乙肝表面抗原定量（精选十篇）
乙肝表面抗原定量 篇1
关键词：Pre-S1Ag,HBeAg,急慢性乙肝,定量检测
我国乙肝表面抗原HBs Ag携带者人数为1.2亿, 约占世界HBs Ag携带者总量的1/3, 是病毒性肝炎高发国家之一。临床常以乙肝五项 ( (1) HBs Ag; (2) HBs; (3) HBe Ag; (4) HBe; (5) 抗HBc) 作为诊断的重要指标。完整的乙肝病毒HBV衣壳蛋白由S蛋白、前S蛋白两部分组成, 前S蛋白具体可分为前S1、前S2蛋白[1~3]。近年来的研究表明, 在病毒侵入过程中PreS1Ag具有重要作用, 不仅可以反映HBV传染性强弱、病毒复制、装配等情况, 还能评估乙型肝炎的诊断、治疗和预后[2]。我们就本院收治的540份急慢性乙肝患者的血清标本进行HBs Ag、HBe Ag、Pre-S1Ag的有关检测, 以对比总结三者的相互关系和临床意义。
1 资料与方法
1.1 资料
从我院2009~2011年收治的乙肝患者血清样540份本中随机抽取, 采用差数字表方法, 其中男性315例, 年龄10~68岁;女性225份, 年龄8~71岁[4]。全部患者, 均符合中华医学会传染病、寄生虫学分会以及肝病学会共同制定的《病毒性肝炎防治方案》诊断标准[5]。
1.2 方法
1.2.1 仪器
时间分辨荧光免疫分析仪 (上海科华生物技术有限公司生产) ;酶标仪 (芬兰Muliskan MK3) ;全自动洗板机 (深圳雷杜RT-6100) 。
1.2.2 试剂
Pre-S1Ag检测试剂 (上海阿尔法生物技术有限公司) ;HBs Ag浓度、HBe Ag浓度检测试剂盒 (上海新波生物技术有限公司) [6,7]。
1.2.3 检测方法
空腹抽取静脉血5ml, 待其自然凝固后进行血清分离。Pre-S1Ag检测采用双抗体夹心ELISA法;HBe Ag和HBs Ag定量检测采用实时荧光定量法。
1.3 统计学处理
采用软件SPSS17.0进行检测结果分析, 计量资料用χ2检验, P<0.05具有统计学意义。
2 结果
(1) E抗原HBe Ag (+) 组的HBe Ag浓度为 (49.77±30.78) PEIU/ml, Pre-S1Ag (+) 率为81.12%;E抗原HBe Ag (-) 组的HBe Ag浓度为 (0.14±0.33) PEIU/ml, Pre-S1Ag (+) 率为21.60%;乙肝表面抗原HBs Ag (+) 组的HBs Ag浓度为 (139.78±89.10) PEIU/ml, Pre-S1Ag (+) 率为35.00%。HBe Ag (+) 组和Pre-S1Ag无统计学意义, P>0.05;HBe Ag (-) 组、HBs Ag (+) 组和PreS1Ag具有统计学差异, P<0.05 (见表1) 。
(2) HBe Ag (+) HBs Ag (+) HBc Ab (+) , HBs Ag浓度为 (212.30±46.90) PEIU/ml, Pre-S1Ag (+) 率为81.12%;HBe Ab (+) HBs Ag (+) HBc Ab (+) , HBs Ag浓度为 (139.78±89.10) PEIU ml, Pre-S1Ag (+) 率为27.95%[8] (见表2) 。
3 讨论
HBV传染性极强, 常通过血液、母婴、性等方式传播。乙肝的流行, 不仅影响居民的身体健康, 还给社会带来诸如经济、心理等负面影响, 已成为目前我国所要面对的严峻的公共卫生问题。目前, 乙肝的临床诊断主要是结合临床表现, 对患者血清标志物、乙肝病毒的脱氧核糖核酸以及肝功能情况进行判断。HBe Ag阳性可作为HBV传染性、复制情况、乙肝急性转慢性的标志。过去普遍认为HBe Ag由阳性转阴性可提示HBV的清除。事实上, HBe Ag会有这样的转变, 有可能是乙肝病毒为逃避免疫反应, 出现C区变异导致HBe Ag转为阴性, 并不能代表HBV复制停止。相反, PreS1Ag不会受到这样的影响, Pre-S1Ag不仅在HBV感染、复制、刺激机体产生免疫反应等方面有重要作用, 也是HBV感染和复制的重要指标, 可见于HBV早期检测[9,10]。据研究表明, Pre-S1Ag与HBV-DNA检测结果有较高的符合率, 对评估HBV复制和传染性强弱方面的价值优于HBe Ag[5]。在本文统计实验中, Pre-S1Ag (+) 率的增加与HBe Ag浓度的增加具有一致性。且有27.95%的HBe Ag (-) 组的Pre-S1Ag呈阳性, 说明HBV仍存在复制, 可采用Pre-S1Ag和乙肝五项同时检测以正确进行综合评定。
参考文献
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乙肝表面抗原定量 篇2
在临床检测中，常常遇到溶血的标本。溶血对ELISA检测乙肝表面抗原（HBsAg）究竟是否有影响，各文献报道很不一致，本文对标本溶血的原因及其对ELISA检测乙肝表面抗原的影响进行简要的讨论。1 标本溶血的原因
