤中的氨基酸加以利用,使得土壤中氨基酸的含量降低,同时植物和微生物通过分泌和死亡分解释放出氨基酸成为土壤氨基酸的来源,氨基酸含量的变化取决于上述2个过程的综合作用结果,同时植物和微生物的相互作用也是影响土壤中氨基酸含量的因素之一。其次,人类社会生产活动(农业灌溉、施肥)和动物活动都会影响土壤中氨基酸的含量。

5 土壤氨基酸在土壤中氮循环中的意义

19世纪中期,Liebig等人提出的纯矿质营养论认为,生态系统中氮的有效性和植物营养都是基于矿质化的氮,即使有研究显示植物根部能直接吸收氨基酸加以利用,但当时普遍认为植物吸收的氨基酸仅是微生物利用剩下的极少部分,并且植物和微生物在有机氮源的竞争中一直处于劣势。因此传统的纯矿质营养论长期处于主导地位,矿质氮(NH4+,NO3-)和氮净矿作用一直是生态系统中土壤氮的有效性评价核心。通常以土壤中矿质氮(NH4+,NO3-)含量及变化和土壤矿质氮的通量来作为生态系统中有效性氮的指标[21]。

1960年以后,随着相关研究的深入,越来越多的研究结果揭示,植物能够直接吸收氨基酸等有机氮源,许多土壤生态系统中有机氮源是充足的,并且植物能够竞争过微生物直接利用这些有机氮源。传统纯矿质理论开始受到挑战,植物对土壤中氨基酸的吸收利用,让人们重新思考氮的矿质化是否仍是土壤生态系统中氮循环的核心。植物对氨基酸类有机氮源的吸收,直接跨越了生物体内矿质氮(NH4+,NO3-)向有机氮转化过程,成为生态系统中氮循环的快速通道[21],加快了土壤中氮元素的库存周转,对研究整个生态系统中氮循环具有重要意义。同时也要求人们进行更加细致深入的研究,提出更加完善的生态系统氮循环模型,以解释氮循环的奥秘及作用。

6 总语

毛发提取氨基酸技术院校成果篇4

该项目使用人及动物毛发、家禽羽毛等, 经水解提取氨基酸。南开大学的技术是将传统的沉淀法和权脂法 (完全新型的权脂) 结合起来。已经成熟的技术可提取胱氨酸、亮氨酸和酪氨酸, 纯度大于99%。目前正在研究并取得一定进展的技术可提取缬氨酸、精氨酸。提取脯氨酸和丝氨酸的方法正在研究中。

国内有些厂家只提取胱氨酸, 少数厂家可提取胱氨酸和亮氨酸, 剩下的其它十几种氨基酸白白浪费掉了, 而且浪费掉的某些氨基酸 (如缬氨酸、精氨酸、脯氨酸和丝氨酸等) 的价值更高。不管提取几种氨基酸, 其原料及水解等一系列过程是相同的, 所以提取的氨基酸的种类越多, 其相对成本越低, 利润越高。本方法工艺简单, 不需苛刻的条件, 规模可大可小。

联系人:米江林

单位:南开大学科技处

地址:天津市南开区卫津路94号

邮编:300071

麦苗中氨基酸测定与评价篇5

1 材料、仪器与方法

1.1 实验材料

麦苗采自山东潍坊地区,将长至25 cm高的幼麦苗割下、洗净、烘干磨碎成粉备用(100目以上)。

1.2 仪器

氨基酸自动分析仪(日立L-8800型),电子天平(METTLER AE200),混合氨基酸标准溶液(购于日本日立公司),色氨酸标准(购于日本日立公司)。

1.3 实验方法

精确称取一定量的样品放入特制的玻璃水解管中,加入6 mol·L-1 HCl 8 mL,抽真空,待真空度达到要求后维持10 min,封口,110℃ 水解 22 h,冷却。用滤纸过滤,取滤液1 mL于10 mL烧杯中,60℃水浴,在真空干燥器中蒸干。将蒸干的样品,定量加入一定体积的0.02 mol·L-1 HCl,在空气中放置30 min,用日立L-8800型氨基酸自动分析仪测定其氨基酸含量。因色氨酸被盐酸水解所破坏,故采用5 mol·L-1的NaOH溶液水解,用日立L-8800型氨基酸自动分析仪测定其色氨酸含量。测定条件为:

离子交换柱: 柱长 4.6×60 mm; 树脂 2622#; 反应柱柱温 135℃;分离柱柱温 57℃

缓冲液: 流速 0.400 ml·min-1; 柱压 7.000~7.300Mpa;茚三酮: 流速 0.350 ml·min-1;柱压 0.700~0.800Mpa。

标准蛋白分析程序

水分测定:GB/T 5009.03-2003;蛋白质测定: GB/T 5009.05-2003。

1.4 营养价值评价方法

根据FAO/WHO 1973年建议的氨基酸模式(%,dry)[3]和全鸡蛋蛋白质的氨基酸模式(%,dry)[3],分别按以下公式计算氨基酸评分(AAS)(CS)[4]:

undefined;undefined

式中:aa为试验样品氨基酸质量分数(%),AA(FAO/WHO)为FAO/WHO评分标准模式中同种氨基酸质量分数(%),AA(Egg)为鸡蛋蛋白质中同种氨基酸质量分数(%)。

2 结果与讨论

2.1 一般成分分析

经测定:麦苗中水分的质量分数为4.32%,蛋白质质量分数为25.16%。

2.2 氨基酸含量及营养评价

由图1表1可见,麦苗中富含有18种氨基酸。

*必需氨基酸;#药效氨基酸; (T)总氨基酸; (D) 药效氨基酸; (E)必需氨基酸;(N)非必需氨基酸

麦苗中氨基酸总量为20.73%,其中人体所必需的氨基酸总量为8.10%,药效氨基酸为13.99%,在我国饮食中作为主食的谷类作物的第一限制性氨基酸——赖氨酸(稻米中含量为0.29%)[5],在麦苗中的含量尤其丰富,可达到1.31%。必需氨基酸占总氨基酸的比值(EAA/TAA)为39%,必需氨基酸与非必需氨基酸的比值(EAA/NEAA)达到63%。根据FAO/WHO的理想模式[3],质量较好的蛋白质的EAA/TAA在40%左右,EAA/NEAA在60%以上。麦苗的氨基酸组成符合上述指标,是全营养食品。

从单一氨基酸组成上看,麦苗中必需氨基酸含量较高,均是AAS标准的1.30倍以上;除胱氨酸+蛋氨酸外均是CS标准的1.20倍左右(见表2)。

氨基酸具有重要的生理功能,除主要作为合成蛋白质的原料外,还可以转变成核苷酸、某些激素、神经递质等含氮物质。氨基酸含量要充足、种类要全面,才能满足机体生长发育和健康的需要。氨基酸缺乏时,人体正常的生长发育就会受到抑制或产生疾病。本文测得麦苗中氨基酸种类齐全,含量丰富, 比例平衡,不但必需氨基酸含量很高,而且还富含药效氨基酸,这与中药典籍《本草纲目》将麦苗列为补益药物相符,也与国内外临床上使用麦苗防治疾病有良效这一事实相吻合。

3 结论

麦苗中富含18种氨基酸,尤其是必需氨基酸占总氨基酸的比值为39%,必需氨基酸与非必需氨基酸的比值达到63%,符合FAO/WHO的理想模式,比例平衡,是一种全营养食品。麦苗中药效氨基酸为13.99%,这也与其具有抗肿瘤、增强毛细管作用及心脏功能、消炎和增强机体免疫等多种功能密不可分。随着人们对麦苗生物活性物质及其作用研究的不断重视和深入,麦苗将会成为药物、保健、饮食、美容等方面的重要资源之一。

参考文献

[1]李时珍.本草纲目[M].北京:人民卫生出版社谷部第二十二卷.1979:1455.

[2]Kulkarni SD,Tilak JC.Evaluation of the antioxidant ac-tivity of wheatgrass(Triticum aestivum L.)as a functionof growth under different conditions[J].Phytother Res,2006,20(3):218～227.

[3]Pellett PL,Yong VR.Nutritional evaluation of proteinfoods[M].Tokyo:The United National University Pub-lishing Company,1980,26～29.

[4]赵峰,宋超,施兆鸿,等.野生银鲳幼鱼主要营养成分的测定与评价[J].营养学报,2008,30(4):425.