溶血是临床检验中最常见的一种干扰和影响因素。溶血可分为体内溶血和体外溶血［1］。体内溶血可由物理因素（如人工心脏瓣膜或大血管手术后）、化学因素（如恶性疟）和药物毒性反应等因素引起。体外溶血可由物理因素（抽血时负压过大、水浴温度过高、冰冻、振荡等机械性破坏）、化学因素（血样接触表面活性剂）和代谢因素（如遗传病引起红细胞脆性增加）引起。
在临床上常见的引起标本溶血的原因包括 ［2］ :由于病人严重脱水、低血容量休克等原因导致穿刺困难造成的溶血;由于抽血器具质量不合格如真空管负压不够或塑料试管质量较差导致的溶血;用干燥管采血为了尽快分离血清用竹签搅拌不当引起的溶血等。2 标本溶血对乙肝表面抗原检测的影响
一些研究没有发现标本溶血对HBsAg检测的影响。李穗芬 ［3］ 对20例HBsAg阴性和10例HBsAg阳性病人的溶血和非溶血标本包括10例OD值在临界值附近的标本进行了对照，结果非溶血和溶血标本的阴、阳性结果完全一致。20例HBsAg阴性和10例OD值在临界值附近的样本，溶血与对应非溶血标本OD值间差异没有显著性;10例HBsAg阳性样品，溶血标本OD值明显大于对应非溶血标本OD值。因此得出结论，标本溶血不影响HBsAg结果的判定，只是使HBsAg阳性标本的OD值提高。许斌等［4］ 对HBˉsAg强阳性样品的非溶血与溶血（Hb浓度为241g/L）标本的A值作了对照后未发现两者有统计学差异，得出结论:溶血对HBsAg的检测没有影响（严格意义上应表述为:溶血对HBsAg强阳性标本的检测没有影响）。单桂秋等［5］ 的研究也显示，HBsAg阳性样品的非溶血与溶血标本的A值间经t检验差异无显著性。
其他的一些研究则发现，溶血对HBsAg的检测有影响。钱厚明等 ［6］发现，在17例溶血标本中，初检的5例HBsAg阳性标本，经重新抽血复检后有2例仍为阳性，另3例转阴。认为是溶血导致了假阳性的出现。刘玉振等 ［7］ 研究发现，溶血对HBsAg的检测有影响，当红细胞浓度>25%造成的溶血可导致假阳性。龙宪和等［8］ 研究发现，无论在健康人还是乙肝病毒感染者中，溶血均导致了ELISA一步法检测HBsAg假阳性结果的出现，而采用二步法则可以保证结果判读无误。标本溶血对乙肝表面抗原检测影响的可能机制
溶血是由于各种原因造成红细胞破坏，胞内血红蛋白（Hb）等物质和细胞内液进入血清。溶血对ELISA的影响主要是反应孔对溶血血清中Hb的非特异性吸附和溶血时细胞内液对血清的稀释作用。单桂秋等［5］ 的实验也证明了溶 血对血清具有稀释作用。
在ELISA试验中，酶标反应板孔包被物的浓度是一个相对定值，抗原抗体反应存在最适比例和后带现象，因此，HBsAg浓度与A值只是在一定的范围内呈一定的线性关系;当HBsAg达到一定浓度时A值的变化进入平台期;当HBsAg浓度太高时，A值反而会降低。因此，溶血可以使HBsAg浓度很高的样品的A值升高（在一定程度上解决了后带现象）;当HBsAg浓度与A值呈线性关系时才会因溶血的稀释作用使A值下降;当HBsAg浓度近临界值时，可能造成假阴性。
Hb具有类过氧化物酶活性，其作用与辣根过氧化物酶类似，如果反应孔非特异吸附Hb而残留，则可催化底物显色，使本底A值升高甚至造成假阳性。如果洗涤质量好，则可能大大减少或排除非特异性吸附的干扰。单桂秋等［5］ 的实验未体现血中Hb非特异性吸附的影响。龙宪和等 ［8］ 采用二步法操作可以排除溶血释出的Hb对HBsAg检测的影响也说明洗板质量在ELISA检测中的重要性。
如何正确对待乙肝表面抗原携带者 篇3
【关键词】乙肝；表面抗原携带者；正确对待
【中图分类号】R51 【文献标识码】B 【文章编号】1004-7484（2013）05-0820-01
国家卫生部在全国人群乙肝等有关疾病血清流行病学调查时发现，全国1～59岁人群乙肝表面抗原携带率为7.18%。1～4岁人群乙肝表面抗原携带率最低，为0.96%。5～14岁人群为2.42%。15～59岁人群乙肝表面抗原携带率最高，达8.57%。1～4岁人群乙肝表面抗原携带率明显低于15～59岁人群。全国人群乙肝抗体阳性率为50.09%。城市高于农村，西部高于东部地区。1～4岁人群乙肝抗体阳性率最高，为71.24%，5～14岁人群为56.58%。15～59岁人群最低，为47.38%。 乙肝疫苗全程和首针及时接种率城市高于农村，东部高于西部，医院出生儿童乙肝疫苗首针及时接种率高于在家出生儿童。
尽管乙肝病毒表面抗原携带者（即所阅“澳抗阳性”，在检验报告单上HBsAg为“+”）没有明显的肝炎症状和体征，肝功能也基本正常，除了部分工作（如饮食服务、幼教保管人员）从业受限制外，其他完全可以与正常人一样地工作学习[1]。但是，大多数乙肝病毒表面抗原携带者的肝组织，都受到不同程度的损害。
1 发病机制
乙型肝炎是由乙肝病毒（HBV）引起的、以肝脏炎性病变为主并可引起多器官损害的一种传染病。本病广泛流行于世界各国，主要侵犯儿童及青壮年，少数患者可转化为肝硬化或肝癌。因此，它已成为严重威胁人类健康的世界性疾病，也是我国当前流行最为广泛、危害性最严重的一种传染病。但并不是每个感染病毒的人都会成为乙肝患者，这与患者感染的病毒数量、毒力和感染方式等因素密切相关，每个人的身体素质、免疫反应状态，也在乙肝病情和病程的转归上起着重要作用。所以患者感染乙肝病毒后可能出现下面结果：不发病且产生保护性乙肝表面抗体、长期慢性无症状带毒者、轻度慢性肝炎、重型肝炎。