驼血多肽的氨基酸成分分析篇6

我国血液资源十分丰富,如猪血、鸭血、鸡血等,但对血液资源的开发利用较少,除少部分被加工成血制品外,大多数作为废弃物处理[1]。血液中蛋白质含量丰富,可作为良好的蛋白源,因此具有广阔的开发前景[2]。骆驼为哺乳纲、偶蹄目、骆驼科、骆驼属动物,在其产业链中,驼奶、驼绒和驼肉都被很好地利用,而宰杀骆驼时产生的驼血,由于口感等原因,绝大部分同其他血液一样被废弃,造成了巨大的资源浪费。研究表明[3],直接从肠道吸收进入血液的活性肽具有许多重要的功能,它不仅是氨基酸的供体,而且具有一定的生物活性,如参与机体的免疫调节、促进矿物质吸收、降血压、抗氧化等。目前国内外对于驼血的研究与开发尚处于空白阶段,本课题组将新鲜驼血酶解、分离、脱色得到驼血多肽,分析了驼血多肽的氨基酸组成,并对其营养价值进行评价,为驼血多肽的开发提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试剂与仪器

浓盐酸、苯酚、柠檬酸三钠、氯化钠、柠檬酸、氢氧化钠、无水乙醇、苯甲醇、硫二甘醇、正辛醇酸、乙二醇甲醚、茚三酮、三氧化钛、无水醋酸钠、冰醋酸、尿素均为分析纯,高纯氮气:纯度99.99%。

835氨基酸自动分析仪(HITACHI,日本),RF-5000型荧光分光光度计(SHIMADZU,日本),ZFD-5090电热恒温干燥箱(上海至诚分析仪器制造厂,中国)。

1.2 方法

1.2.1 氨基酸含量测定

精密称取10.000 mg驼血多肽,置于试管中,加入10mL 6mol·L-1盐酸(含0.1%苯酚),抽真空、充高纯氮气密封后在(110±1)℃恒温烘箱中水解22h,水解结束后冷却、混匀,过滤至50mL容量瓶内,用超纯水定容并混匀。吸取1 mL待测液置于真空干燥器中,在40~50℃干燥,残留物用1mL水溶解,再干燥,反复进行两次,最后蒸干,用1mL pH 2.2的缓冲液溶解,用氨基酸自动分析仪进行测定[4]。色氨酸含量的测定借助于SHIMADZU RF-5000型荧光分光光度计,结合驼血多肽质量及试样中色氨酸的浓度,计算驼血多肽中色氨酸的含量。

1.2.2 氨基酸含量计算

氨基酸含量计算参照GB/T5009.124-2003方法[4]。

1.2.3 驼血多肽营养价值评价指标的计算

(1)必需氨基酸质量分数:必需氨基酸(EAA)含量与氨基酸总量(TAA)之比(E/T),必需氨基酸与非必需氨基酸(NEAA)之比(E/N)按下式计算:

(2)氨基酸评价指标:根据WHO/FAO/UNU1985年推荐的氨基酸评分模式[5],选择成人组评分模式按下式计算驼血多肽中必需氨基酸评分(AAS)和化学评分(CS)。

2 结果与分析

2.1 驼血多肽的氨基酸含量

图1为标准品与驼血多肽经全自动氨基酸分析仪分析获得的色谱图,图中1~17分别表示17种氨基酸。

注:1天门冬氨酸(Asp);2苏氨酸(Thr);3丝氨酸(Ser);4谷氨酸(Glu);5脯氨酸(Pro);6甘氨酸(Gly);7丙氨酸(Ala);8缬氨酸(Val);9甲硫氨酸(Met);10异亮氨酸(Ile);11亮氨酸(Leu);12酪氨酸(Tyr);13苯丙氨酸(Phe);14赖氨酸(Lys);15组氨酸(His);16精氨酸(Arg);17胱氨酸(Cys-Cys)

由图1可知,各氨基酸峰得到了较好的分离,峰面积由大到小依次是亮氨酸、天门冬氨酸、赖氨酸、缬氨酸、丙氨酸、甘氨酸、脯氨酸、丝氨酸、谷氨酸、苏氨酸、组氨酸、苯丙氨酸、精氨酸、胱氨酸、酪氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸。赖氨酸为豆类的限制性氨基酸,而在驼血多肽中,赖氨酸含量较高,因此,驼血多肽具有较高的营养价值,可与豆类食品搭配食用。