医学上肝炎可分为甲、乙、丙、丁、戊、己、庚七种类型，其中乙肝是流行最广泛、危害最严重的一种传染肝炎。乙型病毒性肝炎（简称乙型肝炎）是由乙型肝炎病毒（简称乙肝病毒）引起的肝脏炎性损害，本病遍及全球，临床表现为乏力、食欲减退、恶心、呕吐、厌油、腹泻及腹胀，部分病例有发热、黄疸，约有半数患者起病隐匿，在检查中发现。
乙肝表面抗原是乙肝病毒的外壳蛋白，本身不具有传染性，但它的出现常伴随乙肝病毒的存在，所以它是已感染乙肝病毒的标志。它可存在于患者的血液、唾液、乳汁、汗液、泪水、鼻咽分泌物、精液及阴道分泌物中。在感染乙肝病毒后2～6个月，当丙氨酸氨基转移酶升高前2～8周时，可在血清中测到阳性结果。急性乙型肝炎患者大部分可在病程早期转阴，慢性乙型肝炎患者该指标可持续阳性。
反映乙肝病毒复制的指标很多，如HBsAg，HBV-DNA、抗-HBclgM等，最简便廉的方法就是查一下乙肝五项指标。如果HBsAg、HBeAg和抗HBc三项阳性，其血液就有高度传染性；如果抗-HBe阳性，其血液的传染性就较低。
一般来说，HBsAg阳性者可以和正常人一样参加工作、学习和社交活动，他们对周围的同志不构成明显的威胁。HBsAg阳性携带者结婚前最好先查一下本人的HBeAg和抗-HBe，如果抗-HBe阳性，说明传染性较低，可以结婚[2]；如果H BeAg阳性，就要再查对方的血清，如果是抗-HBs阳性，说明对方对乙肝病毒已有免疫力，不会再感染。
2 常规检查及意义
乙肝五项是诊断乙肝感染的基本依据，HBsAg（+）提示感染了乙肝病毒，但不提示病毒复制及传染性；抗HBs（+）表示有保护性抗体，对乙肝有免疫力，注射乙肝疫苗及自然感染痊愈后都可产生抗HBs；HBeAg（+）是乙肝病毒复制的指标，提示有传染性；抗HBe（+），一般情况下提示乙肝病毒低复制或不复制，少数情况下结合DNA检测明确是否存在病毒变异；抗HBc提示感染过乙肝；抗HBc-IgM（+）提示病毒复制。
3 指导患者做好自我保健
3.1首先应让患者该明确乙肝病毒携带状态并非疾病状态，不是真正的乙型肝炎患者，而且大部分携带者肝脏本身并无明显损害，对健康也无大影响，完全可以、也应当正常生活。除不能献血和国家法律规定不能从事的特殊职业（如服兵役等）外，可照常学习和工作，不影响招工、上学[3]，也不影响报考公务员。
3.2明确乙肝主要经体液、特别是血液以及母婴垂直传播，不像经呼吸道、消化道传播的疾病那样容易传染，所以即使是所谓“大三阳”，与其他传染病比起来，其传染性并不强。除了必要的隔离措施外，无须处处躲避，事事回避。
3.3无须特殊休养，而是应当加强身体锻炼，提高机体免疫功能，保持强健体力。不饮酒，不乱用药，不要轻信虚假广告，咨询专科医生，获得其指导。
3.4防止多种肝炎病毒重叠感染，坚决杜絕性生活混乱、药瘾，尽量避免输血和应用血制品。
3.5定期复查，一旦发病，立即按乙型肝炎正规治疗。复查间隔时间为3～6个月。
4.医生应该做的工作
4.1为乙肝病毒表面抗原携带者应建立健康档案，嘱其定期到医院随访检查。平时要注意劳逸结合，如果发现疲乏无力、食欲不振，就要及时到医院就诊。
4.2如果在检查中，同时发现e抗原阳性，告知他们不能献血，也不能从事餐饮服务、育儿工作。
4.3妇女月经期要注意个人卫生，冲洗外阴部的浴盆和毛巾要单独使用，当有外伤出血时要妥善处理，伤口要认真包扎，被血污染的经济价值不大的物品应焚烧，防止血液对周围环境的污染。
4.4从乙肝表面抗原携带者的唾液中，能检出乙肝病毒，因此生活中应实行分餐制，餐具、牙刷等生活用品要专用；尽量避免夫妻间的深吻。
4.5严防医源性传播，患者使用的注射器、采血针等，必须使用一次性用品，使用后要及时焚烧处理。
4.6对乙肝表面抗原携带的孕妇，分娩前后，要注意卫生防护，防止血液污染环境。同时，对新生儿在出生后24小时内注射高效价乙肝免疫球蛋白和乙肝疫苗，并按程序完成全程免疫。产妇在乳房受伤时，应停止哺乳。
4.7 指导乙肝病毒表面抗原携带者忌烟酒，节制性生活。保持心情舒畅，保持心态的平和。
参考文献：
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乙肝表面抗原定量 篇4
关键词：乙型肝炎,HBsAg,HBV-DNA
乙型肝炎是一种由乙肝病毒 (HBV) 传播的慢性感染性疾病, HBs Ag的测定是乙型肝炎病毒感染的重要诊断标准, 而HBV-DNA是乙肝病毒感染和复制的特异性指标, 为是否具有传染性的判断、疗效的观察提供了确切的依据[1], 常作为抗病毒治疗疗效的监测指标。本文通过对HBs Ag和HBV-DNA定量的测定, 分析两者之间的相关性, 以便为临床的诊断和治疗提供更多有利的帮助。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2011年6月至2012年8月间在我院门诊及住院的诊断为乙型肝炎的患者180例, 其中男120例, 女60例, 年龄18~65岁, 平均31岁。所有患者均符合中华医学会传染病与寄生虫病学分会、肝病学分会2010年12月修订的《病毒性肝炎防治方案》标准[2]。
1.2 方法
180例患者经过静脉采血分离血清后, -20℃保存备检。HBs Ag定量采用电化学发光法, 仪器为罗氏全自动电化学发光免疫分析系统罗氏E170, 检测试剂由罗氏诊断产品 (上海) 有限公司提供。将HBs Ag标准血清用20%小牛血清磷酸盐缓冲液稀释至浓度分别为200, 100, 50, 20, 10, 5, 2, 1, 0.5, 0.2 ng/m L;然后对系列标准进行HBs Ag测定, 以浓度为横轴, 以吸光度为纵轴绘制标准曲线。曲线在0.2~200ng/m L范围内, 线性良好。将所有标本按上述方法进行定量检测。
HBV-DNA定量检测采用荧光定量PCR法, 将标本用裂解法提取DNA后, 依此为模板进行PCR放大反应, 将扩增产物加到已包被好链酶亲和素的反应板中进行分子杂交, 检测PCR扩增产物中被放大的DNA序列。PCR产物经探针捕获后, 经酶联反应判断结果。
2 结果
180例患者HBs Ag和HBV-DNA检测结果显示, 在HBs Ag浓度在20~200ng/m L时, HBV-DNA的阳性率上升较明显, 表明在该时期体内有大量乙肝病毒复制, 具有传染性, 并可能对机体具有一定的破坏性。随着HBs Ag含量的升高, HBV-DNA阳性率也随着不断增高。具体见表1。
3 讨论
乙型肝炎是一种由乙肝病毒 (HBV) 引起的, 经血液、母婴及性接触等途径传播的慢性感染性疾病。其临床表现呈多样化, 早期症状不明显, 容易发展成为慢性肝炎和肝硬化, 甚至有少部分患者可转变为原发性肝癌, 严重危害着人民的健康。
定量测定HBV-DNA是乙型肝炎临床诊断的有效手段。血清HBV-DNA水平是病毒复制活动最直接和最可靠的标志, 也是目前评价HBV复制情况的“金标准”[3]。定量测定HBV-DNA为研究病毒水平与病情严重程度与传染性的关系, 监测疾病进展和评价抗病毒药物的疗效等提供了可靠依据。乙型肝炎病毒表面抗原是HBV的外膜蛋白, 为一条由病毒S基因编码的多肽, 在病毒感染肝细胞过程中起重要作用。一般在人感染HBV后4~7d, 血清中就会出现HBs Ag, 另外, 在HBV感染的潜伏期后期、急性期也可检测到HBs Ag, 所以HBs Ag检测一直是临床诊断HBV感染的传统手段[4,5]。HBs Ag定量检测是反映HBV复制的指标之一, HBs Ag定量水平可以作为HBV DNA检测的一项重要补充。有学者认为血清HBs Ag水平与HBV-DNA效价呈正相关, 可反映病毒在宿主体内的活动程度[6,7,8]。本研究表明随着HBs Ag含量的升高, HBV-DNA阳性率也随着不断增高, 并且与HBV-DNA呈正相关性。表明HBs Ag与HBV-DNA存在一定的一致性。与上述学者的研究结果一致。HBs Ag定量作为一种易于开展的血清学检测指标, 可反映HBV的复制状态, 其临床应用价值正日益被人们关注。
综上所述, HBs Ag与HBV-DNA之间存在一定的相关性。在临床治疗诊断中, 联合检测HBs Ag和HBV-DNA有助于乙肝患者的疾病的诊断观察、用药、提高疗效及判断预后。对乙肝的诊断及治疗具有重要的临床意义。
参考文献
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乙肝表面抗原定量 篇5
入学和就业权利的通知
（征求意见稿）
为进一步维护乙肝表面抗原携带者公平入学（含入幼儿园，下同）、就业权利，现就有关问题通知如下：
一、取消入学、就业体检中的乙肝病毒血清学检查 在公民入学、就业体检中，取消乙肝病毒血清学检测项目（以下简称乙肝五项，包括乙肝病毒表面抗原、乙肝病毒表面抗体、乙肝病毒e抗原、乙肝病毒e抗体和乙肝病毒核心抗体检测）。各级各类教育机构在开展各阶段教育招生入学体检时，不得检查“乙肝五项”。用人单位在招工、招聘体检中，不得将“乙肝五项”检查列入体检标准，也不得要求应聘者提供“乙肝五项”检测报告。各级医疗卫生机构不得在入学、就业体检中提供“乙肝五项”检查服务。
因职业特殊确需在就业体检时检查“乙肝五项”的，应由行业主管部门提出研究报告和书面申请，经卫生部核准后方可进行。未经卫生部核准，任何行业、单位不得自行将“乙肝五项”检查项目列入入学、就业体检标准。军队、武警、公安特警的体检工作按照有关规定执行。
在公民入学、就业体检中，可检查丙氨酸氨基转移酶（ALT,简称转氨酶）项目，以评价肝脏功能。如转氨酶异常，再做相应检查以区分病因，以尽早发现乙肝病人、尽早治疗患者。
二、进一步维护乙肝表面抗原携带者入学、就业权利，保护乙肝表面抗原携带者隐私权
各地要认真贯彻落实就业促进法、教育法、传染病防治法等法律法规，切实维护乙肝表面抗原携带者公平入学、就业权利。各级各类教育机构不得以学生携带乙肝表面抗原为理由拒绝招收或要求退学。除报经卫生部核准的特殊职业外，用人单位不得以劳动者携带乙肝表面抗原为理由拒绝招（聘）用。用人单位不得以携带乙肝表面抗原为理由辞退或解聘劳动者。为医学目的而开展的“乙肝五项”检查，检查机构应严格保护受检者的隐私；为健康体检目的而开展的“乙肝五项”检查，检查机构应充分尊重受检者的选择权并保护其隐私，体检组织者不得强制要求受检者接受“乙肝五项”检查。
三、进一步加强监督管理，加大执法检查力度
各地和各有关部门要抓紧对现行有关规定的清理、修订工作，凡是与国家法律、行政法规和本通知要求相抵触的，要坚决废止。