2.2 驼血多肽的营养评价

2.2.1 驼血多肽的必需氨基酸质量分数

驼血多肽各氨基酸含量及必需氨基酸质量分数见表1。

必需氨基酸是人体不能合成或合成速度不能满足机体需要而必须从食物中直接获得的氨基酸。必需氨基酸在人体中的存在,为促进生长、进行正常代谢、维持生命提供了重要的物质基础。由表1可知,驼血多肽中9种必需氨基酸(包括组氨酸)含量均远高于WHO/FAO/UNU推荐量[5];其中,组氨酸和亮氨酸的含量高于鸡蛋、牛奶和牛肉,赖氨酸含量高于鸡蛋和牛奶,苏氨酸含量高于牛奶,缬氨酸含量高于牛奶和牛肉[5]。质量较好的蛋白质其必需氨基酸与总氨基酸的比值在40%左右,必需氨基酸与非必需氨基酸的比值在60%以上[5],驼血多肽中必需氨基酸含量为44.82%,必需氨基酸与非必需氨基酸的比值更是高达103.20%,均高于推荐值,且必需氨基酸含量均高于鱼皮低聚肽(24.43%)[6]和鹿血低聚肽(36.87%)[7],是一种优质的蛋白质资源。

2.2.2 驼血多肽的氨基酸评价指标

本研究以粗蛋白为基数计算氨基酸评价指标,见表2。

由表2可知,驼血多肽中亮氨酸评分最高,其AAS和CS分别为609.15和134.58;甲硫氨酸评分最低,其AAS和CS分别仅为14.12和4.21,是驼血多肽的第一限制性氨基酸。WHO/FAO/UNU推荐的成人的AAS为100[4],即AAS与CS越接近于100,表明多肽营养价值越高。除异亮氨酸和甲硫氨酸外,驼血多肽的AAS均远高于100,说明驼血多肽中必需氨基酸含量较高。除异亮氨酸、甲硫氨酸和色氨酸的CS较低、组氨酸CS较高外,驼血多肽中CS均接近于100,说明驼血多肽接近于鸡蛋的氨基酸模式,具有较高的营养价值。

研究表明,色氨酸是唯一含吲哚环的氨基酸[8],可经色氨酸脱羧酶转化为色胺,从而提高色氨酸次级代谢产物吲哚生物碱的合成[9],而吲哚生物碱具有很强的抗氧化活性[10],在本课题组前期研究中,通过相同方法测定了鱼皮低聚肽和鹿血低聚肽中的氨基酸含量,其中,鹿血低聚肽中色氨酸含量为0.30%[7],鱼皮低聚肽中色氨酸含量为0.28%[6],与鹿血低聚肽和鱼皮低聚肽相比较,驼血多肽中色氨酸含量较高,可能具有较强的抗氧化活性。

2.2.3 驼血多肽的支链氨基酸含量

驼血多肽中支链氨基酸含量见表3。

由表3可知,驼血多肽中支链氨基酸(branched chain amino acid,BCAA)含量为19.15%,接近于鸡蛋中的BCAA含量(20.6%)[4],高于鹿血低聚肽和鱼皮低聚肽中的BCAA含量(分别为17.99%和9.99%)。BCAA是一组在碳链上具有支链结构的脂肪族中性氨基酸,包括亮氨酸(Leu)、异亮氨酸(Ile)和缬氨酸(Val)。BCAA在生理调节与机体代谢方面具有独特的功能,被称为功能性氨基酸。人们通过三个月周期的临床试验研究了BCAA的补充在心脏衰竭病人治疗中的作用,结果显示,BCAA的补充可改善疲劳(45.4%)、卧位不耐受(21.8%)及呼吸困难(25.4%)[11]。亮氨酸是一种营养必需的BCAA,通常是高质量的蛋白质食品中最丰富的氨基酸之一,能促进蛋白质合成及能量代谢(葡萄糖摄取,线粒体生物合成和脂肪酸氧化),在促进动物(包括人类、鸟类和鱼类)生长方面发挥重要作用[12]。在驼血多肽中,亮氨酸含量最高,因此,驼血多肽能很好地促进蛋白质合成及葡萄糖摄取等,可作为生物活性肽加以开发利用。

3 结论

目前,从动物皮、血、骨中分离的生物活性肽越来越多,如抗氧化肽、抗菌肽、降血压的血管紧张素转换酶抑制肽等。驼血多肽中必需氨基酸含量高达44.84%,为机体正常的新陈代谢提供物质基础;亮氨酸为含量最高的氨基酸,可促进蛋白质合成和能量代谢;BCAA含量为19.15%,不仅高于鹿血低聚肽[7],也高于鱼皮低聚肽[6],且接近于鸡蛋中的BCAA含量,作为能源物质为机体提供能量。驼血多肽中氨基酸总量较高,必需氨基酸均能满足人体需要,接近于鸡蛋必需氨基酸模式,可防止肌肉分解、预防和减轻中枢疲劳、刺激相关激素的分泌。因此,从必需氨基酸含量及氨基酸组成分析,驼血多肽的必需氨基酸含量及氨基酸组成符合高质量蛋白的要求,为优质蛋白源,可作为生物活性肽加以开发利用。

参考文献

[1]钟耀广,南庆贤.国内外畜血研究动态[J].中国农业科技导报,2003,5(3):26-29.