县级以上地方卫生行政部门要对本行政区域内医疗卫生机构开展的健康体检进行监督管理。对医疗卫生机构违规
进行“乙肝五项”检查的，或泄露乙肝表面抗原携带者个人隐私的，县级以上卫生行政部门视情节对其进行处理。
各级教育行政部门要及时调整入学体检项目，规范入学体检表格的内容。要加强对教育机构的监督，督促教育机构严格执行招生体检相关规定，及时查处和纠正违反规定进行“乙肝五项”检查的行为。
各级人力资源社会保障行政部门要加强对用人单位招工、招聘行为的监督检查，督促用人单位严格执行国家相关规定，对用人单位违法要求求职者进行“乙肝五项”检查的，要依法严肃处理。对发生的劳动人事争议，按照有关法律法规进行调处。要及时调整技工院校入学体检项目，督促技工院校严格执行招生体检相关规定。
地方各级人力资源社会保障部门、教育部门、卫生部门要设立并公布投诉、举报电话，认真受理投诉、举报。
四、加强乙肝防治知识和相关政策的宣传教育
各地、各有关部门要高度重视乙肝防治知识和相关政策法规的宣传教育工作。乙肝病毒经血液、母婴垂直和性接触三种途径传播，日常工作、学习和生活接触不会传播乙肝病毒。乙肝表面抗原携带者身体无临床症状，肝功能正常，不是病人，可以正常学习、就业和生活，不会因共同学习、工作等对周围人群构成威胁。要通过宣传引导，帮助社会公众全面正确了解乙肝防治知识，消除公众在与乙肝表面抗原携
带者一起工作、学习问题上的疑虑，形成有利于乙肝表面抗原携带者入学、就业的良好社会氛围。
人力资源社会保障部门要积极帮助用人单位了解相关法律规定，引导劳动者依法维护自身权益。教育部门要面向学校开展系列宣传教育，将乙肝传播途径与防治基本知识纳入中小学生物等相关课程。卫生部门要把加强乙肝防治宣传教育工作纳入当地健康教育规划，广泛宣传乙肝科学知识以及相关政策法规。
人力资源和社会保障部
教育部
卫生部
乙肝表面抗原定量 篇6
1 对象与方法
来自2007年1月至2008年11月石拐区来我院就诊和检查的乙肝病毒五项血清标志物检测一项及以上阳性的800例血清标本。采用酶联免疫吸附试验 (ELISA) 对每份标本检测乙型肝炎病毒表面抗原 (HBsAg) 、表面抗体 (抗-HBs) 、 e抗原 (HBeAg) 、e抗体 (抗-HBe) 、核心抗体 (抗-HBc) , 试剂盒购自上海实业科华生物技术有限公司, 均在有效期内使用。操作严格按照试剂盒操作步骤进行。结果判断:判断值=阴性对照平均OD值×2.1, 样品孔OD值大于或等于判断值为阳性, 小于判断值为阴性。
2 结果
800例乙肝病毒表面抗原阳性者一般特征见表1, 乙肝五项免疫学指标指标特征见表2。
3 讨论
800例表面抗原阳性者中, 仅单项HBsAg阳性者占40%;HBsAg和抗-HBs阳性者占2%;俗称“大三阳” (HBsAg、HbeAg、抗-HBc阳性) 仅占10%, “大三阳”是乙肝感染严重、传染性强的一群HBV感染者, 现症患者或慢性乙肝患者往往是呈现该模式;俗称“小三阳” (HBsAg、抗-HBe、抗-HBc阳性) 的占28%, 此感染人群也具有传染性, 但机体免疫力尚好, HBV在体内的复制受到一定的抑制, 此人群也是乙肝主要传染源之一;还有20%的HBsAg和抗-HBc阳性, 抗HBc是乙型肝炎病毒 (HBV) 既往感染的指标[2]。由此可见表面抗原阳性者中具有强传染性的仅为一小部分。
乙肝病毒主要有血液、母婴垂直 (分娩和围产期) 和性接触3种传播途径, 不会通过呼吸道和消化道传染, 一般接触不会造成乙肝病毒的传播。健康人与乙肝表面抗原携带者在一起工作, 虽然会公用办公桌、椅、门、窗、电话、及书写工具等, 但均属间接传播, 一般不会被传染, 只是乙肝表面抗原携带者的餐饮具及洗漱用具要单独使用, 不要与其他人混用。他们可以正常生活、学习和工作, 但不宜从事餐饮服务和保育工作。这些人除不能献血, 不宜新兵入伍, 不宜从事保育员、炊事员、入口食品行业外, 可照常工作和学习。
我们不能歧视乙肝病人及携带者, 应该多关心爱护他们。他们面临着体检的压力, 日常的生活、人际交往、歧视、求学、就业、失业、婚姻、等等问题无时无刻不在困扰着他们。中华人民共和国就业促进法 (2007年8月30日全国人大常委会通过, 2008年1月1日起施行) 中规定:乙肝病毒携带者在工作和生活能力上同健康人没有区别。由于乙肝传播途径的特殊性, 乙肝病毒携带者在生活、工作、学习和社会活动中不对周围人群和环境构成威胁, 可以正常学习、就业和生活。乙肝携带者在升学、就业、婚姻等方面受到歧视的问题应该引起社会各界的关注, 使公众对乙肝有科学、正确、客观的认识, 防止“谈肝色变”。
医务工作者应该对健康人群, 乙肝病人及携带者进行乙肝病毒传播途径的讲解, 把乙肝病人及携带者的分泌物进行严格消毒、分离处理, 我们的工作重点应放在预防工作上, 人们只有充分了解乙型病毒性肝炎传播的途径, 才能讲究个人卫生, 控制传染源, 切断传播途径, 保护易感人群。正确的接种和定期复种乙型肝炎疫苗, 对防止乙型肝炎传播是非常重要的。
参考文献
[1]朱黎明, 朱英杰.少数民族地区孕妇乙肝病毒感染的调查分析[J].临床肝胆病杂志, 2005, 4:73-74.