[2]董海英,王海滨.鸭血、鸭骨氨基酸分析与评价[J].肉类工业,2009,341(9):24-26.

[3]靳艳,刘晓艳,邹汉法.基于蛋白质组学、肽组学的中药动物药活性组分的研究[J].世界科学技术:中医药现代化,2011,13(1):162-166.

[4]中华人民共和国卫生部.GB/T5009.124-2003.食品中氨基酸的测定[S].北京:中国标准出版社,2003.

[5]World Health Organization,Food and Agriculture Organization of the United Nations,United Nations University.Energy and protein requirements:report of a Joint WHO/FAO/UNU Expert Consultation[R].Geneva:World Health Organization,1985.

[6]王宁丽,徐月敏,刘毅,等.鱼皮低聚肽氨基酸组成及抗氧化活性研究[J].食品研究与开发,2016,37(2):31-35.

[7]王宁丽,徐月敏,刘毅,等.鹿血低聚肽的氨基酸成分分析[J].食品工业,2015,36(10):22-23.

[8]Palego L,Betti L,Rossi A,et al.Tryptophan biochemistry:structural,nutritional,metabolic,and medical aspects in humans[J].J Amino Acids,2016,2016(2):1-13.

[9]Dubouzet J G,Matsuda F,Ishihara A,et al.Production of indole alkaloids by metabolic engineering of the tryptophan pathway in rice[J].Plant Biotechnology Journal,2013,11(9):1103-1111.

[10]缪宇平.海藻生物活性物质研究——1.天然海藻抗氧化剂—吲哚噁唑生物碱Martefragin A衍生物的合成及其生物活性研究2.麻痹性贝毒之膝沟藻毒素Gonyautoxins的制备及其测定方法研究[D].上海:复旦大学,2003.

[11]Pineda-Juárez J A,Sánchez-Ortiz N A,CastilloMartínez L,et al.Changes in body composition in heart failure patients after a resistance exercise program and branched chain amino acid supplementation[J].Clin Nutr,2016,35(1):779-780.

鹅氨基酸营养的研究进展篇7

1 影响家禽氨基酸需要量的因素

影响家禽氨基酸需要量的因素主要包括环境温度、生产力水平、饲料 (日粮能量水平、蛋白质水平及氨基酸平衡、氨基酸利用率) 、遗传因素 (动物生理状况、品种、性别和年龄) 等。家禽是为满足其能量需要而调节其采食量的, 当日粮中能量浓度高时, 家禽的采食量减少, 反之则增加。因此, 应根据日粮能量浓度的不同而调整日粮蛋白质和氨基酸的浓度[1]。由于不同类型、品种的家禽遗传特性不同, 其生长速度、体格大小、胴体组成及消化生理也不同, 氨基酸需要量亦不同[2], 但总的趋势是当用日粮的百分含量表示需要量时, 氨基酸的需要量会随着年龄和体重的增长而下降[3,4]。

2 家禽氨基酸需要量的评定方法

氨基酸需要量的评定方法主要有两种, 即剂量反应法和析因法。

2.1 剂量反应法

剂量反应法是根据饲料中氨基酸水平与生长性能的直接关系确定氨基酸的需要量。但日粮组成、饲养水平以及选取的指标不同得出的氨基酸需要量差异比较大, 与实际需要相比存在一定的误差。不同原料配制出的相同营养水平的日粮, 对实际饲喂效果也会有一些影响。因此, 剂量反应法对各种营养素平衡的考虑尚需进一步验证和加强。