乙肝表面抗原定量 篇7
1 资料与方法
1.1 一般资料
2009年8月~2009年10月到我中心预防医学门诊自愿进行乙肝血清标志物检测的1994年至2001年出生儿童。由于此年龄段儿童全部在我国实施乙肝疫苗计划免疫后出生, 不再细分年龄组, 而是以性别和城乡各分2组。共检测1810人, 男性957人, 女性853人;来自城区学校的1468人, 来自乡镇学校的342人 (该乡镇3年前才划归西湖区, 2001年前出生儿童都是当时的乡卫生院负责计划免疫) 。采血前登记性别、学校、是否进行过乙肝疫苗计划免疫内预防接种以及是否曾经补种。
1.2 方法
采集静脉血分离血清, 应用酶联免疫吸附试验 (ELISA) 法测定HBsAg、抗-HBs2项乙肝标志物, 试剂盒使用北京万泰公司产品, 操作步骤及结果判断均按照试剂盒说明书进行。
2 结果
2.1 HBsAg阳性率
HBsAg阳性共28人, 阳性率1.55%。其中女性12人, 阳性率1.41%, 男性16人, 阳性率1.67%, 差异无统计学意义 (χ2=0.21, P>0.05) 。来自城区学校的20人, 阳性率1.37%, 来自乡镇学校的8人, 阳性率2.34%, 差异无统计学意义 (χ2=1.76, P>0.05) 。
2.2 抗-HBs阳性率
抗-HBs阳性共389人, 阳性率21.5%。其中男性198人, 阳性率20.7%, 女性191人, 阳性率22.4%, 差异无统计学意义 (χ2=0.77, P>0.05) ;来自城区学校的311人, 阳性率21.2%, 来自乡镇学校的78人, 阳性率22.8%, 差异无统计学意义 (χ2=0.43, P>0.05) 。
2.3 乙肝疫苗接种率、补种与抗-HBs阳性的关联
登记中通过出示预防接种证或口头明确曾经进行过乙肝疫苗预防接种的1794人, 接种率99.1%, 表明此次检测中抗-HBs阳性结果基本是因接种疫苗而不是感染HBV产生;不能明确曾经进行过乙肝疫苗预防接种的仅16人, 该样本量太小 (不到总样本量的1%) , 且其中存在登记时无家长陪伴又对儿时接种毫无印象的因素, 因此无统计学意义。其中能明确于计划免疫程序外补种过至少一次乙肝疫苗的652人, 其余以从未补种计。两者抗-HBs阳性率差异有显著统计学意义 (χ2=27.35, P<0.01) 。
3 讨论
3.1 乙肝疫苗1992年纳入计划免疫后, 1994-2001年出生儿童是首
批受益者, 此次调查数据也显示, 乙肝HBsAg阳性率已降低至2%以下。当时乡村计划免疫工作虽然相对城区存在差距, 但是儿童HBsAg阳性率也降低至3%以下, 与城区并无统计学差异。可见接种疫苗后城乡HBsAg阳性率都大大降低[2], 乙肝病毒感染人数大大减少, 是预防乙肝传播的有效措施。
3.2 西湖区1994后出生儿童乙肝疫苗接种率99.1%, 抗-HBs阳性结
果基本应是接种疫苗而不是感染HBV产生, 针对该人群, 不宜再将抗-HBs结果作为乙肝感染诊断依据之一[4]。
参考文献
[1]卫生部2006~2010年全国乙型病毒性肝炎防治规划[EB].
[2]蔡皓东, 马秀云.慢性乙肝防治指南[M].北京:中国医药科技出版社, 2007:11~13.
[3]谢娜, 张大志.中华医学会第十三次全国病毒性肝炎及肝病学术会议纪要[J].中华肝脏病杂志, 2007, 15 (8) :631~632.