2.2 析因法

析因法的依据是组织氨基酸组成与需要量高度相关, 析因法把家禽的氨基酸需要量剖分为维持需要、胴体蛋白质沉积和羽毛蛋白质沉积需要[5], 即通过比较屠宰试验分析胴体及羽毛的氮含量和氨基酸组成, 估测家禽用于生长的氨基酸需要量。维持需要量和生长需要量之和即为家禽的总氨基酸需要量, 再根据家禽采食量, 最后确定日粮中的氨基酸水平。

3 鹅的氨基酸营养需要的研究

3.1 赖氨酸的需要量

Roberson R H等研究表明, 当日粮热能为12.33 MJ/kg、赖氨酸含量为0.9%时, 0～3周龄雏鹅可获得最佳生长与饲料转化率。有人在对鹅赖氨酸需要的研究中发现, 0～4周龄仔鹅赖氨酸需要量为1.10%最佳, 4～8周龄赖氨酸需要量为0.85%最佳[6]。Nitsan等的试验结果表明, 0～2周龄与2～7周龄鹅的赖氨酸需要量分别为1.07%和0.6%。有人建议4～8周龄鹅的赖氨酸最佳需要量为0.9%。对罗曼白鹅赖氨酸需要量的研究表明, 0～4周龄雏鹅的赖氨基酸需要量为1.16%。美国 NRC 建议4周龄以上鹅的赖氨酸需要量为0.85%。李文立等[7]对育成期五龙鹅的研究表明, 饲粮赖氨酸水平为0.70%时增重速度最快。殷海成[8]在对生长期固始白鹅的研究中发现, 适宜的赖氨酸添加量为 0.90%。大量的研究表明, 鹅在0～4周龄时赖氨酸需要量为0.90%～1.16%, 4周龄以后为0.6%～0.9%。

3.2 蛋氨酸的需要量

Roberson的研究表明, 中国白鹅的日粮蛋氨酸需要量为0.34%。前苏联 (1985年) 和美国NRC (1994年) 建议4周龄以上鹅的蛋氨酸需要量为 0.45%～0.50%。研究表明, 30日龄以上蛋氨酸添加水平以大于 0.3%为宜。有人研究了蛋氨酸含量对仔鹅生长的影响, 从体增重和饲料报酬对日粮蛋氨酸水平进行的回归分析, 结果表明, 中国鹅蛋氨酸需要量为0.59%～0.75%, 罗曼白鹅蛋氨酸需要量为0.5%～0.7%;仔鹅蛋氨酸需要量高于肉用仔鸡和北京鸭。李文立等 [9]研究表明, 当饲粮中蛋氨酸含量为0.57%, 赖氨酸含量为1.23%时, 0～6周龄五龙鹅增重最快, 饲料转化率最低, 血浆中尿酸含量最低。殷海成的研究表明, 生长期固始白鹅适宜的蛋氨酸添加量为 0.48% , 符合NRC的推荐量。研究表明, 仔鹅的蛋氨酸需要量为0.34%～0.75%, 但随其品种不同而有较大差异。

3.3 苏氨酸的需要量

周彦文等研究表明, 0～4周龄合浦肉鹅饲粮中苏氨酸适宜添加量为0.55%时可满足生长需要, 这个结果接近 NRC推荐水平, 但对生长性能影响不明显。殷海成的研究表明, 生长期固始白鹅适宜苏氨酸添加量为 0.60%。畜禽对氨基酸的需要量随能量浓度的提高而增加, 保持氨基酸与能量的适宜比例对提高饲料利用率十分重要。只有确定氨基酸与能量、蛋白之间的最佳需要量, 才能达到最佳的生产效益。

4 家禽理想氨基酸模式的研究

人类对畜禽蛋白质、氨基酸需要的认识已经从对总蛋白需要转到对必需氨基酸和非必需氨基酸的需要, 对粗蛋白质消化率的研究转为对氨基酸消化率的研究, 以至引出可利用氨基酸和完整蛋白质的概念, 最终达到“理想蛋白氨基酸模式” (IPAAP) , 即饲料蛋白质中的各种氨基酸含量与动物用于特定功能所需要的氨基酸量相一致 (动物对蛋白质的利用率为100%) 。理想氨基酸模式理论的建立, 订出了以赖氨酸为100的其他氨基酸的比率, 这样更容易适应多样性的环境条件。从对单胃动物理想氨基酸模式50多年的研究历程来看, 可以将理想氨基酸模式的研究方法归纳为机体氨基酸成分分析、综合法和专门的氮平衡试验法。目前, 对其他鸡、鸭、猪等畜禽已有报道, 国内学者尹清强等[10]和计成等 [11]分别用析因法研究了产蛋鸡理想氨基酸模式及其需要量。贺建华等用析因法研究了天府肉鸭氨基酸需要量及其模式。1989年, Fuller等对生长猪理想氨基酸模式进行了研究。王志跃等[12]试验结果表明, 5～10周龄扬州鹅生长的理想氨基酸模式为:赖氨酸100、蛋氨酸44、苏氨酸36、亮氨酸90、异亮氨酸41、精氨酸59、缬氨酸45;5～10周龄扬州鹅各种氨基酸的总需要量 (占日粮的百分比) 为:赖氨酸0.72%、蛋氨酸0.33%、苏氨酸0.31%、亮氨酸0.71%、异亮氨酸0.35%、精氨酸0.51%、缬氨酸0.39%。这也为以后鹅氨基酸营养研究提供了理论基础。