乙肝表面抗原定量 篇8
1 血标本的影响
1.1 溶血、脂血、细菌污染。
溶血的标本和脂血严重的标本都会造成结果错误。有的患者体内存在嗜异性抗体、补体、类风湿因子等, 这些物质在操作中都能与酶标记的第二抗体Fc段结合, 从而导致假阳性结果。
1.2 标本采集后不要马上离心, 应让血凝块更好地收缩, 使标本中的非特异性活性物质部分或全部失活, 降低非特异性反应所致的假阳性率, 待血液完全凝固后再离心。
如不能当日测定, 也不要放冰箱内保存过久 (3 d之内可保存于4~8℃冰箱中) , 因为血清中Ig G可聚合成多聚体, 可造成假阳性。此外, 标本在冰箱内放置过久, 抗原免疫活性会减弱, 可使弱阳性标本造成假阴性[1]。取出后的标本应在37℃下放置10 min后再进行操作, 最好使用负压胶管抽血, 血液用后便于存放, 避免溶血。
2 离心机转数和离心时间
用不同的转速和时间对同一批标本进行离心, 再用ELISA法检测乙肝表面抗原, 发现同一批标本, 通过增加标本的离心时间和提高离心速度, 假阳性结果明显降低。
3 标本及试剂的加样量不准确
必须使用经过鉴定和校准的加样器, 加样量要准确, 酶免分析仪都处于正常状态, 避免出现抗原或抗体过量现象。手工操作中加样板前后标本间隔时间不宜过长, 操作应熟练或分批操作。
4 温度
试剂盒在使用前平衡至室温, 标本加酶反应后, 要严格掌控孵育温度 (37℃恒温) 及孵育时间。
5 洗板不彻底
5.1 洗涤液的配制浓度、洗板的次数是否按规定严格执行。
5.2 血浆中纤维蛋白原和酶结合物一起易黏附到ELISA检测板上不易洗掉, 可造成假阳性。免疫球蛋白聚合物、免疫复合物易吸附于塑料表面, 可造成非特异性吸附, 也可导致假阳性。血清中的细胞成分中含有过氧化物酶成分, 产生辣根过氧化物酶样作用, 当离心不充分的血清、血浆标本加样于反应板孔时, 细胞成分黏附于酶标板而不能洗去, 会产生酶促反应而呈现阳性显色, 导致出现一些假阳性。
5.3 若用洗板机洗板要按规定设置好程序, 要注意洗涤液的量是否充足, 检测是否有堵孔现象发生, 要做好洗板机的维护。
5.4 花板是我们大家都曾经遇到过的问题, 在排除患者自身血液成分因素外, 加酶时的迸溅、洗板的不彻底, 都可造成花板, 导致结果难以判断。
6 显色时间及温度
应严格按操作规程进行避光显色和孵育。
7 加终止液
加终止液时避免产生气泡, 保证酶标板清洁。结果判断须在10 min内完成, 以免出现孔内结晶, 影响酶标仪的测试。
操作者要有高度的责任心, 做好操作前的校对工作, 熟练掌握操作的规程及该方法的操作注意事项。在确保试剂的质量及有效期的同时, 对于复查后的异常结果应重新采集标本再予复查。要想保证结果的可信, 则必须在整个实验过程中加入外部质控血清进行严格的质量控制。
参考文献
乙肝表面抗原定量 篇9
1 材料与方法
1.1 对象
2008年1月4日-2010年1月4日在长春市疾控中心进行健康检查的药品从业人员, 于每年一次的健康检查时进行HBsAg检测。体检总人数为18 717人, 其中男性5 311人, 女性13 406人;年龄18～52岁, 平均26岁。
1.2 方法
采静脉血3mL, 标本由长春市疾控中心专业检验人员应用酶联免疫吸附试验 (ELISA) , 严格按照操作程序进行乙肝血清标志物HBsAg的检测;试剂由厦门新创科技有限公司提供, 有效期内使用。
1.3 数据处理
应用χ2检验对数据进行统计学处理。
2 结果
2.1 HBs Ag总阳性率
2008年1月4日-2010年1月4日共检测18 493人, 其中HBsAg阳性224人, 阳性率为1.21%。2008-2010年三年间HBsAg阳性率依次为1.37%、1.31%和0.93%, 无统计学意义差异 (χ2=5.68, P>0.05) 。 (表1)
2.2 不同性别药品从业人员HBs Ag阳性率
2008-2010年男女HBsAg总阳性率分别为1.94% (101/5210) 和0.93% (123/13283) , 有统计学意义差异 (χ2=31.16, P<0.01) , 即男性明显高于女性。
2.3 不同服务行业从业人员HBs Ag阳性率
2008-2010年食品、公共场所、药品从业人员HBsAg总阳性率分别为1.68%、0.90%和1.21%, 差异有统计学意义 (χ2=190.58, P<0.01) 。 (表2)
3 讨论
《慢性乙型肝炎防治指南》 (2010年版) 发布的中国普通人群HBsAg阳性率从9.75%下降到7.18%, 中国已经从乙型肝炎病毒高流行区进入中度流行区[2]。2008-2010年共检测药品从业人员18 493人, 其中HBsAg阳性224人, 总阳性率为1.21%, 明显低于我国普通人群乙肝表面抗原阳性率, 也低于2001年长春市疾控中心监测调查的2.01%[4]。长春市药品从业人员HBsAg携带率近10年有所下降, 且呈现出低携带率的态势。调查检测结果还显示, 2008-2010年药品从业人员HBsAg携带率无统计学意义差异, 说明三年间HB-s Ag携带率一直趋于恒定状态。一方面是与卫生监督机构对药品从业人员知识培训和及时注射乙肝疫苗有关;另一方面, 按照国家相关法律法规要求, 每年对从业人员进行一次健康体检, 并将健康检查不合格的药品从业人员及时调离原工作岗位, 及时切断传染源有着直接的关系。长春市疾病预防控制中心对药品从业人员的健康体检具有明显的成效, 对控制乙肝的传播有着重要的现实意义。
我国HBsAg感染率为男性高于女性[3], 与本文结果一致。可能与男性良好卫生习惯的形成不佳有关, 提示在管理和健康教育工作中对男性应该有所侧重。
行业间比较结果显示HBsAg携带率的差异有统计学意义, 食品行业最高, 药品行业低于食品行业, 高于公共场所。食品生产经营行业从业人员HBsAg阳性率高于公共场所从业人员, 可能还是由于两类人群的年龄、性别、城乡来源不同而造成的[5]。建议继续加强对药品从业人员健康体检的管理体制, 把好健康体检关, 并积极进行上岗前的卫生知识培训, 增强其对乙型病毒性肝炎防病意识, 建立正确的生活方式, 继续做好卫生监督工作, 大力推广乙肝疫苗的预防接种, 及时、有效地切断传染源, 达到保护易感人群的目的。
关键词：药品从业人员,乙肝表面抗原,携带率
参考文献
[1]冯晓明, 朱贤玉, 李筱青, 等.贵池区农村人群乙型肝炎的血清流行病学调查[J].疾病控制杂志, 2008, 12 (3) :245.
[2]中华医学会肝病学分会, 中华医学会感染病学分会.中国乙肝流行强度降为中度, 间断服药致疗效不佳[J].中国医学前沿杂志, 2011, 1.
[3]姜庆五, 叶冬青, 曹广文, 等.流行病学复习应试指南[M].北京:化学工业出版社, 2005.
[4]赵燕林, 玄春山, 王树新, 等.长春市2001年40390名服务行业从业人员乙肝感染情况调查[J].疾病控制杂志, 2002, 7:24.
乙肝表面抗原定量 篇10
1 ELISA法的优点
较高的灵敏性。测定法最高的灵敏度其实是报告集团中的酶所起的作用。酶是一种常用的有机催化剂, 即使很少量的酶也能诱导很多的催化反应, 就会有一些明显的可以观察的现象产生, 主要是显色反应。所以, 在该体系很多时候被叫做酶的放大体系。所以, ELISA检测法在亚细胞或细胞水平上, 实现了示踪抗原以及抗体所在的部位, 可以对其进行定量, 如微克、纳克。
较强的特异性。特异性其实是抗体以及抗原的选择上。抗原与抗体进行结合, 实际上, 只是在抗原中的抗原决定簇和抗体中的抗原结合位点间进行结合。因为二者化学结构以及空间构型是属于互补关系, 致使抗原抗体的反应有较强的特异性。
2 ELISA法的检测2.1材料和方法
2.1.1材料:
某医院临床患者标本200份。
2.1.2试剂与仪器:
试剂采用的是上海实业科华公司生产的HBsAgELISA试剂盒。仪器是美国宝特ELX-50型生产的全自动洗板机, 美国生产的宝特ELX-800型全自动酶标测定仪, 北京生产的LDZ5-2离心机。
3 方法
对200例患者进行静脉血的抽取, 抽取血清标本进行离心。离心后, 严格按HBsAg的SOP进行检测的要求检测。在离心的过程中要经历4个程度, 转速1000rpm, 时间5 min;转速2000rpm, 时间5 min;转速3000rpm, 时间15min;转速3000rpm, 时间30min。
4 结果
200例标本的检测结果, 统计值P<0.05, 具有统计学意义。
5 讨论
ELISA检测会受到很多的影响因素, 比如血细胞[3]、检测时间、洗板方式[4]、加样量、血清分离等。通过200份标本的检测结果进行分析和比较后发现, 试剂的空白、阴阳性的对照、室内的质控孔OD值都处于正常范围, 血液的标本孔OD值却出现了异常情况, 仔细分析后发现, 原因是出在了标本离心时和放置血液的时间上。
在对标本进行留取检验之前, 采用金标试剂进行检测, 其检测结果皆为阴性, 运用ELISA法对HBsAg进行检测的过程中, 所有标本阳性率理论上不应很高[3]。在临床应用中, 通过对标本的离心时间进行增加, 对离心速度进行改进, 就解决了很多影响临床应用的关键问题。
在对标本进行彻底离心后, 分离不会溶血, 这样就能得到较为准确的结果。这样也说明, 对标本进行离心处理, 好或者坏都直接影响着临床的准确性。
同时, 运用ELISA法对血标本进行检测, 影响结果的最主要原因如下[4]: (1) 血清里所有的补体都能和IgG中的Fc段相结合, 这是假阳性产生的原因之一。 (2) 血浆里的纤维蛋白原与酶的结合物, 混在一起后最容易粘附在ELISA的检测板上, 并且难于洗掉, 这是假阳性产生的原因之二。 (3) 血清里如果有类似的风湿因子 (RF) , 其能够和抗体相结合, 这是假阳性产生的原因之三。 (4) 免疫球蛋白聚合物、免疫复合物易吸附于塑料表面, 可造成非特异性吸附, 导致假阳性。为了避免ELISA试剂“检测时假阳性的出现”, 为了降低检测的假阳性率, 取得准确的结果,
6 ELISA法的临床应用
(1) 试剂盒使用前, 要平衡与室温相同。 (2) 检测时尽量用抗凝血的标本。 (3) 溶血的标本要重新抽血[1,2]。 (4) 冬天抽血后, 放置于温水中2h, 待凝块收缩后再检测。 (5) 检测离心标本之前, 离心速度加大至 (3000 rpm) , 离心时间增加15 min, 让红细胞与纤维蛋白能够完全地沉淀、以至离心完全。 (6) 放置标本10 h后检测好, 血凝块可很好地收缩, 标本里的非特异性活性物质能够部分或全部地失活, 降低了非特异性反应, 这样会需时间长。但这样能降低ELISA法检测的假阳性率, 增强临床效果。
参考文献
[1]黄秋芳, 王微, 李永.ELISA检测HBsAg复检结果的分析[J].检验医学, 2004, 19 (4) :603.
[2]陈传德, 冷霜.ELISA一步法检测HBsAg影响因素分析[J].中国卫生检验杂志, 2003, 13 (3) :853.
[3]施纪文, 徐简华, 温惠萍.ELISA法和胶体金免疫层析法检测乙肝表面抗原的比较[J].现代检验医学杂志, 2005, 20 (5) :48-49.