5 结论与展望

综上所述, 鹅0～4周龄赖氨酸需要量为0.9%～1.16%, 4周龄以后为0.6%～0.9%。仔鹅蛋氨酸需要量为0.34%～0.75%。但在实际生产中氨基酸的用量应根据鹅的遗传因素、饲养环境和日粮能量及蛋白质含量进行调整。一般而言, 当日粮能量变化时, 家禽的采食量也会随之改变, 因此应根据日粮能量的不同来调整日粮中蛋白质和氨基酸的含量, 随着畜禽日粮蛋白质水平的增加, 必需氨基酸需要量 (占日粮的百分比) 亦增加, 若采用氨基酸平衡营养饲料配方新技术, 添加外源性氨基酸可提高粗蛋白的利用率, 进而节省饲粮粗蛋白需要量, 从根本上减少粪尿中氮的排出, 可减轻对环境的污染。家禽氨基酸消化率的测定方法仍需进一步研究和完善, 日粮最终以可利用氨基酸为基础进行配制较为科学。即按照理想蛋白氨基酸模式, 以可消化氨基酸为基础, 配制家禽日粮是家禽理想化营养需要的必然趋势。

摘要：蛋白质是由氨基酸组成, 氨基酸的种类、数量和配比是决定蛋白质品质的重要因素。畜禽对各种氨基酸的需要及模式直接影响蛋白质饲料资源的充分利用, 对提高畜禽的生产性能具有重要意义。本文仅就鹅的氨基酸营养需要研究进展和氨基酸需要量评定方法及影响因素作一综述, 并结合氨基酸在畜禽营养中的利用, 对理想蛋白可消化氨基酸模式在畜禽饲料中的应用前景进行了展望。

关键词：鹅,家禽,氨基酸,理想模式,营养需要

参考文献

[1]黎观红, 瞿明仁, 晏向华.家禽氨基酸需要量的研究进展[J].饲料工业, 2001, 22 (4) :7-9.

[2]ROSA A P, PESTI G M, EDWARDS H M, et al.Threonine require-ments of different broiler genotypes[J].Poult Sci, 2001, 80 (12) :1710-1717.

[3]龚月生, 姚清东.肉用仔鸡赖氨酸需要量的研究:赖氨酸水平对生产性能的影响[J].西北农业大学学报, 1994, 22 (2) :81-85.

[4]刘毅, 程廷锦.肉用仔鸡可消化赖氨酸和可消化含硫氨基酸适宜需要量的研究[J].中国家禽, 1995 (5) :23-24.

[5]王志耕, 吴广全, 李绍全, 等.皖西白鹅肉脂特性研究[J].畜牧兽医学报, 2002, 33 (4) :332-335.

[6]梁远东.生长鹅的营养需要[J].广西畜牧兽医, 2001, 17 (4) :10-12.

[7]李文立, 王宝维, 林英庭, 等.不同蛋氨酸和赖氨酸添加水平对五龙鹅生产性能的影响[J].黑龙江畜牧兽医, 2004 (1) :30-31.

[8]殷海成.饲粮氨基酸水平对生长期固始白鹅生长性能影响[J].饲料广角, 2009 (1) :26-27.

[9]李文立, 王宝维, 林英庭, 等.五龙鹅饲粮蛋氨酸和赖氨酸适宜水平的研究[J].南京农业大学学报, 2004, 27 (2) :68-71.

[10]尹清强, 韩友文.利用析因法测定产蛋必需氨基酸需要量及建立氨基酸模型[J].畜牧与兽医, 1996, (28) 5:195-198.